本發(fā)明涉及水產(chǎn)品加工領(lǐng)域，尤其是一種海產(chǎn)品的酶解凍干粉的制備方法。

背景技術(shù)：

現(xiàn)有海產(chǎn)品精深加工中，產(chǎn)品酶解后形成含有多肽、多糖等復(fù)合產(chǎn)物，這些產(chǎn)物廣泛應(yīng)用于藥品、食品原料等。但現(xiàn)有技術(shù)中尚存在諸多有待改進(jìn)的地方：比如酶解工序所用酶的蛋白質(zhì)水解度低，蛋白質(zhì)水解度直接局限了小分子多肽的含量；同時生物酶解后的滅酶和干燥過程中，高溫對生物活性物質(zhì)大量破壞；另外海產(chǎn)品固有的腥臭味在終產(chǎn)品中無法根本去除，影響食品的口感；而且小分子多肽及活性物質(zhì)在經(jīng)過消化道時被大量破環(huán)，人體吸收率很低。上述這些問題的改進(jìn)和克服對水產(chǎn)品的深度加工和利用有極其重要的意義，提高了水產(chǎn)品利用率和附加值。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供了一種酶解凍干粉的制備方法，該方法能有效解決現(xiàn)有問題的各方面不足，獲得綜合效果優(yōu)異的凍干粉產(chǎn)品。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是酶解凍干粉的制備方法，包括如下步驟：

清洗：將海產(chǎn)品清洗干凈；

勻漿：將清洗后的海產(chǎn)品絞碎勻漿；

粉碎：用純化水稀釋，然后超聲粉碎，得到粉碎漿；

酶解：先將中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.5-1.8:1的比例加入到粉碎漿中，酶解1-2h，離心，得上清液A和濾渣A；再在濾渣A中加入純化水再次酶解，離心，得上清液B和濾渣B；

滅酶：將所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，對所述混合上清液進(jìn)行超高壓滅菌；

脫臭：將滅菌后的混合上清液用層析柱層析，收集洗脫液；

包裹木糖醇：在所述洗脫液中加入木糖醇，攪拌均勻后加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)得到包裹液；

滅菌：將包裹液進(jìn)行超高壓滅菌；

凍干：將滅菌后的包裹液進(jìn)行冷凍干燥。

于本發(fā)明一實施例中，粉碎步驟中純化水的用量為海產(chǎn)品質(zhì)量的3-6倍，粉碎時間為30-40min。

于本發(fā)明一實施例中，離心采用的是冷凍離心機(jī)，速度為3800-4800r/min，離心時間為10-15min。

于本發(fā)明一實施例中，酶解步驟中再次加入純化水的量為濾渣A質(zhì)量的2-5倍，再次酶解時間為1.5-2h。

于本發(fā)明一實施例中，滅酶時的壓力為800-1000MPa，時間為20-40min，溫度為15-20℃。

于本發(fā)明一實施例中，將滅菌后的混合上清液與層析柱按體積比為2.8-3.5:1的比例進(jìn)行層析。

于本發(fā)明一實施例中，將滅菌后的混合上清液與層析柱按3:1的體積比、用恒流泵以2ml/min的流速泵入裝有樹脂D280的層析柱。

于本發(fā)明一實施例中，所述木糖醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的10％，在生物反應(yīng)器中的反應(yīng)壓力為500-800MPa，溫度為25℃，反應(yīng)時間90min。

于本發(fā)明一實施例中，包裹液的滅菌參數(shù)為壓力800-1000MPa，溫度15-20℃，時間20-40min。

于本發(fā)明一實施例中，所述冷凍干燥的溫度為-30～-25℃。

本發(fā)明具有以下有益效果：

通過設(shè)置相應(yīng)的處理步驟及特定的工藝條件，采用清洗-勻漿-粉碎-酶解-滅酶-脫臭-包裹木糖醇-滅菌-凍干的制備方法，使得加工過程中生物活性物質(zhì)最大程度的保留不被破壞，同時徹底除去海產(chǎn)品的異味，不影響產(chǎn)品口感，另外通過包裹糖衣處理使得在被食用階段活性物質(zhì)能最大程度地被消化道吸收，提高了凍干粉的利用率和有效性。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。

實施例1

海參的酶解凍干粉的制備方法，包括以下步驟：

1、清洗：將海參去除內(nèi)臟，清洗干凈；

2、勻漿：將清洗后的海參絞碎成海參漿；

3、粉碎：用海參漿質(zhì)量3倍的純化水或去離子水將海參漿稀釋，然后用超聲波粉碎機(jī)將海參漿在60w功率下粉碎30min。

4、酶解：先將中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.5:1的比例加入到粉碎后的海參漿中，加酶量8％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶總的加入量為海參漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)的8％，酶解1h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4000-4200r/min，離心10min，得到上清液A和濾渣A。再在濾渣A中加入濾渣A質(zhì)量的2倍的純化水再次酶解，再次酶解時間為1.5-2h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速3800-4000r/min，離心15min，得上清液B和濾渣B。

5、滅酶：將所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，對所述混合上清液進(jìn)行超高壓滅菌，滅酶時的壓力為1000MPa，時間為20min，溫度為20℃。

6、脫臭：將滅菌后的混合上清液按3:1的比例、用恒流泵以2ml/min的流速泵入裝有樹脂D280層析柱，收集洗脫液。

7、包裹木糖醇：在所述洗脫液中加入木糖醇，木糖醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的10％，攪拌均勻后加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)得到包裹液；所述反應(yīng)壓力為500-800MPa，溫度為25℃，反應(yīng)時間90min。

8、滅菌：將包裹液進(jìn)行超高壓滅菌；滅菌參數(shù)為壓力800MPa，溫度15℃，時間40min。

9、凍干：將滅菌后的包裹液進(jìn)行冷凍干燥，溫度為-30～-25℃。

實施例2

海參的酶解凍干粉的制備方法，包括以下步驟：

1、清洗：將海參去除內(nèi)臟，清洗干凈；

2、勻漿：將清洗后的海參絞碎成海參漿；

3、粉碎：用海參漿質(zhì)量6倍的純化水或去離子水將海參漿稀釋，然后用超聲波粉碎機(jī)將海參漿在60w功率下粉碎40min。

4、酶解：先將中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.6:1的比例加入到粉碎后的海參漿中，加酶量9％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶總的加入量為海參漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)的9％，酶解1h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4000-4200r/min，離心10min，得到上清液A和濾渣A。再在濾渣A中加入濾渣A質(zhì)量的3倍的純化水再次酶解，再次酶解時間為1.5-2h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4000-4200r/min，離心10min，得上清液B和濾渣B。

5、滅酶：將所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，對所述混合上清液進(jìn)行超高壓滅菌，滅酶時的壓力為1000MPa，時間為20min，溫度為20℃。

6、脫臭：將滅菌后的混合上清液按2.8:1的比例、用恒流泵以2ml/min的流速泵入裝有樹脂D280層析柱，收集洗脫液。

7、包裹木糖醇：在所述洗脫液中加入木糖醇，木糖醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的10％，攪拌均勻后加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)得到包裹液；所述反應(yīng)壓力為500-800MPa，溫度為25℃，反應(yīng)時間90min。

8、滅菌：將包裹液進(jìn)行超高壓滅菌；滅菌參數(shù)為壓力800MPa，溫度15℃，時間40min。

9、凍干：將滅菌后的包裹液進(jìn)行冷凍干燥，溫度為-30～-25℃。

實施例3

酶解凍干粉的制備方法，包括以下步驟：

1、清洗：將牡蠣肉去除外殼，清洗干凈；

2、勻漿：將清洗后的牡蠣肉絞碎成牡蠣肉漿；

3、粉碎：用牡蠣肉漿質(zhì)量4倍的純化水或去離子水將牡蠣肉漿稀釋，然后用超聲波粉碎機(jī)將牡蠣肉漿在60w功率下粉碎35min。

4、酶解：先將中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.6:1的比例加入到粉碎后的海參漿中，加酶量8％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶總的加入量為牡蠣肉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)的8％，酶解1h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4000-4200r/min，離心10min，得到上清液A和濾渣A。再在濾渣A中加入濾渣A質(zhì)量的4倍的純化水再次酶解，再次酶解時間為1.5-2h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4600-4800r/min，離心15min，得上清液B和濾渣B。

5、滅酶：將所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，對所述混合上清液進(jìn)行超高壓滅菌，滅酶時的壓力為1000MPa，時間為30min，溫度為20℃。

6、脫臭：將滅菌后的混合上清液按3:1的比例，用恒流泵以2ml/min的流速泵入裝有樹脂D280層析柱，收集洗脫液。

7、包裹木糖醇：在所述洗脫液中加入木糖醇，木糖醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的10％，攪拌均勻后加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)得到包裹液；所述反應(yīng)壓力為500-800MPa，溫度為25℃，反應(yīng)時間90min。

8、滅菌：將包裹液進(jìn)行超高壓滅菌；滅菌參數(shù)為壓力800-1000MPa，溫度15-20℃，時間20-40min。

9、凍干：將滅菌后的包裹液進(jìn)行冷凍干燥，溫度為-30～-25℃。

實施例4

酶解凍干粉的制備方法，包括以下步驟：

1、清洗：將海虹去除外殼，清洗干凈；

2、勻漿：將清洗后的海虹肉絞碎成海虹肉漿；

3、粉碎：用海虹肉漿質(zhì)量5倍的純化水或去離子水將海虹肉漿稀釋，然后用超聲波粉碎機(jī)將海虹肉漿在60w功率下粉碎40min。

4、酶解：先將中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.8:1的比例加入到粉碎后的海參漿中，加酶量8％(即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶總的加入量為海虹肉漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)的8％)，酶解2h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速3800-4000r/min，離心10min，得到上清液A和濾渣A。再在濾渣A中加入濾渣A質(zhì)量的3倍的純化水再次酶解，再次酶解時間為1.5-2h，然后用冷凍離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速4600-4800r/min，離心15min，得上清液B和濾渣B。

5、滅酶：將所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，對所述混合上清液進(jìn)行超高壓滅菌，滅酶時的壓力為800-1000MPa，時間為20-40min，溫度為5-20℃。

6、脫臭：將滅菌后的混合上清液按3.5:1的比例，用恒流泵以2ml/min的流速泵入裝有樹脂D280層析柱，收集洗脫液。

7、包裹木糖醇：在所述洗脫液中加入木糖醇，木糖醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的10％，攪拌均勻后加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)得到包裹液；所述反應(yīng)壓力為500-800MPa，溫度為25℃，反應(yīng)時間90min。

8、滅菌：將包裹液進(jìn)行超高壓滅菌；滅菌參數(shù)為壓力800-1000MPa，溫度15-20℃，時間20-40min。

9、凍干：將滅菌后的包裹液進(jìn)行冷凍干燥，溫度為-30～-25℃。

上述實施例通過采用上述兩種酶按一定比例復(fù)配后進(jìn)行多次酶解，從而提高了蛋白質(zhì)水解度；采用超高壓滅菌或滅酶，最大程度的保持活性物質(zhì)的生物活性；利用離子交換樹脂脫去酶解液的腥臭味，提高終產(chǎn)品的口感；利用木糖醇不易被消化液破環(huán)的原理，用木糖醇包裹活性物質(zhì)使其不被消化；用低溫冷凍干燥法對酶解液進(jìn)行干燥形成凍干粉。通過上述出處理步驟，得到小分子多肽含量高、生物活性不被破壞且無異味、能被充分吸收利用的海虹凍干粉。

上述具體實施例只是用來解釋說明本發(fā)明，而非是對本發(fā)明進(jìn)行限制，在本發(fā)明的宗旨和權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)，對本發(fā)明做出的任何不付出創(chuàng)造性勞動的替換和改變，皆落入本發(fā)明專利的保護(hù)范圍。