本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種真姬菇多糖抗衰老酸奶及其制備方法。
背景技術(shù)：
真姬菇(Hypsizigus marmoreus)屬于擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、傘菌目、白蘑科、玉蕈屬，其口感極佳，具有獨(dú)特的蟹香味，在日本具有“香在松口蘑，味在玉蕈”之說(shuō)。藥理研究表明，真姬菇多糖作為其主要的生物活性成分，在提高免疫力，抗腫瘤，降血脂，抗氧化等方面發(fā)揮顯著效果。
現(xiàn)有技術(shù)中已有研究探索了真姬菇酸奶，但其主要以真姬菇菌粉為原料，因所用真姬菇菌粉自身的口感、風(fēng)味，經(jīng)簡(jiǎn)單加工工藝，致使其組織狀態(tài)不均、風(fēng)味欠佳，藥理活性不能保證，并且原料成本過(guò)高，周期長(zhǎng)，而未得到廣泛應(yīng)用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中真姬菇酸奶組織狀態(tài)不均、風(fēng)味欠佳，藥理活性不能保證且原料成本過(guò)高，周期長(zhǎng)的缺陷，提供一種真姬菇多糖抗衰老酸奶及其制備方法。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，所采用的技術(shù)方案為：
一種真姬菇多糖抗衰老酸奶，其原料組分按重量份計(jì)：
優(yōu)選的，所述的真姬菇多糖采用液態(tài)發(fā)酵技術(shù)聯(lián)合水提醇沉法提取制得。
所述的白砂糖選自為蔗糖為主要成分的食用級(jí)精制糖類(lèi)。
所述的發(fā)酵劑為植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌按照質(zhì)量份3:1:1混合而成。
優(yōu)選的，其原料組分按重量份計(jì)：
本發(fā)明還包括一種制備真姬菇多糖抗衰老酸奶的方法，采用下述步驟：取配方量的牛奶、真姬菇多糖，白砂糖，經(jīng)95℃巴氏滅菌10min，冷卻至40～45℃，無(wú)菌條件下接種發(fā)酵劑，混合均勻，40℃保溫發(fā)酵6h至奶液凝固，然后在4℃條件下后熟12h制得真姬菇多糖抗衰老酸奶。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
1.真姬菇多糖是真姬菇最主要的生理活性成分，作為天然抗氧化劑，添加到酸奶中，可以直接作用于自由基本身，捕獲脂質(zhì)過(guò)氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中產(chǎn)生活性氧，同時(shí)可以間接提高酸奶中產(chǎn)生的抗氧化酶或人體內(nèi)原有的抗氧化酶活性，抑制或修復(fù)衰老引起的氧化損傷，多糖結(jié)構(gòu)中醇羥基通過(guò)絡(luò)合產(chǎn)生活性氧所必需的金屬離子如Fe2+、Cu2+等，使自由基的產(chǎn)生受到抑制，進(jìn)而影響脂質(zhì)過(guò)氧化的啟動(dòng)，最終抑制活性氧的產(chǎn)生，發(fā)揮良好的抗衰老效果。
同時(shí)，真姬菇多糖作為乳酸菌的生長(zhǎng)因子，所得的產(chǎn)品中乳酸菌的總數(shù)＞109cfu/mL，顯著提高了酸奶中的活菌含量。本發(fā)明的配方制備營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)、功效增強(qiáng)的抗衰老酸奶，具有極大的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)潛力。
2.采用液體發(fā)酵技術(shù)聯(lián)合水提醇沉法提取真姬菇多糖制備工藝，提取多糖質(zhì)量穩(wěn)定，且使用均是常規(guī)設(shè)備，利用現(xiàn)有的設(shè)備直接進(jìn)行生產(chǎn)，節(jié)省了生產(chǎn)的成本，同時(shí)方便大面積的推廣和應(yīng)用，保證了其在保健品行業(yè)的應(yīng)用。
由于液態(tài)發(fā)酵技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量菌絲體并積累發(fā)酵液多糖和其他某些生理活性物質(zhì)，可以很好地解決真姬菇人工栽培時(shí)存在的栽培條件苛刻，勞動(dòng)強(qiáng)度大、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、易污染、產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)，可廣泛應(yīng)用于保健品行業(yè)。
水提醇沉法提取多糖利用熱力作用使得食用菌細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離，水作為溶劑深入細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)中，溶解液泡中的物質(zhì)，使其穿過(guò)細(xì)胞壁，擴(kuò)散到外部溶劑，實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單，操作容易，成本低，終止溫度不會(huì)影響到多糖活性，保證了真姬菇多糖在保健品開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的應(yīng)用。
3.利用本發(fā)明的方法制備的真姬菇多糖抗衰老酸奶，組織形態(tài)與普通酸奶無(wú)差別，營(yíng)養(yǎng)組分高于普通酸奶，口感好，消費(fèi)者易于接受，且含有較多含量的真姬菇多糖，充分發(fā)揮了真姬菇多糖和酸奶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，具有抗氧化、美容養(yǎng)顏等功效。
具體實(shí)施方式
為了使本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合最佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
本發(fā)明所涉及的培養(yǎng)基制作如下：
PDA斜面培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，加適量蒸餾水，煮沸30min后用雙層紗布過(guò)濾，濾液補(bǔ)水至1000mL，葡萄糖20g，瓊脂20g，121℃滅菌20min。
種子(液體)培養(yǎng)基為：葡萄糖15g，蛋白胨5g，KH2PO4·3H2O 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，VB1 10mg，蒸餾水1000mL，pH 5.0，121℃滅菌20min；
真姬菇多糖的制?。喝≌婕Ч骄N接種于PDA斜面上，在25℃條件下恒溫培養(yǎng)10d，至菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)斜面。在無(wú)菌條件下，接種于食用菌種子(液體)培養(yǎng)基中，在搖床轉(zhuǎn)速為150r/min中，25℃培養(yǎng)10～15d，液體培養(yǎng)基至清亮，種子液為小菌絲球。在無(wú)菌條件下以10％接種量接種到液體培養(yǎng)基中，在搖床轉(zhuǎn)速為150r/min中，25℃培養(yǎng)7-10d；待培養(yǎng)液清亮，收集發(fā)酵液。8層紗布過(guò)濾發(fā)酵濾液過(guò)濾，即得發(fā)酵液。
發(fā)酵液經(jīng)過(guò)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)方式濃縮至原體積的1/5，加入95％乙醇在4℃條件下醇析24h，抽濾，獲得粗多糖，然后在60℃熱水溶解加入sevage液，震蕩分層去蛋白，多糖溶液在4℃條件下醇析24h，蒸發(fā)濃縮，獲得脫蛋白多糖；將脫蛋白多糖以60℃熱水溶解，放置于透析袋中，4℃透析5d，真空冷凍干燥，得白色精細(xì)固體粉末，即為真姬菇多糖。
空白酸奶的制取：取配方量的牛奶100g，白砂糖3g，所述的白砂糖選自為蔗糖為主要成分的食用級(jí)精制糖類(lèi)，經(jīng)95℃巴氏滅菌10min，冷卻至40～45℃，無(wú)菌條件下接種發(fā)酵劑0.05g(該發(fā)酵劑以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌按照質(zhì)量份3:1:1混合而成)，混合均勻后，40℃保溫發(fā)酵6h至奶液凝固，然后在4℃條件下后熟12h制得空白酸奶。
實(shí)施例1：
取配方量的牛奶100g、真姬菇多糖0.03g，白砂糖3g，所述的白砂糖選自為蔗糖為主要成分的食用級(jí)精制糖類(lèi)，經(jīng)95℃巴氏滅菌10min，冷卻至40～45℃，無(wú)菌條件下接種發(fā)酵劑0.05g(該發(fā)酵劑以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌按照質(zhì)量份3:1:1混合而成)，混合均勻后，40℃保溫發(fā)酵6h至奶液凝固，然后在4℃條件下后熟12h制得真姬菇多糖抗衰老酸奶。
實(shí)施例2：
取配方量的牛奶100g、真姬菇多糖0.20g，白砂糖9g，所述的白砂糖選自為蔗糖為主要成分的食用級(jí)精制糖類(lèi)，經(jīng)95℃巴氏滅菌10min，冷卻至40～45℃，無(wú)菌條件下接種發(fā)酵劑0.2g(該發(fā)酵劑以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌按照質(zhì)量份3:1:1混合而成)，混合均勻后，40℃保溫發(fā)酵6h至奶液凝固，然后在4℃條件下后熟12h制得真姬菇多糖抗衰老酸奶。
實(shí)施例3：
取配方量的牛奶100g、真姬菇多糖0.12g，白砂糖6g，所述的白砂糖選自為蔗糖為主要成分的食用級(jí)精制糖類(lèi)，經(jīng)95℃巴氏滅菌10min，冷卻至40～45℃，無(wú)菌條件下接種發(fā)酵劑0.1g(該發(fā)酵劑以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌按照質(zhì)量份3:1:1混合而成)，混合均勻后，40℃保溫發(fā)酵6h至奶液凝固，然后在4℃條件下后熟12h制得真姬菇多糖抗衰老酸奶。
實(shí)施例1-3均能得到本發(fā)明的目的，其中以實(shí)施例3的實(shí)施效果為最佳，以實(shí)施例3為例，進(jìn)行實(shí)施效果表述：
實(shí)驗(yàn)1：真姬菇多糖抗衰老酸奶的有益品質(zhì)效果測(cè)試。表1為真姬菇多糖抗衰老酸奶的檢測(cè)指標(biāo)。
表1
真姬菇多糖抗衰老酸奶中乳酸菌總數(shù)達(dá)到10^9CFU/mL，表明，真姬菇多糖對(duì)酸奶發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌增值具有顯著促進(jìn)作用。真姬菇多糖抗衰老酸奶中氨基酸含量達(dá)到79.88mg/100g，提高了蛋白質(zhì)吸收率。真姬菇多糖抗衰老酸奶中胞外多糖含量提高了13.36mg/100g，主要原因是添加的真姬菇多糖，而且乳酸菌增殖分泌的胞外多糖，提高了酸奶組織狀態(tài)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
實(shí)驗(yàn)2：真姬菇多糖益生型酸奶的有益抗衰老效果測(cè)試。
材料與方法：將小鼠每組定為10只，共分6組，其中一組每天注射0.9％生理鹽水0.2mL，普通飼料常規(guī)喂養(yǎng)小鼠45d得到正常的小鼠；其余5組小鼠每天在皮下注射D-半乳糖(1200mg/kg.d)0.2mL，普通飼料常規(guī)喂養(yǎng)小鼠45d得到5組衰老的小鼠；
將5組衰老的小鼠按照喂養(yǎng)樣品的不同進(jìn)行分類(lèi)且每種類(lèi)型均喂養(yǎng)相對(duì)應(yīng)的樣品0.2ml，其中，衰老組對(duì)應(yīng)的樣品為0.9％生理鹽水；酸奶組對(duì)應(yīng)的樣品為空白酸奶；低劑量組對(duì)應(yīng)樣品為實(shí)施例1得到的真姬菇多糖抗衰老酸奶，中劑量組對(duì)應(yīng)樣品為實(shí)施例3得到的真姬菇多糖抗衰老酸奶，高劑量組對(duì)應(yīng)樣品為實(shí)施例2得到的真姬菇多糖抗衰老酸奶。各組均給藥30d。
將1組正常的小鼠每天注射0.9％生理鹽水0.2mL，共給藥30d得到需測(cè)試的正常組。
采用稱(chēng)重法，對(duì)小鼠臟器指數(shù)進(jìn)行測(cè)定。制備小鼠血清，肝、腦組織勻漿液，依據(jù)南京建成生物工程測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)所示測(cè)定SOD、CAT、GSH-PX活性、MDA含量及臟器組織中蛋白質(zhì)含量。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2
注：T檢驗(yàn)，正常組比較，小寫(xiě)字母P＜0.05，大寫(xiě)字母P＜0.01
表2表明真姬菇多糖抗衰老酸奶可降低小鼠腦和肝臟臟器指數(shù)，對(duì)小鼠是安全、無(wú)毒副作用的。
表3
表3為真姬菇多糖抗衰老酸奶對(duì)小鼠SOD活性的影響測(cè)試結(jié)果，表明真姬菇多糖抗衰老酸奶提高小鼠血清、腦、肝組織中SOD活性，且與多糖添加量呈劑量依賴(lài)關(guān)系，以延緩D-半乳糖所致的衰老現(xiàn)象。
表4
表4為真姬菇多糖抗衰老酸奶對(duì)小鼠MDA含量的影響測(cè)試結(jié)果，表明真姬菇多糖抗衰老酸奶能有效抑制或修復(fù)衰老小鼠體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化延緩衰老。
表5
表5為真姬菇多糖抗衰老酸奶對(duì)小鼠GSH-PX含量的影響測(cè)試結(jié)果，表明真姬菇多糖抗衰老酸奶可有效的激活GSH-PX，以清除體內(nèi)的自由基等氧化性物質(zhì)，延緩衰老。
表6
表6為真姬菇多糖抗衰老酸奶對(duì)小鼠CAT活力的影響的測(cè)試結(jié)果，表明真姬菇多糖抗衰老酸奶對(duì)提高小鼠腦、肝臟組織CAT活力，提高機(jī)體免疫力和延緩衰老方面具有重要的作用。
由上可見(jiàn)本發(fā)明所提供的功能性保健乳制品可以有效清除自由基，提高內(nèi)源性抗氧化物酶活性，抑制或修復(fù)氧化損傷，以發(fā)揮延緩機(jī)體衰老效果方面協(xié)同效果，成為一種美容養(yǎng)顏，延緩衰老的良好飲品。