對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法及其專(zhuān)用裝置制造方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種對(duì)由羅布麻柵銹菌所引起的羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法以及該方法所專(zhuān)用的裝置，主要通過(guò)載體制作、取樣裝置準(zhǔn)備、孢子的取樣捕捉、離體培養(yǎng)、致病力測(cè)算步驟實(shí)現(xiàn)的?？奢^為準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)出大田種植羅布麻的柵銹病發(fā)生情況，進(jìn)而有效地制訂出防治預(yù)案。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明解決了在測(cè)定病原菌數(shù)量的同時(shí)，能有效地測(cè)定具有侵染能力的病原菌數(shù)量，特別是解決了在空氣微生物取樣器完成取樣的羅布麻離體葉片培養(yǎng)時(shí)易受污染腐爛的問(wèn)題，適合于大田商業(yè)化種植羅布麻的柵銹病預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法及其專(zhuān)用裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物病預(yù)防范疇，主要涉及對(duì)羅布麻重要病害銹病進(jìn)行檢測(cè)預(yù)報(bào)的技術(shù)，特別是一種對(duì)由羅布麻柵銹菌所引起的羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法以及該方法所專(zhuān)用的裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著羅布麻種植面積和產(chǎn)量日益擴(kuò)大，柵銹病已經(jīng)成為羅布麻種植中的主要病害，對(duì)羅布麻生長(zhǎng)和質(zhì)量造成重要的影響，特別是給生產(chǎn)帶來(lái)極大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重阻礙了羅布麻 產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
[0003]羅布麻柵銹菌夏孢子是柵銹病發(fā)生發(fā)展的侵染源，因此，準(zhǔn)確地測(cè)定大田空氣夏孢子數(shù)量，特別是致病力，能夠?yàn)闇?zhǔn)確及時(shí)地為預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)羅布麻銹病提供依據(jù)，降低銹病對(duì)羅布麻生產(chǎn)造成的損失。
[0004]目前主要通過(guò)空氣微生物采樣器進(jìn)行采樣，然后測(cè)定顯微鏡下可分辨或在培養(yǎng)基中可培養(yǎng)的目標(biāo)病原菌數(shù)量，再根據(jù)該數(shù)值對(duì)植物病害及其發(fā)展進(jìn)行預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)。
[0005]由于羅布麻柵銹菌等病原菌在自然環(huán)境中隨時(shí)間的推移，活性會(huì)顯著降低甚至完全喪失。因此，只測(cè)定病原菌數(shù)量并不能反映其實(shí)際的致病能力，因而常常造成誤報(bào)。
[0006]而且，目前的采樣方法是直接將離體葉片放在水中或保濕物上，再通過(guò)空氣微生物采樣器進(jìn)行采樣。由于接種柵銹菌的離體葉片需要一定的濕度環(huán)境才能侵染、顯癥，而大田采樣的羅布麻葉片容易被其它雜菌污染造成葉片快速腐爛，因此影響侵染及產(chǎn)孢效果，最終使整個(gè)檢測(cè)與實(shí)際相謬甚遠(yuǎn)，也成為造成誤報(bào)的重要原因。
[0007]因此需要準(zhǔn)確有效地進(jìn)行采樣，有效地測(cè)定出具有侵染能力的病原菌數(shù)量，才能準(zhǔn)確有效地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)羅布麻銹病的發(fā)生和發(fā)展，特別是羅布麻柵銹菌夏孢子致病力的強(qiáng)弱，準(zhǔn)確地做出預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)和防治預(yù)案，進(jìn)而避免或降低銹病對(duì)羅布麻生產(chǎn)造成損失。
[0008]因此，一種能夠準(zhǔn)確有效地進(jìn)行采樣，特別是能有效地測(cè)定出具有侵染能力的病原菌數(shù)量，進(jìn)而準(zhǔn)確有效地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)羅布麻銹病，如對(duì)由羅布麻柵銹菌所引起的羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法就應(yīng)運(yùn)而生。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的在于提供一種能夠準(zhǔn)確有效地進(jìn)行采樣，能有效地測(cè)定出具有侵染能力的病原菌數(shù)量的方法及其專(zhuān)用裝置，進(jìn)而準(zhǔn)確有效地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)羅布麻銹病，特別是對(duì)由羅布麻柵銹菌所引起的羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)，制訂出有效的防治預(yù)案，保證羅布麻種植的高產(chǎn)、可持續(xù)性和羅布麻種植產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。
[0010]本發(fā)明的目的主要通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)的:載體制作，取樣裝置準(zhǔn)備，孢子的取樣捕捉，離體培養(yǎng)，致病力測(cè)算。具體操作過(guò)程如下:
載體制作:在無(wú)菌環(huán)境中培育羅布麻植株并取其葉片作為捕捉載體。
[0011]a、培養(yǎng)基制作:選擇市售的蛭石充分滅菌后作為培養(yǎng)基。[0012]b、催芽:將羅布麻種子，用濃度為0.1~0.5%次氯酸鈉溶液消毒3~5 min，用紗布過(guò)濾后再用無(wú)菌水沖洗3~5次，然后將種子在38~42°C的水浴鍋中催芽12~15h，待種子芽苞出現(xiàn)露白，倒去水備用。
[0013]所述的無(wú)菌水最好為濃度為80~IOOppm的苯駢咪唑溶液。
[0014]C、定植:將催芽后的種子于10 h內(nèi)在所述培養(yǎng)基中定植,一般在5~10 h內(nèi)定植。
[0015]d、育苗:當(dāng)植株生長(zhǎng)到3輪以上葉片即可。
[0016]取樣裝置準(zhǔn)備:在專(zhuān)用的取樣裝置中安放取樣載體，取樣載體為載玻片和羅布麻葉片。
[0017]a、取樣裝置的準(zhǔn)備:用上部開(kāi)口并設(shè)有蓋的盒體，在盒體內(nèi)設(shè)置一塊載玻片和一塊保濕體，所述載玻片為一矩形的片狀體并通過(guò)不干膠或粘性硅膠一類(lèi)的物體粘連于盒體的底部，同時(shí)，所述保濕體與載玻片并列安放在盒體的底部。
[0018]所述的盒體可以為為圓形或矩形中的一種，盒體直徑或邊長(zhǎng)在9~15cm，高2~5cm為好。
[0019]b、制作孢子捕捉玻片:在載玻片的距上下緣10~15mm之間的區(qū)域內(nèi)均勻涂抹一層凡士林作為孢子捕捉玻片。
[0020]C、制作孢子捕捉葉片:取所培育的羅布麻植株頂部向下第3~5輪處的健康葉片作為孢子捕捉葉片，將選取的羅布麻葉片葉背向上安置于保濕體上，羅布麻葉片的葉梗處壓蓋小塊脫脂棉，用膠帶沿葉尖上緣0.5~Icm處將保濕體和葉片粘緊，同樣用膠帶將葉片下端壓蓋的脫脂棉粘緊，將取樣裝置直立，向保濕體上緣注無(wú)菌水，至下緣出現(xiàn)滴水為止，蓋上蓋保存即可。
[0021]取樣:將安放了取樣載體的取樣裝置置于大田中進(jìn)行取樣。
[0022]a、設(shè)置取樣點(diǎn):選擇取樣點(diǎn)后，在銹病發(fā)生前開(kāi)始取樣。
[0023]b、安放取樣裝置:使用定容式空氣微生物取樣器，固定在距地面高度為30~50cm支架上。
[0024]C、安裝取樣裝置:將安放了制作孢子捕捉玻片和制作孢子捕捉葉片的取樣裝置安放在定容式空氣微生物取樣器內(nèi)，取樣時(shí)間為每天8~10點(diǎn)開(kāi)始取樣，下午I~3點(diǎn)和傍晚7~9點(diǎn)各換取一次取樣裝置，雨天不取樣。
[0025]上述的取樣最好每次設(shè)置10~12個(gè)循環(huán)，即每個(gè)取樣器進(jìn)行一次取樣按以下過(guò)程進(jìn)行取樣:每取樣80~120L空氣為一個(gè)循環(huán)，在間隔15~20min后再開(kāi)始下一個(gè)循環(huán)。
[0026]上述的取樣最好按照病害發(fā)生狀況，在病害發(fā)生初期每個(gè)循環(huán)取樣100~120L空氣，病害發(fā)生中期每個(gè)循環(huán)為90~100L空氣，病害發(fā)生盛期每個(gè)循環(huán)為80~90L空氣，病害發(fā)生末期為90~100L空氣。
[0027]d、統(tǒng)計(jì)載玻片取樣孢子數(shù):將取樣完畢的取樣裝置蓋上蓋子，帶回室內(nèi)，將載玻片取下，置于存貯盒中保存30天后，在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)夏孢子數(shù)。
[0028]離體培養(yǎng):將取樣后的孢子捕捉葉片進(jìn)行離體培養(yǎng)。
[0029]a、培養(yǎng)裝置:用上部開(kāi)口并設(shè)有蓋的盒體作為培養(yǎng)皿，在盒體底部設(shè)置呈柵欄狀排列的條狀體作為襯底。
[0030]所述條狀體最好距盒體底部0.8~Icm處呈架空狀?？刹捎门c條狀體縱向的支撐條架空，也可采取將條狀體兩端固定于盒體側(cè)邊的方式架空。
[0031]所述的盒體可以為圓形或矩形中的一種，盒體直徑或邊長(zhǎng)在9~15cm,高2~5cm為好。
[0032]b、離體培養(yǎng):將取樣后的羅布麻葉片的放置培養(yǎng)裝置的襯底上，葉片方向與條狀體方向縱向相交，最好呈垂直，葉梗部用脫脂棉包裹并用條形濾紙覆蓋，條形濾紙至少有一處端部與培養(yǎng)裝置底部接觸，然后向培養(yǎng)裝置中加無(wú)菌水至與襯底平齊，再向?yàn)V紙滴加用無(wú)菌水配置的濃度為80~IOOppm的苯駢咪唑溶液,至有水滴出現(xiàn)為止,用噴壺向葉面均勻噴灑無(wú)菌水2~3次，蓋上培養(yǎng)裝置上蓋后置于培養(yǎng)箱中20~23°C下培養(yǎng)8~10天，并按10~12 h光暗交替，光照強(qiáng)度8000~12000LUX。
[0033]之后進(jìn)行致病力測(cè)算。
[0034]a、統(tǒng)計(jì)致病孢子數(shù):培養(yǎng)8~10天后統(tǒng)計(jì)夏孢子堆數(shù)，使用方格紙或掃描儀計(jì)算葉面積。
[0035]b、致病力計(jì)算:用以下公式進(jìn)行致病力計(jì)算:
總孢子量:SI (個(gè) / 升)=(SI *Al/al)/V；
致病孢子量:S2 (個(gè)/升)=(S2*Al/a2)/V;
致病力指數(shù):S2/Sl=(al*S2)/(a2*Sl)。
[0036] 上述參數(shù)定義為:A1取樣裝置底面積；al載玻片涂抹凡士林區(qū)域面積；a2葉片面積；S1載玻片捕捉到的夏孢子數(shù)；S2葉片夏孢子堆數(shù)；S1每日單位體積空氣中夏孢子數(shù)；S2每日單位體積空氣中具致病力的夏孢子數(shù)；V空氣取樣體積。
[0037]根據(jù)上述致病力指數(shù)即可較為準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)出大田種植羅布麻的柵銹病發(fā)生情況，進(jìn)而有效地制訂出防治預(yù)案。
[0038]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明解決了在測(cè)定病原菌數(shù)量的同時(shí)，能有效地測(cè)定具有侵染能力的病原菌數(shù)量，特別是解決了在空氣微生物取樣器完成取樣的羅布麻離體葉片培養(yǎng)時(shí)易受污染腐爛的問(wèn)題，適合于大田商業(yè)化種植羅布麻的柵銹病預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0039]圖1為羅布麻柵銹菌夏孢子專(zhuān)用取樣裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0040]圖2為圖1A — A剖面的結(jié)構(gòu)示意圖
圖3為羅布麻柵銹菌夏孢子專(zhuān)用培養(yǎng)裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0041]圖4為圖3B — B剖面的結(jié)構(gòu)示意圖
圖示中:11為盒體，12為保濕體，13為載玻片，14為羅布麻葉片，15為膠帶，16為脫脂棉，17為不干膠，21為培養(yǎng)皿，22為襯底，23為支撐條，24為濾紙。
【具體實(shí)施方式】
[0042]以下結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明。
[0043]載體制作:在無(wú)菌環(huán)境中培育羅布麻植株并取其葉片作為捕捉載體。
[0044]a、培養(yǎng)基制作:選擇顆粒較粗，透氣性好的市售蛭石，一般選擇顆粒直徑在I~3mm的較好，將蛭石在烘箱120~171°C下滅菌48~72 h，取出裝入育苗盤(pán)中。
[0045]b、催芽:選取當(dāng)年采集的羅布麻種子80~100 g，用濃度為0.1~0.5%次氯酸鈉溶液消毒3~5 min，用紗布過(guò)濾后再用無(wú)菌水沖洗3~5次。然后將種子放入三角瓶中，用封口膜扎住瓶口，放入40°C的水浴鍋中催芽12~15h。待種子芽苞出現(xiàn)露白，倒去三角瓶中的水。
[0046] C、定植:催好芽的種子于5~10 h內(nèi)在溫室內(nèi)進(jìn)行定植。挑選飽滿(mǎn)、露白的種子，用消毒后的鑷子夾取點(diǎn)植于裝好蛭石的育苗盤(pán)中，每窩10~15粒種子。用保鮮膜覆蓋育苗盤(pán)，置于塑料底盤(pán)中，在底盤(pán)側(cè)壁標(biāo)記水位線(xiàn)，以底盤(pán)容積的1/2~2/3為宜。間隔3~5 d補(bǔ)水至水位線(xiàn)，保證蛭石水分處于飽和狀態(tài)。
[0047]d、育苗:出苗后，倒掉底盤(pán)中的水，澆灌一次1/2的Hoagland ' s營(yíng)養(yǎng)液至水位線(xiàn)，間隔7~10天后待所有育苗盤(pán)中水分蒸干，澆灌第二次營(yíng)養(yǎng)液至水位線(xiàn)。30~35天后開(kāi)始間苗，每窩選留4~5株長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗。用黑色塑料薄膜包裹育苗盤(pán)，使羅布麻幼苗露出即可。設(shè)置溫室白天溫度20~25°C，夜間15~20°C，光照10000~12000LUX，空氣相對(duì)濕度60~70%，培養(yǎng)7~10周。
[0048]取樣裝置準(zhǔn)備:在專(zhuān)用取樣裝置中安放取樣載體。
[0049]a、準(zhǔn)備取樣裝置:選用直徑為9~15cm的培養(yǎng)皿作為盒體11(一次性醫(yī)用培養(yǎng)皿或經(jīng)過(guò)消毒的玻璃培養(yǎng)皿均可)，取長(zhǎng)X寬為76.2X25.4mm的玻璃片作為載玻片13，將載玻片13通過(guò)不干膠17或粘性硅膠一類(lèi)的物體粘連于盒體11的底部，同時(shí)，與載玻片13并排安置長(zhǎng)X寬為65~75X25~30mm的取樣保濕體12，取樣保濕體12根據(jù)實(shí)際安置I~3層吸水紙構(gòu)成。
[0050]當(dāng)然，所述的載玻片13也可選用塑料片，取樣保濕體12也可采用其它的有較強(qiáng)吸水作用的材料，如織物。
[0051]b、制作孢子捕捉玻片:在載玻片11的距上下緣10~15mm之間的區(qū)域內(nèi)取豌豆粒大小的凡士林，均勾涂抹在載玻片11上作為抱子捕捉玻片。
[0052]C、制作孢子捕捉葉片:取所培育的羅布麻植株頂部向下第3~5輪處的健康葉片作為孢子捕捉葉片，將選取的羅布麻葉片14葉背向上安置于保濕體12上，羅布麻葉片14的葉梗處壓蓋小塊脫脂棉16，用膠帶15沿葉尖上緣0.5~Icm處將保濕體和葉片粘緊，同樣用膠帶15將葉片下端壓蓋的脫脂棉16粘緊，將取樣裝置直立，向保濕體上緣注無(wú)菌水，至下緣出現(xiàn)滴水為止，蓋上蓋保存即可。
[0053]孢子的捕捉取樣:
a、設(shè)置取樣點(diǎn):在銹病發(fā)生前開(kāi)始取樣，在大田中選擇東、西、南、北及中心區(qū)域，每個(gè)方位設(shè)置3~5個(gè)取樣點(diǎn)。
[0054]b、取樣裝置:使用定容式空氣微生物取樣器，固定在距地面高度為30~50cm支架上。
[0055]C、安裝取樣裝置:將制作好的取樣裝置安放在定容式空氣微生物取樣器中。取樣時(shí)間為:每天9點(diǎn)開(kāi)始取樣，下午2點(diǎn)前后和傍晚8點(diǎn)前后各換取一次取樣裝置。每次取樣設(shè)置模式10~12個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)取樣80~120L空氣,根據(jù)病害發(fā)生狀況,初期取樣100~120L，中期為90~100L，盛期為80~90L，末期為90~100L，循環(huán)間隔15~20min，雨天不取樣。
[0056]d、統(tǒng)計(jì)總孢子數(shù):將取樣完畢的取樣裝置蓋上蓋子，帶回室內(nèi)，將載玻片取下，置于存貯盒中保存30天后，在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)夏孢子數(shù)。[0057]離體培養(yǎng):將取樣后的孢子捕捉葉片進(jìn)行離體培養(yǎng)。
[0058]a、葉片離體培養(yǎng)裝置:用上部開(kāi)口并設(shè)有蓋，直徑或邊長(zhǎng)為9~15cm，高2~5cm的盒體作為培養(yǎng)皿21，在盒體底部設(shè)置竹簽或塑料棒呈柵欄狀排列作為襯底22，竹簽或塑料棒采用縱向的支撐條23架空。
[0059]當(dāng)然葉片離體培養(yǎng)裝置的條狀體也可用膠水相互平行粘在距皿底0.8~Icm處的側(cè)壁上的方式架空。
[0060]b、取樣后葉片的離體培養(yǎng):將取完樣的葉片放置與竹簽方向垂直位置上，葉梗部用一塊脫脂棉包裹，上下 各用3~5層條形濾紙24覆蓋，中間夾入“「”形濾紙24的上端，下端與皿底接觸。然后向皿底加無(wú)菌水至快要接近竹簽為止，向?yàn)V紙24滴加用無(wú)菌水配置的濃度為80~IOOppm的苯駢咪唑溶液,至有水滴出現(xiàn)為止。用噴壺向葉面均勻噴灑無(wú)菌水2~3次,最后蓋上皿蓋置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),設(shè)置溫度為20~23°C,光暗交替12h,光照強(qiáng)度 8000 ~12000LUX。
[0061]取樣裝置和離體培養(yǎng)裝置的盒體也可采用圓形或方形的塑料、玻璃或其它類(lèi)似材料制作。
[0062]致病力測(cè)算
a、統(tǒng)計(jì)致病孢子數(shù):培養(yǎng)8~10天后統(tǒng)計(jì)夏孢子堆數(shù)，使用方格紙或掃描儀計(jì)算葉面積。
[0063]b、致病力計(jì)算:
總孢子量:SI (個(gè) / 升)=(SI *Al/al)/V 致病孢子量:S2 (個(gè)/升)=(S2*Al/a2)/V 致病力指數(shù):S2/Sl=(al*S2)/(a2*Sl)
P、參數(shù)定義:
Al取樣裝置底面積；al載玻片涂抹凡士林區(qū)域面積；a2葉片面積；sl載玻片捕捉到的夏孢子數(shù)；s2葉片夏孢子堆數(shù)；S1每日單位體積空氣中夏孢子數(shù)；S2每日單位體積空氣中具致病力的夏孢子數(shù)空氣取樣體積。
[0064]根據(jù)上述致病力指數(shù)即可較為準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)出大田種植羅布麻的柵銹病發(fā)生情況，進(jìn)而有效地制訂出防治預(yù)案。
[0065]需要聲明的是，本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明。對(duì)于本發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法，其特征在于主要是通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)的:載體制作，取樣裝置準(zhǔn)備，孢子的取樣捕捉，離體培養(yǎng)，致病力測(cè)算，具體操作過(guò)程如下: 載體制作:在無(wú)菌環(huán)境中培育羅布麻植株并取其葉片作為捕捉載體； a、培養(yǎng)基制作:選擇蛭石充分滅菌后作為培養(yǎng)基； b、催芽:將羅布麻種子，用濃度為0.1~0.5%次氯酸鈉溶液消毒3~5 min，用紗布過(guò)濾后再用無(wú)菌水沖洗3~5次，然后將種子在38~42°C的水浴鍋中催芽12~15h，待種子芽荀出現(xiàn)露白，倒去水備用； C、定植:將/[隹牙后的種子于10 h內(nèi)在所述培養(yǎng)基中定植； d、育苗:當(dāng)植株生長(zhǎng)到3輪以上葉片即可； 取樣裝置準(zhǔn)備:在專(zhuān)用的取樣裝置中安放取樣載體； a、取樣裝置的準(zhǔn)備:用上部開(kāi)口并設(shè)有蓋，直徑或邊長(zhǎng)為9~15cm，高2~5cm的盒體，在盒體內(nèi)設(shè)置一塊載玻片和一塊吸水紙，將載玻片通過(guò)不干膠或粘性硅膠一類(lèi)的物體粘連于盒體的底部，同時(shí)，與載玻片并列將保濕體安放在盒體的底部； b、制作孢子捕捉玻片:在載玻片的距上下緣10~15mm之間的區(qū)域內(nèi)均勻涂抹一層凡士林作為孢子捕捉玻片； C、制作孢子捕捉葉片:取所培育的羅布麻植株頂部向下第3~5輪處的健康葉片作為孢子捕捉葉片，將選取的羅布麻葉片葉背向上安置于保濕體上，羅布麻葉片的葉梗處壓蓋小塊脫脂棉，用膠帶沿葉尖上緣0.5~Icm處將保濕體和葉片粘緊，同樣用膠帶將葉片下端壓蓋的脫脂棉粘緊，將取樣裝置直立，向保濕體上緣注無(wú)菌水，至下緣出現(xiàn)滴水為止，蓋上蓋保存即可； 取樣:將安放了取樣載體的取樣裝置置于大田中進(jìn)行取樣； a、設(shè)置取樣點(diǎn):選擇取樣點(diǎn)后，在銹病發(fā)生前開(kāi)始取樣； b、安放取樣裝置:使用定容式空氣微生物取樣器，固定在距地面高度為30~50cm支架上； C、安裝取樣裝置:將安放了制作孢子捕捉玻片和制作孢子捕捉葉片的取樣裝置安放在儀器內(nèi)，取樣時(shí)間為每天8~10點(diǎn)開(kāi)始取樣，下午I~3點(diǎn)和傍晚7~9點(diǎn)各換取一次取樣裝置，雨天不取樣； d、統(tǒng)計(jì)載玻片取樣孢子數(shù):將取樣完畢的取樣裝置蓋上蓋子，帶回室內(nèi)，將載玻片取下，置于存貯盒中保存30天后，在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)載玻片上的夏孢子數(shù)； 離體培養(yǎng):將取樣后的孢子捕捉葉片進(jìn)行離體培養(yǎng)； a、培養(yǎng)裝置:用上部開(kāi)口并設(shè)有蓋，直徑或邊長(zhǎng)為9~15cm，高2~5cm的盒體作為培養(yǎng)皿，在盒體底部設(shè)置呈柵欄狀排列的條狀體作為襯底； b、離體培養(yǎng):將取樣后的羅布麻葉片的放置培養(yǎng)裝置的襯底上，葉片方向與條狀體方向縱向相交，葉梗部用脫脂棉包裹并用條形濾紙覆蓋，條形濾紙至少有一處端部與培養(yǎng)裝置底部接觸，然后向培養(yǎng)裝置中加無(wú)菌水至與襯底平齊，再向?yàn)V紙滴加用無(wú)菌水配置的濃度為80~IOOppm的苯駢咪唑溶液，至有水滴出現(xiàn)為止，再向葉面均勻噴灑無(wú)菌水2~3次，蓋上培養(yǎng)裝置上蓋后置于培養(yǎng)箱中20~23°C下培養(yǎng)8~10天，并按10~12 h光暗交替，光照強(qiáng)度8000~12000LUX ； 之后進(jìn)行致病力測(cè)算。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法，其特征在于:所述無(wú)菌水為濃度為80~IOOppm的苯駢咪唑溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法，其特征在于:所述的取樣每次設(shè)置10~12個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)取樣80~120L空氣，循環(huán)間隔15~20min。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的對(duì)大田羅布麻銹病進(jìn)行預(yù)測(cè)的方法，其特征在于:按照病害發(fā)生狀況，所述的取樣為:病害發(fā)生初期每個(gè)循環(huán)取樣100~120L空氣，病害發(fā)生中期每個(gè)循環(huán)為90~100L空氣，病害發(fā)生盛期每個(gè)循環(huán)為80~90L空氣，病害發(fā)生末期為90~100L空氣。
5.一種羅布麻柵銹菌夏孢子取樣裝置，包括上部開(kāi)口并設(shè)有蓋的盒體，其特征在于:在盒體內(nèi)設(shè)置一塊載玻片和一塊保濕體，所述載玻片為一矩形的片狀體并通過(guò)不干膠或粘性硅膠一類(lèi)的物體粘連于盒體的底部，同時(shí)，所述保濕體與載玻片并列安放在盒體的底部。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的羅布麻柵銹菌夏孢子取樣裝置，其特征在于:所述的盒體為圓形或矩形中的一種，盒體直徑或邊長(zhǎng)為9~15cm,高2~5cm。
7.一種羅布麻柵銹菌夏孢子離體培養(yǎng)裝置，包括上部開(kāi)口并設(shè)有蓋的盒體，其特征在于:在盒體底部設(shè)置呈柵欄狀排列的條狀體作為襯底。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的羅布麻柵銹菌夏孢子離體培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述條狀體距盒體底部0.8~Icm處呈 架空狀。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的羅布麻柵銹菌夏孢子離體培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述的盒體為圓形或矩形中的一種，盒體直徑或邊長(zhǎng)為9~15cm,高2~5cm。
【文檔編號(hào)】C12R1/645GK103937868SQ201410187780
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年5月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月6日
【發(fā)明者】高鵬, 劉起棠, 南志標(biāo), 段廷玉, 黃景鳳, 孟繁杰, 張峰 申請(qǐng)人:新疆艾比湖戈寶麻有限公司, 蘭州大學(xué), 新疆阿勒泰戈寶麻有限公司