專利名稱：一種蛹蟲草變異菌株及其保健藥品的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種蛹蟲草(COcOrdycepssinensis)變異菌株及其保健藥品的人工生產(chǎn)方法。
現(xiàn)有蟲草菌的人工培養(yǎng)方法有多種，但方法繁雜，污染率高，生產(chǎn)量小，藥效功能低，而且大多數(shù)長(zhǎng)不成蟲草(孢梗束)只能長(zhǎng)成菌絲階段。
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，而提出了一種改變外界環(huán)境，導(dǎo)致微生物遺傳性質(zhì)發(fā)生變異，藥效高，生產(chǎn)方法簡(jiǎn)易，產(chǎn)量大的蛹蟲草變異菌株。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的該變異菌株，采用桑蠶蛹，柞蠶蛹為主要成分作為培養(yǎng)基，經(jīng)過變溫(17-25℃)培養(yǎng)，經(jīng)過136-148代培養(yǎng)后，培養(yǎng)成穩(wěn)定的蛹蟲草變異菌株，其中菌種經(jīng)過分離，發(fā)酵(固體發(fā)酵，液體發(fā)酵)，擴(kuò)大培養(yǎng)人工生成蛹蟲草變異菌株，并用該菌株制成保健醫(yī)療藥品。
本發(fā)明的蛹蟲草變異菌株經(jīng)過變溫培養(yǎng)到136-148代完成變異，孢梗束由原來的白黃色或黃白色變?yōu)辄S紅色或紅黃色乃至紅褐色，孢梗束由弱細(xì)變?yōu)榇謮?，孢子量顯著增多，療效顯著增強(qiáng)。性能穩(wěn)定藥效高，其中含有17種氨基酸是本藥滋補(bǔ)強(qiáng)壯的物質(zhì)基礎(chǔ)，環(huán)肽類化合物具有抗癌(KB細(xì)胞)和增強(qiáng)免疫生理活性。甾類化合物以麥角甾醇為主。甘露醇得率為菌絲重的2％，是腦外和腦神經(jīng)科主要藥，可以利尿，降低顱內(nèi)壓，治療腦血栓、腦溢血、血管痙攣可排出。蟲草含腺苷，人工發(fā)酵蛹蟲草含腺苷的量和藥理活性均比天然中華蟲草高。腺苷具有廣泛的生理活性和藥理活性，醫(yī)治機(jī)體極度衰弱，恢復(fù)乙肝損傷的機(jī)體活性，醫(yī)治慢性氣管炎和哮喘，恢復(fù)衰竭的腎功能，恢復(fù)疲勞，醫(yī)治失眠和尿頻，抗缺氧，促進(jìn)心腦組織對(duì)86Rb攝取增加，增加心、腦營(yíng)養(yǎng)性血流量，降低心腦組織耗氧量。對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有顯著抵制功能。服藥后睪酮增加1-2倍，強(qiáng)壯身體，恢復(fù)疲勞，醫(yī)治性功能低下。蛹蟲草含硒量達(dá)0.2％ppm，是抗氧化和抗癌的主要元素之一，具有促進(jìn)造血功能作用，促進(jìn)骨髓細(xì)胞增生，有抗腫瘤作用。本發(fā)明生產(chǎn)方法簡(jiǎn)單，用該菌種制成藥品，具有可恢復(fù)疲勞，治療失眠和尿頻，治療慢性氣管炎，恢復(fù)衰竭的腎功能，降低顱內(nèi)壓，治療腦血栓，腦溢血的功能。
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述一、菌種的分離與培養(yǎng)，(一)菌種的分離，選擇蛹蟲草生產(chǎn)繁殖較密的地區(qū)，于7-8月間，海拔100-600米的山坡地，向陽背風(fēng)，初生林或次生林下，光照較充足，空氣土壤較濕潤(rùn)腐植質(zhì)的地點(diǎn)，搜集蛹蟲草的復(fù)合體，最好多采集幾個(gè)地區(qū)，將搜集的多個(gè)樣品，小心分別裝入事先無菌的玻璃瓶或紙袋中，拿回實(shí)驗(yàn)室，分別純出來。在實(shí)驗(yàn)室將采集的樣品分別除去泥土和雜物，滅菌水初步?jīng)_洗干凈，拿進(jìn)滅菌室，置0.1％汞溶液中或70％的乙醇溶液中，消毒3-5分鐘，在消毒過程中，用攝子搏動(dòng)幾次以防有藥液浸泡不到的皺褶，造成不應(yīng)有的污染。取出樣品，置放于500ml滅菌三角瓶中，用滅菌的生理鹽水或無菌的蒸溜水，沖洗幾次，將藥液清除干凈，將樣品取出置放于滅菌平皿內(nèi)，如取子實(shí)體則用滅菌刀剝?nèi)ネ馄ぃ羧?mm大的小段，置于平皿培養(yǎng)基或斜面培養(yǎng)基上，稍用力將所取子實(shí)體小塊壓入培養(yǎng)基內(nèi)1/2。如取菌核部分，則用滅菌刀切開蛹體，用白金鉤，鉤取出蛹體腔內(nèi)米粒大小塊，置于培養(yǎng)基上，21℃培養(yǎng)，每天觀察，發(fā)現(xiàn)有菌絲長(zhǎng)出時(shí)，立即挑植于另管培養(yǎng)基分體離培養(yǎng)，3-5天菌絲發(fā)育5-6天鋪滿培養(yǎng)基，12-13天生長(zhǎng)成豐盛的菌苔，移人光照室3-5天菌苔呈紅黃色，保存4℃冰箱中待用。(二)發(fā)酵1．固體發(fā)酵種，將保存的菌種由冰箱中取出，進(jìn)行復(fù)狀(一般稱母種)，根據(jù)需要量再進(jìn)行2-3次擴(kuò)大，第一次擴(kuò)大稱一級(jí)種子，第二次擴(kuò)大稱二級(jí)種子。這些種擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)間為6-8天，當(dāng)菌絲發(fā)育豐滿時(shí)，即可作為種子用，勿需等待生長(zhǎng)成子實(shí)體，用于實(shí)體接種顯著地不如用分出孢子和菌絲接種生長(zhǎng)發(fā)育快速。培養(yǎng)5-6天，菌絲發(fā)育鋪滿在培養(yǎng)基料全部，8-9天菌絲體發(fā)育充滿全部養(yǎng)料，全體呈白色。12-13天菌苔豐滿，呈現(xiàn)一些鼓包，此時(shí)移至光照室，菌絲體繼續(xù)發(fā)育，1-2天菌絲體開始變成黃紅色，繼續(xù)培養(yǎng)紅色比例漸增，菌絲體編結(jié)成蠅狀或孢梗束，孢梗束和蠅狀體堅(jiān)韌，不易切斷，至14-15天紅黃色的孢梗束(蠅狀體)充滿培養(yǎng)器，形狀不一，大多數(shù)為一條條的棒狀，部分呈山包狀或磨菇狀，其內(nèi)部包裹著許多一條條孢梗束，這種生長(zhǎng)狀態(tài)比原菌種的產(chǎn)量高數(shù)倍。2．液體發(fā)酵，方法基本上同固體發(fā)酵，只是培養(yǎng)料是液體，取豆粒大小的菌膜，輕輕接種于液體培養(yǎng)料表面，這樣發(fā)育快，若沉入液下，也發(fā)育但較緩慢，接種封口后，其培養(yǎng)程序基本與固體發(fā)酵相同，如用罐頭瓶，則取豆粒大一塊菌膜，輕輕接種于液體培養(yǎng)基表面，最好是浮在表面上，這樣發(fā)育較快。如沉于液下，也發(fā)育，但緩慢些。接種封口后，其培養(yǎng)過程基本與固體培養(yǎng)相同，經(jīng)過14-15天避光培養(yǎng)，再移入光照培養(yǎng)基室，但培養(yǎng)過程中需每天振蕩，如小規(guī)模生產(chǎn)，則需每天人工搖晃3次，每次1-2分鐘，或用振蕩器械振蕩。3-4天后液面形成薄的白色菌膜，菌膜上分泌出黃色液珠，隨著日齡前進(jìn)，菌膜漸增厚，顏色變深灰，分泌的液球增多增大，7-8天有子實(shí)體生出，逐漸高大增多，至15-17天，菌膜增厚至0.5-1.0cm厚，上面生長(zhǎng)著眾多的條條孢梗束。變溫培養(yǎng)增加其產(chǎn)量，提高其藥效成分，其變溫幅度為25-17℃，在變溫過程中，向高溫方向變溫由21℃升溫到25℃，向低溫方向變溫由21℃至17℃，升溫和降溫返復(fù)交互升降。
權(quán)利要求
1.一種蛹蟲草變異菌株及其保健藥品的生產(chǎn)方法，其特征在于該變異菌株，采用桑蠶蛹，柞蠶蛹為主要成分作為培養(yǎng)基，經(jīng)過變溫(17-25℃)培養(yǎng)，136-148代后培養(yǎng)成變異菌株，其中菌種經(jīng)過分離，發(fā)酵(固定發(fā)酵，液體發(fā)酵)，擴(kuò)大培養(yǎng)人工生成蛹蟲草變異菌株并用該菌株制成高效保健藥品。
全文摘要
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種蛹蟲草變異菌株及其保健藥品的人工生產(chǎn)方法。該變異菌株采用桑蠶蛹、柞蠶蛹為主要成分作為培養(yǎng)基,經(jīng)過變溫(17—25℃)培養(yǎng),136—148代后培養(yǎng)成穩(wěn)定的變異菌株。其中菌種經(jīng)過分離,發(fā)酵(固體發(fā)酵,液體發(fā)酵),擴(kuò)大培養(yǎng)人工生成蛹蟲草變異菌株并用該菌株制成高效保健藥品。本發(fā)明的蛹蟲草變異菌株具有性能穩(wěn)定、藥效高,生產(chǎn)方法簡(jiǎn)易,具有恢復(fù)疲勞,治療失眠和尿頻,慢性氣管炎,腎功能衰竭。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1283690SQ9910997
公開日2001年2月14日 申請(qǐng)日期1999年7月8日 優(yōu)先權(quán)日1999年7月8日
發(fā)明者張文濤 申請(qǐng)人:張文濤