本發(fā)明屬于飼料
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地涉及一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，并涉及該飼料的制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：隨著蛋雞養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大，使用1％蛋雞預(yù)混料、3％蛋雞預(yù)混料和5％蛋雞預(yù)混料的中大型蛋雞養(yǎng)殖場日漸增多，甚至達(dá)到40％以上。養(yǎng)殖現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)，使用預(yù)混料的養(yǎng)雞場，蛋殼質(zhì)量不好，糞便稀，死淘率高，嚴(yán)重影響蛋雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，每只蛋雞每年的隱性損失至少5元以上，占蛋雞利潤的30％以上。蛋雞養(yǎng)殖過程中受大腸桿菌、沙門氏菌等污染，呼吸道疾病、腸道疾病、輸卵管疾病等發(fā)病率高；造成這些問題的主要原因是，用預(yù)混料配制成全價(jià)料喂雞：一是原料單一，只有玉米、豆粕、石粉和預(yù)混料，氨基酸平衡和能量蛋白平衡不好把控；二是豆粕使用量大，里面的抗?fàn)I養(yǎng)因子對(duì)雞的腸道健康有一定損傷；三是粗纖維含量不足，難以保證優(yōu)質(zhì)纖維營養(yǎng)，不利于代謝毒素排出；四是混合均勻度差，雞采食營養(yǎng)不均衡帶來的營養(yǎng)不良，產(chǎn)生疾病隱患。蛋雞養(yǎng)殖過程中飼料霉變?nèi)菀滓l(fā)腸炎；濫用消炎藥物，促使腸道菌群失衡，引起厭氧菌等的局部優(yōu)勢而發(fā)病，產(chǎn)氣莢膜梭菌、輪狀病毒等侵襲等引起的腸道疾病普遍。家禽腸黏膜屏障由腸黏膜上皮、腸道內(nèi)正常菌群、腸道內(nèi)分泌物和腸相關(guān)免疫細(xì)胞組成，腸黏膜表面生長著大量的厭氧菌；腸黏膜細(xì)胞主要是柱狀上皮細(xì)胞及少量的杯狀細(xì)胞，內(nèi)分泌細(xì)胞及細(xì)胞腸屏障功能的維持依賴于由胃腸相關(guān)淋巴組織產(chǎn)生的特異性的分泌型免疫球蛋白IgA，以及非特異性的機(jī)械和化學(xué)屏障，如胃酸、蠕動(dòng)、腸上皮緊密連接、黏液、消化酶和正常菌群等。腸內(nèi)營養(yǎng)與腸粘膜的屏障功能發(fā)揮著機(jī)體健康程度和免疫功能的70％作用。因此說，養(yǎng)雞就是養(yǎng)腸道，只有腸道健康，才會(huì)抗病力強(qiáng)，蛋雞機(jī)體才會(huì)健康，才能夠有效降低亞健康甚至疾病帶來的隱形損失。加拿大圭爾夫大學(xué)教授Dr.JulangLi，明確了影響腸道健康的三個(gè)因素：給予腸道的營養(yǎng)，調(diào)整腸道生態(tài)環(huán)境，及根除腸道的病源；認(rèn)為“抗菌肽”，不產(chǎn)生耐藥性，有效抗菌，同時(shí)有助于組織的修復(fù)。具備了理想替抗產(chǎn)品的特征。中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)科院院長咼于明教授研究認(rèn)為明確了腸道疾病的共性，來自于腸道微生態(tài)失衡、防疫屏障損傷、炎癥反應(yīng)、養(yǎng)分吸收障礙及應(yīng)激代謝,造成生產(chǎn)性能降低及死淘率升高。而鋅是六大酶促反應(yīng)中含Zn酶的活性成分，同時(shí)，鋅營養(yǎng)與腸道屏障功能密切相關(guān)，適宜鋅營養(yǎng)有利于雞粘膜免疫，鋅缺乏不利于雞小腸粘液蛋白的表達(dá)；鋅缺乏不利于小腸機(jī)械屏障及其功能；缺鋅時(shí)參與體液免疫的主要細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量減少，并導(dǎo)致T細(xì)胞發(fā)育異常，甚至缺鋅導(dǎo)致胸腺萎縮。酵母細(xì)胞壁粉富含甘露寡糖(20％)、β-葡聚糖(20-40％)等免疫多糖。β-葡聚糖特有的β-1,3-1,6螺旋結(jié)構(gòu)，易被免疫系統(tǒng)識(shí)別，能提高動(dòng)物非特異性和特異性免疫力。甘露寡糖能改善動(dòng)物消化道菌群平衡，防止腸道病原菌定植，具有增強(qiáng)免疫、抗病毒、抗氧化、促生長、吸附細(xì)菌及霉菌毒素等多種重要的生物學(xué)功能，能夠極大地提高人體免疫力。減少應(yīng)激，充分發(fā)揮飼料的營養(yǎng)價(jià)值，穩(wěn)定生產(chǎn)，減少病原菌的危害，降低發(fā)病率，降低死淘率，減少養(yǎng)殖用藥成本。硒參與機(jī)體非特異性免疫、細(xì)胞免疫、體液免疫，在抗氧化和免疫功能方面發(fā)揮著重要作用。因此酵母硒與酵母細(xì)胞壁粉聯(lián)合使用效果最好。酵母細(xì)胞水解物含有游離氨基酸、小肽、核苷酸和酵母細(xì)胞壁成分，能顯著提高動(dòng)物采食量，顯著改善動(dòng)物腸道健康，顯著提高機(jī)體免疫力，有效吸附霉菌毒素等功能。水解單寧酸具有以下功能：一是收斂抗腹瀉性：其機(jī)理為當(dāng)單寧酸以疏水鍵、多點(diǎn)氫鍵與蛋白質(zhì)反應(yīng)理論。主要是其酚羥基與蛋白質(zhì)主鏈中的肽基、側(cè)鏈上的羥基、氨基以及羧基多點(diǎn)結(jié)合，而促進(jìn)水分和營養(yǎng)物質(zhì)更好的吸收。水解單寧酸能有效降低畜禽腹瀉率，提高畜禽的生產(chǎn)性能；二是抑菌性、減少抗生素使用；其機(jī)理是直接通過抑制微生物氧化磷酸化過程中關(guān)鍵酶的活性，從而影響微生物等原生物質(zhì)的新陳代謝。單寧酸對(duì)大腸桿菌、腸炎沙門氏菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、金黃色葡萄球菌、空腸彎曲菌都具有抑制作用。Graziani等、Molan等；三是抗病毒效果。其機(jī)理：單寧酸易與蛋白質(zhì)結(jié)合,進(jìn)入病毒內(nèi)部并阻止糖蛋白復(fù)制，能使生物體內(nèi)的原生質(zhì)凝固,具有抑制病毒內(nèi)部酶的活性從而使病毒凋亡。日糧纖維主要營養(yǎng)作用為：刺激胃腸道發(fā)育；維持腸胃正常蠕動(dòng),減少稀糞和便秘發(fā)生；采食適量粗纖維可被后腸道內(nèi)有益菌發(fā)酵降解，預(yù)防腹瀉，同時(shí)因?yàn)榇掷w維的吸水性，可以將糞便中的水分吸收，減少稀糞問題；維持腸道微生物平衡；解毒作用：日糧纖維可吸附飼料和消化道中產(chǎn)生的某些有害物質(zhì)，使其排出體外。適量的日糧纖維在后腸發(fā)酵，可降低后腸內(nèi)容物的pH，抑制大腸桿菌等病原菌的生長，防止腹瀉。申請(qǐng)?zhí)朇N201110355692.8的發(fā)明《一種環(huán)保、無抗型肉雞后期配合飼料》，表述了其動(dòng)物消化利用率高,有效維持消化道菌群平衡,成本低,減少環(huán)境污染。本發(fā)明由以下原料制成：玉米580-630重量份,豆粕90-120重量份,次粉85-105重量份,菜粕25-45重量份,DDGS50-70重量份,玉米蛋白粉20-40重量份,肉骨粉20-30重量份,碳酸鈣3-7重量份,復(fù)合維生素0.3-0.7重量份,油脂10-30重量份,賴氨酸2.0-6.0重量份,蛋氨酸0.2-0.6重量份,蘇氨酸0.1-0.5重量份,食鹽2.0-3.0重量份,抗氧化劑0.3-0.7重量份,微生態(tài)制劑0.3-0.7重量份和植酸酶0.1-0.5重量份。該發(fā)明是針對(duì)肉雞的產(chǎn)品，在替代抗生素方面只選擇了一種益生菌，實(shí)踐中達(dá)不到有效作用，目前替代抗生素的方法必須采用系統(tǒng)綜合措施。公開號(hào):102742738A的發(fā)明《一種改善蛋殼質(zhì)量的蛋雞產(chǎn)蛋期預(yù)混合飼料》公開了一種改善蛋殼質(zhì)量的蛋雞產(chǎn)蛋期預(yù)混合飼料，由以下按重量記份的組分組成：0-40份豆粕、8-11份磷酸一二鈣、0-15份酶力肽、0-20份肉骨粉、10-14份麥飯石、5份食鹽、2份小蘇打、2份膽堿、10-21份石粉、0.3-0.6份98％甜菜堿、1.6-2.2份蛋氨酸、0.24-0.3份植酸酶、0.1-0.2份抗氧化劑、0.06份產(chǎn)酶益生素、4份蛋雞多礦、0.6份蛋雞多維、0-23份沸石粉。本發(fā)明科學(xué)合理搭配，原料優(yōu)選組合，滿足蛋雞的營養(yǎng)需要，使用先進(jìn)的添加劑組合，提高抗病力，增強(qiáng)抗應(yīng)激能力，優(yōu)質(zhì)復(fù)合酶制劑的使用，改善蛋雞胃腸生物結(jié)構(gòu)，雞糞中氮磷等有害物質(zhì)排放降低，雞舍內(nèi)氨等有害氣體濃度下降，可以改善飼料利用率，產(chǎn)蛋率提高平均延長雞產(chǎn)蛋期，降低飼養(yǎng)成本，降低蛋雞死亡率，可有效改善蛋殼顏色，增強(qiáng)蛋殼強(qiáng)度，減少雞蛋破損率。該發(fā)明核心點(diǎn)是提高蛋殼質(zhì)量，沒有考慮提高抗病力和替代抗生素問題，而本發(fā)明主要針對(duì)提高蛋雞免疫功能和提高抗病力，減少蛋雞養(yǎng)殖中用藥。公開號(hào):106234822A的發(fā)明《蛋雞產(chǎn)蛋期飼料及加工方法》公開的蛋雞產(chǎn)蛋期飼料，由以下按重量份配比的原料組成：植物莖葉粉末30-60份，谷物和/或豆類粉末150-250份，植物殼類粉末50-150份，中藥提取物7-15份，食鹽1-3份，功能粉4-7份，魚粉1-3份。所述功能粉為氨基酸粉、維生素粉、礦物質(zhì)粉、石粉中的任意一種或幾種混合而成。其中植物莖葉粉末、植物殼粉末雖然纖維素含量高，但是為天然狀態(tài)，不利蛋雞吸收利用，反而會(huì)阻礙營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，利用中藥提取物，雖然避免了抗生素的危害，但是起效慢，且用量要求較大。公開號(hào):105995177A的發(fā)明《一種家禽產(chǎn)蛋期飼料及其制備方法》公開的飼料由以下重量份的原料組成：玉米粉30-40份、豆餅5-10份、蠶豆皮5-10份、西瓜皮3-5份、蚯蚓粉5-8份、鬼針草2-3份、山萵苣15-20份、魚粉5-10份、蒲公英2-5份、蛋氨酸0.1-0.5份、貝殼粉2-3份、松針粉5-10份、食鹽2-5份。本發(fā)明從家禽的生物特性著手，對(duì)飼料成分進(jìn)行改善，營養(yǎng)均衡，適口性好，易被家禽消化吸收，各成分共同作用，提高了家禽的產(chǎn)蛋率，改善家禽所產(chǎn)蛋的內(nèi)在品質(zhì)；促進(jìn)家禽的快速生長，降低料肉比；提高家禽的免疫力，增強(qiáng)家禽的抗病能力。但是該發(fā)明的很多原料都不是常用原料，原料不易得且受季節(jié)限制較大，不利于推廣應(yīng)用。公開號(hào):105876116A的發(fā)明《利用魚蟲替代魚粉的蛋雞產(chǎn)蛋期的飼料配方》公開了一種利用魚蟲替代魚粉的蛋雞產(chǎn)蛋期飼料配方，所述配方由以下原料的重量比重組成：玉米68％，魚蟲30％，磷酸氫鈣1.7％，食鹽0.3％。由于傳統(tǒng)養(yǎng)殖配方中的魚粉嚴(yán)重不足，不易消化，所述配方中的魚蟲取之不盡，用之不竭，又易于消化，因此，所述配方用魚蟲代替?zhèn)鹘y(tǒng)養(yǎng)殖配方中的魚粉，在蛋雞產(chǎn)蛋期，有利于降低成本，使蛋黃紅，蛋清稠，延長產(chǎn)蛋周期，降低死亡率。所述配方適用于產(chǎn)蛋率5％-高峰階段的蛋雞應(yīng)用。該發(fā)明的核心點(diǎn)是魚蟲的使用，于本發(fā)明的核心點(diǎn)明顯不同。公開號(hào):105851613A的發(fā)明《一種蛋雞的飼喂飼料》公開了一種蛋雞的飼喂飼料，包括雛雞飼料、青年雞飼料、產(chǎn)蛋期飼料，其中所述產(chǎn)蛋期飼料按照質(zhì)量份包括玉米65-70份、麩皮10-15份、豆粕10-20份、菜籽粕5-10份、魚粉3-5份、石粉3-5份、骨粉1-3份、食鹽1-2份、氨基酸0.5-1份、維生素1-2份、微量元素1-2份。本發(fā)明蛋雞的飼喂飼料，在蛋雞的不同成長過程中，提供不同的飼料配方，該飼料不僅具有豐富的營養(yǎng)成分，而且成本低，養(yǎng)殖戶可以根據(jù)需要靈活地改變飼料成分配比。該發(fā)明組分過于簡單，屬于常規(guī)飼料，并且提高消化率的生物活性物質(zhì)如酶制劑、微生態(tài)制劑等都沒有使用，標(biāo)準(zhǔn)化程度低，不能滿足蛋雞產(chǎn)蛋期營養(yǎng)需求，易發(fā)生蛋雞為了產(chǎn)蛋動(dòng)用體儲(chǔ)備，以健康為代價(jià)滿足最大產(chǎn)蛋需求，造成體重不達(dá)標(biāo)，抗病力降低的現(xiàn)象。綜上所述，目前普遍使用的蛋雞預(yù)混料存在營養(yǎng)不均衡，容易造成使用預(yù)混料的養(yǎng)雞場，蛋殼質(zhì)量不好，糞便稀，死淘率高，養(yǎng)殖用藥量大等嚴(yán)重影響蛋雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益等諸多問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明根據(jù)蛋雞生理機(jī)能和營養(yǎng)特點(diǎn)，從日糧纖維營養(yǎng)、腸道健康的添加劑、提高免疫功能營養(yǎng)、功能性氨基酸等方面著手，有效降低呼吸道疾病、腸道疾病、輸卵管疾病等，提高蛋殼質(zhì)量和腸道健康水平，進(jìn)而降低發(fā)病率，減少養(yǎng)殖用藥，提供安全雞蛋產(chǎn)品，提高蛋雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉5-10份，花生粕8-25份，米糠5-10份，芝麻粕15-25份，膳食纖維20-50份，大豆油1-10份，0.5％復(fù)合預(yù)混料5份，石粉8-15份，磷酸氫鈣8-15份，食鹽2.5-4.5份，賴氨酸1-3份，蘇氨酸1-3份，蛋氨酸1-3份，優(yōu)可寶0.1-0.5份，酵母水解物1-3份，酵母細(xì)胞壁粉0.3-2份，酵母硒0.1-0.5份，蛋氨酸鋅0.1-0.5份，血紅素蛋白0.2-0.5份，復(fù)合酶制劑0.2-0.5份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份；進(jìn)一步地，所述復(fù)合酶制劑由木聚糖酶、纖維素酶、脂肪酶和蛋白酶組成；進(jìn)一步，所述膳食纖維由洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維混合，經(jīng)超聲提取、生物酶解后發(fā)酵得到；所述膳食纖維制備方法包括以下步驟：將洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維按質(zhì)量比1:3:8:3均勻混合，加入混合物質(zhì)量8倍的水，室溫300W、40KHz條件超聲提取20min，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2％的生物酶，于50℃酶解45min，滅酶；酶解液70℃，18-20MPa均質(zhì)，物料冷卻至25-30℃后，加入混合物質(zhì)量3-5％的葡萄糖，0.2-0.5％的混合菌種，25-30℃培養(yǎng)48-72小時(shí)，攪拌轉(zhuǎn)速為20-30r/min，培養(yǎng)到50-55小時(shí)添加混合物質(zhì)量0.005-0.1％的L-半胱氨酸和0.05-0.1％的甘草超微粉，發(fā)酵結(jié)束后減壓濃縮、冷凍干燥、低溫粉碎至粒徑為0.1-0.3mm即得膳食纖維；所述混合菌種含有如下有效活菌數(shù)：枯草芽孢桿菌≥100億/g、地衣芽孢桿菌≥1000億/g、酵母菌≥100億/g、乳酸菌≥50億/g；優(yōu)選的，所述酵母菌為釀酒酵母；進(jìn)一步的，所述酵母菌為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789；所述生物酶為木聚糖酶、纖維素酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:9:2:4:1均勻混合；進(jìn)一步，所述洋蔥粉制備方法包括如下步驟：新鮮洋蔥去外皮，清洗，加入洋蔥重量12倍的水打漿，之后加入洋蔥重量0.03％的混合酶制劑進(jìn)行酶解，調(diào)節(jié)pH值為4.5，溫度55℃，酶解3h，將酶解液在55℃、300W、80KHz條件下超聲提取20min，4-6℃放置12h，過濾后真空濃縮、冷凍干燥、粉碎即得洋蔥粉；所述混合酶制劑由如下重量份數(shù)的原料組成：纖維素酶2、蛋白酶1、α-淀粉酶2、木聚糖酶0.5；所述真空濃縮，具體為：一效75-85℃，真空度0.07MPa，二效65-75℃，真空度0.05MPa，三效45-55℃，真空度0.04MPa。進(jìn)一步，所述酵母水解物的制備方法，包括以下步驟：(1)搖瓶培養(yǎng)取斜面酵母菌種一環(huán)，接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，150rpm,30℃培養(yǎng)30h得酵母種子液；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L發(fā)酵罐培養(yǎng)將酵母種子液按10％質(zhì)量百分比接種量，接入裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30℃,通氣量6L/min,罐壓0.03MPa，500rpm,恒pH6.0條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵至30h時(shí)，一次性添加終濃度為25mmol/L的L-半胱氨酸，總發(fā)酵時(shí)間為50h，得發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0。(3)制備酵母泥：將步驟(2)制得的發(fā)酵液通過離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集酵母泥；(4)酵母細(xì)胞破壁：將步驟(3)所得的酵母泥和水在自溶罐中按1∶1.5質(zhì)量比例調(diào)漿，調(diào)整pH值6-8，加溫到80℃，滅活40分鐘；降溫到40℃-50℃保溫自溶24h；加入混合酶制劑，用量為酵母泥質(zhì)量的1％-1.5％；攪拌，酶法水解10h-24h。所述混合酶制劑由蛋白酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、耐高溫淀粉酶等量混合而成；(5)噴霧干燥120℃-140℃噴霧干燥使水分含量小于10％，即得酵母水解物。較佳的，所述酵母為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789。本發(fā)明同時(shí)提供一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法，包括以下步驟：按照配方準(zhǔn)確稱取各組分原料，將復(fù)合酶制劑、酵母細(xì)胞壁粉、酵母水解物與0.5％復(fù)合預(yù)混料預(yù)先混合，然后按重量份數(shù)自大至小依次加入各種原料，混合均勻，加工制粒，即得無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混和飼料。無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的應(yīng)用方法為：按照以下配比，玉米62％，豆粕20％，石粉8％，無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料10％；將玉米、豆粕、石粉分別粉碎后，與本發(fā)明復(fù)合預(yù)混合飼料混勻后使用。有益效果本發(fā)明根據(jù)蛋雞生理機(jī)能和營養(yǎng)特點(diǎn)，從日糧纖維營養(yǎng)、腸道健康的添加劑、提高免疫功能營養(yǎng)、功能性氨基酸等方面著手，有效降低呼吸道疾病、腸道疾病、輸卵管疾病等，提高蛋殼質(zhì)量和腸道健康水平，進(jìn)而降低發(fā)病率，減少死淘率，減少養(yǎng)殖中抗生素使用，提供安全雞蛋產(chǎn)品，提高蛋雞養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。經(jīng)飼喂試驗(yàn)表明：產(chǎn)蛋率提高3.37％，產(chǎn)蛋量提高7.65％，蛋重提高4.13％，死亡率比對(duì)照組降低3.1％，每只雞多賺錢5.39元，總抗氧化能力T-AOC等抗氧化指標(biāo)提高54.1％，效果明顯。特別是采用特定方法制備的膳食纖維，可溶性膳食纖維含量高、生物活性強(qiáng)，并保留了一定數(shù)量的非水溶性膳食纖維，與益生元配合，能夠顯著地改善腸道菌群，提高腸道益生菌群的數(shù)量，調(diào)節(jié)和維持腸道益生菌群的定植時(shí)間，增強(qiáng)腸道的消化和吸收能力，提高動(dòng)物免疫力。膳食纖維的制備，將酶解、超聲提取與超微粉碎技術(shù)相結(jié)合，采用特定的工藝條件，在提高可溶性膳食纖維含量的同時(shí)，并可改善可溶性膳食纖維及非水溶性膳食纖維的特性，其持水性、膨脹性、增稠性均有不同程度提高。選用洋蔥粉制備膳食纖維，洋蔥：性味辛溫，甜潤白嫩，除含有常見的營養(yǎng)物質(zhì)外，其所含的前列腺素A和硫胺基酸，有擴(kuò)張血管，調(diào)節(jié)血脂，防止動(dòng)脈硬化的作用，賦予本發(fā)明膳食纖維與同類膳食纖維不同的重要特性。采用特定工藝制備酵母水解液，能夠明顯提高谷胱苷肽的含量，谷胱苷肽具有抗氧化、清除自由基、解毒、增強(qiáng)免疫力、延緩衰老、抗癌、抗放射線危害等功能，是重要的功能因子，能夠改善雛雞的皮膚健康狀況，及羽毛的光澤度，具有增強(qiáng)免疫功能、強(qiáng)化營養(yǎng)的作用。與益生元等協(xié)同作用，能夠促進(jìn)有益菌的增殖，改善雛雞小腸絨毛發(fā)育，降低腹瀉率，提高動(dòng)物免疫力；特別是添加高產(chǎn)谷胱苷肽的保藏菌種tlj2016，更能夠顯著提高谷胱苷肽含量，發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液中GSH的含量能夠達(dá)到3308mg/L，谷胱苷肽作為體內(nèi)重要的抗氧化劑和自由基清除劑，如與自由基、重金屬等結(jié)合，能夠把機(jī)體內(nèi)有害的毒物轉(zhuǎn)化為無害的物質(zhì)，排泄出體外，對(duì)改善育成蛋雞的身體機(jī)能，很有益處。具體實(shí)施方式下面通過具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對(duì)這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動(dòng)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述釀酒酵母菌株具體為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，該菌株已于2016年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101。所述釀酒酵母tlj2016的最適生長pH為6.0-6.5，最適生長溫度為28-35℃；所述釀酒酵母tlj2016是從一株寧夏果園中分離得到的釀酒酵母出發(fā)菌株經(jīng)以下步驟得到：原始出發(fā)菌種→試管活化→硫酸二乙酯(DES)誘變→高滲平板篩選→亞硝基胍(NTG)誘變篩選→高滲平板初篩→搖瓶篩選→發(fā)酵復(fù)篩(產(chǎn)谷胱苷肽GSH能力)→傳代穩(wěn)定性試驗(yàn)。經(jīng)過誘變后獲得的菌株tlj2016，其葡萄糖耐受能力以及L-半胱氨酸耐受能力均得到提高，一方面在高濃度葡萄糖培養(yǎng)下能夠提高細(xì)胞密度，另一方面L-半胱氨酸耐受能力的提高將有利于GSH在胞內(nèi)大量合成，從而提高菌株大規(guī)模生產(chǎn)GSH的能力。本發(fā)明所采用的釀酒酵母對(duì)葡萄糖的耐受能力達(dá)到300g/L，利于其在高濃度葡萄糖條件下生產(chǎn)GSH；在5L發(fā)酵罐中發(fā)酵生產(chǎn)GSH終濃度達(dá)到3308mg/L；耐受L-半胱氨酸的能力遠(yuǎn)高于出發(fā)菌株，在5mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能緩慢生長，在40mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能保持GSH大量合成；耐鹽能力達(dá)到18％，有利于擴(kuò)展其應(yīng)用領(lǐng)域。1.DES誘變選育1)在超凈臺(tái)上取試管斜面上的出發(fā)菌株1一環(huán)，接入裝有50mL麥芽汁培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，200rpm，30℃培養(yǎng)10h左右，使菌體處于對(duì)數(shù)生長前期。2)取5mL菌液，5000rpm離心10min收集菌體，用生理鹽水洗滌2次。3)用pH7.0磷酸緩沖液稀釋成107個(gè)/mL菌懸液。4)取32mLpH7.0的磷酸鉀緩沖液、8mL菌懸液、0.4mLDES在預(yù)先放入轉(zhuǎn)子的150mL三角瓶中充分混合，使DES最終濃度為1％(v/v)。5)在30℃搖床中150rpm反應(yīng)30min，取1mL混合液，加入0.5mL25％Na2S2O3溶液中止反應(yīng)。6)稀釋涂布于含150g/LKCl的麥芽汁培養(yǎng)基平皿中，在30℃培養(yǎng)2-3天后挑取菌落最大的菌株1。2.亞硝基胍誘變1)在超凈臺(tái)上取試管斜面上的釀酒酵母菌菌株1一環(huán)，接入裝有50mL麥芽汁培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，200rpm，30℃培養(yǎng)10h左右，使菌體處于對(duì)數(shù)生長前期。2)取5mL菌液5000rpm離心10min收集菌體，用生理鹽水洗滌2次。3)用pH6.0磷酸緩沖液稀釋成107個(gè)/mL菌懸液。4)取10mL菌懸液轉(zhuǎn)移至100mL三角瓶中，加入10mg的NTG，配制成終濃度為10mg/mL的NTG溶液，并加入4-5滴丙酮，以利于NTG溶解。5)在30℃下200rpm振蕩反應(yīng)30min，5000rpm離心10min收集菌體，用無菌生理鹽水洗滌數(shù)次，中止反應(yīng)。6)適當(dāng)稀釋涂布，取最后稀釋度的菌液0.2mL，涂布于含200g/LKCl的麥芽汁培養(yǎng)基平皿中。在30℃培養(yǎng)2-3天后挑取菌落20支。3.搖瓶初篩1)在超凈臺(tái)上分別取上述20支釀酒酵母菌各一環(huán)，分別接入裝有50mL麥芽汁培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，200rpm，30℃培養(yǎng)12h左右，使菌體處于對(duì)數(shù)生長中期。2)取5mL菌液，接入裝有50mL高滲麥芽汁培養(yǎng)基(葡萄糖濃度為300g/L)中的250mL三角瓶中，200rpm，30℃培養(yǎng)3-4天，每天檢測葡萄糖濃度和乙醇濃度變化。發(fā)酵結(jié)束后，比較20株菌種的葡萄糖和乙醇消耗速率、最終殘?zhí)菨舛群鸵掖紳舛?、葡萄糖?duì)乙醇的轉(zhuǎn)化率以及雜酸含量。3)選擇葡萄糖消耗速率快、最終殘?zhí)菨舛鹊秃鸵掖紳舛雀叩?株菌命名為Y-1，Y-2，Y-3，Y-4，Y-5。4.發(fā)酵復(fù)篩將步驟3中所得的5株菌Y-1，Y-2，Y-3，Y-4，Y-5以及出發(fā)菌株，分別按照10％接種量，在裝有30mL液體培養(yǎng)基的250mL搖瓶中150rpm,30℃培養(yǎng)30h，取發(fā)酵液測定GSH濃度；液體培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1；GSH測定方法：發(fā)酵液離心洗滌后得新鮮酵母，30℃下，40％乙醇處理3h，離心取上清液做GSH測定樣品；采用四氧嘧啶法進(jìn)行GSH測定：其原理為GSH上的-SH與四氧嘧啶反應(yīng)，生成的物質(zhì)在305nm處有吸收峰，且與谷胱甘肽濃度成線性關(guān)系，故可用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量測定GSH含量。表1：GSH檢測結(jié)果菌株出發(fā)菌株Y-1Y-2Y-3Y-4Y-5GSH濃度(mg/L)127.9195.7172.3263.2216.5185.2由表1結(jié)果可知，菌株Y-3具有最高的GSH發(fā)酵能力，因此確定Y-3為最終的生產(chǎn)菌株，并將其命名為tlj2016。5.遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)將tlj2016菌在斜面上連續(xù)十次傳代，并用搖瓶復(fù)篩的方法檢測每次傳代后的發(fā)酵情況。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在斜面上連續(xù)十次傳代，該菌種性狀沒有明顯變化，各項(xiàng)性能指標(biāo)都正常，說明該菌種的遺傳穩(wěn)定性較強(qiáng)。釀酒酵母tlj2016高糖條件下發(fā)酵產(chǎn)GSH能力實(shí)驗(yàn)(1)搖瓶培養(yǎng)取tlj2016斜面菌種一環(huán)，接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中150rpm,30℃培養(yǎng)30h得種子液；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L發(fā)酵罐培養(yǎng)將種子液按10％質(zhì)量百分比的接種量，接入裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30℃,通氣量6L/min,罐壓0.03MPa，500rpm,恒pH6.0條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵至30h時(shí)，一次性添加終濃度為25mmol/L的L-半胱氨酸，總發(fā)酵時(shí)間為50h；發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0；發(fā)酵結(jié)束后，測定發(fā)酵液中GSH的含量為3308mg/L。釀酒酵母tlj2016L-半胱氨酸耐受力實(shí)驗(yàn)將出發(fā)菌株以及tlj2016斜面菌種各一環(huán)，分別接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中150rpm,30℃培養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng)，在培養(yǎng)至12h時(shí)，向搖瓶中加入不同終濃度的L-半胱氨酸，再培養(yǎng)10h，測定細(xì)胞干重，結(jié)果表2、3；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖20、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；表2：出發(fā)菌株L-半胱氨酸耐受力L-半胱氨酸濃度mmol/L0510152040出發(fā)菌株干重g/L22.615.710.24.32.20.8GSH濃度(mg/L)35.646.743.240.737.925.3表3：tlj2016L-半胱氨酸耐受力L-半胱氨酸濃度mmol/L0510152040tlj2016干重g/L25.728.523.621.220.618.7GSH濃度(mg/L)73.298.3113.5121.7127.5135.8從表2的結(jié)果可以看出，對(duì)于出發(fā)菌株，培養(yǎng)基中添加L-半胱氨酸，細(xì)胞停止生長，并且開始自溶，導(dǎo)致GSH增長率隨著L-半胱氨酸濃度的升高而降低；從表3的結(jié)果可以看出，低濃度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能夠緩慢生長，隨著L-半胱氨酸濃度的提高，tlj2016菌株的細(xì)胞干重緩慢下降，而GSH濃度持續(xù)增長，這一結(jié)果將有利于GSH生產(chǎn)過程中通過添加前體氨基酸-L-半胱氨酸促進(jìn)GSH的生產(chǎn)。釀酒酵母tlj2016耐鹽能力實(shí)驗(yàn)取tlj2016菌液1mL接種菌種于含有不同NaCl濃度的(含量梯度為0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mLYPD液體培養(yǎng)基(pH＝6.5)，置于30℃下分別培養(yǎng)24h，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。各取1ml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋度溶液，取0.1ml稀釋液于YPD固體平板中涂布，于30℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)36小時(shí)(每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行)記錄計(jì)算平板上的菌數(shù)個(gè)數(shù)。結(jié)果見表4，可知該菌的耐鹽濃度為18％，說明tlj2016不僅可以在常規(guī)環(huán)境中生存，在高鹽條件下依然具有活力，可應(yīng)用于醬油、腌制品等高鹽食品加工過程中耗糖產(chǎn)谷胱甘肽。表4：耐鹽能力檢測(×107cfu/ml)實(shí)施例1一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉8份，花生粕19份，米糠6份，芝麻粕20份，膳食纖維20份，大豆油1.5份，0.5％復(fù)合預(yù)混料5份，石粉10份，磷酸氫鈣12份，食鹽3.5份，賴氨酸1.3份，蘇氨酸1份，蛋氨酸1.5份，優(yōu)可寶0.2份，酵母水解物1份，蛋氨酸鋅0.5份，復(fù)合酶制劑0.5份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份，酵母細(xì)胞壁粉1份，酵母硒0.3份，血紅素蛋白0.3份；所述膳食纖維由洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維混合，經(jīng)超聲提取、生物酶解后發(fā)酵得到；所述膳食纖維制備方法包括以下步驟：將洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維按質(zhì)量比1:3:8:3均勻混合，加入混合物質(zhì)量8倍的水，室溫300W、40KHz條件超聲提取20min，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2％的生物酶，于50℃酶解45min，滅酶；酶解液70℃，18-20MPa均質(zhì)，物料冷卻至28℃后，加入混合物質(zhì)量4％的葡萄糖，0.4％的混合菌種，28℃培養(yǎng)60小時(shí)，攪拌轉(zhuǎn)速為25r/min，培養(yǎng)到52小時(shí)添加混合物質(zhì)量0.05％的L-半胱氨酸和0.1％的甘草超微粉，發(fā)酵結(jié)束后減壓濃縮、冷凍干燥、低溫粉碎至粒徑為0.2mm即得膳食纖維；所述混合菌種含有如下有效活菌數(shù)：枯草芽孢桿菌≥100億/g、地衣芽孢桿菌≥1000億/g、酵母菌≥100億/g、乳酸菌≥50億/g；所述酵母菌為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789；所述生物酶為木聚糖酶、纖維素酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:9:2:4:1均勻混合；所述洋蔥粉制備方法包括如下步驟：新鮮洋蔥去外皮，清洗，加入洋蔥重量12倍的水打漿，之后加入洋蔥重量0.03％的混合酶制劑進(jìn)行酶解，調(diào)節(jié)pH值為4.5，溫度55℃，酶解3h，將酶解液在55℃、300W、80KHz條件下超聲提取20min，4-6℃放置12h，過濾后真空濃縮、冷凍干燥、粉碎即得洋蔥粉；所述混合酶制劑由如下重量份數(shù)的原料組成：纖維素酶2、蛋白酶1、α-淀粉酶2、木聚糖酶0.5；所述真空濃縮，具體為：一效75-85℃，真空度0.07MPa，二效65-75℃，真空度0.05MPa，三效45-55℃，真空度0.04MPa。所述酵母水解物的制備方法，包括以下步驟：(1)搖瓶培養(yǎng)取斜面酵母菌種一環(huán)，接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，150rpm,30℃培養(yǎng)30h得酵母種子液；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L發(fā)酵罐培養(yǎng)將酵母種子液按10％質(zhì)量百分比接種量，接入裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30℃,通氣量6L/min,罐壓0.03MPa，500rpm,恒pH6.0條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵至30h時(shí)，一次性添加終濃度為25mmol/L的L-半胱氨酸，總發(fā)酵時(shí)間為50h，得發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0。(3)制備酵母泥：將步驟(2)制得的發(fā)酵液通過離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集酵母泥；(4)酵母細(xì)胞破壁：將步驟(3)所得的酵母泥和水在自溶罐中按1∶1.5質(zhì)量比例調(diào)漿，調(diào)整pH值7，加溫到80℃，滅活40分鐘；降溫到45℃保溫自溶24h；加入混合酶制劑，用量為酵母泥質(zhì)量的1.2％；攪拌，酶法水解18h。所述混合酶制劑由蛋白酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、耐高溫淀粉酶等量混合而成；(5)噴霧干燥130℃噴霧干燥使水分含量小于10％，即得酵母水解物。所述酵母為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789。一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法，包括以下步驟：按照配方準(zhǔn)確稱取各組分原料，將復(fù)合酶制劑、酵母細(xì)胞壁粉、酵母水解物與0.5％復(fù)合預(yù)混料預(yù)先混合，然后按重量份數(shù)自大至小依次加入各種原料，混合均勻，加工制粒，即得無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混和飼料。所述無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的應(yīng)用方法為：按照以下配比，玉米62％，豆粕20％，石粉8％，本發(fā)明無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料10％；將玉米、豆粕、石粉分別粉碎后，與本發(fā)明復(fù)合預(yù)混合飼料混勻后使用。實(shí)施例2一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉10份，花生粕18份，米糠5份，膳食纖維28份，大豆油1.5份，0.5％復(fù)合預(yù)混料5份，石粉10份，磷酸氫鈣12份，食鹽3.5份，賴氨酸1.3份，蘇氨酸1份，蛋氨酸1.5份，血紅素蛋白0.2份，酵母硒0.3份，酵母細(xì)胞壁粉0.5份，復(fù)合酶制劑0.5份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份，芝麻粕15份，優(yōu)可寶0.5份，酵母水解物3份，蛋氨酸鋅0.1份；所述膳食纖維由洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維混合，經(jīng)超聲提取、生物酶解后發(fā)酵得到；所述膳食纖維制備方法包括以下步驟：將洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維按質(zhì)量比1:3:8:3均勻混合，加入混合物質(zhì)量8倍的水，室溫300W、40KHz條件超聲提取20min，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2％的生物酶，于50℃酶解45min，滅酶；酶解液70℃，18-20MPa均質(zhì)，物料冷卻至25℃后，加入混合物質(zhì)量5％的葡萄糖，0.5％的混合菌種，25℃培養(yǎng)72小時(shí)，攪拌轉(zhuǎn)速為30r/min，培養(yǎng)到50小時(shí)添加混合物質(zhì)量0.005％的L-半胱氨酸和0.1％的甘草超微粉，發(fā)酵結(jié)束后減壓濃縮、冷凍干燥、低溫粉碎至粒徑為0.1mm即得膳食纖維；所述混合菌種含有如下有效活菌數(shù)：枯草芽孢桿菌≥100億/g、地衣芽孢桿菌≥1000億/g、酵母菌≥100億/g、乳酸菌≥50億/g；所述酵母菌為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789；所述生物酶為木聚糖酶、纖維素酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:9:2:4:1均勻混合；所述洋蔥粉制備方法包括如下步驟：新鮮洋蔥去外皮，清洗，加入洋蔥重量12倍的水打漿，之后加入洋蔥重量0.03％的混合酶制劑進(jìn)行酶解，調(diào)節(jié)pH值為4.5，溫度55℃，酶解3h，將酶解液在55℃、300W、80KHz條件下超聲提取20min，4-6℃放置12h，過濾后真空濃縮、冷凍干燥、粉碎即得洋蔥粉；所述混合酶制劑由如下重量份數(shù)的原料組成：纖維素酶2、蛋白酶1、α-淀粉酶2、木聚糖酶0.5；所述真空濃縮，具體為：一效75-85℃，真空度0.07MPa，二效65-75℃，真空度0.05MPa，三效45-55℃，真空度0.04MPa。所述酵母水解物的制備方法，包括以下步驟：(1)搖瓶培養(yǎng)取斜面酵母菌種一環(huán)，接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，150rpm,30℃培養(yǎng)30h得酵母種子液；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L發(fā)酵罐培養(yǎng)將酵母種子液按10％質(zhì)量百分比接種量，接入裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30℃,通氣量6L/min,罐壓0.03MPa，500rpm,恒pH6.0條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵至30h時(shí)，一次性添加終濃度為25mmol/L的L-半胱氨酸，總發(fā)酵時(shí)間為50h，得發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0。(3)制備酵母泥：將步驟(2)制得的發(fā)酵液通過離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集酵母泥；(4)酵母細(xì)胞破壁：將步驟(3)所得的酵母泥和水在自溶罐中按1∶1.5質(zhì)量比例調(diào)漿，調(diào)整pH值6，加溫到80℃，滅活40分鐘；降溫到40℃保溫自溶24h；加入混合酶制劑，用量為酵母泥質(zhì)量的1.5％；攪拌，酶法水解10h。所述混合酶制劑由蛋白酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、耐高溫淀粉酶等量混合而成；(5)噴霧干燥120℃噴霧干燥使水分含量小于10％，即得酵母水解物。所述酵母為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789。一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法和應(yīng)用方法，同實(shí)施例1；實(shí)施例3一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉5份，花生粕8份，膳食纖維36份，大豆油1.5份，0.5％復(fù)合預(yù)混料5份，石粉10份，磷酸氫鈣12份，食鹽3.5份，賴氨酸1.5份，蘇氨酸1份，蛋氨酸1.5份，優(yōu)可寶0.2份，酵母硒0.3份，酵母細(xì)胞壁粉0.5份，復(fù)合酶制劑0.5份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份，米糠5份，芝麻粕25份，酵母水解物3份，蛋氨酸鋅0.5份，血紅素蛋白0.5份；所述膳食纖維由洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維混合，經(jīng)超聲提取、生物酶解后發(fā)酵得到；所述膳食纖維制備方法包括以下步驟：將洋蔥粉、大麥纖維、燕麥纖維、小麥胚芽纖維按質(zhì)量比1:3:8:3均勻混合，加入混合物質(zhì)量8倍的水，室溫300W、40KHz條件超聲提取20min，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2％的生物酶，于50℃酶解45min，滅酶；酶解液70℃，18-20MPa均質(zhì)，物料冷卻至30℃后，加入混合物質(zhì)量3％的葡萄糖，0.2％的混合菌種，30℃培養(yǎng)48小時(shí)，攪拌轉(zhuǎn)速為20r/min，培養(yǎng)到50小時(shí)添加混合物質(zhì)量0.1％的L-半胱氨酸和0.05％的甘草超微粉，發(fā)酵結(jié)束后減壓濃縮、冷凍干燥、低溫粉碎至粒徑為0.3mm即得膳食纖維；所述混合菌種含有如下有效活菌數(shù)：枯草芽孢桿菌≥100億/g、地衣芽孢桿菌≥1000億/g、酵母菌≥100億/g、乳酸菌≥50億/g；所述酵母菌為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789；所述生物酶為木聚糖酶、纖維素酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:9:2:4:1均勻混合；所述洋蔥粉制備方法包括如下步驟：新鮮洋蔥去外皮，清洗，加入洋蔥重量12倍的水打漿，之后加入洋蔥重量0.03％的混合酶制劑進(jìn)行酶解，調(diào)節(jié)pH值為4.5，溫度55℃，酶解3h，將酶解液在55℃、300W、80KHz條件下超聲提取20min，4-6℃放置12h，過濾后真空濃縮、冷凍干燥、粉碎即得洋蔥粉；所述混合酶制劑由如下重量份數(shù)的原料組成：纖維素酶2、蛋白酶1、α-淀粉酶2、木聚糖酶0.5；所述真空濃縮，具體為：一效75-85℃，真空度0.07MPa，二效65-75℃，真空度0.05MPa，三效45-55℃，真空度0.04MPa。所述酵母水解物的制備方法，包括以下步驟：(1)搖瓶培養(yǎng)取斜面酵母菌種一環(huán)，接入裝有30mL搖瓶培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，150rpm,30℃培養(yǎng)30h得酵母種子液；搖瓶培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO46、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O3、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1，pH6.0；(2)5L發(fā)酵罐培養(yǎng)將酵母種子液按10％質(zhì)量百分比接種量，接入裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30℃,通氣量6L/min,罐壓0.03MPa，500rpm,恒pH6.0條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵至30h時(shí)，一次性添加終濃度為25mmol/L的L-半胱氨酸，總發(fā)酵時(shí)間為50h，得發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：(NH4)2SO410、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O8、KH2PO40.5、酵母粉11、MnSO40.1、KCL0.1、FeSO40.1、MgSO4·7H2O0.1,pH6.0。(3)制備酵母泥：將步驟(2)制得的發(fā)酵液通過離心機(jī)進(jìn)行固液分離，收集酵母泥；(4)酵母細(xì)胞破壁：將步驟(3)所得的酵母泥和水在自溶罐中按1∶1.5質(zhì)量比例調(diào)漿，調(diào)整pH值8，加溫到80℃，滅活40分鐘；降溫到50℃保溫自溶24h；加入混合酶制劑，用量為酵母泥質(zhì)量的1％；攪拌，酶法水解24h。所述混合酶制劑由蛋白酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、耐高溫淀粉酶等量混合而成；(5)噴霧干燥140℃噴霧干燥使水分含量小于10％，即得酵母水解物。所述酵母為保藏菌種釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016，保藏編號(hào)為CGMCCNo.12789。一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法和應(yīng)用方法，同實(shí)施例1。實(shí)施例4一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉6份，花生粕25份，米糠10份，芝麻粕15份，膳食纖維50份，大豆油1份，復(fù)合預(yù)混料5份，石粉8份，磷酸氫鈣15份，食鹽2.5份，賴氨酸3份，蘇氨酸3份，蛋氨酸1份，優(yōu)可寶0.1份，酵母水解物1份，酵母細(xì)胞壁粉0.3份，酵母硒0.5份，蛋氨酸鋅0.1份，血紅素蛋白0.2份，復(fù)合酶制劑0.2份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份；所述膳食纖維制備方法同實(shí)施例1；所述洋蔥粉制備方法同實(shí)施例1；所述酵母水解物的制備方法同實(shí)施例1；一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法和應(yīng)用方法，同實(shí)施例1；實(shí)施例5一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料，由以下重量份數(shù)的原料制備：玉米蛋白粉8份，花生粕13份，米糠8份，芝麻粕20份，膳食纖維20份，大豆油10份，復(fù)合預(yù)混料5份，石粉15份，磷酸氫鈣8份，食鹽4.5份，賴氨酸1份，蘇氨酸1份，蛋氨酸3份，優(yōu)可寶0.5份，酵母水解物1份，酵母細(xì)胞壁粉2份，酵母硒0.1份，蛋氨酸鋅0.5份，血紅素蛋白0.4份，復(fù)合酶制劑0.4份，氯化膽堿0.8份，1萬單位植酸酶0.2份；所述膳食纖維制備方法同實(shí)施例2；所述酵母菌為本領(lǐng)域常規(guī)的釀酒酵母；所述洋蔥粉制備方法同實(shí)施例2；所述酵母水解物的制備方法同實(shí)施例2；所述酵母菌為本領(lǐng)域常規(guī)的釀酒酵母；一種無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料的制備方法和應(yīng)用方法，同實(shí)施例1；上述實(shí)施例1-5中0.5％復(fù)合預(yù)混料，遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，Q/HFJ02.03-2012，遼飼預(yù)字(2013)003024；1萬單位植酸酶：北京新大洋科技發(fā)展有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)為飼添(2012)0017，批準(zhǔn)文號(hào)：京飼(添)字(2012)403711；復(fù)合酶制劑：沈陽豐美生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)許可證號(hào)為飼添(2011)1986，批準(zhǔn)文號(hào)：遼飼(添)字(2011)040008；優(yōu)可寶：意大利施華公司，(2011)外飼準(zhǔn)字328號(hào)；產(chǎn)品有效成分：水解單寧酸75％；主要作用：收斂控制腹瀉，選擇性抑菌，抗病毒，天然抗氧化；提高蛋殼顏色、降低死亡率，改善雞舍空氣質(zhì)量。試驗(yàn)例：以下通過與本領(lǐng)域同類飼料的對(duì)比試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明無抗蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混合飼料對(duì)蛋雞免疫功能和產(chǎn)蛋性能的影響做進(jìn)一步說明1實(shí)驗(yàn)材料和方法1.1試驗(yàn)時(shí)間：試驗(yàn)于2015年8月20日——2015年12月20日，共計(jì)121天，其中預(yù)試期7天。1.2試驗(yàn)地點(diǎn)：試驗(yàn)在桓仁新華雞場實(shí)驗(yàn)場實(shí)施。1.3試驗(yàn)組設(shè)計(jì)：試驗(yàn)組分為對(duì)照組和本發(fā)明飼料組；按照以下配方：玉米62％，豆粕20％，石粉8％，復(fù)合預(yù)混合飼料10％，分別將玉米、豆粕、石粉粉碎后，與本發(fā)明各實(shí)施例制備的預(yù)混料、市場銷售較好的同類預(yù)混料混勻，試驗(yàn)組分別飼喂混有本發(fā)明實(shí)施例1-5預(yù)混料的的飼料，對(duì)照組飼喂混有市售同類預(yù)混料的飼料。試驗(yàn)采用單因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)選擇1152只海蘭褐220日齡蛋雞，分為6組，每組設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)32只雞。玉米容重要求710以上，豆粕粗蛋白44％以上，石粉粒度為4.0毫米以上達(dá)到65％。1.4喂料方法：手動(dòng)上料，每天3次，自由采食；自由飲水，自來水，水溫15-21℃。1.5雞舍溫度：采用縱向通風(fēng)，雞舍溫度控制在20-22℃。按照海蘭褐飼養(yǎng)管理嚴(yán)格控制。1.6試驗(yàn)檢測指標(biāo)：1)稱重：初始體重，結(jié)束體重。每個(gè)重復(fù)稱量1籠雞，逐只稱量。采食量：自由采食，按周清算耗料量；期間累計(jì)死亡雞只數(shù)。2)產(chǎn)蛋枚數(shù)、蛋重、破蛋和軟皮蛋；3)血液免疫指標(biāo)：IgA,IgG,IgM；抗氧化指標(biāo)：谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX、超氧化物岐化酶T-SOD、丙二醛MDA和總抗氧化能力T-AOC。采血方法采用心臟采血。1.7數(shù)據(jù)處理與分析所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用excel表格進(jìn)行整理，然后用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示。2試驗(yàn)結(jié)果將6棟雞舍6個(gè)批次試驗(yàn)指標(biāo)檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)，將本發(fā)明各組數(shù)據(jù)取平均值，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表5、表6和表7：表5：本發(fā)明對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響初始體重(千克)結(jié)束體重(千克)體增重(克)死亡率(％)本發(fā)明組1.851.961100.8對(duì)照組1.861.89303.9由表5可見，本發(fā)明組在220日齡到341日齡期間體增重達(dá)標(biāo)，蛋雞在此期間體重達(dá)標(biāo)說明產(chǎn)蛋持久性強(qiáng)，多產(chǎn)蛋；而對(duì)照組體重沒有達(dá)標(biāo)；體增重達(dá)標(biāo)，表明沒有動(dòng)用體儲(chǔ)備進(jìn)行產(chǎn)蛋，機(jī)體健康狀態(tài)會(huì)好，抗病力增強(qiáng)。體重不達(dá)標(biāo)，說明蛋雞為了產(chǎn)蛋動(dòng)用了體儲(chǔ)備，以健康為代價(jià)滿足最大產(chǎn)蛋需求，會(huì)降低抗病力。死亡率比對(duì)照組降低3.1％，1萬只雞少死亡310只雞，減少經(jīng)濟(jì)損失9300元以上。表6：本發(fā)明對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響本發(fā)明組對(duì)照組采食量(克)113.2±0.27117.3±0.34產(chǎn)蛋率(％)96.55±1.24a93.39±1.31b蛋重(克)63.68±0.45a61.15±0.83b料蛋比1.97±0.082.25±0.15產(chǎn)蛋量(克/只/日)61.48±1.08a57.11±1.84b只盈利(元/只)26.9521.56由表6可見，本發(fā)明與對(duì)照組相比，產(chǎn)蛋率提高3.37％，產(chǎn)蛋量提高7.65％，蛋重提高4.13％，每只雞多賺錢5.39元。表7：本發(fā)明對(duì)蛋雞免疫機(jī)能和抗氧化功能的影響由表7可見，本發(fā)明飼料組蛋雞免疫功能指標(biāo)IgA、IgG、IgM均比對(duì)照組大幅度提高，說明采用增強(qiáng)免疫功能蘇氨酸、蛋氨酸、維生素A、酵母細(xì)胞壁粉和酵母水解物、酵母硒等系列綜合措施的免疫營養(yǎng)管理，有效的增強(qiáng)了免疫細(xì)胞的免疫活性，有利于維持高水平的健康狀態(tài)，提高抗病力。本發(fā)明組谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX、超氧化物岐化酶T-SOD、丙二醛MDA和總抗氧化能力T-AOC等抗氧化指標(biāo)也明顯提高，說明飼料中的玉米蛋白粉中的天然葉黃素、水解單寧酸、蛋氨酸鋅等相關(guān)營養(yǎng)直接影響蛋雞血液的抗氧化指標(biāo)，蛋雞抗氧化能力增強(qiáng)，提高腸道健康狀態(tài)，從而提高蛋雞機(jī)體健康水平，增強(qiáng)抗病力，減少養(yǎng)殖用藥。以上實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明具有較好的腸道健康、產(chǎn)蛋性能、免疫功能強(qiáng)及抗病力強(qiáng)等效果，可以作為無抗日糧應(yīng)用和普及。當(dāng)前第1頁1 2 3