本發(fā)明屬于保健食品或食品添加劑制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種大豆肽螯合鈣的制備方法。

背景技術(shù)：

鈣在人體內(nèi)具有許多重要生理功能，在人體健康方面發(fā)揮重要作用。鈣不僅是骨頭和牙齒的重要成分，還是細胞分裂和凋亡的信號物質(zhì)，有助于維持毛細血管和細胞膜中的滲透壓，參與肌肉收縮等各種各樣的生理活動。鈣的缺乏會導致人體發(fā)生一系列不利變化，如骨質(zhì)疏松、營養(yǎng)不良、發(fā)育遲緩、免疫能力下降等。

補鈣劑發(fā)展到今天經(jīng)歷了四個階段。

第一代補鈣產(chǎn)品主要有氧化鈣、氯化鈣、磷酸鈣、碳酸鈣等無機鹽組成的補鈣制劑，必須由胃酸中和并解離成Ca²⁺才被吸收，強烈刺激胃。并且還需要相關(guān)酶類及維生素D才能被消化吸收，吸收利用率低，未消化的鈣易停留在腎臟，以難溶鹽的形式被排泄，易引起腎結(jié)石，有毒副作用。

第二代補鈣產(chǎn)品主要有葡萄糖酸鈣、乳酸鈣、檸檬酸鈣等傳統(tǒng)的有機酸鈣，這類制劑溶解性較好，吸收率優(yōu)于無機鈣，胃腸刺激小含鈣量較低，有一定副作用，且Ca²⁺在胃內(nèi)易與食物中草酸、植酸等結(jié)合，形成草酸鈣、植酸鈣等沉淀阻礙鈣的吸收；例如:醋酸鈣急性毒性較大，易導致腎結(jié)石、心臟痙攣、血管鈣化和軟組織鈣化癥。且第二代補鈣產(chǎn)品的吸收利用也依賴體內(nèi)維生素D，因此，會對鈣的吸收產(chǎn)生影響。

第三代補鈣產(chǎn)品是以氨基酸螯合鈣為代表的新型有機酸鈣，由于它是將鈣元素嵌合在氨基酸中間，溶解性好，不受食物中植物酸、草酸和胃酸、堿性的影響，直接通過腸道粘膜吸收，有效的提高了鈣的吸收利用率。常見的包括氨基酸螯合鈣，復合氨基酸螯合鈣等。這類補鈣制劑的吸收是主動吸收，且屬于不飽和吸附狀態(tài)。氨基酸螯合鈣能以螯合物的形式持續(xù)解離鈣離子供機體利用，實現(xiàn)鈣與氨基酸同時補充的目的，但是該補鈣制劑與短肽螯合鈣相比在吸收與轉(zhuǎn)運機制方面存在缺陷，因為人體吸收蛋白質(zhì)主要是以短肽的形式吸收的，而不是氨基酸。短肽螯合鈣是一種新型的鈣螯合物，相比之下，具有比氨基酸螯合鈣更易吸收、生物利用度更高的優(yōu)點。和前兩種補鈣制劑相比，氨基酸螯合鈣雖然有著優(yōu)良的性能，但它也可能使人體吸收氨基酸比例不協(xié)調(diào)，給人體帶來負氮平衡。

第四代補鈣產(chǎn)品為肽-鈣螯合物，正受到越來越多的關(guān)注 ?，F(xiàn)有研究報道顯示，大豆蛋白，小麥蛋白和牛血清蛋白水解物可以作為鈣吸收的促進劑，且這種作用受到肽中氨基酸種類和序列的影響。第四代補鈣產(chǎn)品可以使人體同時補充鈣與蛋白肽，吸收效果優(yōu)于第一代、第二代及第三代補鈣產(chǎn)品。但其生產(chǎn)工藝還存在諸多問題需要研究解決，例如需要先對蛋白質(zhì)進行水解得到肽的粗產(chǎn)品，然后對粗肽半成品進行脫鹽純化得到肽產(chǎn)品，再進行肽和鈣的螯合反應(yīng)。

目前肽-鈣螯合物的制備方法主要是首先利用蛋白質(zhì)原料水解制備肽，然后使肽和無機鈣發(fā)生螯合制備出肽-鈣螯合物。CN 101161114B公開了大豆肽-鈣復合物的制備方法，該發(fā)明以低溫脫脂豆粕或大豆分離蛋白為原料，經(jīng)蛋白酶水解得到大豆肽后再與鈣螯合，制備得到大豆肽-鈣復合物（螯合物）。CN 103040000 B公開了大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，該發(fā)明將大豆蛋白經(jīng)米曲霉、醬油曲霉發(fā)酵后得到大豆蛋白水解液，澄清化處理后，加入鈣離子，制備得到大豆勝肽-鈣螯合物。肖珊等發(fā)表了“乳清多肽螯合鈣的制備與結(jié)構(gòu)表征”的論文（食品工業(yè)科技，2013，34（24）：253-257），是以乳清蛋白為原料，用酶法水解制得乳清多肽，加入鈣鹽，制備得到乳清多肽螯合鈣。敖冉等發(fā)表了“膠原多肽螯合鈣螯合工藝研究”的論文（食品工業(yè)，2016，37（ 3）：27-30），是利用豬皮酶解原液，添加外源鈣制劑進行螯合后制得膠原多肽。這些方法操作步驟繁瑣，并且在制備肽的過程往往有鈉離子和氯離子等鹽分引入，增加了產(chǎn)品中灰分的含量，影響了產(chǎn)品的質(zhì)量和口感。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種大豆肽-鈣螯合物制備的新方法，將大豆肽的制備和鈣的螯合由原來的必須首先制備出肽，再加入鈣離子進行肽-鈣螯合的兩步反應(yīng)合并為一步完成，且在制備過程中沒有鈉離子和氯離子的引入。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：將大豆分離蛋白配制成大豆分離蛋白溶液，水浴加熱至95℃維持8~10min，使大豆分離蛋白變性，以利于蛋白酶的水解，將變性大豆分離蛋白溶液冷卻到35℃~65℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH為8~10，加入堿性蛋白酶酶解10～30min，然后，加入氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH為6~8，加入中性蛋白酶，在35℃~65℃下繼續(xù)反應(yīng)10～30min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）離心沉淀：將大豆蛋白水解液離心，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過微濾膜，得到濾液；

（5）乙醇沉淀：向濾液中加入無水乙醇使濾液產(chǎn)生沉淀，進行離心分離后初步脫去大豆肽-鈣螯合物的水分，收集沉淀物；

（6）干燥：將沉淀物進行真空冷凍干燥，得到干燥的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

所述步驟（1）中大豆分離蛋白溶液的質(zhì)量分數(shù)為10%。

所述步驟（2）中氫氧化鈣懸濁液的質(zhì)量分數(shù)為10%。

所述步驟（2）中以底物干基的質(zhì)量計，堿性蛋白酶的加入量為1~2%，中性蛋白酶的加入量為2~4%。

所述步驟（2）中堿性蛋白酶的酶活力為20萬u/g，中性蛋白酶的酶活力為10萬u/g。

所述步驟（4）中的微濾膜的孔徑為0.22μm。

所述步驟（5）中濾液和無水乙醇的體積比為1:9。

所述步驟（4）和步驟（5）中的離心均是在轉(zhuǎn)速為5000r/min的條件下離心10min。

所述步驟（6）中的真空冷凍干燥條件為冷凍溫度-35℃、真空度 30Pa、解吸溫度50℃、冷凍時間24h。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明提供了一種大豆肽-鈣螯合物制備的新方法，將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，即將大豆肽的制備和鈣的螯合由原來的必須首先制備出肽，再加入鈣離子進行肽-鈣螯合的兩步反應(yīng)合并為一步完成，且在制備過程中沒有鈉離子和氯離子的引入，避免了兩步法反應(yīng)中采用氫氧化鈉調(diào)節(jié)大豆蛋白酶解過程中的pH，避免了兩步法所制備的大豆肽中含有較高的鹽分從而需要對大豆肽產(chǎn)物脫鹽的負擔以及鹽分殘留高不易徹底脫除的弊端。另一方面，本專利申請采用一步法利用氫氧化鈣中和大豆蛋白水解產(chǎn)生的酸性基團，保持反應(yīng)溶液處于pH8~10的范圍，以適和堿性蛋白酶保持活性的pH條件；同時，加入的鈣離子可直接和大豆蛋白水解產(chǎn)生的酸性基團發(fā)生螯合，和兩步法相比，一步法具有明顯的節(jié)能降耗效果。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。

圖2為大豆肽螯合鈣的光電子能譜全掃描圖。

圖3為大豆肽螯合鈣中鈣離子的光電子能譜圖。

圖4為檸檬酸脫鈣處理制備的大豆肽的高效液相色譜圖。

圖5為檸檬酸的高效液相色譜圖。

圖6為大豆肽和大豆肽螯合鈣的傅里葉紅外光譜圖。

圖7為大豆肽的核磁共振譜圖。

圖8為大豆肽螯合鈣的核磁共振譜圖。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明做進一步說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限制本發(fā)明的范圍，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員可以根據(jù)上述發(fā)明的內(nèi)容作出一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整。

實施例1

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，本發(fā)明的工藝流程如圖1所示，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g 大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理10min使大豆蛋白變性，然后冷卻至45℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝8，加入1.5%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解 20min，然后加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝6，加入3%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在45℃下繼續(xù)反應(yīng) 20min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：酶解后的反應(yīng)液5000r/min下離心10min，收集上清液，過0.22μm 微濾膜；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后5000r /min 下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物；

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

實施例2

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g 大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理8min使大豆蛋白變性，然后冷卻至50℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝9，加入2%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解 20min，然后加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝7，加入4%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在50℃下繼續(xù)反應(yīng) 20min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：將大豆蛋白水解液在5000r/min的條件下離心10min，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過0.22μm的微濾膜，得到濾液；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后在5000r /min的條件下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物。

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

實施例3

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理10min使大豆蛋白變性，然后冷卻至60℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝10，加入2%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解20min，然后，加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝8，加入4%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在60℃下繼續(xù)反應(yīng)20min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：（4）分離：將大豆蛋白水解液在5000r/min的條件下離心10min，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過0.22μm的微濾膜，得到濾液；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后在5000r /min的條件下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物。

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

實施例4

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理8min使大豆蛋白變性，然后冷卻至35℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝8，加入1%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解30min，然后，加入1%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝6，加入2%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在35℃下繼續(xù)反應(yīng)30min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：將大豆蛋白水解液在5000r/min的條件下離心10min，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過0.22μm的微濾膜，得到濾液；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后在5000r /min的條件下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物。

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

實施例5

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理9min使大豆蛋白變性，然后冷卻至65℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝9，加入2%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解10min，然后，加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝7，加入4%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在65℃下繼續(xù)反應(yīng)10min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：將大豆蛋白水解液在5000r/min的條件下離心10min，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過0.22μm的微濾膜，得到濾液；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后在5000r /min的條件下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物。

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

實施例6

一種大豆肽螯合鈣的制備方法，該制備方法將大豆蛋白的酶水解過程和鈣的螯合反應(yīng)同步進行，具體步驟如下：

（1）原料預處理：稱取10.00g 大豆分離蛋白，加去離子水至100.00g，將配置的溶液攪拌均勻，在95℃浴中處理10min使大豆蛋白變性，然后冷卻至50℃；

（2）酶解：在冷卻后的變性大豆分離蛋白溶液中加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液，維持體系pH＝10，加入1.5%（以底物干基計）的堿性蛋白酶（酶活力，20萬u/g），酶解15min，然后，加入10%（w/w）的氫氧化鈣懸濁液控制反應(yīng)液pH＝8，加入3%（以底物干基計）的中性蛋白酶（酶活力，10萬u/g），在50℃下繼續(xù)反應(yīng)25min；

（3）滅酶：酶解反應(yīng)后的溶液水浴加熱到95℃滅酶10min，快速冷卻到室溫，得到大豆蛋白水解液；

（4）分離：將大豆蛋白水解液在5000r/min的條件下離心10min，得到上清液和沉淀物，其中沉淀物為未反應(yīng)的大豆蛋白，棄去沉淀物，上清液通過0.22μm的微濾膜，得到濾液；

（5）沉淀：收集濾液，加入9倍濾液體積的無水乙醇，沉淀1h，然后在5000r /min的條件下離心10min，棄去上清液，收集沉淀物。

（6）干燥：將沉淀物冷凍干燥24h得到大豆肽螯合鈣產(chǎn)品。

（一）大豆肽螯合鈣中肽含量標準曲線的繪制

用凱氏定氮法測定按照基本條件（大豆分離蛋白濃度10.00%，混合液總重100.00g，加酶量（堿性蛋白酶：中性蛋白酶為1:2）為5%（以底物干基計），反應(yīng)過程中料液pH8.00，反應(yīng)過程中料液溫度45℃，反應(yīng)時間30min。）所制備產(chǎn)品的蛋白質(zhì)含量，將該產(chǎn)品分別配置成蛋白濃度為0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8和3.2g/L的溶液。用雙縮脲法測定其吸光度，作出標準曲線。

（二）大豆肽螯合鈣中鈣含量的測定方法

稱取一定量的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品，將其溶解在去離子水中，取1mL溶液用雙縮脲法測定其中肽含量。另取1mL溶液，用原子吸收法測定沉淀物中鈣含量。

本發(fā)明制備的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品的X射線光電子能譜全掃描如圖2所示，結(jié)果顯示其中含有一定量的鈣。對大豆肽鈣螯合物中鈣的電子能進行分峰軟件的處理結(jié)果如圖3所示。其結(jié)果顯示，大豆肽螯合鈣中的Ca P3/2電子結(jié)合能分別為346.70 v、347.17 ev和347.70ev。根據(jù)國家標準與技術(shù)研究所（NIST）的數(shù)據(jù)和學者研究可知，Ca P3/2電子結(jié)合能在346.7 eV 和347.0 eV之間時，鈣可能以Ca-O形式結(jié)合。Ca P3/2電子結(jié)合能為347.4ev時，鈣可能以Ca-OOCH形式結(jié)合。Ca P3/2電子結(jié)合能為347.7ev時，鈣可能以Ca=O形式結(jié)合。由此推測，本發(fā)明制備的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品中的鈣分別以Ca-O、Ca-OOCH、Ca=O三種結(jié)合形式存在。

為了對本發(fā)明大豆肽螯合鈣產(chǎn)品和未結(jié)合鈣的大豆肽進行傅里葉紅外光譜特征吸收峰及核磁共振氫譜的對比分析，我們對制備的肽-鈣螯合物產(chǎn)品進行檸檬酸脫鈣處理，得到脫除鈣離子的大豆肽樣品。對經(jīng)檸檬酸處理后得到的大豆肽，通過加入無水乙醇除去殘留檸檬酸，利用高效液相色譜法檢測其中是否殘留有檸檬酸，具體步驟如下。

取5g大豆肽螯合鈣產(chǎn)品，加入245g去離子水調(diào)配成2%（w/w）的溶液，加入11mL左右的 1mol/L檸檬酸。此時加入的檸檬酸為過量，可以將肽-鈣螯合物中的鈣全部形成檸檬酸鈣沉淀析出。溶液在65℃下真空濃縮到30ml左右，提高濃度有利于螯合形式的鈣全部形成檸檬酸鈣沉淀析出，微濾膜（0.22μm）過濾，除去檸檬酸鈣沉淀。

取濾液10mL，加入9倍于濾液體積的無水乙醇，5000r/min離心10min，樣品分為固液兩相，沉淀物為脫除鈣離子后的大豆肽，液體部分為乙醇溶液。殘留的檸檬酸存在于乙醇溶液中，無水乙醇洗滌沉淀物3次，去除上清液，即可除去檸檬酸。將該沉淀物冷凍干燥后可以得到脫除鈣離子的大豆肽樣品。該大豆肽樣品的高效液相色譜如圖4所示，而檸檬酸的高效液相色譜如圖5所示。結(jié)果顯示，該大豆肽樣品中未檢出檸檬酸的殘留?；鹧嬖游諜z測大豆肽樣品中的鈣含量≤0.5%。凱氏定氮檢測該大豆肽樣品中肽含量 ≥ 90%。

采用傅里葉紅外光譜對脫除鈣離子后的大豆肽樣品及制備的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品進行分析，如圖6所示。結(jié)果顯示，在特征區(qū)內(nèi)，大豆肽樣品的-NH₂吸收峰為3302cm^-1，而大豆肽螯合鈣的-NH₂吸收峰紅移到3323cm^-1。在指紋區(qū)內(nèi)，大豆肽樣品的C=O吸收峰為1624cm^-1，而大豆肽螯合鈣的C=O吸收峰紅移到1643cm^-1；大豆肽樣品的-COOH吸收峰為1385cm^-1，大豆肽螯合鈣的-COOH吸收峰紅移到1414cm^-1。這說明制備的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品和脫除鈣后的大豆肽樣品為兩種物質(zhì)。大豆肽螯合鈣產(chǎn)品中，鈣和肽分子內(nèi)的-COOH、-NH₂ 發(fā)生了某種結(jié)合。

采用核磁共振對脫除鈣離子后的大豆肽樣品及制備的大豆肽螯合鈣產(chǎn)品進行分析，如圖7和圖8所示。結(jié)果顯示，大豆肽樣品活潑氫的積分面積比值為7.76，大豆肽螯合鈣活潑氫積分面積比值為0.64。表明在大豆肽螯合鈣產(chǎn)品中，由于活潑氫基團和鈣的結(jié)合導致了活潑氫個數(shù)顯著下降。而大豆肽分子中的-COOH和-NH₂基團中含有活潑氫?？梢酝茰y，鈣和大豆肽的螯合反應(yīng)可能發(fā)生在-COOH 和-NH₂等活潑氫基團的位置上。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征以及本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。