專利名稱：顆粒狀果膠酶制劑及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于用微生物發(fā)酵制造酶制劑的方法。
果膠酶(Pectinase)是一種可分解果實和植物中含有的果膠，生成小分子的半乳糖醛酸的酶類生化制劑，具有提高過濾速度和收得率或出汁率，還具有加速澄清作用提高產(chǎn)品質(zhì)量等作用，故廣泛應(yīng)用于以植物為原料的食品工業(yè)，飲料工業(yè)以及中草藥提取等行業(yè)。目前出現(xiàn)市場上的果膠酶制劑主要有液狀果膠酶，粉狀果膠酶和顆粒狀果膠酶三種類型，液狀果膠酶在常溫下保持期僅三個月至半年，難于商品化;粉狀果膠酶除易吸濕變質(zhì)外，在生產(chǎn)工藝上采用噴霧干燥收率低僅30-40%。產(chǎn)品中酶的組份變化又會影響產(chǎn)品質(zhì)量。顆粒狀果膠酶可為包衣的微晶顆粒，有保持期長，不易吸潮變質(zhì)，分散性好和方便使用、貯運等優(yōu)點，然而由于生產(chǎn)所需技術(shù)裝備條件要求較高，一般廠家難以生產(chǎn)，國內(nèi)至今尚未見過報道。國外進(jìn)口的產(chǎn)品價格昂貴，每噸高達(dá)40余萬元，難以被一般廠家所接受。
本發(fā)明目的在于提供一種顆粒狀果膠酶制劑及其制造方法，用該方法制得的產(chǎn)品質(zhì)量好收率高，活性大。
根據(jù)本發(fā)明目的，發(fā)明人公開了一種以山楂渣為誘導(dǎo)物，以Asp.niger P-565菌株作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)制種、發(fā)酵、提取，制粒等工序制取顆粒狀果膠酶的方法。其具體的解決方案是經(jīng)過以下處理步驟實現(xiàn)的。
一、菌種培育本發(fā)明以Asp.niger P-565菌株為生產(chǎn)菌種，用麩皮和水按1∶(1-1.2)比例作菌種培養(yǎng)基，置圓錐瓶中經(jīng)滅菌處理后，按接種量為1-5%接種，在溫度為28℃-32℃，相對濕度為80-95%的培養(yǎng)室內(nèi)靜置培養(yǎng)3-5天，即制得種曲。
二、發(fā)酵培養(yǎng)基配制發(fā)酵培養(yǎng)基配方的重量百分比按山楂渣20.4-44.7%，麩皮0-27%，谷殼2.04-2.38%，硫酸銨0.408-0.476%，磷酸氫二鉀0.0408-0.0476%，水45-69%，稱取各原料組份，混合、攪拌均勻后分盛于方形鋁盤，4公斤/盤，經(jīng)120℃蒸汽天菌一小時。
三、發(fā)酵將上述步驟一制得種曲按1-5%按種量接種于已配制好經(jīng)滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵室溫度30℃-34℃，濕度85-95%。發(fā)酵80-96小時即制得成熟曲。
四、浸提浸提液按食鹽0.9，苯甲酸鈉0.1，水100比例配制，成熟曲與浸提液按1∶4重量比分兩次浸提，獲取浸提液。
五、固液分離經(jīng)浸提后的懸濁液采用SS60離心機甩干得離心液，渣再經(jīng)步驟四浸提，取液再離心甩干得離心液，將二次離心液加1-2%的助濾劑用板框過濾機壓濾、棄渣，得濾清液。
六、超濾提純、增稠將濾清液先后用1×5M2和3×5M2超濾機，去棄濾液中分子量大于(10-15×104)和分子量小于(2-5×104)的物質(zhì)，并增稠后，得提純濃縮液。
七、抽濾、滅菌將上述經(jīng)超濾器兩端分割獲得的分子量小于(10～15)×104大于(2～5)×104的超濾液用布氏漏斗減壓抽濾。棄除不溶物后的抽濾液采用紫外線飲水消毒器進(jìn)行滅菌消毒，得無菌酶液。
八、制粒干燥上述的無菌酶液制粒賦形劑采用藥用淀粉賦形;選擇FL-5沸騰造粒機一步完成造粒與干燥，得粒狀果膠酶。
九、篩拆將上述粒狀的果膠酶置于篩拆器中篩分，獲得80目≤dn≤40目的粒狀果膠酶。粒徑小于80目的果膠酶重新造粒干燥篩析，粒徑大于40目的經(jīng)粉碎后再篩析造粒。
十、包衣干燥包膜材料選用食品級β-糊精，包膜材料量是粒狀果膠酶量的2-8%。先將粒狀果膠酶置于FL-5沸騰造粒機的料斗中，將已用10倍消毒水糊化好的包膜材料通過計量泵與果膠酶一起進(jìn)入沸騰室，一步完成果膠酶的包模與干燥作業(yè)，即得本發(fā)明產(chǎn)品。
按照本發(fā)明的制造方法生產(chǎn)的顆粒狀果膠酶外觀呈淡黃或淡黃棕色微晶顆粒，平均粒經(jīng)為0.25mm，堆積密度(平均數(shù))為323g/L，流動特性(角度)≥33-37°;氣味呈微酸的特殊香味;果膠酶活力≥30×104Mou/g達(dá)到美國XGNA公司同類產(chǎn)品的酶活力指標(biāo)。重金屬含量≤30mg/Kg，鉛含量≤1mg/kg，砷含量≤0.5mg/kg，細(xì)菌總數(shù)≤5×104個/g，大腸桿菌≤30個/100g，不含致病菌。
本發(fā)明具有如下顯著特點1、選用Asp.niger P-565菌株作生產(chǎn)種，活力高，其生產(chǎn)能力每克絕干曲含有6.8萬單位果膠酶活力，較現(xiàn)有技術(shù)中采用的以1.130為菌株的活力高出4倍，大大提高了本發(fā)明產(chǎn)品的活力。
2、利用山楂渣為發(fā)酵劑主原料，原料易得，價格便宜，果膠含量高，不須添加其它碳源，特別是本發(fā)明中直接選用制藥廠生產(chǎn)山楂降酯藥片后的工藝廢渣作Asp.niger P-565菌株的誘導(dǎo)物，所含的果膠含量穩(wěn)定，質(zhì)量穩(wěn)定又好，使本發(fā)明制得產(chǎn)品具有質(zhì)量穩(wěn)定，產(chǎn)量高，成本低等優(yōu)點。
3、應(yīng)用低溫超濾技術(shù)“兩端分割”提純濃縮果膠酶較之“減壓濃縮”有效地達(dá)到酶液的提純和濃縮的雙重目的，大大穩(wěn)定了制作工藝。
4、創(chuàng)造性地將制藥工業(yè)上應(yīng)用的FL-5沸騰造粒機作為本發(fā)明的造粒與包膜以及干燥工藝，并使之一步完成，極大地節(jié)省了造粒、包膜和干燥工序，生產(chǎn)工藝穩(wěn)定且收率達(dá)90%以上。較采用噴霧干燥生產(chǎn)粉狀果膠酶收率(30-40%)高一倍以上。
5、本發(fā)明生產(chǎn)的顆粒果膠酶是包衣的微晶顆粒，酶活性保存期長，不易吸潮變質(zhì)，便于使用和貯運。
6、本發(fā)明生產(chǎn)的顆粒果膠酶各種指標(biāo)均達(dá)到進(jìn)口產(chǎn)品水平，產(chǎn)品的活力指高達(dá)30×104Mou/g以上，達(dá)到美國XGNA公司同類產(chǎn)品的技術(shù)參數(shù)，可替代進(jìn)口產(chǎn)品，節(jié)省外匯。
實施例1按上述公開的具體制造方法進(jìn)行，其中發(fā)酵培養(yǎng)基具體投料量為山楂渣140Kg，麩皮126Kg，谷殼14Kg，硫酸銨2.8Kg，磷酸氫二鉀0.28Kg，自來水370公升，接入投料量的2%的種曲，發(fā)酵周期為84小時，獲得發(fā)酵酶活性單位為36900Mou/g，發(fā)酵總億為170.04億單位，提煉收率84.78%，制粒收率92%，總收得率78%，得成品顆粒狀果膠酶44.21Kg，活力單位3×105Mou/g。
實施例2按上述公開的具體制造方法進(jìn)行，其中發(fā)酵培養(yǎng)基配比的投料量為山楂渣266kg，谷殼14kg，硫酸銨2.8kg，磷酸氫二鉀0.28kg，自來水310公升，其它同例一制得發(fā)酵成熟曲469.8kg，果膠酶活性單位34700Mou/g，發(fā)酵總億163.02億單位，提煉收率79%，制粒收率90%，總收得率71.1%，得成品顆粒狀果膠酶19.32kg，活力單位6×105Mou/g。
實施例3按上述所述的制造方法進(jìn)行，其中發(fā)酵培養(yǎng)基配比投料量為山楂渣134kg，麩皮132kg，谷殼14kg，硫酸銨2.8kg，磷酸氫二鉀0.28kg，自來水360公升，余同例一制得發(fā)酵成熟曲466kg，果膠酶活性單位39800Mou/g，發(fā)酵總億185.47億單位，提煉收率86%，制粒收率95%，總收得率81.7%，得成品果膠酶50.51kg，活力單位6×105Mou/g。
權(quán)利要求
1.一種顆粒狀果膠酶制劑的制造方法，其特征在于該制造方法包括菌種培育→發(fā)酵培養(yǎng)基配制→發(fā)酵→浸提→固液分離→超濾提純增稠→抽濾滅菌→制粒干燥→篩析→包衣干燥→成品等工藝步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制造方法，其特征在于菌種培育中選用Asp.niger P-565菌株為生產(chǎn)種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制造方法，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)其原料配比的重量%是山楂渣20.4-44.7%，麩皮0-21%，谷殼2.04-2.38%，硫酸銨0.408-0.476%，磷酸氫二鉀0.0408-0.0476%，水45-67%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述制造方法，其特征在于超濾提純增稠步驟是通過1×5M2和3×5M2超濾器采用兩端分割法進(jìn)行超濾提純增稠的。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制造方法，其特征在于制粒干燥和包衣干燥均是采用醫(yī)用的FL-5沸騰造粒機一步完成的。
6.一種以Psp.niger P-565菌株為生產(chǎn)種，以山楂渣為誘導(dǎo)物，經(jīng)制種，發(fā)酵，提取，制粒等工序制取的顆粒狀果膠酶，其特征在于該產(chǎn)品外觀呈淡黃或淡黃棕色微晶顆粒，平均粒徑為0.25mm，堆積密度(平均數(shù))為323g/L，流動特性(角度)≥33-37°;氣味呈微酸性特殊香味;果膠酶活力≥30×104Mou/g，重金屬含量≤30mg/Kg，鉛含量≤1mg/kg，砷含量≤0.5mg/kg，細(xì)菌總數(shù)≤5×104個/g，大腸桿菌≤30個/100g，不含致病菌。
全文摘要
本發(fā)明公開一種以Asp.niger P-565菌株為生產(chǎn)菌種，以山楂渣為誘導(dǎo)物，經(jīng)制種，發(fā)酵，提取，制粒等工序制取顆粒狀果膠酶的方法，具有菌種活力高，誘導(dǎo)物果膠含量穩(wěn)定、質(zhì)量高，提純濃縮工藝科學(xué)合理，收率高，制粒包衣工序采用一步沸騰造粒機制粒收率高達(dá)90％以上。用本發(fā)明方法制得的顆粒狀果膠酶活力高達(dá)30×10
文檔編號C12M1/12GK1102671SQ9311463
公開日1995年5月17日 申請日期1993年11月10日 優(yōu)先權(quán)日1993年11月10日
發(fā)明者陳神佑, 陳淑珍, 方琳, 胡紅華, 李健 申請人:福州洪山生化實業(yè)有限公司