本發(fā)明涉及一種具有緩解沙門氏菌誘導(dǎo)腸炎功能的微量元素硒膳食補(bǔ)充劑，屬于食品技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鼠傷寒沙門氏菌是一種能夠侵染許多哺乳類的宿主，引發(fā)腸道疾病和腹瀉甚至死亡的致病菌。它屬于無宿主特異性但有侵害性的病原菌，據(jù)報(bào)道日本、美國(guó)等發(fā)達(dá)國(guó)家的食物中毒事情中40～80％是由沙門氏菌侵染引發(fā)的。1981年，世界衛(wèi)生組織公布的沙門氏菌有2000余種，其中文獻(xiàn)報(bào)告的小兒沙門氏菌感染鼠傷寒占到了53-80％。鼠傷寒沙門氏菌性狀為：需氧、無芽孢、有鞭毛的革蘭氏陰性菌。適應(yīng)外界的生活能力強(qiáng)，廣泛分布在自然界中。常見的傳染源有：暫時(shí)無病癥的沙門氏菌攜帶者，家禽和其他動(dòng)物的內(nèi)臟，被污染的健康畜禽養(yǎng)殖以及蛋和蛋制品等。消化道是沙門氏菌對(duì)機(jī)體侵染的首要途徑。攝入被沙門氏菌污染過的食物和水都會(huì)引起感染發(fā)病。沙門氏菌進(jìn)入腸道后，通過內(nèi)毒素來致病。部分沙門氏菌能夠在腸道中定植下來，而大部分沙門氏菌則通過糞便排出體外。沙門氏菌的潛伏期不定，最常見的臨床類型為畏寒發(fā)熱，嘔吐，腹瀉，腹痛，大便水樣等腸炎現(xiàn)象。現(xiàn)在對(duì)于沙門氏菌感染的有效方法是使用抗生素，如土霉素、氯霉素等，并輔以對(duì)癥治療。呋喃類和磺胺類的也有一定的效果。
隨著抗生素的廣泛使用，沙門氏菌特別是鼠傷寒沙門氏菌對(duì)抗生素的耐藥性也大幅增強(qiáng)。雖然只有少部分沙門氏菌會(huì)在抗生素的誘導(dǎo)下(或自生突變)擁有耐藥性，但是在抗生素的廣泛使用之后，這少部分菌得到大量繁殖，成為優(yōu)勢(shì)菌群并導(dǎo)致機(jī)體腸炎。因此，我們需要尋找一個(gè)能更好預(yù)防或控制沙門氏菌感染機(jī)體且不會(huì)有副作用的新方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了用于緩解沙門氏菌對(duì)機(jī)體的侵染以及沙門氏菌誘導(dǎo)腸道的病癥的微量元素硒膳食補(bǔ)充劑，是以亞硒酸鈉為有效成分或者主要有效成分。
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種能夠緩解沙門氏菌對(duì)機(jī)體的侵染或者沙門氏菌誘導(dǎo)腸道的病癥的膳食補(bǔ)充劑，所述膳食補(bǔ)充劑以亞硒酸鈉為主要有效成分。
在一種實(shí)施方式中，所述膳食補(bǔ)充劑為飼料、飲料、小麥粉、小麥制品等。
在一種實(shí)施方式中，所述飼料中還包括在飼料中可接受的載體。
在一種實(shí)施方式中，所述飼料是顆粒型飼料。
在一種實(shí)施方式中，所述飼料是小鼠飼料。
在一種實(shí)施方式中，所述飼料的制備：將把亞硒酸鈉溶解在去離子水中，然后與飼料混勻，制粒；其中硒含量為0.15～2.00mg/kg飼料。
在一種實(shí)施方式中，所述飼料中硒含量為0.40～1.00mg/kg飼料。
在一種實(shí)施方式中，所述飲料為含乳飲料，比如發(fā)酵乳。
在一種實(shí)施方式中，所述小麥制品包括面包等。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種能夠緩解沙門氏菌對(duì)機(jī)體的侵染或者沙門氏菌誘導(dǎo)腸道的病癥的藥物或者藥物組合物，所述藥物或者藥物組合物以亞硒酸鈉為主要有效成分。
在一種實(shí)施方式中，所述藥物組合物還包括藥學(xué)上可接受的載體。
在一種實(shí)施方式中，所述藥物組合物中的亞硒酸鈉是由冷凍干燥所得的亞硒酸鈉粉。
在一種實(shí)施方式中，藥物或者藥物組合物可配制成若干種劑型，其中含有藥學(xué)領(lǐng)域中常用的一些賦形劑；例如，口服制劑(如片劑，膠囊劑，溶液或混懸液)；可注射的制劑(如可注射的溶液或混懸液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射用水可立即使用)；局部制劑(例如軟膏或溶液)。
在一種實(shí)施方式中，所述藥物組合物為膠囊劑或者片劑。
在一種實(shí)施方式中，用于本發(fā)明藥物組合物的載體是藥學(xué)領(lǐng)域中可得到的常見類型，包括：口服制劑用的粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、助溶劑、稀釋劑、穩(wěn)定劑、懸浮劑、無色素、矯味劑等；可注射制劑用的防腐劑、加溶劑、穩(wěn)定劑等；局部制劑用的基質(zhì)、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、防腐劑等。
在一種實(shí)施方式中，所述藥物組合物與標(biāo)簽放在一起；所述標(biāo)簽上記載硒攝入量在200～400μg/d。
本發(fā)明涉及的亞硒酸鈉皆滿足食用要求，形態(tài)呈結(jié)晶型粉末，溶于水，不溶于乙醇。熔點(diǎn)為350℃，純度>99.99％，分子量為119.9634，在空氣中穩(wěn)定，對(duì)濕度敏感，易結(jié)晶。
本發(fā)明的微量元素硒膳食補(bǔ)充劑或者藥物或者藥物組合物具有下述有益特性：
1、能夠抑制沙門氏菌對(duì)機(jī)體組織的侵染；
2、能夠提高機(jī)體的抗氧化能力。
本發(fā)明表明，當(dāng)微量元素硒膳食補(bǔ)充劑添加量200～400μg/d時(shí)，能夠有效抑制沙門氏菌對(duì)不同器官的侵染，提高腸道的免疫能力，減輕因沙門氏菌侵染給機(jī)體帶來的氧化應(yīng)激損傷。
附圖說明
圖1是飼料制作方法流程。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1：小鼠飼料制備
本發(fā)明的飼料制作方法如圖1所示。
把亞硒酸鈉溶解在去離子水中，然后與飼料混勻，制粒。分別稱量0.15，0.40，1.00和2.00mg亞硒酸鈉，溶解在200mL的去離子水中，倒入1kg的飼料原料中，混合制粒。形成硒含量為0.15，0.40，1.00和2.00mg/kg的飼料，分別命名為對(duì)照組、富硒組、高硒組和極高硒組。它們相當(dāng)于人的攝入量分別為50，200，400和800ug/d。本發(fā)明的實(shí)施中，飼料的成分如下表1、表2所示：
表1基礎(chǔ)飼料組成及含量
表2基礎(chǔ)飼料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量
實(shí)施例2：微量元素硒膳食補(bǔ)充劑對(duì)沙門氏菌侵染小鼠組織的影響
將40只四周齡的SPF級(jí)小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。分組分別是，對(duì)照組，富硒組，高硒組和極高硒組。每組分別喂食硒含量為0.15，0.40，1.00和2.00ppm的飼料。小鼠自由采食飲水，喂食2個(gè)月。兩個(gè)月結(jié)束后，將所有小鼠禁食禁水4h，經(jīng)口徑灌胃20mg的鏈霉素后恢復(fù)小鼠自由飲食。在鏈霉素處理20h后，再次禁食禁水4h，經(jīng)口徑灌胃已經(jīng)用PBS稀釋好的5×107CFU鼠傷寒沙門氏菌SL1344。48h后殺死全部小鼠進(jìn)行解剖，取脾臟和腸系膜淋巴結(jié)(mLN)用生理鹽水清洗，并在含有1％曲拉通100的生理鹽水中勻漿，將勻漿液涂布到含有0.5％鏈霉素的麥康凱平板培養(yǎng)基上，計(jì)數(shù)其中沙門氏菌數(shù)量。
表3沙門氏菌對(duì)免疫器官的侵染程度
注：*:與對(duì)照組比較P<0.05。
沙門氏菌在入侵到機(jī)體腸道之后，會(huì)侵染到消化道周圍的免疫器官中，對(duì)免疫器官造成氧化應(yīng)激損傷。表3的數(shù)據(jù)表明，無論是在脾臟還是腸系膜淋巴結(jié)中，富硒組和高硒組的沙門氏菌數(shù)量明顯少于對(duì)照組，這說明本發(fā)明在富硒組和高硒組中能夠有效的抑制沙門氏菌對(duì)機(jī)體免疫器官的侵染，從而緩解沙門氏菌誘導(dǎo)腸炎對(duì)機(jī)體造成的損傷。
實(shí)施例3：微量元素硒膳食補(bǔ)充劑對(duì)小鼠抗氧化能力的影響
按照實(shí)施例1所述的小鼠實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，眼眶取血處死小鼠，取小鼠的肝臟用預(yù)冷的生理鹽水清洗，勻漿。測(cè)定肝臟中SOD(超氧化物歧化酶)，MDA(丙二醛)和T-AOC(總抗氧化能力)等抗氧化指標(biāo)。測(cè)試結(jié)果如下表。
表4小鼠肝臟抗氧化測(cè)定
注：*表示該組與對(duì)照組相比有顯著性差異，p<0.05；**表示該組與對(duì)照組比較有極大顯著性差異，p<0.01。
沙門氏菌在入侵機(jī)體后，會(huì)通過自身代謝分泌內(nèi)毒素，增加機(jī)體細(xì)胞的氧化應(yīng)激效應(yīng)。它誘導(dǎo)的腸炎也會(huì)增加機(jī)體內(nèi)活性氧的濃度，給機(jī)體造成更大的氧化應(yīng)激損傷。SOD(過氧化物歧化酶)是機(jī)體內(nèi)的一種活性物質(zhì)，它主要的功能是消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的自由基等有害物質(zhì)，修復(fù)因氧化應(yīng)激效應(yīng)損傷的細(xì)胞，T-AOC(總抗氧化能力)是評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化能力的一個(gè)綜合指標(biāo)，當(dāng)機(jī)體組織的抗氧化能力越強(qiáng)的時(shí)候，T-AOC的數(shù)值越大。MDA(丙二醛)是生物體內(nèi)自由基與脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的標(biāo)志性產(chǎn)物，是生物體內(nèi)氧化應(yīng)激損傷的指標(biāo)。
由表4的結(jié)果可以看出，本發(fā)明的微量元素硒膳食補(bǔ)充劑能夠有效提高小鼠抗氧化能力。其中富硒組小鼠肝臟中SOD明顯高于對(duì)照組，雖然高硒組與對(duì)照組比較沒有明顯的差異，但是也略微有所上升。這兩組在T-AOC的水平上，都明顯高于對(duì)照組，說明這兩組的總抗氧化能力要高于對(duì)照組，機(jī)體的抗氧化能力得到了加強(qiáng)。從MDA值可以看出，高硒組的MDA值要明顯低于對(duì)照組，雖然富硒組和對(duì)照組比較沒有明顯的差異，但是MDA濃度也有所降低，這說明這兩組小鼠收到沙門氏菌氧化應(yīng)激效應(yīng)的影響沒有對(duì)照組明顯。極高硒組呈現(xiàn)相反的趨勢(shì)。以上數(shù)據(jù)充分說明，本發(fā)明的微量元素硒膳食補(bǔ)充劑在富硒組和高硒組中確實(shí)能緩解因沙門氏菌侵染誘導(dǎo)腸炎給機(jī)體帶的氧化應(yīng)激效應(yīng)。
應(yīng)用實(shí)施例1：制備含有微量元素硒膳食添加劑的發(fā)酵乳
鮮奶加糖溶解后，加入一定量亞硒酸鈉，使其濃度為200μg/kg，于60℃，20MPa條件下進(jìn)行均質(zhì)，然后在95℃條件下殺菌5min，降溫到35℃，加入商業(yè)干粉發(fā)酵劑保加利亞乳桿菌和商業(yè)干粉發(fā)酵劑嗜熱鏈球菌，所述混合菌的接種量為鮮奶重量的0.03％，混勻，在40℃下保溫發(fā)酵，凝乳后，在溫度4℃下冷藏24h，得到所述富硒發(fā)酵乳。
應(yīng)用實(shí)施例2：制備含量微量元素硒膳食添加劑的面包
將10g白砂糖和200μg的亞硒酸鈉溶于300ml的溫水(41～45℃)中，將干酵母灑在水上，攪拌，靜置10-15min。然后將水倒入1kg面粉中，混勻，揉面，于室溫下放置60min。用拳頭壓扁面團(tuán)排除其中氣泡，將面團(tuán)分成等大小若干份，再將小面團(tuán)放置室溫下繼續(xù)發(fā)酵至原先體積的兩倍大，發(fā)酵時(shí)間依據(jù)室溫而定，為60min～120min之間。在面團(tuán)表面涂少許黃油，與220℃的烤箱中烘烤30～35min。冷卻至室溫，即得到所述的富硒面包。
應(yīng)用實(shí)施例3：制備含有微量元素硒膳食補(bǔ)充劑的膠囊制品
稱量亞硒酸鈉200μg，加入到以重量計(jì)算3％的海藻酸鈉溶液中，充分?jǐn)嚢枞芙?，然后將此混合液以重量?jì)2％氯化鈣溶液中形成膠粒，靜置固化30min，過濾收集膠粒，將收集到膠粒進(jìn)行冷凍干燥48h，得到含有亞硒酸鈉的粉劑，將這種粉劑裝入目前市場(chǎng)上銷售的藥用膠囊中，得到所述的膠囊制品。
應(yīng)用實(shí)施例4：制備含有微量元素硒膳食補(bǔ)充劑的片劑
分別稱取采用冷凍干燥方法制備的亞硒酸鈉粉劑25.7重量份、淀粉55.0重量份、纖維素衍生物4.5重量份、羧甲基淀粉鈉12.0重量份、滑石粉0.8重量份、蔗糖1.0重量份與水1.0重量份，充分混勻，采用常規(guī)方法制成濕顆粒，然后使用例如中南制藥機(jī)械廠生產(chǎn)的壓片機(jī)進(jìn)行壓片，然后使用例如青州市益康中藥機(jī)械有限公司生產(chǎn)的小型藥物干燥劑中進(jìn)行干燥，再包裝得到本發(fā)明的片劑。
應(yīng)用實(shí)施例5：制備含微量元素硒膳食補(bǔ)充劑的小鼠顆粒飼料
將0.4～1mg的亞硒酸鈉添加入1kg粉狀預(yù)混飼料中，充分混勻，以小型顆粒飼料機(jī)進(jìn)行制粒，制粒溫度為65℃，得到富硒顆粒飼料，所得顆粒飼料硒含量為0.4～1mg/kg。
雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動(dòng)與修飾，因此本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。