本發(fā)明涉及微生物添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種合生元組合物、合生元制劑、制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
合生元(synbiotics)又稱為合生素，是指益生菌和益生元的組合制劑，或再加入維生素、微量元素等。益生菌是通過攝取適當?shù)牧?、對食用者的身體健康能發(fā)揮有效作用的活菌；益生元是指可以選擇性刺激腸道中已定植的有益菌群的繁殖或活性的一種膳食補充劑，它既不能為畜禽自身吸收利用，又不能為腸道內(nèi)大部分有害菌利用，而只能為大部分益生菌利用，從而使有益菌增生。
合生元作為新一代微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，將益生菌和益生元聯(lián)合應(yīng)用，可同時發(fā)揮益生菌和益生元的生理功能，使益生菌和益生元協(xié)調(diào)作用，共同對抗疾病，維護機體的微生態(tài)平衡，既可發(fā)揮益生菌的生理性細菌活性，又可選擇性地快速增加益生菌數(shù)量，使益生菌作用更顯著持久。相比單純的益生菌或益生元而言，合生元具有更好的性價比，市場潛力更大。
目前合生元已經(jīng)應(yīng)用到飼料領(lǐng)域，由于目前動物飼料普遍采用蒸汽調(diào)質(zhì)制粒技術(shù)，該過程的高溫高濕條件可將大量不耐熱的微生物殺死，因此合生元作為飼料添加劑，其中的很多活菌不能耐受高溫而失活，使得益生菌的效果下降，不能發(fā)揮其作用。此外目前生產(chǎn)的飼用合生元還存在含菌量低，雜菌率高，品質(zhì)不穩(wěn)定、效果不佳等缺點，嚴重制約了我國飼用微生態(tài)制劑的發(fā)展和應(yīng)用。
有鑒于此，特提出本發(fā)明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的第一目的在于提供一種合生元組合物，該組合物以復(fù)合糖為益生元，增強益生元作用，通過與多種益生菌配合，益生元對益生菌的促進作用明顯，該合生元組合物效果好。
本發(fā)明的第二目的在于提供一種合生元制劑，該制劑包括所述的合生元組合物，以米糠作為制劑基質(zhì)，通過合理配比，維持機體腸道的微生態(tài)平衡。
本發(fā)明的第三個目的在于提供一種所述的合生元制劑的制備方法，該方法操作簡單，便于實施。
本發(fā)明的第四目的在于提供一種所述的合生元制劑在制備豬飼料或雞飼料中的應(yīng)用。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：
一種合生元組合物，所述合生元組合物包含：乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌、低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖；
乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌的總重量與低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的總重量之比為1:(0.7～1.2)。
一種按照上述的合生元組合物制成的合生元制劑，包含以重量份計的如下組分：米糠450～510份、乳酸菌2～8份、糞腸球菌1～5份、屎腸球菌1～5份、布拉迪酵母200～300份、枯草芽孢桿菌5～12份、低聚果糖30～70份、殼寡糖30～70份、異麥芽寡糖100～200份和防霉劑0～5份。
優(yōu)選地，在本發(fā)明提供的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠470～500份、乳酸菌3～7份、糞腸球菌2～4份、屎腸球菌2～4份、布拉迪酵母220～280份、枯草芽孢桿菌5～10份、低聚果糖40～60份、殼寡糖40～60份、異麥芽寡糖120～180份和防霉劑1～5份。
優(yōu)選地，在本發(fā)明提供的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠470～480份、乳酸菌4～6份、糞腸球菌2～4份、屎腸球菌2～4份、布拉迪酵母240～260份、枯草芽孢桿菌8～10份、低聚果糖40～60份、殼寡糖40～60份、異麥芽寡糖150～160份和防霉劑1～3份。
優(yōu)選地，在本發(fā)明提供的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，上述合生元制劑中低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的質(zhì)量比為1:1:3。
優(yōu)選地，在本發(fā)明提供的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠479份、乳酸菌5份、糞腸球菌3份、屎腸球菌3份、布拉迪酵母250份、枯草芽孢桿菌8份、低聚果糖50份、殼寡糖50份、異麥芽寡糖150份和防霉劑2份。
優(yōu)選地，在本發(fā)明提供的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，上述合生元制劑為粉劑、片劑、顆粒劑或膠囊劑。
一種上述任一項所述的合生元制劑的制備方法，該方法包括：將配方量的米糠、乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌、低聚果糖、殼寡糖、異麥芽寡糖和任選地防霉劑混合均勻，得到合生元制劑。
一種上述任一項所述的合生元制劑在制備豬飼料中的應(yīng)用。
一種上述任一項所述的合生元制劑在制備雞飼料中的應(yīng)用。
與已有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
(1)本發(fā)明提供的合生元組合物和合生元制劑以乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌為益生菌，以低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖復(fù)配作為益生元，復(fù)合糖增強益生元作用，能夠促進益生菌的增殖，抑制有害菌的生長，通過多種益生菌和復(fù)合糖的協(xié)同配合，建立和維持機體健康的消化道環(huán)境；各成份均不含有毒有害物質(zhì)，不會在機體內(nèi)產(chǎn)生殘留。
(2)上述合生元制劑的制備方法簡單易行，使用時將其混合于飼料中經(jīng)口進入機體中，有益菌能夠在腸道中定植。
(3)本發(fā)明提供的合生元以及由其制成的合生元制劑作為添加劑應(yīng)用于畜禽飼料中，為動物腸道建立了一個良好的微生態(tài)環(huán)境，提高畜禽的生長速度，增強機體免疫力，降低腹瀉率和發(fā)病率，改善畜禽生產(chǎn)性能，增強體質(zhì)。
具體實施方式
下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
根據(jù)本發(fā)明的第一個方面，提供了一種合生元組合物，一種合生元組合物，所述合生元組合物包含：乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌、低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖；乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌的總重量與低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的總重量之比為1:(0.7～1.2)。
乳酸菌是一類能利用可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的細菌的通稱，乳酸菌從來源上可分為動物源乳酸菌和植物源乳酸菌，植物性乳酸菌是從泡菜、腌菜、豆瓣醬等傳統(tǒng)的植物性發(fā)酵食品中分離篩選出來的一類乳酸菌，包括植物乳桿菌、干酪乳桿菌、短乳桿菌等。
優(yōu)選地，本發(fā)明的乳酸菌為植物乳酸菌。
糞腸球菌(Enterococcus faecalis)是革蘭氏陽性，過氧化氫陰性球菌，是人和動物腸道內(nèi)主要菌群之一，其能產(chǎn)生天然抗生素，有利于機體健康，同時還能產(chǎn)生細菌素等抑菌物質(zhì)，抑制大腸桿菌和沙門氏菌等病原菌的生長，改善腸道微環(huán)境，還能抑制腸道內(nèi)產(chǎn)尿素酶細菌和腐敗菌的繁殖，減少腸道尿素酶和內(nèi)毒素的含量，使血液中氨和內(nèi)毒素的含量下降。
屎腸球菌(Enterococcus faecium)屬腸球菌屬，存在于人和動物的腸道中，對腸系的有害菌具有抑制作用。
布拉迪酵母(Saccharomyces cerevisiae boulardii)是單細胞真菌，屬于酵母屬，釀酒酵母亞種的一個菌株，酵母菌屬于兼性厭氧菌，在有氧和無氧狀態(tài)下都能生存和繁衍，具有很強的產(chǎn)酶活性，而且還能產(chǎn)生豐富的B族維生素、谷胱甘肽、麥角固醇、氨基酸和未知生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)。布拉迪酵母菌不僅具有提供營養(yǎng)物質(zhì)，還能提高腸道有益微生物的活性、抑制病原菌生長和提高腸黏膜免疫功能等作用。
枯草芽孢桿菌是芽孢桿菌屬的一種，菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色，枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)對致病菌或內(nèi)源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用?？莶菅挎邨U菌來源于中國普通微生物菌種保藏管理中心，枯草芽孢桿菌枯草亞種(Bacillus subtilis subsp.subtilis)保藏編號：CGMCC 1.3358。
上述這些菌種均可以通過商業(yè)購買的方式或從國家保藏單位獲得。
低聚果糖又稱蔗果低聚糖，是由1～3個果糖基通過β(2—1)糖苷鍵與蔗糖中的果糖基結(jié)合生成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖等的混合物。低聚果糖是一種水溶性膳食纖維，長期服用可以降低血清膽固醇，改善脂質(zhì)代謝。
殼寡糖又叫殼聚寡糖、低聚殼聚糖，是將殼聚糖經(jīng)特殊的生物酶技術(shù)(化學(xué)降解、微波降解技術(shù))降解得到的一種聚合度在2～20之間寡糖產(chǎn)品，分子量≤3200Da，是水溶性較好、功能作用大、生物活性高的低分子量產(chǎn)品。它具有殼聚糖所沒有的較高溶解度，容易被生物體吸收利用等諸多獨特的功能，其作用為殼聚糖的14倍。
異麥芽寡糖(IMO)亦稱分枝低聚糖，是由葡萄糖以α(1→6)糖苷鍵結(jié)合而成的單糖數(shù)在2～5不等的低聚糖，由于分子構(gòu)象不同，所以區(qū)別于麥芽糖而稱為低聚異麥芽糖。
在本發(fā)明中，乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌的總重量與低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的總重量之比為1:(0.7～1.2)。
通過復(fù)合益生菌與復(fù)合益生元之間的合理配比，能夠很好地發(fā)揮合生元的作用。
本發(fā)明的合生元組合物中以乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌作為復(fù)合益生菌，以低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖復(fù)配作為益生元，復(fù)合糖益生元可以顯著地促進益生菌增殖和有效地抑制有害菌生長的作用，通過多種復(fù)合益生菌和復(fù)合糖益生元的協(xié)同配合，明顯改善機體腸道微生態(tài)系統(tǒng)，建立和維持機體健康的消化道環(huán)境，防止菌群失調(diào)而發(fā)生腸道感染；而且各成份均不含有毒有害物質(zhì)，不會在機體內(nèi)產(chǎn)生殘留。
根據(jù)本發(fā)明的第二個方面，提供了一種上述的合生元組合物制成的合生元制劑，包含以重量份計的如下組分：米糠450～510份、乳酸菌2～8份、糞腸球菌1～5份、屎腸球菌1～5份、布拉迪酵母200～300份、枯草芽孢桿菌5～12份、低聚果糖30～70份、殼寡糖30～70份、異麥芽寡糖100～200份和防霉劑0～5份。
合生元制劑以上述合生元組合物的各組分為主，加之米糠作為基質(zhì)，選擇地添加防霉劑等添加劑后得到合生元制劑。
米糠是稻米加工的副產(chǎn)品，具有營養(yǎng)物質(zhì)豐富、分布廣、價格低廉等優(yōu)點，本發(fā)明的合生元制劑以米糠作為基體物質(zhì)，在不影響益生菌和益生元發(fā)揮作用的情況下為機體補充營養(yǎng)物質(zhì)。
本發(fā)明中，米糠典型但非限制性的含量例如為450重量份、460重量份、470重量份、480重量份、490重量份、500重量份或510重量份。
優(yōu)選地，米糠為脫脂米糠。
脫脂米糠因油脂被脫除(含量<2％)，貯存期較長。
本發(fā)明合生元制劑中的乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌均采用菌粉。
乳酸菌采用植物乳酸菌菌粉，制備方法為將植物乳酸菌進行濃縮，獲得濃縮液，在真空低溫干燥的條件下對濃縮液進行干燥處理，得到植物乳酸菌菌粉，其中，植物乳酸菌菌粉中有效活菌數(shù)為1000億/克。
優(yōu)選地，對植物乳酸菌菌粉進行包被處理，即采用微膠囊化技術(shù)，獲得包被植物乳酸菌菌粉。
通過對菌粉進行包被處理，可解決菌粉在飼料配制中出現(xiàn)的問題，包括：高濕，制粒時的水汽會使干菌提前復(fù)活，而將其包被后膠囊層可阻擋水汽與活菌的接觸，從而使其免受水汽的破壞；高熱，微膠囊層使包被的干菌可以耐熱80～90℃的制粒高溫，在100℃的環(huán)境下也能存活數(shù)秒；擠壓，膠囊層可以防止干菌體在制粒時被破壞，維持其完整性。
本發(fā)明中，乳酸菌菌粉粉典型但非限制性的含量例如為2重量份、3重量份、4重量份、5重量份、6重量份、7重量份或8重量份。
糞腸球菌采用糞腸球菌菌粉，制備方法為將糞腸球菌發(fā)酵液進行濃縮，獲得濃縮液，在真空低溫干燥的條件下對濃縮液進行真空低溫干燥處理，得到糞腸球菌菌粉，其中，糞腸球菌菌粉中有效活菌數(shù)為1000億/克。
優(yōu)選地，對糞腸球菌菌粉進行包被處理，即微膠囊化，獲得包被糞腸球菌菌粉。
本發(fā)明中，糞腸球菌菌粉典型但非限制性的含量例如為1重量份、2重量份、3重量份、4重量份或5重量份。
屎腸球菌采用屎腸球菌菌粉，制備方法為將屎腸球菌發(fā)酵液進行濃縮，獲得濃縮液，在真空低溫干燥的條件下對濃縮液進行真空低溫干燥處理，得到屎腸球菌菌粉，其中，屎腸球菌菌粉中有效活菌數(shù)為1000億/克。
優(yōu)選地，對屎腸球菌菌粉進行包被處理，即微膠囊化，獲得包被屎腸球菌菌粉。
本發(fā)明中，屎腸球菌菌粉典型但非限制性的含量例如為1重量份、2重量份、3重量份、4重量份或5重量份。
布拉迪酵母采用布拉迪活性干酵母，即對布拉迪酵母進行干燥制?；蛭⒛z囊化，便于保存和使用。正常情況下，布拉迪酵母菌處于休眠狀態(tài)，但在胃腸道的適宜環(huán)境中，會迅速恢復(fù)活性。酵母菌不是腸道固有菌種，不能黏附在腸黏膜上，而是以活菌形式在腸道中發(fā)揮作用。其中，布拉迪酵母菌粉中活性干酵母數(shù)為200億/克。
本發(fā)明中，布拉迪酵母菌粉典型但非限制性的含量例如為200重量份、210重量份、220重量份、230重量份、240重量份、250重量份、260重量份、270重量份、280重量份、290重量份或300重量份。
枯草芽孢桿菌采用枯草芽孢桿菌菌粉，制備方法為將活化的菌種接種發(fā)酵、干燥、粉碎制成菌粉，其中，枯草芽孢桿菌菌粉中有效活菌數(shù)為1000億/克。
本發(fā)明中，枯草芽孢桿菌菌粉典型但非限制性的含量例如為5重量份、6重量份、7重量份、8重量份、9重量份、10重量份、11重量份或12重量份。
本發(fā)明中，低聚果糖的純度為90％；殼寡糖的純度為80％；異麥芽寡糖的純度為90％。采用上述三種糖復(fù)配作為益生元，可以增強益生元的效果，對復(fù)合益生菌的生長的促進效果顯著，并抑制有害菌的生長，通過復(fù)合益生菌與復(fù)合益生元的協(xié)同配合，改善和維持機體腸道微生態(tài)平衡。
低聚果糖典型但非限制性的含量例如為30重量份、32重量份、34重量份、36重量份、38重量份、40重量份、42重量份、44重量份、46重量份、48重量份、50重量份、52重量份、54重量份、56重量份、58重量份、60重量份、62重量份、64重量份、66重量份、68重量份或70重量份。
殼寡糖典型但非限制性的含量例如為30重量份、32重量份、34重量份、36重量份、38重量份、40重量份、42重量份、44重量份、46重量份、48重量份、50重量份、52重量份、54重量份、56重量份、58重量份、60重量份、62重量份、64重量份、66重量份、68重量份或70重量份。
異麥芽寡糖典型但非限制性的含量例如為100重量份、120重量份、140重量份、160重量份、180重量份或200重量份。
飼料防霉劑是抑制霉菌毒素的產(chǎn)生，防止飼料發(fā)霉變質(zhì)并延長貯存時間的飼料添加劑。防霉劑包括單方防霉劑和復(fù)方防霉劑，單方防霉劑包括丙酸鹽類、甲酸及甲酸鈣、山梨酸、檸檬酸、馬酸二甲酯以及大蒜素等。將兩種或兩種以上不同的防霉劑配伍組合而成的為復(fù)方防霉劑，例如美國產(chǎn)的克霉霸。
防霉劑典型但非限制性的含量例如為0重量份、1重量份、2重量份、3重量份、4重量份或5重量份。
本發(fā)明提供的由上述合生元組合物制成的合生元制劑以米糠為制劑基質(zhì)，經(jīng)過組分之間的合理配比，能夠充分發(fā)揮合生元的作用，作成制劑后貯存時間長、方便使用，達到維持動物腸道良好的微生態(tài)環(huán)境的目的。
本發(fā)明所述的“主要由”，意指其除所述組份外，還可以包括其他組份，這些其他組份賦予所述合生元制劑不同的特性。除此之外，本發(fā)明所述的“主要由”，還可以替換為封閉式的“為”或“由……組成”。
在一種優(yōu)選的實施方式中，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠470～500份、乳酸菌3～7份、糞腸球菌2～4份、屎腸球菌2～4份、布拉迪酵母220～280份、枯草芽孢桿菌5～10份、低聚果糖40～60份、殼寡糖40～60份、異麥芽寡糖120～180份和防霉劑1～5份。
在一種優(yōu)選的實施方式中，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠470～480份、乳酸菌4～6份、糞腸球菌2～4份、屎腸球菌2～4份、布拉迪酵母240～260份、枯草芽孢桿菌8～10份、低聚果糖40～60份、殼寡糖40～60份、異麥芽寡糖150～160份和防霉劑1～3份。
在一種優(yōu)選的實施方式中，上述合生元制劑中低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的質(zhì)量比為1:1:3。
通過低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖以特定配比進行復(fù)配，可以增強益生元的效果。
在一種優(yōu)選的實施方式中，上述合生元制劑包含以重量份計的如下組分：米糠479份、乳酸菌5份、糞腸球菌3份、屎腸球菌3份、布拉迪酵母250份、枯草芽孢桿菌8份、低聚果糖50份、殼寡糖50份、異麥芽寡糖150份和防霉劑2份。
通過更進一步地優(yōu)化各組分的配比關(guān)系，可以進一步地提高合生元制劑的效果。
在一種優(yōu)選的實施方式中，上述合生元制劑為粉劑、片劑、顆粒劑或膠囊劑。
將合生元制劑制成粉劑、片劑、顆粒劑或膠囊劑，使用方便，利于機體吸收利用。
根據(jù)本發(fā)明的第三個方面，提供了一種所述的合生元制劑的制備方法，該方法包括：將配方量的米糠、乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌、低聚果糖、殼寡糖、異麥芽寡糖和任選地防霉劑混合均勻，得到合生元制劑。
該方法將乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母、枯草芽孢桿菌的菌粉和低聚果糖、殼寡糖、異麥芽寡糖混合后混入米糠中，任選地加入防霉劑，制成粉末、片狀、顆粒態(tài)或膠囊態(tài)的制劑，操作簡單，材料容易獲得。
根據(jù)本發(fā)明的第四個方面，提供一種所述的合生元制劑在制備豬飼料或雞飼料中的應(yīng)用。
合生元制劑作為飼料添加劑應(yīng)用在豬飼料和雞飼料中，具有改善畜禽腸道的微生態(tài)環(huán)境，降低腹瀉等腸道疾病的發(fā)病率，提高畜禽免疫力，促進畜禽生長的作用。
體內(nèi)試驗表明，合生元作為飼料添加劑能夠明顯促進仔豬和仔雞的生長，提高其免疫力，降低其死亡率和發(fā)病率。添加到仔豬飼料中，仔豬存活率為100％，仔豬發(fā)病率低于5％；添加到雞飼料中，肉仔雞的存活率大于95％，肉仔雞的發(fā)病率小于5％。
為了進一步了解本發(fā)明及其效果，下面結(jié)合具體效果例、實施例及對比例對本發(fā)明做進一步詳細的說明。
效果例1低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖三者復(fù)配的復(fù)合糖對乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌生長的影響試驗
培養(yǎng)基：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母提取物5g、K2HPO4 2g、乙酸鈉5g、檸檬酸二銨2g、葡萄糖20g、MgSO4·7H2O 0.58g、MnSO4·4H2O 0.25g、水1000mL，調(diào)pH值至7.3；
將活化的乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌或干活菌粉分別接種或放入到含有重量百分比為0.1％、0.2％、0.3％、0.4％的復(fù)合糖的培養(yǎng)基中，以不含復(fù)合糖的培養(yǎng)基以及含有重量百分比為0.2％的單一糖或兩種糖復(fù)配的培養(yǎng)基為對照，置37℃恒溫厭氧振蕩培養(yǎng)24h，然后以10倍稀釋平板滴種法測定菌液的濃度，測定結(jié)果見表1所示。
表1異麥芽寡糖對各益生菌生長影響試驗結(jié)果
其中：A代表低聚果糖；B代表殼寡糖；C代表異麥芽寡糖
由表1可以看出，不同濃度的復(fù)合糖(A+B+C)對乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌均有顯著的促生長的作用，但是濃度在0.2％左右時的促生長效果最佳。如果濃度繼續(xù)增高，會抑制生長。經(jīng)計算得出，當乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌的總重量和低聚果糖、殼寡糖、異麥芽寡糖的重量之比為1:0.9時，復(fù)合糖對益生菌的促生長效果最佳。
進一步發(fā)現(xiàn)，采用濃度為0.2％的單一糖及二種糖復(fù)配的培養(yǎng)基對乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌的生長也有一定的促進作用，但促進作用明顯小于三種糖復(fù)配時的促進效果。
效果例2復(fù)合糖對大腸桿菌和沙門氏菌生長的影響試驗
以與效果例1同樣的方法測定含復(fù)合糖的普通肉湯培養(yǎng)基對大腸桿菌和沙門氏菌的生長影響，結(jié)果見表2所示。
表2復(fù)合糖對大腸桿菌和沙門氏菌生長影響試驗結(jié)果
從表2可以看出，不同濃度的復(fù)合糖對大腸桿菌和沙門氏菌都有不同程度的抑制生長的作用，且抑制程度與復(fù)合糖的添加量有關(guān)，濃度越高，抑制作用越強。
由此可見，本發(fā)明的合生元組合物中以低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖三種糖復(fù)配組成的復(fù)合糖作為益生元，對乳酸菌、糞腸球菌、屎腸球菌、布拉迪酵母和枯草芽孢桿菌復(fù)合益生菌生長具有明顯的促進作用，對有害菌生長有明顯的抑制作用，同時，通過它們之間的合理配比，可以進一步提高益生菌的增殖率。
實施例1
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將2重量份的包被植物乳酸菌菌粉、5重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、300重量份的布拉迪干酵母、5重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、70重量份的低聚果糖、30重量份的殼寡糖及200重量份的異麥芽寡糖加入到510重量份的脫脂米糠中，再加入5重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
實施例2
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將8重量份的包被植物乳酸菌菌粉、1重量份的包被糞腸球菌菌粉、5重量份的包被屎腸球菌菌粉、200重量份的布拉迪干酵母、12重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、30重量份的低聚果糖、70重量份的殼寡糖及100重量份的異麥芽寡糖加入到510重量份的脫脂米糠中，混合均勻，得到合生元制劑。
實施例3
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將4重量份的包被植物乳酸菌菌粉、4重量份的包被糞腸球菌菌粉、2重量份的包被屎腸球菌菌粉、240重量份的布拉迪干酵母、6重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、40重量份的低聚果糖、60重量份的殼寡糖及130重量份的異麥芽寡糖加入到470重量份的脫脂米糠中，再加入1重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
實施例4
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將6重量份的包被植物乳酸菌菌粉、2重量份的包被糞腸球菌菌粉、4重量份的包被屎腸球菌菌粉、260重量份的布拉迪干酵母、10重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、60重量份的低聚果糖、40重量份的殼寡糖及180重量份的異麥芽寡糖加入到480重量份的脫脂米糠中，再加入3重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
實施例5
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將5重量份的包被植物乳酸菌菌粉、3重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、250重量份的布拉迪干酵母、8重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、40重量份的低聚果糖、80重量份的殼寡糖及130重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
實施例6
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將5重量份的包被植物乳酸菌菌粉、3重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、250重量份的布拉迪干酵母、8重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、50重量份的低聚果糖、50重量份的殼寡糖及150重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例1
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將2重量份的包被植物乳酸菌菌粉、5重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、300重量份的布拉迪干酵母、5重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、70重量份的低聚果糖加入到510重量份的脫脂米糠中，再加入5重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例2
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將8重量份的包被植物乳酸菌菌粉、1重量份的包被糞腸球菌菌粉、5重量份的包被屎腸球菌菌粉、200重量份的布拉迪干酵母、12重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、70重量份的殼寡糖加入到510重量份的脫脂米糠中，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例3
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將4重量份的包被植物乳酸菌菌粉、4重量份的包被糞腸球菌菌粉、2重量份的包被屎腸球菌菌粉、240重量份的布拉迪干酵母、6重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、130重量份的異麥芽寡糖加入到470重量份的脫脂米糠中，再加入1重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例4
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將6重量份的包被植物乳酸菌菌粉、2重量份的包被糞腸球菌菌粉、4重量份的包被屎腸球菌菌粉、260重量份的布拉迪干酵母、10重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、60重量份的低聚果糖、40重量份的殼寡糖加入到480重量份的脫脂米糠中，再加入3重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例5
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將5重量份的包被植物乳酸菌菌粉、3重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、250重量份的布拉迪干酵母、8重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、80重量份的殼寡糖及130重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例6
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將5重量份的包被植物乳酸菌菌粉、3重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、250重量份的布拉迪干酵母、8重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、50重量份的低聚果糖及150重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例7
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將5重量份的包被植物乳酸菌菌粉、3重量份的包被糞腸球菌菌粉、1重量份的包被屎腸球菌菌粉、250重量份的布拉迪干酵母、8重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、150重量份的低聚果糖、50重量份的殼寡糖及150重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
對比例8
一種合生元制劑，包括以下步驟：
將1重量份的包被植物乳酸菌菌粉、6重量份的包被糞腸球菌菌粉、6重量份的包被屎腸球菌菌粉、150重量份的布拉迪干酵母、3重量份的枯草芽孢桿菌菌粉、50重量份的低聚果糖、50重量份的殼寡糖及150重量份的異麥芽寡糖加入到479重量份的脫脂米糠中，再加入2重量份防霉劑，混合均勻，得到合生元制劑。
用上述實施例1-6和對比例1-8制備的合生元制劑對豬和雞進行體內(nèi)試驗。
效果例3合生元制劑對仔豬生長性能的影響
1、試驗動物
本試驗選用豬場飼喂的斷奶仔豬300只，公母各半，隨機分為15組，每組20只，各組的體重差異不顯著(P>0.05)，具有可比性。
2、試驗方法
第一組采用實施例1制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第二組采用實施例2制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第三組采用實施例3制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第四組采用實施例4制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第五組采用實施例5制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第六組采用實施例6制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第七組采用對比例1制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第八組采用對比例2制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第九組采用對比例3制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十組采用對比例4制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十一組采用對比例5制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十二組采用對比例6制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十三組采用對比例7制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十四組采用對比例8制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到仔豬飼料中對仔豬進行飼養(yǎng)，第十五組采用未添加本發(fā)明合生元制劑的仔豬飼料對仔豬進行飼養(yǎng)。其中，各組采用的仔豬飼料相同。第一組到第十四組中合生元制劑以占仔豬飼料重量的0.5％的量進行添加。
試驗中的飼養(yǎng)方法和飼養(yǎng)條件按常規(guī)方式進行，飼養(yǎng)仔豬至60日齡，在飼養(yǎng)過程中，每天觀察仔豬健康情況，記錄發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)。試驗前每組稱重，于60日齡稱重(稱重前空腹4h)，得到每組仔豬的平均體重。
計算方法如下：成活率＝(20-飼養(yǎng)期間的死亡數(shù))/20ⅹ100％；
發(fā)病率＝飼養(yǎng)期間的腸道發(fā)病數(shù)/20ⅹ100％；
60日齡平均體重＝60日齡仔豬總體重/20
3、試驗結(jié)果
合生元制劑對仔豬生長性能的影響結(jié)果如下表3所示。
表3合生元制劑對仔豬生長性能的影響結(jié)果
從表3可以看出，經(jīng)過二個月左右的飼養(yǎng)，添加了本發(fā)明合生元制劑的飼料飼養(yǎng)的第一組到第六組的仔豬死亡率和發(fā)病率明顯低于第十五組未添加本發(fā)明合生元制劑的飼料飼養(yǎng)的仔豬的死亡率和發(fā)病率，仔豬存活率為100％，仔豬發(fā)病率低于5％。正常情況下，60日齡仔豬的平均體重在20kg左右，第一組到第六組的仔豬平均體重有不同程度的增加，增加范圍在2.9～4.7kg?？梢姡景l(fā)明合生元作為飼料添加劑添加到仔豬飼料中使用，可以降低仔豬的發(fā)病率和死亡率，增強免疫力，提高仔豬的生長速度和品質(zhì)。
第六組與第五組相比，第六組中低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的質(zhì)量比為1:1:3，通過采用特定配比的三種糖進行復(fù)配，仔豬的生長狀態(tài)良好，發(fā)病率為0，且60日后的平均體重最重。
第七組到第十二組分別與第一組到第六組相比，益生元采用其中一種糖或兩種糖復(fù)配，仔豬的腹瀉率、發(fā)病率和死亡率有所上升，對仔豬的促生長作用也有所下降，沒有獲得第一組到第六組的效果。
第十三組與第一組相比，復(fù)合糖與復(fù)合益生菌的重量配比有所區(qū)別，第十四組與第一組相比，復(fù)合益生菌中各個菌的重量范圍配比有所區(qū)別，都不能很好地發(fā)揮合生元防病、促生長的效果。
效果例4合生元制劑對肉仔雞生長性能的影響
1、試驗動物
本試驗選用雞場剛出殼的肉仔雞600只，公母各半，隨機分為15組，每組40只，各組的體重差異不顯著(P>0.05)，具有可比性。
2、試驗方法
第一組采用實施例1制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第二組采用實施例2制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第三組采用實施例3制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第四組采用實施例4制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第五組采用實施例5制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第六組采用實施例6制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第七組采用對比例1制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第八組采用對比例2制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第九組采用對比例3制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十組采用對比例4制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十一組采用對比例5制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十二組采用對比例6制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十三組采用對比例7制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十四組采用對比例8制備的合生元制劑作為飼料添加劑加入到肉仔雞飼料中對肉仔雞進行飼養(yǎng)，第十五組采用未添加本發(fā)明合生元制劑的肉仔雞飼料對肉仔雞進行飼養(yǎng)。其中，各組采用的肉仔雞飼料相同。第一組到第十四組中合生元制劑以占肉仔雞飼料重量的0.3％的量進行添加。
試驗中的飼養(yǎng)方法和飼養(yǎng)條件按常規(guī)方式進行，前7天24h光照，以后23h光照，1h黑暗，相對濕度55～70％，飼養(yǎng)初期保持室溫33℃左右，以后逐漸降低，最低室溫保持在23℃左右。每周用0.1％的新潔爾滅帶雞噴霧消毒一次，免疫程序按常規(guī)進行。地面平養(yǎng)，采用傳統(tǒng)的飲水器自由飲水和采食。飼養(yǎng)肉仔雞至28日齡，在飼養(yǎng)過程中，每天觀察肉仔雞健康情況，記錄發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)。試驗前每組稱重，于28日齡稱重(稱重前空腹4h)，得到每組肉仔雞的平均體重。
計算方法如下：成活率＝(20-飼養(yǎng)期間的死亡數(shù))/20ⅹ100％；
發(fā)病率＝飼養(yǎng)期間的腸道發(fā)病數(shù)/20ⅹ100％；
28日齡平均體重＝60日齡肉仔雞總體重/20
3、試驗結(jié)果
合生元制劑對肉仔雞生長性能的影響結(jié)果如下表4所示。
表4合生元制劑對肉仔雞生長性能的影響結(jié)果
從表4可以看出，經(jīng)過二十八天的飼養(yǎng)，添加了本發(fā)明合生元制劑的飼料飼養(yǎng)的第一組到第六組的肉仔雞死亡率和發(fā)病率明顯低于第十五組未添加本發(fā)明合生元制劑的飼料飼養(yǎng)的肉仔雞的死亡率和發(fā)病率，肉仔雞的存活率大于95％，肉仔雞的發(fā)病率小于5％。正常情況下，28日齡肉仔雞的平均體重在1300kg左右，第一組到第六組的肉仔雞平均體重有不同程度的增加，增加范圍在115～227g?？梢?，本發(fā)明合生元作為飼料添加劑添加到肉仔雞飼料中使用，可以降低肉仔雞的發(fā)病率和死亡率，增強免疫力，提高肉仔雞的生長速度和品質(zhì)。
第六組與第五組相比，第六組中低聚果糖、殼寡糖和異麥芽寡糖的質(zhì)量比為1:1:3，通過采用特定配比的三種糖進行復(fù)配，肉仔雞的生長狀態(tài)良好，存活率為100％，且28日后的平均體重最重。
第七組到第十二組分別與第一組到第六組相比，益生元采用其中一種糖或兩種糖復(fù)配，肉仔雞的腹瀉率、發(fā)病率和死亡率有所上升，對肉仔雞的促生長作用也有所下降，沒有第一組到第六組的效果好。
第十三組與第一組相比，復(fù)合糖與復(fù)合益生菌的重量配比有所區(qū)別，第十四組與第一組相比，復(fù)合益生菌中各個菌的重量范圍配比有所區(qū)別，都不能很好地發(fā)揮合生元防病、促生長的效果。
綜上所述，本發(fā)明的合生元作為飼料添加劑使用，通過多種益生菌和復(fù)合糖益生元的協(xié)同配合，明顯改善機體腸道微生態(tài)系統(tǒng)，通過低聚果糖、殼寡糖與異麥芽寡糖復(fù)配作為益生元，可以增強益生元的效果，明顯促進益生菌的生長，防止菌群失調(diào)而發(fā)生腸道感染，降低發(fā)病率和死亡率，同時，使用合生元制劑后能夠促進畜禽的生長。
盡管已用具體實施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。