本發(fā)明涉及一種降低高血壓、保護高血壓靶器官損害的果汁的制備和應(yīng)用，具體地說，本發(fā)明涉及一種降低高血壓、保護高血壓靶器官損害的果汁的制備及果汁的降壓作用、改善血流動力學(xué)作用、改善血清學(xué)指標作用、保護高血壓靶器官損害作用。

背景技術(shù)：

楊桃(averrhoacarambolal.)，又名五斂子，陽桃，洋桃，三廉子等，系酢漿草科(oxalidaceae)五斂子屬(averrhoa)植物楊桃的果實，主要分布于馬來西亞、印度尼西亞等亞熱帶國家以及我國的廣東、廣西、福建、臺灣、云南等地。其性酸、甘、平，有生津止咳的功效，民間用于風熱咳嗽、咽喉痛、虐母等的治療。楊桃的有效化學(xué)成分包括1-二十三碳烯、亞油酸、1，1，5-三甲基-6-亞丁烯基-4-環(huán)乙烯、六氫番茄烴、β-胡蘿卜素、玉米黃素、葉黃素、維生素c、草酸、枸櫞酸、蘋果酸、蔗糖、果糖、葡萄糖等。本課題組對楊桃進行了大量的藥學(xué)、藥效學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)楊桃根多糖具有較強的體外抗氧化作用及降低血糖作用，能緩解糖尿病小鼠胰島素抵抗、提高胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)；楊桃根醇提物也有降血糖作用，能提高糖尿病小鼠血清中的sod活性、降低mda含量，緩解糖尿病小鼠體質(zhì)量的下降；楊桃根總提取物對糖尿病心肌病大鼠有保護作用；對楊桃根中苯醌類化合物進行了分離鑒定和含量測定，分離得到2個苯醌類化合物2-methoxy-6-nonyl-cyclohexa-2，5-diene-1，4-dione和2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2，5-diene-1，4-dione。本課題組以研究楊桃根居多，對酸楊桃果的研究甚少，且國內(nèi)外尚未見到關(guān)于酸楊桃果汁對高血壓具有降壓作用、改善血流動力學(xué)作用、改善血清學(xué)指標作用、保護高血壓靶器官損害作用的報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種降低高血壓、保護高血壓靶器官損害的果汁的制備方法，本發(fā)明還提供了該果汁的幾種新用途：

1.酸楊桃果汁的降壓作用；

2.酸楊桃果汁的改善血流動力學(xué)作用；

3.酸楊桃果汁的改善血清學(xué)指標作用；

4.酸楊桃果汁的保護高血壓靶器官損害作用。

技術(shù)方案：

1、酸楊桃果汁的制備：稱取酸楊桃果，加水榨成果汁，紗布過濾后，濾液于70℃減壓濃縮，使酸楊桃果汁濃度為1g生藥材/ml。

2、降壓作用的研究：采用一氧化氮合酶抑制劑l-name誘導(dǎo)的高血壓大鼠模型，研究酸楊桃果汁高、低劑量(12ml/kg、6ml/kg)對高血壓大鼠收縮壓、舒張壓、平均壓及心率的影響。

3、改善血流動力學(xué)作用的研究：采用l-name誘導(dǎo)的高血壓大鼠模型，研究酸楊桃果汁對高血壓大鼠左心室收縮壓(lvsp)、左心室舒張末期壓力(lvdep)、左心室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)的影響。

4、改善血清學(xué)指標作用的研究：采用l-name誘導(dǎo)的高血壓大鼠模型，研究酸楊桃果汁對高血壓大鼠血清中sod、hyp、no、tnos水平的影響。

5、保護高血壓靶器官損害作用的研究：高血壓大鼠連續(xù)灌胃給予酸楊桃果汁4周后，摘取大鼠心臟和腎臟，稱重。計算全心質(zhì)量指數(shù)(全心/體重)、左心室質(zhì)量指數(shù)(左心室/體重)、腎臟質(zhì)量指數(shù)(腎臟/體重)。取胸主動脈及心肌組織，制作病理切片。

具體實施方式

稱取酸楊桃果，加水榨成果汁，紗布過濾后，濾液于70℃減壓濃縮，使酸楊桃果汁濃度為1g生藥材/ml。

藥效學(xué)研究

1、酸楊桃果汁的降壓作用

取正常雄性sd大鼠50只，隨機抽取8只作為空白對照組，其余42只用于制備高血壓模型，即大鼠每天灌胃給予0.015g/kg的l-name，空白對照組給予相等容積的生理鹽水，連續(xù)給藥3周，第3周結(jié)束時測定42只大鼠的血壓，隨機選擇收縮壓高于150mmhg(1mmhg＝0.133kpa)的大鼠32只進行降壓研究。將造模成功的32只高血壓大鼠隨機分為模型組、卡托普利組和酸楊桃果汁高、低劑量組，每組8只。各組大鼠連續(xù)給藥干預(yù)4周，即酸楊桃果汁高、低劑量組灌胃給予酸楊桃果汁12ml/kg、6ml/kg，卡托普利組灌胃給予卡托普利10mg/kg，空白組和模型組給予生理鹽水10ml/kg。用alc-nibp無創(chuàng)尾動脈血壓測量分析系統(tǒng)分別測定造模前、造模后、給藥干預(yù)后1周、2周、3周、4周的收縮壓(sbp)、舒張壓(dbp)、平均壓(mbp)和心率(hr)。

結(jié)果顯示，各組灌胃給予l-name3周后，與空白對照組相比收縮壓、舒張壓和平均壓均顯著升高(p＜0.05)，說明造模成功。與模型組相比，高劑量組從給藥干預(yù)后第二周開始出現(xiàn)血壓下降趨勢(p＜0.05)，低劑量組從給藥干預(yù)后第三周開始出現(xiàn)血壓下降趨勢(p＜0.01)。結(jié)果見表1。結(jié)果還顯示，造模成功后，與空白對照組比較各組大鼠的心率明顯下降(p＜0.05)，酸楊桃果汁高、低劑量組從給藥干預(yù)第2周開始心率逐漸回升(p＞0.05)。結(jié)果見表2。

表1酸楊桃果汁對高血壓大鼠血壓的影響

與空白對照組比較，*p＜0.05；與模型組比較，^#p＜0.05，^##p＜0.01

表2酸楊桃果汁對高血壓大鼠心率的影響

與空白對照組比較，*p＜0.05；與模型組比較，^#p＜0.05，^##p＜0.01

2、酸楊桃果汁的改善血流動力學(xué)作用

將32只高血壓模型大鼠隨機分為模型組、卡托普利組和酸楊桃果汁高、低劑量組，每組8只，另取8只正常大鼠作為空白對照組。各組大鼠連續(xù)給藥干預(yù)4周，即酸楊桃果汁高、低劑量組灌胃給予酸楊桃果汁12ml/kg、6ml/kg，卡托普利組灌胃給予卡托普利10mg/kg，空白組和模型組給予生理鹽水10ml/kg。各組給藥4周后，大鼠麻醉，行氣管插管，將大鼠的心室插管與mpa心功能分析系統(tǒng)相連，測量血流動力學(xué)指標：左心室收縮壓(lvsp)，左心室舒張末期壓力(lvdep)，左心室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)，左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)。

結(jié)果顯示，模型組大鼠lvsp，±dp/dtmax較空白對照組有明顯降低(p＜0.05)，lvdep水平明顯升高(p＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。酸楊桃果汁高劑量組與模型組比較，lvsp及±dp/dtmax明顯降低(p＜0.01)，lvdep升高(p＜0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。酸楊桃果汁低劑量組與模型組比較，lvsp及±dp/dtmax明顯降低(p＜0.05orp＜0.01)，lvdep變化不明顯(p＞0.05)?？梢娝釛钐夜哂懈纳聘哐獕捍笫蟮难鲃恿W(xué)的作用，即改善高血壓大鼠左心室的收縮和舒張功能，結(jié)果見表3。

表3酸楊桃果汁對高血壓大鼠血流動力學(xué)的影響

與空白對照組比較，*p＜0.05；與模型組比較，^#p＜0.05，^##p＜0.01

3、酸楊桃果汁對高血壓大鼠血清學(xué)指標的影響

將32只高血壓模型大鼠隨機分為模型組、卡托普利組和酸楊桃果汁高、低劑量組，每組各組8只，另取8只正常大鼠作為空白對照組。各組大鼠連續(xù)給藥干預(yù)4周，即酸楊桃果汁高、低劑量組灌胃給予酸楊桃果汁12ml/kg、6ml/kg，卡托普利組灌胃給予卡托普利10mg/kg，空白組和模型組給予生理鹽水10ml/kg。各組大鼠給藥干預(yù)4周后，于腹主動脈取血5ml，靜置后離心，吸取上層血清，用試劑盒測定其中的羥脯氨酸(hyp)、超氧化物歧化酶(sod)、一氧化氮(no)、總一氧化氮合酶(tnos)水平。結(jié)果顯示，與模型組比較，各給藥組的no、tnos水平均有不同程度的提高(p＜0.05orp＜0.01)，提示酸楊桃果汁能增加no和tnos水平，從而使高血壓大鼠的血管擴張，緩解高血壓；同時，與模型組比較，酸楊桃果汁高劑量組和卡托普利組的hyp水平降低、sod水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)，酸楊桃果汁低劑量組的hyp水平和sod水平變化不明顯(p＞0.05)，提示酸楊桃果汁能保護高血壓大鼠的脂質(zhì)過氧化損傷。結(jié)果見表4。

表4酸楊桃果汁對高血壓大鼠血清學(xué)指標的影響

與空白對照組比較，*p＜0.05；與模型組比較，^#p＜0.05，^##p＜0.01

4、酸楊桃果汁對高血壓大鼠靶器官的保護作用

將32只高血壓模型大鼠隨機分為模型組、卡托普利組和酸楊桃果汁高、低劑量組，每組8只，另取8只正常大鼠作為空白對照組。各組大鼠連續(xù)給藥干預(yù)4周，即酸楊桃果汁高、低劑量組灌胃給予酸楊桃果汁12ml/kg、6ml/kg，卡托普利組灌胃給予卡托普利10mg/kg，空白組和模型組給予生理鹽水10ml/kg。各組大鼠給藥干預(yù)4周后，摘取大鼠心臟、腎臟，4℃生理鹽水洗凈并吸干水分，稱重。剝離腎臟、全心、左心室，稱重。計算全心質(zhì)量指數(shù)(全心/體重)、左心室質(zhì)量指數(shù)(左心室/體重)、腎臟質(zhì)量指數(shù)(腎臟/體重)。取心肌組織及主動脈弓下約5mm長的胸主動脈，制作病理切片。結(jié)果顯示，與模型組比較，卡托普利組、酸楊桃果汁高、低劑量組全心質(zhì)量指數(shù)和左心室質(zhì)量指數(shù)均有明顯降低(p＜0.01)，全腎質(zhì)量指數(shù)也有降低(p＜0.05orp＜0.01)，提示酸楊桃果汁對高血壓大鼠的心、腎等器官具有一定的保護作用，結(jié)果見表5。

由主動脈病理切片可看出，空白組血管壁厚薄均勻，內(nèi)膜較光滑，內(nèi)皮細胞及基底膜完整，外膜疏松結(jié)締組織無沉淀物；模型組動脈壁增厚，內(nèi)膜變厚，內(nèi)皮細胞腫脹受損，中膜平滑肌增生、肥大，膠原纖維和彈力纖維增生，外膜疏松結(jié)締組織有較多沉淀物；酸楊桃果汁高、低劑量組均能不同程度的改善上述病理變化，有效保護主動脈，有效抑制動脈的增厚情況。結(jié)果見圖1。

由心肌組織病理切片可看出，空白組心肌細胞排列整齊，大小基本均衡，呈束狀分布，細胞核清晰，核型整齊，胞漿染色均勻，肌纖維橫紋清晰可見，無細胞肥大或腫脹，未見壞死及炎性細胞浸潤；模型組心肌細胞排列混亂，大小不均，細胞明顯變粗、變長，伴有較多的分支，著色不均，胞核肥大，呈圓形或橢圓形，核深染，部分肌纖維斷裂，肌纖維橫紋模糊甚至消失，可見到壞死及炎性細胞浸潤；酸楊桃果汁高、低劑量組均能不同程度的改善上述病理變化，對心肌組織具有一定的保護作用。結(jié)果見圖2。

表5酸楊桃果汁對高血壓大鼠心臟指數(shù)、腎臟指數(shù)的影響

與空白對照組比較，*p＜0.05；與模型組比較，^#p＜0.05，^##p＜0.01

附圖說明

圖1酸楊桃果汁對高血壓大鼠靶器官胸主動脈的保護作用(大鼠胸主動脈病理切片，he染色，×200)

a空白組，b模型組，c卡托普利組，d酸楊桃果汁高劑量組，e酸楊桃果汁低劑量組

圖2酸楊桃果汁對高血壓大鼠靶器官大鼠心肌組織的保護作用(大鼠心肌組織病理切片，he染色，×200)

a空白組，b模型組，c卡托普利組，d酸楊桃果汁高劑量組，e酸楊桃果汁低劑量組。