本發(fā)明涉及飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一種含大蒜精油的掩味控釋顆粒及其制備方法和應(yīng)用
背景技術(shù)：
目前，動物養(yǎng)殖業(yè)面臨著疾病、應(yīng)激等各種不良因素的影響，飼料添加抗生素等傳統(tǒng)解決方法會導致腸道菌群失衡、藥物殘留和抗藥性等多方面負效應(yīng)，存在著威脅食品安全等諸多問題和潛在風險。植物精油是一種“安全、高效、穩(wěn)定、可控”的飼料添加劑，具有很強的殺菌抑菌功能，并促進動物采食、提高生產(chǎn)性能、抗氧化和增強機體免疫等生物功能，可作為抗生素的替代品應(yīng)用于動物生產(chǎn)中。
大蒜精油是從大蒜的球形鱗莖中提取的一種揮發(fā)性油狀物，是由二烯丙基三硫醚、二烯丙基二硫醚、甲基烯丙基二硫醚等組成的混合物，是目前動物飼料中最常用的添加劑品種。大蒜精油作為飼料添加劑應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)，可增強動物抗病力，提高免疫力，改善飼料風味，促進動物生長發(fā)育，提高動物的肉蛋產(chǎn)量，提高飼料報酬，經(jīng)濟效益十分顯著。
大蒜精油的抗菌譜較廣，其有效成分對大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌、巴氏桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌等病原微生物都有較強的抑制和殺滅作用，能有效地防治多種常見疾病，保障動物健康生長。大蒜精油應(yīng)用范圍很廣，可在牛、豬、肉雞、蛋雞、鴨以及魚類和一些特種經(jīng)濟動物中使用，且在動物的各生長階段均可使用。
但是，大蒜精油具有強烈的蒜臭味，對皮膚、粘膜、呼吸道等有強烈的刺激性，引起人的不舒適，導致大蒜精油系列產(chǎn)品的生產(chǎn)者和使用者對此有強烈的反感，影響了其在養(yǎng)殖生產(chǎn)上的推廣；大蒜精油具有不穩(wěn)定性，長期暴露于空氣中，紫外線可誘發(fā)其分解；大蒜精油可增強胃液分泌和胃腸蠕動，但大蒜精油量大時會對胃黏膜產(chǎn)生刺激性，引起動物反胃傷胃，同時胃部的強酸環(huán)境對大蒜精油具有破壞性，影響了其利用度；大蒜精油常規(guī)制劑一般為粉劑，流動性較差，分散性較低，直接混飼使用時容易混合不均勻，嚴重制約了大蒜精油在養(yǎng)殖生產(chǎn)上的應(yīng)用。
氨基轉(zhuǎn)移酶，還稱為轉(zhuǎn)氨酶(e.c.2.6.1)，催化來自氨基供體底物的伯胺的氨基，一對電子和質(zhì)子向氨基受體分子的羰基轉(zhuǎn)移。ω-轉(zhuǎn)氨酶(ω-轉(zhuǎn)氨酶)轉(zhuǎn)移與羰基間隔至少一個亞甲基插入的胺基團。
多種ω-轉(zhuǎn)氨酶已經(jīng)從微生物分離，微生物包括但不限于：反硝化產(chǎn)喊菌(alcaligenesdenitrificans)、支氣管敗血性博德特氏菌(bordetellabronchiseptica)、副百日咳博德特氏菌(bordetellaparapertussis)、羊流產(chǎn)布氏桿菌(brucellamelitensis)、鼻疽伯克霍爾德氏菌(burkholderiamalle)、類鼻疽伯克霍爾德氏菌(burkholderiapseudomallei)、青紫色素桿菌(chromobacteriumviolaceum)、oceanicolagranulosushtcc2516、海洋桿菌(oceanobactersp.red65)>0ceanospirillumsp.med92、惡臭假單胞菌(pseudomonasputida)、青枯雷爾氏菌(ralstoniasolanacearum)、苜猜根瘤菌(rhizobiummeliloti)、根瘤菌(rhizobiumsp.)(菌株ngr234)、河流弧菌(vibriofluvialis)、蘇云金桿菌(bacillusthuringensis)和肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)(shin等，2001，biosci.biotechnol，biochem.65:1782-1788)。
幾個氨基轉(zhuǎn)移酶基因和酶序列也已經(jīng)被報道，例如，青枯雷爾氏菌(genbank登錄號yp_002257813.1，gi:207739420)、類鼻疽伯克霍爾德氏菌1710b(genbank登錄號aba47738.1，gi:76578263)和彼得里鮑特氏菌(bordetellapetru)(genbank登錄號am902716.1，gi:163258032)。兩種轉(zhuǎn)氨酶，ec2.6.1.18和ec2.6.1-19,已經(jīng)被結(jié)晶和表征(參見yonaha等人，1983,agric.biol.chem.47(10):2257-2265)。
轉(zhuǎn)氨酶具有潛在的工業(yè)用途，用于立體選擇性合成光學純的手性胺和手性胺和氨基酸的對映異構(gòu)體富集(shin等，2001，biosci.biotechno1.biochem.65:1782-1788；iwasaki等，2003，biotech.lett.25:1843-1846；iwasaki等，2004，appl.microb.biotech.69:499-505,yun等，2004，appl.environ.microbiol.70:2529-2534；和hwang等，2004，enzymemicrobiol.technol.34:429-426)。手性胺在制藥、農(nóng)業(yè)化學和化學工業(yè)中起重要作用且通常被用作中間體或合成子，用于制備多種藥物，如頭孢菌素或吡咯烷衍生物。使用氨基轉(zhuǎn)移酶產(chǎn)生有用的化合物的實例包括：制備普加巴林的中間體和前體(例如w02008/127646)；β-氨基酸的立體定向合成和對映異構(gòu)體富集(例如to2005/005633)；胺的對映異構(gòu)體富集(例如美國專利第us4,950,606號；美國專利第5,300,437號；和美國專利第5,169,780號)；氨基酸和衍生物的產(chǎn)生(例如美國專利第5,316,943號；美國專利第4,518,692號；美國專利第4,826,766號；美國專利第6,197,558號；和美國專利第4,600,692號)。
然后具有轉(zhuǎn)氨酶活性的被用于抑制大蒜精油的刺激味道是本公開中新的嘗試。雖然轉(zhuǎn)氨酶對于抑制大蒜精油的刺激味道的原理還不清晰，本發(fā)明人認為轉(zhuǎn)氨酶對于刺激味道成分的基團的改變起到催化作用，使其轉(zhuǎn)變?yōu)椴痪哂写碳の兜赖某煞?，且不影響該成分本身具有的功能，該原理正在通過更多的試驗進行闡明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有大蒜精油制劑的缺陷和技術(shù)不足，提供一種生產(chǎn)工藝簡單、掩味效果好、能夠控制在胃腸道釋放部位和速度的大蒜精油顆粒制劑。
本發(fā)明要解決的另一技術(shù)問題是提供所述大蒜精油掩味控釋顆粒制劑的制備方法，簡單易行，成本較低。
本發(fā)明還有一個目的是提供所述大蒜精油掩味控釋顆粒制劑的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：
本發(fā)明提供了一種含大蒜精油的掩味控釋顆粒，含有大蒜精油、控釋性載體、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳、以及轉(zhuǎn)氨酶；所述大蒜精油為5-30％(w/w)，所述甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物為1-5％(w/w)、慢型消化淀粉5-10％(w/w)、氨基酸0.2-1％(w/w)、丁苯吡膠乳0.6-3％(w/w)，所述轉(zhuǎn)氨酶為0.1-3％(w/w)，余量為控釋性載體；所述轉(zhuǎn)氨酶的序列是seqidno.2；所述的控釋性載體是醫(yī)用或食品用載體材料，包括親水性載體和親脂性載體；親水性載體包括聚乙二醇、泊洛沙姆，優(yōu)選聚乙二醇6000(peg6000)、泊洛沙姆188(f68)，它們可單一應(yīng)用，也可聯(lián)合應(yīng)用；親脂性載體包括硬脂醇、硬脂酸、棕櫚酸、單硬脂酸甘油酯、石蠟，它們可單一應(yīng)用，也可聯(lián)合應(yīng)用。
進一步地，所述氨基酸是由賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸按照6:2:1:7的重量比組成的混合物。
進一步地，在上述方案中，所述的慢型消化淀粉制備方法為：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為6-15％，在70-85℃條件下糊化處理5-20min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為3-5％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.2-0.8:80-90，在溫度45-55℃，ph值5.0-6.0，轉(zhuǎn)速120-180r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)3-4h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于-2-3℃下靜置10-20h，然后于30-50℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量5-8倍的質(zhì)量濃度為0.01-0.5％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于33-45℃恒溫保存30-40h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
進一步地，在上述方案中，所述親水性載體和親脂性載體要同時應(yīng)用，通過調(diào)節(jié)兩類載體的比例，調(diào)節(jié)大蒜精油在胃腸道釋放的部位和速度。
本發(fā)明同時提供了所述大蒜精油掩味控釋顆粒的制備方法，包括以下步驟：
s1.按照比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至65～75℃，使其熔化并攪拌混合均勻，得到載體輔料；
s2.按照比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再將大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在10～25℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得。
進一步地，通過調(diào)節(jié)旋轉(zhuǎn)霧化器轉(zhuǎn)速控制s3所述噴霧液滴的線速度在20～120米/秒，優(yōu)選為50～80米/秒，所得大蒜精油掩味控釋顆粒粒徑大小為150～850μm。
所述的含大蒜精油的掩味控釋顆粒，應(yīng)用于制備飼料添加劑。
如本文所用，以下術(shù)語意欲具有以下含義。
"蛋白"、"多肽"和"肽"在本文被互換地用于表示通過酰胺鍵共價地連接的至少兩個氨基酸的聚合物，不論長度或翻譯后的修飾(例如糖基化、磷酸化、脂質(zhì)化、豆蘧?；?myristilation)、泛素化等)。這一定義包括d-與l-氨基酸和d-與l-氨基酸的混合物。
"氨基轉(zhuǎn)移酶"和"轉(zhuǎn)氨酶"在本文被互換地用于指具有從伯胺轉(zhuǎn)移氨基(nh2)、一對電子和質(zhì)子至受體分子的羰基(c＝0)的酶能力的多肽。更特定地，轉(zhuǎn)氨酶多肽能夠立體選擇性地催化方案1的方法(下面)。如本文所用的轉(zhuǎn)氨酶包括天然存在的(野生型)轉(zhuǎn)氨酶以及由人處理產(chǎn)生的非天然存在的工程化的多肽。
在本文的轉(zhuǎn)氨酶的表征中，可以參照河流弧菌的天然存在的轉(zhuǎn)氨酶或另一工程轉(zhuǎn)氨酶的氨基酸序列描述多肽。編碼天然存在的河流弧菌js17轉(zhuǎn)氨酶的多核苷酸序列在siin等，2003，"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中被公開。本公開的河流弧菌轉(zhuǎn)氨酶的多核苷酸和氨基酸序列分別以seqidno.1和seqidno.2表示。
在一些實施方式中，提供改進的轉(zhuǎn)氨酶性質(zhì)的與參照轉(zhuǎn)氨酶多肽的殘基差異的數(shù)目可以包括一個或多個殘基位置、2個或多個殘基位置、3個或多個殘基位置、5個或多個殘基位置、10個或多個殘基位置或20個或多個殘基位置的差異，最多參照酶序列的氨基酸總數(shù)的10％，最多參照酶序列的氨基酸總數(shù)的20％，最多參照酶序列的氨基酸總數(shù)的30％。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明所述大蒜精油掩味控釋顆粒的制備方法與現(xiàn)有普通大蒜精油制劑相比，具有很大的改進，主要有以下幾點：
(1)所選控釋性載體輔料是醫(yī)用或食品用載體材料，無毒無害價廉易得，制備方法簡單易行，成本較低，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)；
(2)篩選了親水性載體和親脂性載體的種類，科學確定了親水性載體和親脂性載體聯(lián)合應(yīng)用的配伍比例，確定了大蒜精油掩味控釋顆粒的配方；
(3)有效掩蓋了大蒜精油的強烈蒜臭味，增加了產(chǎn)品生產(chǎn)者和使用者的舒適感；
(4)通過調(diào)節(jié)親水性載體和親脂性載體聯(lián)合應(yīng)用的配伍比例，較好的控制了大蒜精油在胃腸道的釋放部位和速度，在胃部適度釋放，既可增強胃液分泌和胃腸蠕動，又避免大蒜精油量大時會對胃黏膜產(chǎn)生刺激性，引起動物反胃傷胃，同時防止胃部的強酸環(huán)境對大蒜精油的破壞性，防止其在胃內(nèi)失活，提高了利用度；
(5)可在腸道全過程釋放，持續(xù)刺激腸道蠕動和各種消化酶的分泌，提高動物對飼料的消化吸收，同時延長了大蒜精油在腸道后端的作用濃度和時間，增強大蒜精油的腸道抗菌效果；
(6)顆粒外觀呈類白色、淡黃色球形顆粒，顯微鏡下觀察為半透明狀，粒徑大小為150～850μm，流動性和分散性好，更有利于與飼料混合均勻，使用方便。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例來進一步詳細說明本發(fā)明，但實施例不限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍與核心內(nèi)容依據(jù)權(quán)利要求書加以確定。
實施例1：10％大蒜精油掩味控釋顆粒
按照"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中記載的方法，獲得轉(zhuǎn)氨酶。
再按照以下方法制備慢型消化淀粉：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為6％，在70℃條件下糊化處理5min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為3％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.2:80，在溫度45℃，ph值5.0，轉(zhuǎn)速120r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)3h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于-2℃下靜置10h，然后于30℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量5倍的質(zhì)量濃度為0.01％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于33℃恒溫保存30h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
制備10％大蒜精油掩味控釋顆粒：
s1.按照下列比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至70℃，使其熔化并攪拌混合均勻；
s2.按照下列比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再稱取大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在10℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得10％大蒜精油掩味控釋顆粒。
實施例2：5％大蒜精油掩味控釋顆粒
按照"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中記載的方法，獲得轉(zhuǎn)氨酶。
再按照以下方法制備慢型消化淀粉：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為8％，在72℃條件下糊化處理8min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為3-5％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.3:82，在溫度47℃，ph值5.2，轉(zhuǎn)速130r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)3.1h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于-1℃下靜置12h，然后于34℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量5.5倍的質(zhì)量濃度為0.1％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于36℃恒溫保存32h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
制備5％大蒜精油掩味控釋顆粒：
s1.按照下列比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至75℃，使其熔化并攪拌混合均勻；
peg6000：30g；
棕櫚酸：25g；
單硬脂酸甘油酯：30.6g；
s2.按照下列比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再稱取大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在15℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得5％大蒜精油掩味控釋顆粒。
實施例3：15％大蒜精油掩味控釋顆粒
按照"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中記載的方法，獲得轉(zhuǎn)氨酶。
再按照以下方法制備慢型消化淀粉：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為10％，在76℃條件下糊化處理11min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為3-5％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.6:85，在溫度45-55℃，ph值5.5，轉(zhuǎn)速150r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)3.5h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于0℃下靜置15h，然后于40℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量6.5倍的質(zhì)量濃度為0.3％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于38℃恒溫保存35h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
制備15％大蒜精油掩味控釋顆粒：
s1.按照下列比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至65℃，使其熔化并攪拌混合均勻；
s2.按照下列比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再稱取大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在15℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得15％大蒜精油掩味控釋顆粒。
實施例4：20％大蒜精油掩味控釋顆粒
按照"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中記載的方法，獲得轉(zhuǎn)氨酶。
再按照以下方法制備慢型消化淀粉：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為12％，在81℃條件下糊化處理18min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為4.5％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.6:88，在溫度53℃，ph值5.8，轉(zhuǎn)速170r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)3.8h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于2℃下靜置18h，然后于45℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量7倍的質(zhì)量濃度為0.4％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于42℃恒溫保存37h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
制備20％大蒜精油掩味控釋顆粒：
s1.按照下列比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至72℃，使其熔化并攪拌混合均勻；
peg6000：26g；
單硬脂酸甘油酯：39.3g；
s2.按照下列比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再稱取大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在10℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得20％大蒜精油掩味控釋顆粒。
實施例5：30％大蒜精油掩味控釋顆粒
按照"purification,characterization,andmolecularcloningofanovelamine:pyruvatetransaminasefromvibriofluvialisjs17(來自河流弧菌js17的新的胺：丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶的純化、表征和分子克隆)”applmicrobiolbiotechnol.61(5-6):463-471)中記載的方法，獲得轉(zhuǎn)氨酶。
再按照以下方法制備慢型消化淀粉：
1)將藕淀粉、芭蕉芋淀粉、羧甲基淀粉按照1:1:20的重量比混合，加水，使淀粉質(zhì)量濃度為15％，在85℃條件下糊化處理20min，得到淀粉糊；
2)淀粉糊冷卻，與α-1,6葡萄糖苷酶以及碳酸氫鈉溶液(質(zhì)量濃度為5％)按照以下配比混合：淀粉糊:α-1,6葡萄糖苷酶:碳酸氫鈉溶液＝10:0.8:90，在溫度55℃，ph值6.0，轉(zhuǎn)速180r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌反應(yīng)4h；
3)將上述步驟2)反應(yīng)后得到的產(chǎn)物置于3℃下靜置20h，然后于50℃低溫干燥；
4)步驟3)干燥后的產(chǎn)物加入相對于其重量8倍的質(zhì)量濃度為0.5％的氯化鈉溶液，攪拌均勻，置于45℃恒溫保存40h；
5)步驟4)的產(chǎn)物用噴霧干燥法處理得到粉末狀物體，即為所述慢型消化淀粉。
制備30％大蒜精油掩味控釋顆粒：
s1.按照下列比例稱取親水性載體和親脂性載體輔料，投入反應(yīng)釜中，加熱至70℃，使其熔化并攪拌混合均勻；
s2.s2.按照下列比例稱取甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-丙烯酸丁酯共聚物、慢型消化淀粉、氨基酸、丁苯吡膠乳，加入s1得到的載體輔料中，再稱取大蒜精油原料加入其中，攪拌均勻，得到混勻物料；
s3.將s2所得混勻物料，通過噴霧冷卻制粒機進行制粒，控制噴霧液滴所處空氣溫度在25℃；
s4.冷卻，過篩，收集即得30％大蒜精油掩味控釋顆粒。
本發(fā)明制備得到的大蒜精油掩味控釋顆粒相關(guān)試驗：
1、對雞的生長性能比較試驗
以實施例1配方為例進行10％大蒜精油掩味控釋顆粒對雞的生長性能影響試驗，另外配制含10％大蒜精油的粉劑作為對照品，兩種產(chǎn)品有效成分含量相同；300只7日齡aa+肉雞，隨即分為三組，每組100只，在常規(guī)飼料中分別添加0.1％的上述大蒜精油制劑，自由采食及飲水，常規(guī)免疫，直至實驗結(jié)束；35日齡時，空腹稱重，統(tǒng)計采食量，計算平均日增重、平均日采食量、料肉比，并對添加大蒜精油的兩組生長性能進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果表明，與空白組比較，飼料中添加大蒜精油制劑，可以增加肉雞采食量，提高日增重，降低料肉比，表現(xiàn)出更加優(yōu)異的生產(chǎn)性能；10％大蒜精油掩味控釋顆粒添加組生產(chǎn)成績要優(yōu)于10％大蒜精油粉劑添加組，但是沒有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
2、對仔豬的生長性能和預防腹瀉試驗
以實施例1配方為例進行10％大蒜精油掩味控釋顆粒對仔豬的生長性能和預防腹瀉試驗，在常規(guī)飼料中添加0.1％的10％大蒜精油掩味控釋顆粒；110頭60日齡仔豬，隨即分為兩組，每組55頭，自由采食及飲水，常規(guī)免疫，直至實驗結(jié)束；100日齡時，空腹稱重，統(tǒng)計采食量，計算平均日增重、平均日采食量、料肉比，并對大蒜精油對仔豬預防腹瀉情況進行分析。
結(jié)果表明，與空白組比較，飼料中添加大蒜精油掩味控釋顆粒，具有顯著的促生長作用，平均日采食量提高2.9％，平均日增重提高8.8％，料肉比降低5.7％，表現(xiàn)出更加優(yōu)異的生產(chǎn)性能；并且仔豬腹瀉率降低了18.1％，說明大蒜精油掩味控釋顆粒具有很好的預防仔豬腹瀉作用，大蒜精油在腸道后端的作用濃度提高，作用時間延長，增強了大蒜精油的腸道抗菌效果。
最后應(yīng)說明的是：以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其限制；盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解：其依然可以對前述實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實施例技術(shù)方案的精神和范圍。
序列表
<110>揭陽市潤達腸衣有限公司
<120>一種含大蒜精油的掩味控釋顆粒及其制備方法和應(yīng)用
<130>28-2701
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