谷子SiREM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種谷子SiREM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用，將含有谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列的表達(dá)載體經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化到植物中，可獲得了抗鹽性提高的轉(zhuǎn)基因植物，有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】谷子S i REM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及谷子SiREM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]谷子(Setaria italica L.),屬于禾本科,狗尾草屬，廣泛栽培于歐亞大陸的溫帶和熱帶。谷子的適應(yīng)能力極強(qiáng)，它既耐旱、耐貧瘠的土壤，又耐酸、耐堿，尤以耐旱能力最強(qiáng)，所以谷子除了分布在我國(guó)北方干旱地區(qū)外，在我國(guó)南方某些干旱、貧瘠的山區(qū)，也有種植。為了提高植物的抗逆境能力，通過(guò)對(duì)冀谷11號(hào)基因組的分析，從谷子中挖掘了一些有應(yīng)用潛力的和抗逆相關(guān)的基因。其中，谷子的Remorin蛋白家族基因可能參與了植物對(duì)于非生物脅迫的響應(yīng)。第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的Remorin蛋白是定位于馬鈴薯葉片質(zhì)膜上的一個(gè)約為34kDa大小的蛋白質(zhì),該蛋白在體外可以被寡半乳糖醒酸(Oligogalacturonide, 0GA)磷酸化。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供谷子SiREM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用。 [0004]前述應(yīng)用，具體是將含有谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列的表達(dá)載體經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化到植物中。
[0005]本發(fā)明還提供了含有谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列的載體，所述谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列如SEQ ID N0.1所示。
[0006]本發(fā)明還提供了含有所述載體的工程菌。
[0007]本發(fā)明從谷子cDNA中篩選得到一個(gè)Remorin蛋白家族基因，稱(chēng)之為SiREM6基因。該基因的開(kāi)放閱讀框的序列長(zhǎng)度為639bp，其核苷酸序列如圖2A所示。通過(guò)核苷酸序列推測(cè)，SiREM6編碼一個(gè)含212個(gè)氨基酸的蛋白，富含賴(lài)氨酸(18.99% , w/w)和谷氨酸(22.39% ,w/w)。根據(jù)DNAMAN6.0.3.48軟件分析，該蛋白大小為23kDa，等電點(diǎn)為5.4。通過(guò)InterProScan預(yù)測(cè)出該蛋白含有一個(gè)典型而保守的Remorin蛋白的C端和Remorin蛋白的N端結(jié)構(gòu)域。進(jìn)一步分析該蛋白的氨基酸序列表明，該蛋白的N端含有9個(gè)脯氨酸，C端包含一個(gè)coiled-coil結(jié)構(gòu)域(圖2)。根據(jù)谷子中的11個(gè)Remorin蛋白及其它植物Remorin蛋白的氨基酸序列(分析中涉及到的所有Remorin蛋白的Gene/EST編號(hào)請(qǐng)見(jiàn)表I)，用MEGA5.2.2軟件進(jìn)行了 Remorin蛋白的進(jìn)化分析，結(jié)果如圖3所示，SiREM6蛋白和水稻OsREMl.5及玉米ZmREMl.2的親緣關(guān)系較近,屬于第1_3組Remorin蛋白。進(jìn)一步，根據(jù)Raffaele 等(Raffaele et al., 2007, Plant Phys1l.Vol.145, pp.593-600)人對(duì) Remorin蛋白的分類(lèi)方法，比較N端的氨基酸序列發(fā)現(xiàn)，SiREM6蛋白屬于第I組Remorin蛋白，而第I組Remorin蛋白可能參與了植物對(duì)于非生物脅迫的響應(yīng)。SiREM6定位于谷子原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)中，在體外能自聚成類(lèi)似于纖維狀的結(jié)構(gòu)。qRT-PCR研究表明SiREM6在谷子的根、莖、葉和花序中均有表達(dá)，而且在不同程度上受到ΑΒΑ、鹽和冷脅迫誘導(dǎo)表達(dá)，但幾乎不受PEG誘導(dǎo)表達(dá)。
[0008]表1系統(tǒng)進(jìn)化分析中所有Remorin蛋白
[0009]
【權(quán)利要求】
1.谷子SiREM6基因在提高植物抗鹽性的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，將含有谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列的表達(dá)載體經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化到植物中。
3.含有谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列的載體，其特征在于，所述谷子SiREM6基因開(kāi)放閱讀框序列如SEQ ID N0.1所示。
4.含有權(quán)利要求3 所述載體的工程菌。
【文檔編號(hào)】C12N1/21GK104031937SQ201410176183
【公開(kāi)日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】于靜娟, 岳靜, 李叢 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)