本發(fā)明涉及豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，還涉及所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法及其在脫除豬飼料中霉菌毒素的應(yīng)用，屬于豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的制備領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
霉菌及霉菌毒素污染是現(xiàn)代飼料工業(yè)和畜牧業(yè)需要共同面對(duì)的生產(chǎn)問(wèn)題。由于谷物是畜禽的主要飼料糧，霉菌毒素的污染會(huì)嚴(yán)重降低畜禽的生產(chǎn)性能，且多數(shù)霉菌毒素具有強(qiáng)烈致癌性、致突變性，容易通過(guò)食物鏈危害人類健康甚至生命。另外，在當(dāng)前日益高漲的飼料原料價(jià)格形勢(shì)下，受霉菌毒素污染的飼料原料及飼料無(wú)法正常使用，將使飼料及養(yǎng)殖企業(yè)蒙受巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此，盡可能的消除由于諸多因素導(dǎo)致的飼料原料及飼料中霉菌和霉菌毒素的污染，提高飼料質(zhì)量，保障畜禽生產(chǎn)性能及畜產(chǎn)品安全性，對(duì)于現(xiàn)代飼料工業(yè)和畜牧業(yè)十分必要。
目前市場(chǎng)上的脫毒劑以霉菌毒素吸附劑為主，但霉菌毒素吸附劑在飼料工業(yè)和畜牧業(yè)中的迅速推廣，造成當(dāng)前霉菌毒素吸附劑產(chǎn)品繁雜，品質(zhì)參差不齊。因此，開發(fā)一種能夠有效去除飼料中多種霉菌毒素的豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，對(duì)現(xiàn)代畜牧業(yè)具有重要的意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，該豬用抗霉菌毒素飼料添加劑能夠有效脫除飼料中的多種霉菌毒素，防止霉菌毒素對(duì)豬只產(chǎn)生的毒害作用。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
本發(fā)明首先公開了一種豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，包括以下各組分：鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)菌劑、煅燒貝殼和玉米秸稈炭；各組分的重量份為：鼠李糖乳桿菌菌劑1-30份、煅燒貝殼10-80份、玉米秸稈炭1-50份；優(yōu)選的，各組分的重量份為：鼠李糖乳桿菌菌劑12份、煅燒貝殼70份、玉米秸稈炭45份。
本發(fā)明所述鼠李糖乳桿菌的保藏編號(hào)為ATCC 53103。本發(fā)明對(duì)鼠李糖乳桿菌的具體菌株沒(méi)有特殊限制，所述的鼠李糖乳桿菌可以是市售商品，也可以通過(guò)培養(yǎng)獲得，不影響本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的實(shí)施；但為達(dá)到更好的效果，所述鼠李糖乳桿菌的活菌數(shù)要求在200億個(gè)/克以上。
本發(fā)明進(jìn)一步公開了一種所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟：將煅燒貝殼、玉米秸稈炭粉碎，然后與鼠李糖乳桿菌混合均勻，即得。本發(fā)明對(duì)所述粉碎沒(méi)有特殊限制，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整，作為參考，粉碎至100-300目。
本發(fā)明由鼠李糖乳桿菌菌劑、煅燒貝殼和玉米秸稈炭制備的豬用抗霉菌毒素飼料添加劑能夠吸附霉菌毒素，使毒素經(jīng)過(guò)動(dòng)物腸道時(shí)不被動(dòng)物吸收，直接排出體外。在鼠李糖乳桿菌、煅燒貝殼和玉米秸稈炭的基礎(chǔ)上添加以下原料時(shí)，能夠顯著提高對(duì)霉菌毒素的去除率：梔子和牡丹皮；各組分的重量份為：梔子10-35份、牡丹皮10-30份；優(yōu)選的，各組分的重量份為：梔子32份、牡丹皮25。
梔子，為茜草科植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實(shí)。性味苦，寒。歸心、肺、三焦經(jīng)。功能主治：瀉火除煩，清熱利尿，涼血解毒。
牡丹皮，為毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮。性味苦、辛，微寒。歸心、肝、腎經(jīng)。功能主治：清熱涼血，活血化瘀。
梔子中含有如羥異梔子苷、梔子酮苷等多種環(huán)烯醚萜類，多糖、有機(jī)酸類等多種生物活性成分；牡丹皮中含有酚及酚苷類、甾醇及其苷類、黃銅、有機(jī)酸等多種有效成分。進(jìn)一步添加梔子和牡丹皮能夠進(jìn)一步提高本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑對(duì)霉菌毒素的吸附效果，還有助于提高豬的生產(chǎn)性能。
本發(fā)明還公開了一種上述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟：將煅燒貝殼，玉米秸稈炭、梔子、牡丹皮粉碎，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。本發(fā)明對(duì)所述粉碎沒(méi)有特殊限制，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整，作為參考，粉碎至100-300目。
本發(fā)明將鼠李糖乳桿菌菌劑、煅燒貝殼和玉米秸稈炭制備的豬用抗霉菌毒素飼料添加劑對(duì)霉菌毒素的有一定的脫除效果，對(duì)玉米赤霉烯酮、AFB1、伏馬毒素B1、嘔吐毒素和T-2毒素的吸附率分別為64.31％、70.62％、65.33％、69.65％和70.24％；而在鼠李糖乳桿菌、煅燒貝殼和玉米秸稈炭的基礎(chǔ)上進(jìn)一步添加梔子和牡丹皮，對(duì)霉菌毒素的脫除率顯著提高，對(duì)玉米赤霉烯酮、AFB1、伏馬毒素B1、嘔吐毒素和T-2毒素的吸附率分別達(dá)到94.85％、98.13％、96.30％、95.74％和96.68％，霉菌毒素的脫除率比添加其他原料的添加劑組提高了19個(gè)百分點(diǎn)以上，而且與毒素結(jié)合更緊密，解吸率顯著降低，脫毒更為徹底。證明，鼠李糖乳桿菌、煅燒貝殼、玉米秸稈炭與梔子、牡丹皮之間具有明顯的協(xié)同增效作用。
本發(fā)明所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑能夠應(yīng)用于脫除豬飼料中的霉菌毒素。其中，所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的添加量為豬飼料質(zhì)量的0.1-1％；優(yōu)選為0.2％。本發(fā)明所述霉菌毒素包括但不限于：玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、煙曲霉毒素、伏馬毒素B1或T-2毒素中的任意一種或多種。
本發(fā)明所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑能夠用于受霉菌毒素污染的玉米、谷物等原料及配合飼料等的脫毒，防止霉菌毒素對(duì)豬只產(chǎn)生的毒害作用。另外，本發(fā)明所述豬用抗霉菌毒素飼料添加劑不吸附營(yíng)養(yǎng)元素，不影響豬只的正常生長(zhǎng)，而且由于鼠李糖乳桿菌能夠調(diào)節(jié)腸道內(nèi)微生態(tài)的菌群平衡，以及梔子和牡丹皮中含有的多種生物活性成分，因此本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑還能夠提高豬的生產(chǎn)性能。
本發(fā)明在AFB1污染的基礎(chǔ)日糧中添加本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑飼喂仔豬，仔豬腹瀉率僅2.5％，仔豬的平均日增重、平均日采食量和料重比與空白對(duì)照組差異不顯著，而且仔豬的料重比略低于空白對(duì)照組，證明本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑不僅能夠有效脫除飼料中的AFB1，從而降低其對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的危害，而且還能夠提高仔豬的生長(zhǎng)性能。而飼喂AFB1污染的基礎(chǔ)日糧組仔豬食欲不振，背毛粗糙，腹瀉率高達(dá)47.5％，且仔豬平均日增重、平均日采食量均顯著低于空白對(duì)照組，料重比顯著高于空白對(duì)照組，說(shuō)明AFB1對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能有明顯危害。
本發(fā)明技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果：
本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的配伍合理，原料李糖乳桿菌、煅燒貝殼、玉米秸稈炭與梔子、牡丹皮之間具有明顯的協(xié)同增效作用，不僅能夠有效地吸附飼料中的霉菌毒素如黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、T-2毒素等，同時(shí)還能抑制霉菌的生長(zhǎng)，防止霉菌毒素的產(chǎn)生，消除霉菌毒素對(duì)豬只的毒害作用，提高飼料報(bào)酬。另外，本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑的無(wú)毒副作用，無(wú)污染，符合畜牧業(yè)發(fā)展的需要。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但是應(yīng)理解所述實(shí)施例僅是范例性的，不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改或替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
1、原料
鼠李糖乳桿菌，菌株保藏編號(hào)為ATCC 53103；
煅燒貝殼粉，購(gòu)自天津鴻雁天山石業(yè)納米技術(shù)有限公司。
預(yù)備實(shí)施例1玉米秸稈炭的制備
以玉米秸稈為原料，采用缺氧熱解法，將秸稈洗凈、風(fēng)干粉碎后，填滿于密封坩堝中，放入預(yù)熱的馬弗爐，在300-700℃厭氧加熱6h，即得到玉米秸稈炭。
實(shí)施例1豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑1、煅燒貝殼10、玉米秸稈炭1；
將煅燒貝殼、玉米秸稈炭粉碎至100目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
實(shí)施例2豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑30、煅燒貝殼80、玉米秸稈炭50；
將煅燒貝殼、玉米秸稈炭粉碎至300目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
實(shí)施例3豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑12、煅燒貝殼70、玉米秸稈炭45；
將煅燒貝殼、玉米秸稈炭粉碎至200目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
實(shí)施例4豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑1、煅燒貝殼10、玉米秸稈炭1、梔子10、牡丹皮10；
將煅燒貝殼，玉米秸稈炭、梔子、牡丹皮粉碎至100目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
實(shí)施例5豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑30份、煅燒貝殼80份、玉米秸稈炭50份、梔子35份、牡丹皮30；
將煅燒貝殼，玉米秸稈炭、梔子、牡丹皮粉碎至300目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
實(shí)施例6豬用抗霉菌毒素飼料添加劑
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下比例稱取各組分(Kg)：鼠李糖乳桿菌菌劑12、煅燒貝殼70、玉米秸稈炭45、梔子32、牡丹皮25；
將煅燒貝殼，玉米秸稈炭、梔子、牡丹皮粉碎至200目，然后與鼠李糖乳桿菌菌劑混合均勻，即得。
試驗(yàn)例1豬用抗霉菌毒素飼料添加劑脫除霉菌毒素的效果觀察
1、實(shí)驗(yàn)方法
培養(yǎng)鼠李糖乳桿菌菌劑，要求活菌數(shù)在200億個(gè)/克或以上。
按照以下組合分別制備豬用抗霉菌毒素飼料添加劑(g)：
添加劑1：鼠李糖乳桿菌菌劑12、煅燒貝殼70、玉米秸稈炭45；
添加劑2-8分別在添加劑1的基礎(chǔ)上添加以下原料：
添加劑2：梔子32、姜黃25；
添加劑3：梔子32、茵陳25；
添加劑4：梔子32、牡丹皮25；
添加劑5：黃芩32、牡丹皮25；
添加劑6：茜草32、牡丹皮25；
添加劑7：馬齒莧32、丁香25；
添加劑8：青蒿32、白術(shù)25。
各添加劑的制備方法同實(shí)施例6。對(duì)以上8組添加劑分別進(jìn)行霉菌毒素的脫毒效果試驗(yàn)。霉菌毒素分別為玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素B1(AFB1)、嘔吐毒素、T-2毒素、伏馬毒素B1，取離心管加入l0ml上述霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液(具體見表1)，再在離心管中分別加入上述10組添加劑樣品25mg，使添加劑樣品在溶液中的濃度為2.5mg/ml。同時(shí)設(shè)置空白組(未添加任何脫毒劑)，所有樣品設(shè)2個(gè)重復(fù)。所有樣品于37℃恒溫水浴振蕩器中以150r/min振蕩吸附2h。而后，以3000r/min離心l0min，收集上清液，測(cè)定上清液中各霉菌毒素的含量并計(jì)算各霉菌毒素的吸附率Y(％)，Y＝100×(C0-C1)/C0；
然后在離心后的沉淀中加入l0ml pH 7.0的PBS緩沖溶液，于37℃，150r/min的恒溫振蕩水浴鍋中振蕩解吸30min，3000r/min離心l0min，收集上清液，同上法測(cè)定上清液中各霉菌毒素的含量并計(jì)算解吸率R(％)，R＝C2/(C0-C1)×100％；
其中，C0為吸附前各霉菌毒素的濃度(ng/ml)；C1為吸附后各霉菌毒素的濃度(ng/ml)；C2為解吸后各霉菌毒素的濃度(ng/ml)。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
不同添加劑對(duì)霉菌毒素的脫除效果見表1。
表1不同添加劑對(duì)霉菌毒素的脫除效果
結(jié)果表明，本發(fā)明將鼠李糖乳桿菌、煅燒貝殼和玉米秸稈炭制備的豬用抗霉菌毒素飼料添加劑對(duì)霉菌毒素的有一定的脫除效果，對(duì)玉米赤霉烯酮、AFB1、伏馬毒素B1、嘔吐毒素和T-2毒素的吸附率分別為64.31％、70.62％、65.33％、69.65％和70.24％；而進(jìn)一步添加梔子和牡丹皮制備的添加劑4，對(duì)霉菌毒素的脫除率顯著提高，對(duì)玉米赤霉烯酮、AFB1、伏馬毒素B1、嘔吐毒素和T-2毒素的吸附率分別達(dá)到94.85％、98.13％、96.30％、95.74％和96.68％，不同霉菌毒素的脫除率比添加其他原料的添加劑組提高了19個(gè)百分點(diǎn)以上，而且與毒素結(jié)合更緊密，解吸率顯著降低，脫毒更為徹底。
以上結(jié)果證明，鼠李糖乳桿菌、煅燒貝殼、玉米秸稈炭與梔子、牡丹皮之間具有明顯的協(xié)同增效作用。
試驗(yàn)例2豬用抗霉菌毒素飼料添加劑對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響
選擇健康、體重相近的杜×長(zhǎng)×大雜交豬120頭(平均體重25kg)，均隨機(jī)分成3組(空白對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)1組和實(shí)驗(yàn)2組)，空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，不添加任何添加劑；實(shí)驗(yàn)1組在基礎(chǔ)日糧中添加AFB1(0.1mg/kg飼料)；實(shí)驗(yàn)2組在基礎(chǔ)日糧中添加AFB1(0.1mg/kg飼料)，再添加本發(fā)明實(shí)施例6制備的豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，添加量為0.2％(質(zhì)量比)；各組的其他飼養(yǎng)條件均相同，連續(xù)飼喂60天，對(duì)試驗(yàn)豬進(jìn)行日常觀察和檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2豬用抗霉菌毒素飼料添加劑對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響
注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p＜0.05)。
結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)1組仔豬食欲不振，背毛粗糙，腹瀉率高達(dá)47.5％，而且仔豬的平均日增重、平均日采食量均顯著低于空白對(duì)照組，料重比顯著高于空白對(duì)照組，說(shuō)明AFB1對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能有明顯危害。而實(shí)驗(yàn)2組添加本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑，仔豬腹瀉率僅2.5％，仔豬的平均日增重、平均日采食量和料重比與空白對(duì)照組差異不顯著，另外實(shí)驗(yàn)2組仔豬的料重比略低于空白對(duì)照組，證明本發(fā)明豬用抗霉菌毒素飼料添加劑不僅能夠有效脫除飼料中的AFB1，降低其對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的危害，而且還能夠提高仔豬的生長(zhǎng)性能。