一種b群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為：牛肉浸出液1000ml，胰蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g,500g/L的右旋葡萄糖溶液25-35ml，NaCl 2-12g，Na2HPO40.5-4.5g，Na2CO31-10g，慶大霉素3-30mg，萘啶酮酸3-30mg。本發(fā)明提供的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基能夠抑制其他細(xì)菌的生長，而B群鏈球菌是正常生長，便于后續(xù)的鑒定檢測，提高檢測的正確率和效率。本發(fā)明的選擇性培養(yǎng)基使用方法操作簡單。
【專利說明】一種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，尤其涉及一種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基。

【背景技術(shù)】
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[0002]B群鏈球菌(group B strep tococcus, GBS)又名無乳鏈球菌，是圍生期女性泌尿生殖道感染和新生兒期重癥肺炎、敗血癥和腦膜炎的常見病原菌。新生兒的GBS感染臨床進(jìn)展迅速，具有發(fā)病迅速、病死率高的特點(diǎn)，是新生兒的主要死亡原因，已引起世界范圍內(nèi)廣大學(xué)者的深切關(guān)注。細(xì)菌培養(yǎng)是檢測GBS的標(biāo)準(zhǔn)方法，但此菌營養(yǎng)要求較高，培養(yǎng)鑒定耗時(shí)較長(至少2d)且陽性率較低。如何在感染早期快速、準(zhǔn)確、靈敏地檢測B群鏈球菌成為研究的熱點(diǎn)。
[0003]目前，在對(duì)孕產(chǎn)婦是否攜帶GBS進(jìn)行篩查的時(shí)候主要有兩種方法，第一種是使用檢測試劑盒進(jìn)行快速診斷。但是通過檢測試劑盒進(jìn)行快速診斷對(duì)操作的要求和成本均比較高。第二種是目前最常見的方法，是利用培養(yǎng)基對(duì)取得的樣品進(jìn)行培養(yǎng)，然后通過直接觀察法、革蘭氏染色法、觸酶試驗(yàn)、協(xié)同溶血(CAMP)試驗(yàn)等判斷是否感染GBS。但是孕婦生殖道和直腸有多種細(xì)菌存在，而目前的培養(yǎng)基不能有效抑制GBS以外的其他菌的生長，這些細(xì)菌生長速度快，常使GBS菌生長受到抑制，造成GBS菌漏檢。
[0004]萘啶酮酸為抗細(xì)菌性合成化合物之一，具有寬廣的抗菌譜，特別對(duì)革蘭氏陰性菌有很強(qiáng)的效力，其作用機(jī)制是抑制細(xì)菌脫氧核苷酸的合成。
[0005]慶大霉素是一種氨基糖苷類抗生素，對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、克雷白桿菌、奇異變形桿菌、某些吲哚陽性變形桿菌、綠膿桿菌、某些奈瑟菌、某些無色素沙雷桿菌和志賀菌等革蘭陰性菌有抗菌作用，同時(shí)也對(duì)革蘭氏陽性菌中的金黃色葡萄球菌(包括產(chǎn)內(nèi)酰胺酶株)有抗菌作用。
[0006]氟康唑能夠高度選擇抑制真菌的細(xì)胞色素Ρ-450，使菌細(xì)胞損失正常的甾醇，而14 α -甲基留醇則在菌細(xì)胞中蓄積，起抑菌作用，對(duì)新型隱球菌、白色念珠菌及其他念珠菌、黃曲菌、煙曲菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌、莢膜組織胞漿菌等有抗菌作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供了一種能夠擴(kuò)增B群鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能夠抑制其他細(xì)菌的生長，如果樣品中存在B群鏈球菌則可正常生長為優(yōu)勢菌，便于后續(xù)的鑒定檢測，提高檢測的正確率和效率。
[0008]—種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液100ml,胰蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g，500g/L的右旋葡萄糖溶液25_35ml，NaCl 2~12g,Na2HPO40.5-4.5g，Na2CO31-1Og,慶大霉素 3_30mg，萘啶酮酸 3_30mg。
[0009]—種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液1000ml,胰蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，500g/L的右旋葡萄糖溶液30ml，NaCl 7g，Na2HP043g, Na2C035g，慶大霉素20mg，萘啶酮酸21mg。
[0010]所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基還包含終濃度為5_50mg/L的氟康唑。
[0011]所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的氟康唑濃度為10_30mg/L。
[0012]B群鏈球菌培養(yǎng)基制備方法:按量稱取各組份，將胰蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl，Na2HPO4, Na2CO3溶于牛肉浸出液中，調(diào)整pH值至7.7±0.1，滅菌后再在前述溶液中加入滅菌的右旋葡萄糖溶液。將樣品接種于B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5% -8%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)16-24小時(shí)。
[0013]本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基能夠抑制其他細(xì)菌的生長，而B群鏈球菌是正常生長，便于后續(xù)的鑒定檢測，提高檢測的正確率和效率。本發(fā)明的選擇性培養(yǎng)基使用方法操作簡單。

【具體實(shí)施方式】
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[0014]為了加深對(duì)本發(fā)明的理解，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，該實(shí)施例僅用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。
[0015]一、B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的制備。
[0016]實(shí)施例一:
[0017]—種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液1000ml,胰蛋白胨15g，酵母浸出粉 3g，500g/L 的右旋葡萄糖溶液 25ml，NaCl 2g，Na2HPO40.5g，Na2CO3Ig,慶大霉素3mg，萘啶酮酸3mg。
[0018]所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基還包含終濃度為5mg/L的氟康唑。
[0019]一種B群鏈球菌培養(yǎng)基制備方法:按量稱取各組份，將胰蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl, Na2HPO4, Na2CO3溶于牛肉浸出液中，調(diào)整pH值至7.7，滅菌后再在前述溶液中加入滅菌的右旋葡萄糖溶液。將樣品接種于B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)24小時(shí)。
[0020]實(shí)施例二:
[0021]—種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液1000ml,胰蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，500g/L的右旋葡萄糖溶液30ml，NaCl lg, Na2HP043g, Na2C035g，慶大霉素20mg，萘啶酮酸21mg。
[0022]所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的氟康唑濃度為20mg/L。
[0023]一種B群鏈球菌培養(yǎng)基制備方法:按量稱取各組份，將胰蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl, Na2HPO4, Na2CO3溶于牛肉浸出液中，調(diào)整pH值至7.7，滅菌后再在前述溶液中加入滅菌的右旋葡萄糖溶液。將樣品接種于B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)24小時(shí)。
[0024]實(shí)施例三:
[0025]—種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液1000ml,胰蛋白胨25g，酵母浸出粉 5g，500g/L 的右旋葡萄糖溶液 35ml，NaCl 12g，Na2HP044.5g，Na2CO31g,慶大霉素30mg，萘唳酮酸30mg。
[0026]所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的氟康唑濃度為30mg/L。
[0027]B群鏈球菌培養(yǎng)基制備方法:按量稱取各組份，將胰蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl,Na2HPO4, Na2CO3溶于牛肉浸出液中，調(diào)整pH值至7.7，滅菌后再在前述溶液中加入滅菌的右旋葡萄糖溶液。將樣品接種于B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)24小時(shí)。
[0028]二、B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基的比較試驗(yàn)。
[0029]本實(shí)驗(yàn)中所使用的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基與實(shí)施例2中所配制的培養(yǎng)基相同，所用普通培養(yǎng)基為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(購于蘇州朗易生物醫(yī)藥有限公司)。
[0030]B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基與營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基效果比較試驗(yàn)。
[0031]取B群鏈球菌懸液、金黃色葡萄球菌懸液、大腸桿菌懸液(三種菌懸液的濃度均在104-105cfu/ml)各Iml混勻，吸取該菌懸液100 μ L接種到B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)24小時(shí)。鑒定試驗(yàn)結(jié)果表明存活的細(xì)菌均為B群鏈球菌。
[0032]取B群鏈球菌懸液、金黃色葡萄球菌懸液、大腸桿菌懸液(三種菌懸液的濃度均在104-105cfu/ml)各Iml混勻，吸取該菌懸液100 μ L接種到營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)24小時(shí)。鑒定試驗(yàn)結(jié)果表明存活的細(xì)菌大部分為金黃色葡萄球菌與大腸桿菌、少部分為B群鏈球菌。
[0033]結(jié)果表明本發(fā)明的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基能選擇性殺滅或抑制雜菌生長，而不影響B(tài)群鏈球菌的生長。
【權(quán)利要求】
1.一種B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基,其特征在于,該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液100ml,胰蛋白胨15_25g，酵母浸出粉3-5g，500g/L的右旋葡萄糖溶液25_35ml，NaCl 2~12g,Na2HPO4 0.5-4.5g，Na2CO31-1Og,慶大霉素 3_30mg，萘啶酮酸 3_30mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的B群鏈球菌性培養(yǎng)基，其特征在于，該培養(yǎng)基組份為:牛肉浸出液1000ml，胰蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，500g/L的右旋葡萄糖溶液30ml，NaCl 7g，Na2HPO4 3g, Na2CO3 5g，慶大霉素 20mg，萘啶酮酸 21mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基，其特征在于:所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基還包含終濃度為5-50mg/L的氟康唑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基，其特征在于:所述B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的氟康唑濃度為10-30mg/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4所述的任一B群鏈球菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，按量稱取各組份，將胰蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl，Na2HPO4, Na2CO3溶于牛肉浸出液中，調(diào)整pH值至7.7±0.1，滅菌后再在前述溶液中加入滅菌的右旋葡萄糖溶液。將樣品接種于B群鏈球菌選擇性培養(yǎng)基中，于5% -8%二氧化碳培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)16-25小時(shí)。
【文檔編號(hào)】C12R1/46GK104450861SQ201410707063
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月27日
【發(fā)明者】金京勛 申請(qǐng)人:蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司