本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，特別涉及一種幼齡反芻動(dòng)物早期斷奶促進(jìn)劑及其飼喂方法。

背景技術(shù)：

犢牛斷奶過(guò)程中，伴隨著飼料形態(tài)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)源和飼養(yǎng)環(huán)境的改變，對(duì)犢牛造成了一定的應(yīng)激反應(yīng)。早期斷奶犢牛的消化系統(tǒng)、免疫器官等都還沒(méi)有發(fā)育完全，機(jī)能尚不完善，在斷奶期間容易產(chǎn)生生長(zhǎng)停滯、腹瀉等應(yīng)激癥狀。

犢牛飼料含脂肪高，容易被氧化，并且犢牛早期斷奶過(guò)程中機(jī)體的氧化還原平衡被打破，自由基增加，同時(shí)抗氧化能力下降，導(dǎo)致嚴(yán)重的氧化應(yīng)激產(chǎn)生。奶牛早期斷奶技術(shù)雖然在國(guó)外及國(guó)內(nèi)部分規(guī)模化奶牛場(chǎng)開(kāi)始推行，但是我國(guó)仍處于起步階段，飼養(yǎng)管理水平跟不上對(duì)瘤胃的定向培育需要，對(duì)斷奶期間抗應(yīng)激干預(yù)技術(shù)更是缺乏研究，斷奶對(duì)犢牛造成應(yīng)激的根源仍不十分清楚。尤其在犢牛斷奶這一特殊生理階段其消化特性、血液指標(biāo)變化規(guī)律以及緩解氧化應(yīng)激對(duì)改善犢?？寡趸癄顟B(tài)的作用機(jī)制缺乏研究，需要大量基礎(chǔ)研究進(jìn)一步提高犢牛的培育技術(shù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于一種添加入飼料中的幼齡反芻動(dòng)物早期斷奶促進(jìn)劑，其可有效提高飼料的抗氧化性，增強(qiáng)動(dòng)物自身抗氧化、抗應(yīng)激能力和免疫能力，增強(qiáng)瘤胃微生物生長(zhǎng)。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：

一種幼齡反芻動(dòng)物早期斷奶促進(jìn)劑，以待添加的精料重量為100％計(jì)，該促進(jìn)劑包括以下組分：維生素E 0.003-0.02％；乙氧基喹啉0.006-0.03％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.0005-0.005％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸0.05-0.5％。

維生素E可以起到體內(nèi)抗氧化劑并且也是必需的維生素，有利于調(diào)動(dòng)動(dòng)物自身的免疫能力。PG是強(qiáng)力飼料抗氧化劑，并能防止VE氧化和乙氧基喹啉合用可以減少用量并達(dá)到更好的抗氧化效果。乙氧基喹啉可以起到體外和體內(nèi)的雙重抗氧化作用。幾種物質(zhì)可以有體內(nèi)體外抗氧化的協(xié)同作用，促進(jìn)瘤胃微生物的生長(zhǎng)，提高動(dòng)物自身免疫能力。

配方中的過(guò)瘤胃DL蛋氨酸起增效作用，具有螯合金屬離子、抗氧化及提供有機(jī)酸的補(bǔ)充作用。并且適宜過(guò)瘤胃率同時(shí)保證了在瘤胃中微生物的生長(zhǎng)、促進(jìn)瘤胃發(fā)育，以及供應(yīng)瘤胃后動(dòng)物的蛋氨酸需要、增強(qiáng)動(dòng)物免疫力、抗應(yīng)激力和甲基供給能力。

乙氧基喹啉是性能優(yōu)良的飼料抗氧化劑之一，是最經(jīng)濟(jì)的抗氧化劑，適用于預(yù)混料、魚(yú)粉及添加脂肪的產(chǎn)品，可防止其中的維生素A、D、E等及脂肪氧分變質(zhì)天然色素氧化變色，并有一定的防霉和保鮮作用；另可作為食品抗氧化劑、水果保鮮劑、橡膠防老劑。在本發(fā)明促進(jìn)劑中，乙氧基喹啉可以起到體內(nèi)體外聯(lián)合抗氧化、緩解應(yīng)激的作用，與維生素E協(xié)同，VE可在細(xì)胞內(nèi)抗氧化、緩解應(yīng)激；乙氧基喹啉可在體液中起到抗氧化作用，并提高動(dòng)物免疫力。并且可以保證動(dòng)物紅細(xì)胞膜上的不飽和脂肪酸不被氧化，保證生物膜的穩(wěn)定性和流動(dòng)性，提高動(dòng)物的防疫能力。

作為優(yōu)選，該促進(jìn)劑包括以下組分：維生素E 0.006-0.01％；乙氧基喹啉0.012-0.024％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.001-0.002％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸0.4-0.5％。

作為優(yōu)選，過(guò)瘤胃DL蛋氨酸的過(guò)瘤胃率為50-80％。過(guò)瘤胃率是一個(gè)表明有多少蛋氨酸能通過(guò)瘤胃的指標(biāo)。50-80％的過(guò)瘤胃率可以在瘤胃中釋放出適宜比例的蛋氨酸供瘤胃微生物的合成以及增強(qiáng)上述其它物質(zhì)的作用。并且提供反芻動(dòng)物合適比例的過(guò)瘤胃蛋氨酸增強(qiáng)動(dòng)物免疫力、提供游離甲基促進(jìn)動(dòng)物合成磷脂酰膽堿，保證生物膜的流動(dòng)性和穩(wěn)定性。

一種用于幼齡反芻動(dòng)物早期斷奶的精料組合物，該精料組合物包括精料和促進(jìn)劑，其中以精料重量為100％計(jì)，所述促進(jìn)劑包括以下組分：維生素E 0.003-0.02％；乙氧基喹啉0.006-0.03％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.0005-0.005％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸0.05-0.5％。

作為優(yōu)選，所述的精料包括以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)的原料：玉米52.0％、大豆粕27.5％、膨化玉米5.0％、小麥麩11.0％、食鹽1.0％、磷酸氫鈣1.1％、石粉1.4％、犢牛預(yù)混料1.0％。

本發(fā)明的有益效果是：我國(guó)反芻動(dòng)物的斷奶水平仍然較低，不正確的斷奶方法以及沒(méi)有針對(duì)斷奶的添加劑使得我國(guó)牛羊在斷奶時(shí)期普遍發(fā)生嚴(yán)重的應(yīng)激現(xiàn)象，采食量低下，腹瀉，嚴(yán)重的甚至死亡。使用本促進(jìn)劑可起養(yǎng)分增效作用，具有螯合金屬離子、抗氧化及提供有機(jī)酸的補(bǔ)充作用，增加動(dòng)物的總抗氧化能力，減少過(guò)氧化物的產(chǎn)生，使幼齡反芻動(dòng)物更好的抵抗斷奶所帶來(lái)的應(yīng)激，特別是自由基氧化導(dǎo)致的不良反應(yīng)，提高日增重，改善斷奶后對(duì)日糧的適應(yīng)性，穩(wěn)定瘤胃內(nèi)環(huán)境的pH值在6.4-6.6，可有利于瘤胃上皮的發(fā)育，減少腹瀉的發(fā)生10-30％。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的實(shí)施并不局限于下面的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。

在本發(fā)明中，若非特指，所有的份、百分比均為重量單位，所采用的設(shè)備和原料等均可從市場(chǎng)購(gòu)得或是本領(lǐng)域常用的。下述實(shí)施例中的方法，如無(wú)特別說(shuō)明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。

過(guò)瘤胃DL蛋氨酸，購(gòu)自杭州康德權(quán)飼料有限公司，實(shí)施例采用的過(guò)瘤胃DL蛋氨酸的過(guò)瘤胃率為50-80％；

犢牛預(yù)混料，購(gòu)自杭州思我特農(nóng)業(yè)科技有限公司；

愛(ài)可多，美國(guó)諾偉司公司，有效成分為乙氧基喹啉，乙氧基喹啉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)約60％。

實(shí)施例1：

一種犢牛早期斷奶促進(jìn)劑(以下簡(jiǎn)稱(chēng)聯(lián)合促進(jìn)劑)，以添加的精料重量為100％計(jì)，由以下組分組成：維生素E 0.006％；愛(ài)可多(美國(guó)諾偉司公司，有效成分為乙氧基喹啉)0.02％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.001％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸0.4％。所述促進(jìn)劑使用時(shí)在精料中添加。

實(shí)施例2：

一種犢牛早期斷奶促進(jìn)劑(以下簡(jiǎn)稱(chēng)聯(lián)合促進(jìn)劑)，以精料重量為100％計(jì)，包括：維生素E 0.006％；愛(ài)可多(美國(guó)諾偉司公司，有效成分為乙氧基喹啉)0.02％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.001％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸(起增效作用，具有螯合金屬離子、抗氧化及提供有機(jī)酸的補(bǔ)充作用)0.4％。所述促進(jìn)劑使用時(shí)在精料中添加。

實(shí)施例3：

一種犢牛早期斷奶促進(jìn)劑(以下簡(jiǎn)稱(chēng)聯(lián)合促進(jìn)劑)，以精料重量為100％計(jì)，包括：維生素E 0.006％；愛(ài)可多(美國(guó)諾偉司公司，有效成分為乙氧基喹啉)0.02％；沒(méi)食子酸丙酯(PG)0.001％；過(guò)瘤胃DL蛋氨酸(起增效作用，具有螯合金屬離子、抗氧化及提供有機(jī)酸的補(bǔ)充作用)0.4％。所述促進(jìn)劑使用時(shí)在精料中添加。

為驗(yàn)證效果，以下采用實(shí)施例1制得的聯(lián)合促進(jìn)劑進(jìn)行飼喂試驗(yàn)：

1.聯(lián)合促進(jìn)劑的抗氧化效果

試驗(yàn)設(shè)計(jì)為對(duì)照組飼料采用開(kāi)食料與代乳粉1：1配合，試驗(yàn)組采用聯(lián)合促進(jìn)劑或乙氧基喹啉(0.025％)或維生素E(300mg/kg)作為處理組。

通過(guò)測(cè)定過(guò)氧化物值(POV)來(lái)確定抗氧化效果。過(guò)氧化物值采用活性氧代謝(AOM)法，按照國(guó)標(biāo)GB/T 5538–2005測(cè)定，其原理是根據(jù)油脂氧化過(guò)程中產(chǎn)生過(guò)氧化物與碘化鉀作用，生成游離碘，以硫代硫酸鈉溶液滴定，計(jì)算過(guò)氧化物值。稱(chēng)取3g樣品于錐形瓶中，將50mL乙酸―異辛烷溶液加入錐形瓶中溶解樣品，加入0.5mL飽和碘化鉀溶液使其反應(yīng)1min。然后立即加入30mL蒸餾水，用硫代硫酸鈉溶液滴定上述溶液直至黃色幾乎消失。添加0.5mL淀粉溶液繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失即為滴定終點(diǎn)。記錄消耗的硫代硫酸鈉體積，根據(jù)下列公式計(jì)算過(guò)氧化物值：POV＝1000(V-V0)c/m，其中，V為滴定的硫代硫酸鈉溶液的體積(mL)，V0為空白的硫代硫酸鈉體積(mL)，c為硫代硫酸鈉的濃度(mol/L)，m為稱(chēng)量樣品的質(zhì)量，單位為g。

表1各處理組過(guò)氧化物值

飼料原料中高于5.0meq/kg就說(shuō)明飼料已經(jīng)氧化變質(zhì)，本研究中飼料中添加促進(jìn)劑，所測(cè)的POV都低于5.0meq/kg，說(shuō)明飼料的質(zhì)量良好，這與所采飼料常溫下貯存的時(shí)間較短，飼料新鮮度較高有關(guān)。另外添加促進(jìn)劑各組的POV都低于對(duì)照組，說(shuō)明飼料中添加促進(jìn)劑能夠起到很好的抗氧化效果。從表1中看出聯(lián)合促進(jìn)劑的防治飼料氧化效果要優(yōu)于單獨(dú)促進(jìn)劑組。

2.聯(lián)合促進(jìn)劑實(shí)施時(shí)間確定

試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。選取生長(zhǎng)發(fā)育正常，健康無(wú)疾病剛出生的南方黃牛犢牛20頭，根據(jù)體重、出生日期相同或相近的原則，隨機(jī)分配入2組：對(duì)照組、試驗(yàn)組，每組10頭牛。

犢牛飼用代乳粉作為母乳代替，飼養(yǎng)至犢牛達(dá)到45日齡左右斷奶，開(kāi)食料放在飼草中供犢牛自由采食。

對(duì)照組在斷奶后飼喂促進(jìn)劑，試驗(yàn)組在斷奶前2周開(kāi)始飼喂促進(jìn)劑。

各組犢牛的開(kāi)食料(精料)放在飼草中供犢牛自由采食，開(kāi)食料(精料)配方見(jiàn)表2。

表2開(kāi)食料(精料)配方

試驗(yàn)期間測(cè)定犢牛、體尺初始體重、斷奶體重以及15，30天體重，每周測(cè)定采食量，數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。

分別于斷奶后第2天，第10天，第20天采集血樣10ml，離心分裝3管。用于測(cè)定血清中SOD(超氧化物歧化酶)，MDA(丙二醛),TAOC(總抗氧化能力)，葡萄糖、總蛋白、白蛋白、尿素氮，數(shù)據(jù)見(jiàn)表4。

表3不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)施聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響

表4不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)施聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛血液的影響

由表3中看出，使用聯(lián)合抗氧化對(duì)肉牛采食量沒(méi)有負(fù)面作用，反而增加了11.8％(P＝0.05)。采食量的增加可能與聯(lián)合促進(jìn)劑改善了犢牛健康，緩解了氧化應(yīng)激有關(guān)。并且聯(lián)合促進(jìn)劑的實(shí)施選擇在斷奶前2周開(kāi)始較好。

斷奶前2周開(kāi)始聯(lián)合促進(jìn)劑提高了肉牛的日增重，試驗(yàn)組平均日增重高對(duì)照組5.1％，這說(shuō)明，當(dāng)在斷奶前2周使用聯(lián)合促進(jìn)劑時(shí)，能提高肉牛的食欲，并且對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率也有幫助，這也導(dǎo)致試驗(yàn)組肉牛的日增重和增重采食比高于對(duì)照組。

如表4所示，斷奶前2周或斷奶后使用聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛的血液總蛋白、白蛋白、血糖以及尿素氮的含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。試驗(yàn)組和對(duì)照組肉牛的血液尿素氮含量差異不顯著說(shuō)明使用聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛氮代謝沒(méi)有負(fù)面影響。另外，試驗(yàn)組肉牛的血液的SOD和T-AOC要顯著高于對(duì)照組說(shuō)明在斷奶前使用聯(lián)合促進(jìn)劑有利于提高犢?？寡趸芰Α６囼?yàn)組MDA的減少說(shuō)明，在斷奶前2周使用聯(lián)合促進(jìn)劑有助于減少幼犢牛體內(nèi)過(guò)氧化產(chǎn)物。

另外，對(duì)照組有3頭發(fā)生腹瀉，而試驗(yàn)組沒(méi)有腹瀉發(fā)生。

研究得出利用代乳粉替代母乳進(jìn)行早期斷奶時(shí)推薦在斷奶前2周實(shí)施添加聯(lián)合促進(jìn)劑。

3.聯(lián)合促進(jìn)劑劑量確定

試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。選取生長(zhǎng)發(fā)育正常，健康無(wú)疾病剛出生的南方黃牛犢牛30頭，根據(jù)體重、出生日期相同或相近的原則，隨機(jī)分配入3組：對(duì)照組、試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組，每組10頭。

犢牛飼用代乳粉作為母乳代替，飼養(yǎng)至犢牛達(dá)到45日齡左右斷奶，開(kāi)食料(配方見(jiàn)表2)放在飼草中供犢牛自由采食，持續(xù)飼喂促進(jìn)劑。

對(duì)照組日糧中不添加促進(jìn)劑，飼喂代乳粉，至45日齡斷奶(不加促進(jìn)劑)。

試驗(yàn)1組日糧中1倍劑量的聯(lián)合促進(jìn)劑，飼喂代乳品，飼養(yǎng)至45日齡，停喂代乳粉持續(xù)飼喂促進(jìn)劑從斷奶前2周開(kāi)始喂到斷奶后30天。

試驗(yàn)2組日糧中2倍劑量的聯(lián)合促進(jìn)劑，飼喂代乳品，飼養(yǎng)至45日齡，停喂代乳品，開(kāi)食料放在飼草中供犢牛自由采食，持續(xù)飼喂EQ從斷奶前2周開(kāi)始喂到斷奶后30天。

各組犢牛的開(kāi)食料放在飼草中供犢牛自由采食。

試驗(yàn)期間測(cè)定犢牛、體尺初始體重、斷奶體重以及15，30天體重，每周測(cè)定采食量，數(shù)據(jù)見(jiàn)表5。

于試驗(yàn)犢牛斷奶后1-2天內(nèi)用胃管采樣裝置采集瘤胃液，Sartorius PB–20型pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)液pH值。測(cè)定前，pH計(jì)先用緩沖液進(jìn)行校正。

分別于斷奶后第2天，第10天，第20天采集血樣10ml，離心分裝3管。用于測(cè)定血清中SOD(超氧化物歧化酶)，MDA(丙二醛),TAOC(總抗氧化能力)，葡萄糖、總蛋白、白蛋白、尿素氮，數(shù)據(jù)見(jiàn)表6。

表5不同劑量聯(lián)合抗促進(jìn)劑對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響

表6不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)施聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛血液的影響

由表5中看出，1倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑提高了肉牛采食量，但2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑與對(duì)照組相比沒(méi)有提高作用。采食量的增加可能與聯(lián)合促進(jìn)劑改善了犢牛健康，緩解了氧化應(yīng)激有關(guān)。而過(guò)多使用促進(jìn)劑可能對(duì)采食不利。

斷奶前2周開(kāi)始使用聯(lián)合促進(jìn)劑或2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑均提高了肉牛的日增重，試驗(yàn)組1組與試驗(yàn)2組分別比對(duì)照組平均日增重高17.3％和7.7％，而增重：采食量各組沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。這說(shuō)明，斷奶前2周使用1倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑時(shí)，能提高肉牛的食欲，并且對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率也有幫助，這也導(dǎo)致試驗(yàn)組肉牛的日增重和增重采食比高于對(duì)照組。而使用2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑時(shí)效果并沒(méi)有比1倍劑量更好。另外各組的瘤胃液pH值沒(méi)有顯著差異，但是數(shù)值上偏向中性，有利于瘤胃的發(fā)育，說(shuō)明使用該聯(lián)合促進(jìn)劑不會(huì)使瘤胃發(fā)酵環(huán)境產(chǎn)生變化。

如表6所示，斷奶前2周或斷奶后使用1倍或2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛的血液總蛋白、白蛋白、血糖以及尿素氮的含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。試驗(yàn)組和對(duì)照組肉牛的血液尿素氮含量差異不顯著說(shuō)明使用聯(lián)合促進(jìn)劑對(duì)肉牛氮代謝沒(méi)有負(fù)面影響。1倍或2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑試驗(yàn)組肉牛的血液的SOD和T-AOC要顯著高于對(duì)照組說(shuō)明在斷奶前使用聯(lián)合促進(jìn)劑有利于提高犢?？寡趸芰Α６囼?yàn)1組和試驗(yàn)2組犢牛血液中MDA的減少說(shuō)明，斷奶前2周使用聯(lián)合促進(jìn)劑有助于減少幼犢牛體內(nèi)過(guò)氧化產(chǎn)物。

犢牛斷奶前2周使用2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑與1倍聯(lián)合促進(jìn)劑相比，SOD、T-AOC、MDA均沒(méi)有顯著差異。本試驗(yàn)表明，2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑并沒(méi)有在1倍聯(lián)合促進(jìn)劑基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高抗氧化性能。因此，聯(lián)合促進(jìn)劑不必高于2倍劑量。

另外，對(duì)照組腹瀉發(fā)生的有3頭，1倍促進(jìn)劑組有1頭發(fā)生腹瀉，2倍劑量組沒(méi)有發(fā)生腹瀉情況。

根據(jù)以上試驗(yàn)可知，本發(fā)明的犢牛早期斷奶促進(jìn)劑及養(yǎng)殖方法在幼齡反芻動(dòng)物斷奶前實(shí)施效果較好，推薦斷奶前2周開(kāi)始實(shí)施，可實(shí)現(xiàn)較好的體內(nèi)外聯(lián)合抗氧化功效，推薦劑量為1-2倍劑量聯(lián)合促進(jìn)劑。

以上所述的實(shí)施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。