一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法
【專利摘要】一種冷榨茶餅活性肽的制備方法，它利用DHPM、定向酶解冷榨餅粕蛋白，制備蛋白肽溶液，經(jīng)過(guò)濾、濃縮、噴霧干燥得到產(chǎn)品。本發(fā)明的積極效果：1、DHPM技術(shù)有助于酶切位點(diǎn)的暴露并能加快茶餅蛋白的快速斷裂降解，縮短了茶餅蛋白活性肽的制備周期并提高了多肽的得率，增強(qiáng)了其活性。2、定向酶解技術(shù)提高酶解效率，直接酶解目標(biāo)片段多肽大大縮短酶解時(shí)間定向酶解產(chǎn)出的多肽，去除了冷榨茶餅的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消費(fèi)者對(duì)“色、香、味”的追求。3、將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時(shí)間、降低了生產(chǎn)成本。
【專利說(shuō)明】一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】:
本發(fā)明涉及蛋白多肽制備領(lǐng)域，尤其涉及一種動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)、定向酶解冷榨茶餅制備蛋白多肽的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，油茶籽在我國(guó)的利用基本上局限于榨油，而對(duì)榨油后的冷榨茶餅利用不夠充分，大都直接被浪費(fèi)，每年浪費(fèi)的成百上千噸的冷榨茶餅，只有部分作為燃料、清洗劑等使用，附加值低，造成了嚴(yán)重的資源浪費(fèi)。冷榨茶餅，由于采用低溫壓榨技術(shù)，蛋白質(zhì)變性小，活性未被破壞，加工價(jià)值較高，經(jīng)檢測(cè)茶餅組分，茶餅中含有蛋白質(zhì)12%-16%，據(jù)氨基酸組分分析，茶餅中富含7種是人體必需的氨基酸，僅硫氨基酸含量較少。這7種必需氨基酸的種類和含量在一定意義上可以反映冷榨茶餅蛋白具有極高的營(yíng)養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，研究顯示蛋白分解后的多肽因具有良好抗氧化、降血壓、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血脂和抗菌活性，受到廣大消費(fèi)者所喜愛(ài)，多肽活性成就了其在市場(chǎng)上的地位。
[0003]目前，植物性活性肽大部分采用傳統(tǒng)酶法制備得到，酶法存在未經(jīng)任何前處理、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、反應(yīng)條件劇烈、易產(chǎn)生苦味肽、酶解效率低等特性。
[0004]
【發(fā)明內(nèi)容】
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一種冷榨茶餅制備活性蛋白肽的方法，它提高了蛋白的酶解效率，產(chǎn)生出活性和口感更好的多肽，酶解后的冷榨茶餅活性肽去除了原有的苦味。
[0005]本發(fā)明是這樣來(lái)實(shí)現(xiàn)的，它采用DHPM聯(lián)合定向酶解既充分的利用了 DHPM可以激活更多的酶切位點(diǎn)，改變傳統(tǒng)酶解的位點(diǎn)，繼而產(chǎn)生多肽的分子更小活性更強(qiáng)，酶解后的油茶活性肽去除了原有的苦味，又利用定向酶解技術(shù)提高酶解效率，縮短酶解時(shí)間，而且將過(guò)DHPM和定向酶解同時(shí)進(jìn)行，DHPM輔助酶解大大縮短酶解時(shí)間；
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案得以解決:
(1)冷榨茶餅粉碎過(guò)目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25-1:40加入蒸餾水、用Imo I/LNaOH 調(diào) pH 值至 10-12、控制溫度為 40-60 °C，浸提 2_4h。4000r/min 離心 IOmin,收
集上清液；
(2)在上清液中加入l.0Omol/LHcl,調(diào)pH值至4.6使蛋白沉淀。4000r/min離心IOmin,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗冷榨茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質(zhì)量百分比為10%-30%蛋白液然后，加入重量比為2:3的風(fēng)味蛋白酶和堿性蛋白酶復(fù)合酶，DHPM(60-1OOMPa)處理酶解20_40min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調(diào)至中性，離心取上清液。
[0006](5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內(nèi)的多肽，采用噴霧干燥技術(shù)，將多肽溶液制備成粉末，進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度分別為180°C和90°C。
[0007]本發(fā)明聯(lián)合DHPM和定向酶解，提高了多肽的活性和口感，將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時(shí)間、降低了生產(chǎn)成本，具體有益效果為:1、DHPM技術(shù)有助于酶切位點(diǎn)的暴露并能加快冷榨茶餅蛋白的快速斷裂降解，縮短了冷榨茶餅蛋白活性肽的制備周期并提高了多肽的得率，增強(qiáng)了其活性。2、定向酶解技術(shù)提高酶解效率，直接酶解目標(biāo)片段多肽大大縮短酶解時(shí)間定向酶解產(chǎn)出的多肽，去除了冷榨茶餅的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消費(fèi)者對(duì)“色、香、味”的追求。3、將蛋白酶解和DHPM兩道工序合并縮短了加工工序，減少了加工時(shí)間、降低了生產(chǎn)成本。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0008]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
[0009]【具體實(shí)施方式】:
下面結(jié)合附圖與【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述；
實(shí)施例一，如圖1所示步驟；
(I)冷榨茶餅粉碎過(guò)目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25加入蒸餾水、用I mol/LNaOH調(diào)pH值至10、控制溫度為40°C，浸提2h，4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入I mol/L Hcl,調(diào)pH值至4.6使蛋白沉淀。4000 r/min離心10min,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質(zhì)量百分比為10%蛋白液然后，按重量比2:3加入風(fēng)味蛋白酶和堿性蛋白酶復(fù)合酶，DHPM(60MPa)處理酶解20mi ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調(diào)至 中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內(nèi)的多肽，采用噴霧干燥技術(shù)，將多肽溶液制備成粉末。進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度分別為180°C和90°C。
[0010]實(shí)施例二，如圖1所示步驟；
(1)冷榨茶餅粉碎過(guò)目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比1:30加入蒸餾水、用Imol/LNaOH調(diào)pH值至11，控制溫度為50°C，浸提3h,4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入ImoI/LHcl,調(diào)pH值至4.6使蛋白沉淀，4500r/min離心25 min,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質(zhì)量百分比20%蛋白液，然后加入重量比為2:3的風(fēng)味蛋白酶、堿性蛋白酶復(fù)合酶，DHPM(80MPa)處理酶解30min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調(diào)至中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內(nèi)的多肽，采用噴霧干燥技術(shù)，將多肽溶液制備成粉末。進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度分別為180°C和90°C。
[0011]實(shí)施例三，如圖1所示步驟；
(I)冷榨茶餅粉碎過(guò)目篩；50kg脫脂茶餅按料液重量比比1:40加入蒸餾水、用I mol/LNaOH調(diào)pH值至12、控制溫度為60°C，浸提4h，4000r/min離心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入lmol/L Hcl,調(diào)pH值至4.6使蛋白沉淀，4000r/min離心IOmin,收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗茶餅蛋白；
(3)將干燥后的蛋白配成質(zhì)量百分比為30%蛋白液然后加入重量比2:3的風(fēng)味蛋白酶、堿性蛋白酶復(fù)合酶，DHPM(IOOMPa)處理酶解40min ；
(4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調(diào)至中性，離心取上清液；
(5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以內(nèi)的多肽，采用噴霧干燥技術(shù)，將多肽溶液制備成粉末。進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度分別為180°C和90°C。
【權(quán)利要求】
1.一種冷榨茶餅活性蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括以下步驟:(1)冷榨茶餅粉碎過(guò)目篩；將50kg脫脂茶餅按料液重量比1:25-1:40加入蒸餾水，用I mol/L 的 NaOH 調(diào) pH 值至 10-12，控制溫度為40-601:，浸提 2_4h，4000r/min 離心 IOmin,收集上清液； (2)在上清液中加入l.0Omol/L的鹽酸，調(diào)pH值至4.6，使蛋白沉淀；然后4000r/min離心lOmin，收集蛋白沉淀并噴霧干燥，得到粗冷榨茶餅蛋白； (3)將干燥后的蛋白配成質(zhì)量百分比為10%-30%的蛋白液，然后加入重量比為2:3的風(fēng)味蛋白酶和堿性蛋白酶，DHPM處理酶解20-40min ； (4)水解完成后，滅活蛋白酶，將pH調(diào)至中性，離心取上清液； (5)采用膜超濾法分離水解液，收集分子量在IOkDa以內(nèi)的多肽，采用噴霧干燥技術(shù)，將多肽溶液制備成粉末，進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度分別為180°C和90°C。
2.如權(quán)利要求1所述的一種冷榨茶餅活性蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述的DHPM處理壓 強(qiáng)為60-100Mpa。
【文檔編號(hào)】C12P21/06GK103602712SQ201310512577
【公開(kāi)日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年10月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月28日
【發(fā)明者】涂宗財(cái), 馬達(dá), 王輝, 劉光憲, 沙小梅, 陳靜 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)