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一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法

文檔序號(hào):498990閱讀:1826來(lái)源:國(guó)知局
一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:(1)配制培養(yǎng)基;(2)消毒滅菌;(3)接種;(4)培養(yǎng):將接完種的培養(yǎng)瓶放進(jìn)培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28℃-32℃,培養(yǎng)2-3天后轉(zhuǎn)接1-2次。培養(yǎng)室的墻壁由外到內(nèi)分別是常規(guī)墻壁、保溫隔熱材料和加熱電纜;每10-12個(gè)培養(yǎng)瓶緊靠圍成一個(gè)圓形,在其正上方安裝1個(gè)白熾燈,白熾燈的功率是40W,培養(yǎng)瓶與垂直上方的燈泡距離為10cm。該方法培養(yǎng)出的沼澤紅假單胞菌每瓶菌濃度為5×109個(gè)/mL,濃度高并且很均勻。
【專利說(shuō)明】一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于細(xì)菌的培養(yǎng)方法領(lǐng)域,具體涉及一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法。

【背景技術(shù)】
[0002]光合細(xì)菌(91101:087111:1161:10 13801:61-18)簡(jiǎn)稱?38,是能利用光能和⑶2維持其自養(yǎng)生活的有色細(xì)菌的總稱,也是地球上出現(xiàn)最早、自然界中普遍存在的一種原核生物,能在厭氧光照條件下或好氧黑暗條件下,以光作為能源,利用自然界中的有機(jī)物、氨等作為供養(yǎng)體來(lái)進(jìn)行光合作用的微生物。光合細(xì)菌菌體無(wú)毒,其蛋白質(zhì)含量很高且種類齊全,此外,菌體細(xì)胞內(nèi)還含有豐富的碳素儲(chǔ)存物和聚0 -羥基丁酸、輔酶0、抗病毒物質(zhì)和生長(zhǎng)因子等。
[0003]沼澤紅假單胞菌¢110(101) 8611(181101188屬于光合細(xì)菌的一種,屬于紅螺菌科,紅假單胞菌屬,可作為一種飼料添加劑,在養(yǎng)殖業(yè)有很廣闊的應(yīng)用前景;還可用于凈化水質(zhì)、提高植物耐鹽性、耐鉛性等。但常規(guī)培養(yǎng)出的沼澤紅假單胞菌的濃度不均一,差別較大,因此在沼澤紅假單胞菌的利用方面,操作較繁瑣,加大了利用成本。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明針對(duì)上述不足之處而提供的一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,該方法操作簡(jiǎn)單,且培養(yǎng)出的沼澤紅假單胞菌濃度質(zhì)量一致。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:
[0006]一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
[0007](1)配制培養(yǎng)基
[0008]分別稱取版1(^158、順 4。1158、蛋白胨 158、1妨04 18^2?。??04 1^,5%的溶液100111匕溶于51蒸餾水中,攪拌均勻;
[0009]⑵消毒滅菌
[0010]將攪拌均勻的培養(yǎng)基裝入不銹鋼桶中,用臭氧發(fā)生器進(jìn)行消毒滅菌,消毒10-??!,臭氧的使用量為18 ;
[0011]⑶接種
[0012]取活化后的沼澤紅假單胞菌母液3-54置于500此三角瓶中,然后向培養(yǎng)瓶中添加滅過(guò)菌的培養(yǎng)基至瓶頸,整個(gè)接種過(guò)程所用器材都滅過(guò)菌;
[0013]⑷培養(yǎng)
[0014]將接完種的培養(yǎng)瓶放進(jìn)培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為281: -32 00,培養(yǎng)2-3天后轉(zhuǎn)接1-2次。
[0015]為了保證培養(yǎng)室的溫度恒定,進(jìn)一步地,培養(yǎng)室的墻壁設(shè)計(jì)為多層夾壁,由外到內(nèi)分別是常規(guī)墻壁、保溫隔熱材料和加熱電纜。
[0016]為了給沼澤紅假單胞菌提供均衡的光照環(huán)境,進(jìn)一步地,培養(yǎng)架上的培養(yǎng)瓶每10-12個(gè)緊靠圍成一個(gè)圓形,在其正上方安裝1個(gè)白熾燈,白熾燈的功率是401,培養(yǎng)瓶與垂直上方的燈泡距離為10(31110
[0017]本發(fā)明提供的一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,有以下有益效果:
[0018](1)培養(yǎng)室為多層夾壁,由外到內(nèi)分別是常規(guī)墻壁、保溫隔熱材料和加熱電纜,同時(shí)室內(nèi)還安裝有溫度控制器、排氣扇、軸流風(fēng)機(jī)等,保證室內(nèi)溫度恒定且均勻,為沼澤紅假單胞菌的生長(zhǎng)提供最佳的生長(zhǎng)環(huán)境。
[0019](2)培養(yǎng)架上的培養(yǎng)瓶每10-12個(gè)緊靠圍成一個(gè)圓形,在其正上方安裝1個(gè)白熾燈,白熾燈的功率是401,培養(yǎng)瓶與垂直上方的燈泡距離為10挪,此設(shè)計(jì)為沼澤紅假單胞菌提高了均勻的光強(qiáng)度,使得沼澤紅假單胞菌生長(zhǎng)濃度均衡。

【具體實(shí)施方式】
[0020]實(shí)施例1
[0021]一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
[0022](1)配制培養(yǎng)基
[0023]分別稱取版1(^158、順 4。1 58、0!3 ⑶ 0% 158、蛋白胨 158、1妨04 18^2?。??04 1^,5%的溶液100111匕溶于51蒸餾水中,攪拌均勻;
[0024](2)消毒滅菌
[0025]將攪拌均勻的培養(yǎng)基裝入不銹鋼桶中,用臭氧發(fā)生器進(jìn)行消毒滅菌,消毒10-??!,臭氧的使用量為18,此過(guò)程可使培養(yǎng)基完全滅菌,以防沼澤紅假單胞菌受污染;
[0026](3)接種
[0027]取活化后的沼澤紅假單胞菌母液3-54置于5004三角瓶中,然后向培養(yǎng)瓶中添加滅過(guò)菌的培養(yǎng)基至瓶頸,整個(gè)接種過(guò)程所用器材都滅過(guò)菌;
[0028](4)培養(yǎng)
[0029]將接完種的培養(yǎng)瓶放進(jìn)培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為281: -32 00,培養(yǎng)2-3天后,菌液變紅,然后轉(zhuǎn)接1-2次,沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)期間要經(jīng)常觀察室內(nèi)溫度和光照情況。
[0030]為了保證培養(yǎng)室的溫度恒定,培養(yǎng)室墻壁設(shè)計(jì)為多層夾壁,由外到內(nèi)分別是常規(guī)墻壁、保溫隔熱材料和加熱電纜,同時(shí)室內(nèi)還安裝有溫度控制器、排氣扇、軸流風(fēng)機(jī)等,保證室內(nèi)溫度恒定且均勻,為沼澤紅假單胞菌的生長(zhǎng)提供最佳的生長(zhǎng)環(huán)境。
[0031]為了給沼澤紅假單胞菌提供均衡的光照環(huán)境,培養(yǎng)架上的培養(yǎng)瓶每10-12個(gè)緊靠圍成一個(gè)圓形,在其正上方安裝1個(gè)白熾燈,白熾燈的功率是401,培養(yǎng)瓶與垂直上方的燈泡距離為10(3111。
[0032]本發(fā)明培養(yǎng)沼澤紅假單胞菌的條件是恒溫,光照厭氧,培養(yǎng)時(shí)間為3-6天,培養(yǎng)結(jié)束后,隨機(jī)檢測(cè)200瓶菌液,其中有1瓶污染雜菌,平均每瓶菌液濃度為5 X 109個(gè) ?匕每瓶菌液濃度差在誤差范圍之內(nèi),由此可見(jiàn),使用本發(fā)明培養(yǎng)的沼澤紅假單胞菌濃度高并且很均勻。
【權(quán)利要求】
1.一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)配制培養(yǎng)基 分別稱取 NaCl 5g、NH4Cl 5g、CH3COONa 15g、蛋白胨 15g、MgSO4Ig, K2HPO4Ig'5 % 的NaHCO3溶液100mL,溶于5L蒸餾水中,攪拌均勻; (2)消毒滅菌 將攪拌均勻的培養(yǎng)基裝入不銹鋼桶中,用臭氧發(fā)生器進(jìn)行消毒滅菌,消毒lOmin,臭氧的使用量為Ig ; (3)接種 取活化后的沼澤紅假單胞菌母液3-5mL置于500mL三角瓶中,然后向培養(yǎng)瓶中添加滅過(guò)菌的培養(yǎng)基至瓶頸,整個(gè)接種過(guò)程所用器材都滅過(guò)菌; (4)培養(yǎng) 將接完種的培養(yǎng)瓶放進(jìn)培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28 °C -32 °C,培養(yǎng)2-3天后轉(zhuǎn)接1-2次。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,其特征在于,培養(yǎng)室的墻壁由外到內(nèi)分別是常規(guī)墻壁、保溫隔熱材料和加熱電纜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)方法,其特征在于,每10-12個(gè)培養(yǎng)瓶緊靠圍成一個(gè)圓形,在其正上方安裝I個(gè)白熾燈,白熾燈的功率是40W,培養(yǎng)瓶與垂直上方的燈泡距離為10cm。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK104450588SQ201410816451
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月24日
【發(fā)明者】郭川 申請(qǐng)人:四川省星川生物科技有限公司
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