一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基及其制備方法
【專利摘要】一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基及其制備方法，涉及一種適合于培養(yǎng)反硝化聚磷菌的微生物培養(yǎng)基，可顯著提高菌體生物量和多聚磷酸鹽顆粒產量，該培養(yǎng)基命名為DNJPU。將(NH4)2SO4、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2、檸檬酸鈉、NaCl、蔗糖、瓊脂粉加入蒸餾水中定容至1L，滅菌后即得同步脫氮除磷菌的培養(yǎng)基。其可應用于反硝化聚磷菌的分離鑒定及菌種培養(yǎng)，克服了牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基保質期短、反硝化聚磷菌專性篩選目標性差的缺點。
CGMCC NO.9168
2014.05.16
【專利說明】一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基及其制備方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基及其制備方法，屬于污水處理技術領 域。

【背景技術】
[0002] 地表水環(huán)境污染問題之一是水體富營養(yǎng)化，藻類大量繁殖引發(fā)淡水區(qū)域"水華"和 海域的"赤潮"現象。生態(tài)學中的"利比希（Liebig)最小因子定律"表明，水體中較高濃度 的氮、磷含量是引發(fā)地表水體富營養(yǎng)化的主要環(huán)境因素，當總磷濃度超過〇. lmg/L(如果磷 是限制因素）或總氮濃度超過〇.3mg/L(如果氮是限制因素）時，藻類會過量生長，引發(fā)江 河、湖塘、近海的富營養(yǎng)化。
[0003] 我國地表水體絕大部分氮、磷污染物來源于城鎮(zhèn)生活污水和工業(yè)廢水的排放。據 統(tǒng)計，近5年來我國每年接近有600億噸的攜帶有氮、磷污染物的廢水排放至自然水體中。 雖然我國《城鎮(zhèn)污水處理廠排放標準（GB 18918-2002)》與各行業(yè)排放標準均對總氮（TN) 排放濃度有要求，但環(huán)保部門對污水處理廠出水指標仍以化學需氧量（COD)、總磷（TP)、氨 氮（NH 4+-N)作為總量控制指標，從而造成出水NH/-N達標、而TN超標成為普遍現象。從技 術上來說，主要是由于NH/-N變成氮氣（N 2)的過程是先通過好氧硝化途徑將NH4+-N最終轉 化為NCV-N，然后再通過缺氧反硝化途徑使NCV-N變成N 2去除。所以廢水中的NH/-N指標 雖然低了，但氮元素仍然以NCV-N的形式存在于水中，污水中的TN含量依然較高，其中大部 分為NCV-N，致使污水處理廠出水TN達不到排放標準。而藻類生長正好是先需攝取NCV，并 非是NH/-N，水體中高濃度的NCV-N更易促使藻類瘋長。因此，對廢水中NCV-N的去除已逐 漸引起人們的關注。
[0004] 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為微生物培養(yǎng)基質，因其對菌種培養(yǎng)具有普遍適用性，所 以在菌種培養(yǎng)和篩選被廣泛使用。但牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基成分中的牛肉膏和蛋白胨的保 質期短，而且保存條件較為苛刻，一旦沒有控制好保存條件致使培養(yǎng)基變質就會造成菌種 的丟失，即使及時的轉接菌種至新鮮的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，但會由于菌株傳代次數過 多而降低菌株內在性能，這些都限制了反硝化聚磷菌的培養(yǎng)、分離以及應用?！吨袊h(huán)境科 學》2011年第31卷第6期958-964頁報道了劉暉等利用活性污泥與生物膜復合系統(tǒng)富 集反硝化聚磷菌并獲得具有脫氮聚磷能力的菌種YB(Paracoccus denitrificans)，其聚磷 率與脫氮率均達到90%以上，所用培養(yǎng)液為無水乙酸鈉5. 0g，KH2PO4O. 025g，MgSO4 ? 7H20 0? 5g，CaCl2 ? H2O 0? 2g，（NH4)2S042. 0g，微量元素 I. OmL，蒸餾水 lOOOmL，pH 7. 0?！栋不辙r 業(yè)科學》2011年第39卷第18期11040-11046頁報道了劉艷萍等采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng) 基進行平板分離技術，從城市河道底泥中篩得3株反硝化聚磷菌DPB-A511 (Dechloromonas aromatic)、DPB-A9(Candidatus accumulibacter phosphatis)和 DPB-A10 (Bacillus pumilus)，其聚磷率與脫氮率均達到50%，所用培養(yǎng)基是牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其組成為： 牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，NaC15g，瓊脂 15g，水 1000ml，pH7. 0。
[0005] 因此，本發(fā)明制備的一種適合于培養(yǎng)反硝化聚磷菌的培養(yǎng)基（命名為DNJPU)，利 用該培養(yǎng)基可以快速高效的從污泥中篩選分離出反硝化聚磷菌。


【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種適合于反硝化聚磷菌的培養(yǎng)基（命名為DNJPU)配方， 該培養(yǎng)基可以替代反硝化聚磷菌篩選以及培養(yǎng)用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。
[0007] 本發(fā)明的另一目的在于提供DNJPU培養(yǎng)基的制備方法。
[0008] 所述DNJPU培養(yǎng)基組成為，在IL的蒸餾水中含有：
[0009]

【權利要求】
1. 一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基命名為DNJPU，其特征在于所述同步反硝 化除磷菌培養(yǎng)基組成是在1L的蒸餾水中含有： (NH4) 2S04 2.48?3,03 g; Na2HP04 27.54~33.66 g； KH2P〇4 2.7?3.3 g; MgS04?7H20 0,225 ?0,275 g; CaCl2 0.225?0,275 g; 朽't#·鈉 3.6?4.4g; NaCl 2.25 ?2.75 g; 蔗糖 0.009?0.01】g; 瓊船粉（制平板成斜而時添加） 1卜22g',
2. 如權利要求1所述的一種聚磷菌培養(yǎng)基DNJPU，其特征在于DNJPU培養(yǎng)基最佳組成 為，在1L的蒸餾水中含有： (NH4) 2SO4 2,75 g； Na.HPOj 30.6 g； KH2P〇4 3g； MgS04*7H2〇 0.25 g； CaCI： 0.25 g； 檸樣酸鈉 4.0 g; NaCl 2.5 g； 蔗糖 0,01 g; 瓊脂粉（.制平板或斜面時添III) 20go
3. 如權利要求1所述的一種同步反硝化除磷菌培養(yǎng)基DNJPU的制備方法，其特征是： 將（NH4)2S0 4、Na2HP04、KH2P04、MgS0 4 · 7H20、CaCl2、檸檬酸鈉、NaCl、蔗糖、瓊脂粉加入蒸餾水 中定容至1L，滅菌后即得聚磷菌培養(yǎng)基DNJPU。
【文檔編號】C12N1/20GK104293698SQ201410476594
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月17日 優(yōu)先權日:2014年9月17日
【發(fā)明者】張文藝, 陳晶, 周新程, 馮國勇, 胡林潮, 姚立榮 申請人:常州大學