本發(fā)明涉及飼料脫霉劑領(lǐng)域，尤其涉及一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：霉菌毒素是動物致病的一類常見毒素，動物發(fā)生霉菌毒素中毒時，一方面會導(dǎo)致肝、腎功能減弱，使其對病毒、細菌崩解碎片以及其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物的處理速率降低，造成病毒、細菌等停留在體液中的時間延長并不斷積聚，使動物出現(xiàn)煩躁不安、食欲減退、渴欲增強、腹瀉、等中毒癥狀。另一方面，動物霉菌毒素中毒后，肝臟會發(fā)生大、變性、壞死，影響機體內(nèi)核酸復(fù)制，使機體免疫系統(tǒng)減弱，無法發(fā)揮正常的生理機能，霉菌毒素也能使淋巴細胞發(fā)生溶解，抑制細胞、體液免疫調(diào)節(jié)機能，免疫系統(tǒng)減弱、失去調(diào)節(jié)后會導(dǎo)致動物出現(xiàn)繼發(fā)性感染，盡管動物場采取固定的免疫程序，但由于整個動物群抗體水平降低，會使其經(jīng)常發(fā)生動物瘟、藍耳病、附紅細胞體病、偽狂犬病等疾病。在飼料中添加脫霉劑是用于避免發(fā)生動物霉菌毒素中毒的一種最常用方法，然而現(xiàn)有脫霉劑，只能吸附毒素，卻忽視了動物在已經(jīng)受到霉菌毒素侵害后的消炎和機體各種功能的修復(fù)問題，不能快速有效的解決動物霉菌毒素中毒的各種病癥和恢復(fù)機體健康。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明提供一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑及其制備方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑，包括以下質(zhì)量分數(shù)的各組分：蒙脫石50～80％、殼寡糖5～30％、鉀鹽10～20％。本發(fā)明所述的一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑可進一步確定各組分質(zhì)量分數(shù)為：蒙脫石80％、殼寡糖8％、鉀鹽12％。本發(fā)明所述的一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑可進一步確定各組分質(zhì)量分數(shù)為：蒙脫石80％、殼寡糖5％、鉀鹽15％。本發(fā)明所述的一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑可進一步確定各組分質(zhì)量分數(shù)為：蒙脫石70％、殼寡糖15％、鉀鹽15％。進一步的，殼寡糖的脫乙酰度≥90％、均分子量為200～1000da、純度≥90％。進一步的，鉀鹽為飼料級氯化鉀。進一步的，蒙脫石為300～500目、純度≥95％。進一步的，本發(fā)明還包括所述一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑的制備方法：步驟為：(1)將蒙脫石原料在70～90℃條件下烘干，粉碎得到蒙脫石原料粉；(2)將殼寡糖粉末溶于去離子水中配制成質(zhì)量濃度為5～10％的溶液；(3)將步驟(1)中的蒙脫石原料粉加入到步驟(2)中的殼寡糖溶液中，在混合設(shè)備中混合2～3h，攪拌速度為20～50rpm，然后減壓干燥得到處理粉；(4)將鉀鹽加入到步驟(3)得到的處理粉中，攪拌混勻后得到脫霉劑。進一步的，本發(fā)明的一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑的制備方法中步驟(1)中的蒙脫石原料純度≥95％，烘干粉碎至300～500目。進一步的，本發(fā)明還包括一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑的使用方法：飼料預(yù)防發(fā)霉：脫霉劑與飼料質(zhì)量比為0.5～1‰；飼料已發(fā)霉：脫霉劑與飼料質(zhì)量比為1～3‰。本發(fā)明的理論依據(jù)為：蒙脫石：可以有效清除飼料中的多種有害霉菌毒素，對黃曲霉素、赭曲霉素、玉米赤霉烯酮毒素、嘔吐毒素等霉菌毒素有極強的吸附、固定、抑制作用，蒙脫石本身不被消化，攜帶各種毒物排出動物體外，保證動物的健康。殼寡糖：是n-乙酰氨基葡萄糖(glcnac)和氨基葡萄糖(glcn)以β-1，4糖苷鍵連接而成的同聚物或異聚物。殼寡糖自身氨基帶正電荷，是目前已知的唯一堿性寡糖。殼寡糖一般以幾丁質(zhì)或殼聚糖為原料，經(jīng)酶轉(zhuǎn)化和化學(xué)方法脫乙酰基后制而得，它無毒，有較好的生物相容性和生物可降解性。殼寡糖的生物活性依賴于分子質(zhì)量、聚合度、脫乙酰度。殼寡糖可抑制腫瘤生長，抑制炎癥反應(yīng)，有抗細菌、抗瘧疾、抗真菌、抗氧化和增強免疫力等作用。在抑制炎癥反應(yīng)方面，殼寡糖能夠抑制各類炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，還能抑制炎癥區(qū)域細胞白介素、腫瘤壞死因子產(chǎn)生，減輕炎癥損傷；另外殼寡糖在炎癥過激部位抑制核轉(zhuǎn)錄因子，阻斷炎癥關(guān)鍵起始步驟及次級炎癥反應(yīng)。在抗氧化方面，殼寡糖結(jié)構(gòu)所帶氨基具有還原性，可直接清除部分活性氧，同時殼寡糖增強體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)，不僅提高超氧化物歧化酶、過氧化氫酶等抗氧化酶的活性，還可以誘導(dǎo)金屬含硫蛋白的表達合成、保護巰基，提高機體總抗氧化能力。在增強免疫力方面，殼寡糖激活傷口周圍更多的成纖細胞，增加成纖維細胞中膠原酶的釋放，促進細胞有絲分裂，有利于傷口的愈合。鉀鹽：是體內(nèi)一個重要的電解質(zhì)，參與細胞的酸堿平衡、離子平衡、水平衡和滲透壓的保持，在維持這些重要功能中起著舉足輕重的作用。同時鉀在幾個酶控生化反應(yīng)中起著激活和輔酶的作用，這些反應(yīng)包括能量的轉(zhuǎn)換和利用、蛋白質(zhì)合成及碳水化合物代謝。本發(fā)明的復(fù)合脫霉劑殼寡糖能被吸附進蒙脫石的晶體結(jié)構(gòu)中，成為一個特殊的穩(wěn)定體系，在進入動物體后，殼寡糖與蒙脫石協(xié)同，對消化道內(nèi)的致病菌，以及它們所產(chǎn)生的毒素、氣體等有極強的吸附、固定、抑制作用，使其失去致病性；同時，殼寡糖在胃部低ph環(huán)境下溶解后，殼寡糖上的氨基會質(zhì)子化(-nh4+)，質(zhì)子化的殼寡糖很容易被鉀離子置換出來，殼寡糖游離出來后，殼寡糖繼續(xù)在動物腸道內(nèi)發(fā)揮作用，促進損傷的消化道黏膜上皮再生，恢復(fù)腸蠕動的正常節(jié)律，維護腸道的輸送和吸收，提高消化道的免疫功能；殼寡糖進入動物機體血液后，可消除霉菌毒素導(dǎo)致的各種炎癥反應(yīng)，進而提高機體免疫力。本發(fā)明復(fù)合脫霉劑既能消除霉菌毒素，又能最大程度的對動物機體產(chǎn)生修復(fù)作用，并能提高機體免疫力。極大的解決了普通脫霉劑質(zhì)量不穩(wěn)定或產(chǎn)品功能單一的缺點，另外本發(fā)明添加劑成分均為天然產(chǎn)物、具有安全、營養(yǎng)等特點，符合畜牧業(yè)發(fā)展的需要。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例與效果試驗對本發(fā)明做進一步闡述。(一)實施例實施例1本發(fā)明一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的各組分組成：蒙脫石80％、殼寡糖8％、鉀鹽12％。其中蒙脫石純度≥95％；殼寡糖的脫乙酰度≥90％、均分子量為200～1000da、純度≥90％；鉀鹽為飼料級氯化鉀。制備步驟為：(1)將蒙脫石原料在90℃條件下烘干，粉碎至300～500目得到蒙脫石原料粉；(2)將殼寡糖粉末溶于去離子水中配制成質(zhì)量濃度為5％的溶液；(3)將步驟(1)中的蒙脫石原料粉加入到步驟(2)中的殼寡糖溶液中，在混合設(shè)備中混合3h，攪拌速度為50rpm，然后減壓干燥得到處理粉；(4)將鉀鹽加入到步驟(3)得到的處理粉中，攪拌混勻后得到脫霉劑樣品1。實施例2本發(fā)明一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的各組分組成：蒙脫石80％、殼寡糖5％、鉀鹽15％。其中蒙脫石純度≥95％；殼寡糖的脫乙酰度≥90％、均分子量為200～1000da、純度≥90％；鉀鹽為飼料級氯化鉀。制備方法同實施例1，最后得到的脫霉劑樣品2。實施例3本發(fā)明一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的各組分組成：蒙脫石50％、殼寡糖30％、鉀鹽20％。其中蒙脫石純度≥95％；殼寡糖的脫乙酰度≥90％、均分子量為200～1000da、純度≥90％；鉀鹽為飼料級氯化鉀。制備方法同實施例1，最后得到的脫霉劑樣品3。實施例4本發(fā)明一種含有殼寡糖的復(fù)合脫霉劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的各組分組成：蒙脫石70％、殼寡糖15％、鉀鹽15％。其中蒙脫石純度≥95％；殼寡糖的脫乙酰度≥90％、均分子量為200～1000da、純度≥90％；鉀鹽為飼料級氯化鉀。制備方法同實施例1，最后得到的脫霉劑樣品4。(二)脫霉劑對霉菌毒素的體外吸附效果試驗選用普通蒙脫石和酵母細胞壁提取物分別作為對比樣品a和對比樣品b，與實施例樣品進行體外脫霉效果評估。實驗步驟如下：(1)將各實施例樣品及對比樣品a、對比樣品b各取0.01g，分別加入到裝有10ml霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的試管中；(2)將各試管在37℃水浴恒溫振蕩器中振蕩1.5h；(3)將振蕩后的各試管混合物在離心機2000rpm條件下離心10min，各取上清液200μl；(4)將各上清液中加入流動相(乙腈、去離子水組成，質(zhì)量比為52：48)5ml，將上清液和流動相混合均勻；(5)各取步驟(4)中的混合物樣品100μl，通過高壓液相色譜法進行分析；(6)重復(fù)步驟(5)三次，取每種混合物樣品分析結(jié)果平均值作結(jié)果分析。霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)緩沖液分為兩種情況，分別模擬動物胃部和腸部的內(nèi)部環(huán)境：(1)胃部環(huán)境：標(biāo)準(zhǔn)緩沖液組成為ph3.0檸檬酸緩沖液加霉菌毒素；(2)腸部環(huán)境：標(biāo)準(zhǔn)緩沖液組成為ph6.5磷酸氫鈉緩沖液加霉菌毒素。霉菌毒素與標(biāo)準(zhǔn)緩沖液組成如表1所示：表1霉菌毒素組成項目含量單位黃曲霉毒素b1200μg/kg玉米赤霉烯酮2mg/kg嘔吐毒素50mg/kg赭曲霉毒素200μg/kg煙曲霉毒素b12mg/kg試驗結(jié)果如下：表2脫霉劑樣品對霉菌毒素的吸附效果(ph＝3.0)表3脫霉劑樣品對霉菌毒素的吸附效果(ph＝6.5)由如表2和表3可以看出，本發(fā)明含有殼寡糖的脫霉劑對霉菌毒素的吸收率均在80％以上，均遠高于對比樣品a、對比樣品b的吸收率，其中實施例1的樣品1對各種霉菌毒素的吸附率最高，均達到90％以上，效果都明顯高于單純蒙脫石、酵母細胞壁脫霉劑。(三)脫霉劑對動物免疫功能的影響試驗實驗步驟為：選擇體重約50kg的生長豬40頭，隨機分為4組，每組10頭，分別喂養(yǎng)不同的飼料。第1組為對照組，喂霉變飼料；第2組喂霉變飼料加1‰對比樣品a；第3組喂霉變飼料加1‰對比樣品b；第4組喂霉變飼料加1‰樣品1，分別喂養(yǎng)30天進行血清檢測。檢測結(jié)果如下：表4脫霉劑對生長豬血清生化指標(biāo)的影響指標(biāo)對照組樣品a樣品b樣品1tp(g/l)52.47±1.8453.20±4.6954.75±1.6550.97±3.57alb(g/l)29.37±3.0228.60±3.1634.45±2.3533.70±1.94glb(g/l)23.10±1.1924.60±7.7520.30±0.7017.27±1.64bun(mmol/l)3.13±0.623.47±0.205.55±2.053.37±0.09tg(nmol/l)0.53±0.120.60±0.180.46±0.070.79±0.37tc(nmol/l)2.06±0.181.90±0.042.19±0.111.83±0.21hdl-c(mmol/l)1.04±0.090.86±0.021.09±0.130.89±0.03ldl-c(mmol/l)0.85±0.080.83±0.040.91±0.130.78±0.13got(u/l)83.67±11.46a45.67±0.67b65.50±1.50ab62.00±4.00abgpt(u/l)72.33±7.9767.00±9.2957.00±5.0060.00±0.58alp(u/l)247.00±22.72198.33±39.47186.50±99.50247.67±20.58表5脫霉劑對生長豬血清抗氧化指標(biāo)的影響表6脫霉劑對生長豬血清球蛋白和激素水平的影響指標(biāo)對照組樣品a樣品b樣品1igg(μg/ml)7.53±0.397.99±0.976.77±1.487.48±1.06gh(μg/ml)1.08±0.251.15±0.080.96±0.141.43±0.21t3(μg/ml)1.06±0.05ab0.67±0.05bc1.06±0.03ab1.36±0.09aat4(μg/ml)46.72±6.3632.27±5.4138.96±1.7248.13±5.18由表4至表6可以看出，樣品1的got(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、mda(丙二醛)較低，alp(堿性磷酸酶)、t-aoc(總抗氧化能力)、cat(氧化氫酶)、gh(生長激素)較高，表明本發(fā)明含有殼寡糖的脫霉劑能有效降低霉菌毒素對動物免疫系統(tǒng)的損傷，提高動物的抗氧化能力及免疫功能，進而增強動物對食用含霉菌毒素飼料的免疫力。以上所述，僅是本發(fā)明的最佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，任何熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍情況下，利用上述揭示的方法內(nèi)容對本發(fā)明技術(shù)方案做出許多可能的變動和修飾，均屬于權(quán)利要求書保護的范圍。當(dāng)前第1頁12