專利名稱：大棗葉提取物及其在制備防治肝損傷藥物及保健食品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物提取物的提取技術(shù)及其應(yīng)用，具體涉及大棗葉提取物的提取技術(shù)及其在制備防治肝損傷藥物或保健品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肝臟是機(jī)體最重要的臟器之一，肝臟疾病是臨床上較為常見的疾病。因此，肝臟疾病一直是醫(yī)學(xué)科學(xué)重點(diǎn)研究的對(duì)象之一。肝損傷是多種肝臟疾病共有的一種特點(diǎn)突出的病理狀態(tài)，嚴(yán)重威脅著人類健康。各種有害因素諸如藥物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的損害，從而使肝臟的解毒、排泄功能及貯備和再生能力降低，肝血流量減少，代謝負(fù)荷加重，從而發(fā)生內(nèi)環(huán)境紊亂，肝細(xì)胞壞死和凋亡，進(jìn)而造成肝損傷。全世界有數(shù)十億人曾經(jīng)或正忍受著肝損傷的痛苦。肝損傷的長(zhǎng)期存在往往會(huì)導(dǎo)致肝纖維化，是進(jìn)而誘發(fā)肝硬化、肝功能衰竭、甚至肝癌的重要始動(dòng)因素。因此預(yù)防和治療肝細(xì)胞損傷是臨床上肝病治療的重要環(huán)節(jié)之一，是抑制肝纖維化、肝壞死、肝硬化以及肝癌等疾病發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)。因此研究肝損傷防治藥物具有重要臨床意義。目前臨床常用的保肝藥物，或因?yàn)閮r(jià)格昂貴，或因使用不便，或具有較大副作用，使用受到限制。因此，進(jìn)一步尋找用于預(yù)防和治療肝損傷的有效藥物仍然是當(dāng)今藥理學(xué)工作者的努力方向。大棗葉系鼠李科棗屬植物棗(Ziziphus jujuba Mill.)的干燥葉。本草大棗葉作為藥用可用于治療小兒發(fā)熱、瘡癤、熱痱、爛腳、燙火傷等癥。關(guān)于大棗葉的現(xiàn)代研究較少，除少量作為茶飲原料開發(fā)應(yīng)用外，較少被利用，多作為廢棄資源丟棄。目前尚未見以大棗葉為原料制備活性提取物的技術(shù)，也未見以大棗葉為主要組成組分應(yīng)用于防治肝損傷的藥品或保健食品的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的:本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，在大棗葉原有用途的基礎(chǔ)上，開發(fā)其新的臨床用途，提供大棗葉在防治肝損傷中的應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其具有很好的防治肝損傷的作用。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開一種大棗葉提取物的制備方法。技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:一種大棗葉提取物，它是通過以下步驟制備得到:(I)取大棗葉揀選、洗凈、干燥后放入提取罐中，加6 12倍量的50% 95%乙醇，加熱回流I 3次，過濾、合并提取液，濃縮至無醇味后，得大棗葉的醇提物備用；(2)取步驟(I)得到的大棗葉醇提物，加I 5倍量水，上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為60% 95%的乙醇洗脫，收集60% 95%乙醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到大棗葉活性部位粗提物 ，備用；(3)取步驟(2)得到的大棗葉活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分別用水和20%乙醇洗脫，再用濃度為70% 95%乙醇洗脫，并收集70% 95%乙醇洗脫液，濃縮，經(jīng)減壓干燥得到大棗葉活性部位精制提取物；(4)取步驟(3)得到大棗葉活性部位提取物采用制備液相進(jìn)一步富集得到精制大棗提取物，經(jīng)檢測(cè)，總?cè)坪涂傸S酮含量>80%。作為優(yōu)選方案，以上所述的大棗葉提取物，步驟(I)中提取條件為加10倍量濃度為80%的乙醇，加熱到80°C持續(xù)回流2小時(shí)。該方法可保證提取溶液和藥材之間達(dá)到足夠大的濃度差，增加目標(biāo)成分的溶出率，因?yàn)橐掖紳舛忍?，大棗葉中的三萜酸類活性成分得率太低，乙醇濃度太高大棗葉中的黃酮苷類成分轉(zhuǎn)移率太低，且脂肪酸、葉綠素等雜質(zhì)轉(zhuǎn)移率增加。因此本發(fā)明根據(jù)活性成分的性質(zhì)，確定乙醇的濃度和用量，得到的提取物目標(biāo)成分溶出率高，活性更強(qiáng)。作為優(yōu)選方案，以上所述的大棗葉提取物，步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂為非極性大孔吸附樹脂。作為更優(yōu)選方案，其中步驟(2)中所述的非極性大孔吸附樹脂為DlOl型大孔吸附樹脂，收集濃度為90%乙醇洗脫液；步驟(3)中收集濃度為90%乙醇洗脫液。本發(fā)明以現(xiàn)代提取分離手段和藥理活性篩選相結(jié)合的方法確定大棗葉最佳防治肝損傷活性提取物，經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)研究表明，通過非極性大孔吸附耦合聚酰胺柱色譜，采用不同濃度的乙醇洗脫，有利于大棗葉中的黃酮類和三萜類活性成分的富集，除去糖類、鞣質(zhì)、葉綠素等雜質(zhì)，得到高活性成分比例及活性更強(qiáng)的防治肝損傷活性提取物，經(jīng)HPLC-ELSD及HPLC-DAD檢測(cè)該活性部位中三萜酸類和黃酮類成分部含量可達(dá)70%。作為優(yōu)選方案，以上所述的大棗葉提取物，步驟(3)中所述的聚酰胺樹脂的粒徑為60-80目。作為優(yōu)選方案，以上所述 的大棗葉提取物，步驟(4)中所述的制備液相富集的色譜條件為:色譜柱為安捷倫反相C18柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為:0至35分鐘，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分鐘甲醇的含量由45%上升到83%，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流速為5ml/min，檢測(cè)器為二極管陳列檢測(cè)器。大棗葉及其提取物在制備防治肝損傷藥物或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)研究表明，大棗葉及其提取物能夠有效降低肝損傷模型動(dòng)物血清ALT、AST活性及肝組織MDA含量，增強(qiáng)肝臟SOD活性，表明大棗葉具有明顯的肝臟保護(hù)作用，可應(yīng)用于制備防治肝損傷的藥品或保健食品。本發(fā)明所述的大棗葉提取物在制備防治肝損傷的藥品或保健食品中的應(yīng)用，將大棗提取物和藥學(xué)上可接受的載體制成片劑、注射劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、湯劑、糖漿劑、合劑、煎膏劑或浸膏劑劑型的藥物。本發(fā)明提供的大棗葉提取物制成膠囊劑時(shí)把大棗葉提取物和載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。將本發(fā)明提供的大棗葉提取物制成片劑時(shí)，把大棗葉提取物和乳糖或玉米淀粉，需要時(shí)加入潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，然后壓片制成片劑。本發(fā)明提供的大棗葉提取物制成顆粒劑時(shí)，把大棗葉提取物和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。本發(fā)明提供的大棗葉提取物制成注射液時(shí)，取大棗葉提取物加入生理鹽水溶解然后加入活性碳，攪拌均勻，80°C加熱30分鐘，過濾，調(diào)節(jié)pH值，用垂熔玻璃漏斗或其它濾器過濾至澄明，灌裝，在100至115°C滅菌30分鐘制成注射液。
本發(fā)明提供的大棗葉提取物制成其它劑型時(shí)，可按藥學(xué)常規(guī)方法制備得到。有益效果:本發(fā)明在大棗葉原有應(yīng)用的基礎(chǔ)上進(jìn)行新的用途開發(fā)，同時(shí)制備其活性提取物，和現(xiàn)現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):(I)本發(fā)明主要以生產(chǎn)大棗過程中產(chǎn)生的廢棄物大棗葉為原料，制備其活性提取物，開發(fā)其新用途，實(shí)現(xiàn)變廢為寶，提升了棗樹的可利用價(jià)值，實(shí)現(xiàn)了棗樹資源的綜合利用，具有很好的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。(2)本發(fā)明提供的大棗葉防治肝損傷活性提取物，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明可顯著降低CCl4致肝損傷模型小鼠、乙醇致肝損傷模型小鼠、D-氨基半乳糖致肝損傷模型小鼠血清ALT、AST活性及肝組織MDA含量，增強(qiáng)肝臟SOD活性，表明該活性提取物不僅對(duì)化學(xué)性肝損傷、長(zhǎng)期飲酒致肝損傷具有具有明顯的肝臟保護(hù)作用，同時(shí)對(duì)病毒性肝炎所致肝損傷也具有保護(hù)作用。因此大棗葉及其提取物有望開發(fā)成為新一代安全有效，用于防治多種類型肝損傷的藥物或保健品，同時(shí)也為大棗葉廢棄資源變廢為寶及棗樹資源綜合利用提供了途徑。(3)本發(fā)明提供的制備方法可操作性強(qiáng)，尤其是在分離過程中本發(fā)明首次采用大孔樹脂和聚酰胺樹脂聯(lián)用，并采用制備液相進(jìn)一步富集純化，提取分離效率高，分離得到的大棗葉提取物活性成分含量高，抗肝損傷活性更強(qiáng)，不良反應(yīng)更低，并且制備工藝中能量消耗少，生產(chǎn)成本低，對(duì)環(huán)境無污染。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。實(shí)施例1大棗葉防治肝損傷活性提取物，其通過以下方法制備得到:(I)取大棗葉揀選、洗凈、干燥后稱取10kg，放入提取罐中，加10倍量的80%乙醇，加熱回流3次，每次2h，過濾、合并提取液，濃縮至無醇味后，得大棗葉的醇提物(2L)備用；(2)取步驟(I)得到的大棗葉醇提物，加2倍量水，混勻后加入經(jīng)活化的直徑為50厘米，高1.5米的DlOl大孔吸附樹脂層析柱中，預(yù)吸附12小時(shí)后，分別以水、10%乙醇和90%乙醇按2BV/h的速度洗脫，洗脫體積均為50L，收集90%乙醇洗脫液，濃縮至無醇味，得到大棗葉活性部位粗提物1L，備用；(3)取步驟(2)得到的大棗葉活性部位粗提物干法上經(jīng)活化的直徑為20厘米，高1.5米的聚酰胺柱(60 80目)，先分別用20L的水和20%乙醇洗脫，再用濃度為90%乙醇洗脫，并收集90%乙醇洗脫液，濃縮，經(jīng)減壓干燥得到大棗葉活性部位精制提取物610g ；(4)取步驟(3)得到大棗葉活性部位提取物采用制備液相進(jìn)一步富集得到精制大棗提取物，經(jīng)檢測(cè)，總?cè)坪涂傸S酮含量>80%。制備液相色譜條件為:色譜柱為安捷倫反相C18柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為:0至35分鐘，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分鐘甲醇的含量由45%上升到83%， 檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流速為5ml/min，檢測(cè)器為二極管陳列檢測(cè)器。實(shí)施例2大棗葉防治肝損傷活性提取物，其通過以下方法制備得到:
(I)取大棗葉揀選、洗凈、干燥后稱取10kg，放入提取罐中，加10倍量的70%乙醇，加熱回流3次，每次2h，過濾、合并提取液，濃縮至無醇味后，得大棗葉的醇提物(2.5L)備用；(2)取步驟(I)得到的大棗葉醇提物，加1.5倍量水，混勻后加入經(jīng)活化的直徑為50厘米，高1.5米的AB-8大孔吸附樹脂層析柱中，預(yù)吸附12小時(shí)后，分別以水、10%乙醇和85%乙醇按2BV/h的速度洗脫，洗脫體積均為50L，收集85%乙醇洗脫液，濃縮至無醇味，得到大棗葉活性部位粗提物1L，備用；(3)取步驟(2)得到的大棗葉活性部位粗提物干法上經(jīng)活化的直徑為20厘米，高1.5米的聚酰胺柱(60 80目)，先分別用20L的水和20%乙醇洗脫，再用濃度為80%乙醇洗脫，并收集80%乙醇洗脫液，濃縮，經(jīng)減壓干燥得到大棗葉活性部位精制提取物570g ；(4)取步驟(3)得到大棗葉活性部位提取物采用制備液相進(jìn)一步富集得到精制大棗提取物，經(jīng)檢測(cè)，總?cè)坪涂傸S酮含量>80%。制備液相色譜條件為:色譜柱為安捷倫反相C18柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為:0至35分鐘，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分鐘甲醇的含量由45%上升到83%，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流速為5ml/min，檢測(cè)器為二極管 陳列檢測(cè)器。實(shí)施例3大棗葉防治肝損傷活性提取物，其通過以下方法制備得到:(I)取大棗葉揀選、洗凈、干燥后稱取10kg，放入提取罐中，加8倍量的90%乙醇，加熱回流2次，每次2h，過濾、合并提取液，濃縮至無醇味后，得大棗葉的醇提物(1.6L)備用；(2)取步驟(I)得到的大棗葉醇提物，加3倍量水，混勻后加入經(jīng)活化的直徑為50厘米，高1.5米的HP-20大孔吸附樹脂層析柱中，預(yù)吸附12小時(shí)后，分別以水、10%乙醇和95%乙醇按2BV/h的速度洗脫，洗脫體積均為50L，收集95%乙醇洗脫液，濃縮至無醇味，得到大棗葉活性部位粗提物1L，備用；(3)取步驟(2)得到的大棗葉活性部位粗提物干法上經(jīng)活化的直徑為20厘米，高
1.5米的聚酰胺柱(100目)，先分別用20L的水和20%乙醇洗脫，再用濃度為95%乙醇洗脫，并收集80%乙醇洗脫液，濃縮，經(jīng)減壓干燥得到大棗葉活性部位精制提取物6050g ；(4)取步驟(3)得到大棗葉活性部位提取物采用制備液相進(jìn)一步富集得到精制大棗提取物，經(jīng)檢測(cè)，總?cè)坪涂傸S酮含量>81%。制備液相色譜條件為:色譜柱為安捷倫反相C18柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為:0至35分鐘，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分鐘甲醇的含量由45%上升到83%，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流速為5ml/min，檢測(cè)器為二極管陳列檢測(cè)器。實(shí)施例4大棗葉提取物抗肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究一、實(shí)驗(yàn)材料與藥物1.藥物和試劑AST, ALT,MDA, SOD試劑盒及考馬斯亮藍(lán)蛋白試劑盒均購于南京建成生物工程研究所；四氯化碳(CCl4，分析純，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司)，使用時(shí)用花生油配制成0.1%的花生油溶液；氨基半乳糖苷(D-GalN，Sigma公司)，臨用前蒸餾水溶解稀釋成70mg/mL溶液；聯(lián)苯雙酯片(江蘇鵬鷂藥業(yè)有限公司)，臨用時(shí)碾成細(xì)粉加生理鹽水制成混懸液。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)雄性ICR小鼠，體重18 22g，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK(浙)2008-0033。3.實(shí)驗(yàn)儀器酶聯(lián)免疫儀(美國(guó)Bio-Tek公司);UV_2000型紫外分光光度計(jì)(北京萊柏泰科儀器有限公司)；BT125型電子 天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；KQ-250E型超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；AnkeGL-16GII型離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。4.受試藥物及處理方法分別取實(shí)施例1 3制備得到的大棗葉提取物，加水稀釋制成所需濃度；陽性藥為聯(lián)苯雙酯，給藥前以蒸餾水溶解配制成所需濃度。二、實(shí)驗(yàn)方法1.對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷的影響取60只小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，按體重隨機(jī)分成6組，每組10只，分別為正常對(duì)照組，CCl4至肝損傷模型組，實(shí)施例2制備得到的大棗葉提取物低劑量組(0.25g/kg/d)、中劑量組(0.5g/kg/d)和高劑量組(1.0g/kg/d),聯(lián)苯雙酯組(150mg/kg/d)。對(duì)照組及模型組給予同量的生理鹽水，給藥組連續(xù)灌胃10d，于末次給藥后lh，除正常組ip0.9%NaC110mL/kg外，其余各組均ip0.1%CC14花生油溶液10mL/kg。16h后，所有小鼠采用眼眶后靜脈叢采血，分離血清，測(cè)定血清中ALT及AST的活性。取血后處死小鼠，隨即取部分肝臟，用生理鹽水制備成10%的肝勻漿，按照試劑盒說明測(cè)定MDA含量及SOD活力。2.對(duì)D-GalN致小鼠急性肝損傷的影響取60只小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，按體重隨機(jī)分成6組，每組10只，分別為正常對(duì)照組，D-GalN致肝損傷模型組，實(shí)施例1制備得到的大棗葉提取物低劑量組(0.25g/kg/d)、中劑量組(0.5g/kg/d)和高劑量組(1.0g/kg/d),聯(lián)苯雙酯組(150mg/kg/d)。對(duì)照組及模型組給予同量的生理鹽水，給藥組連續(xù)灌胃10d，于末次給藥后lh，除正常組ip0.9%NaC110mL/kg外，其余各組均ipD_GalN700mg/kg。16h后，所有小鼠采用眼眶后靜脈叢采血，分離血清，測(cè)定血清中ALT及AST的活性。取血后處死小鼠，隨即取部分肝臟，用生理鹽水制備成10%的肝勻漿，按照試劑盒說明測(cè)定MDA含量及SOD活力。3.對(duì)乙醇致小鼠肝損傷的影響取60只小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，按體重隨機(jī)分成6組，每組10只，分別為正常對(duì)照組，乙醇致肝損傷模型組，實(shí)施例3制備得到的大棗葉提取物低劑量組(0.25g/kg/d)、中劑量組(0.5g/kg/d)和高劑量組(1.0g/kg/d)，聯(lián)苯雙酯組(150mg/kg/d)。除正常對(duì)照組(以等體積的蒸餾水灌胃)外，其余各組均按7mL/kg/次灌胃給予50%乙醇，2次/d，中間間隔6h，連續(xù)15d。自造模第I天起，每日灌胃給藥I次。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服等體積的蒸餾水，其余各組分別灌胃給予相應(yīng)的大棗葉提取物及聯(lián)苯雙酯。最后I次灌胃6h后，所有小鼠采用眼眶后靜脈叢采血，分離血清，測(cè)定血清中ALT及AST的活性。取血后處死小鼠，隨即取部分肝臟，用生理鹽水制備成10%的肝勻漿，按照試劑盒說明測(cè)定MDA含量及SOD活力。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果以^±s表示，組間比較采用方差分析。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.大棗葉提取物對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷的影響CCl4肝損傷模型組與正常組比較，小鼠血清ALT、AST和肝組織MDA水平明顯升高(P〈0.01)，SOD活性明顯降低(P〈0.01);大棗葉、實(shí)施例2制備得到的大棗葉提取物各劑量組、聯(lián)苯雙酯組與模型組比較均不同程度地使肝損傷小鼠血清ALT、AST降低(P〈0.01);大棗葉提取物低劑量組有降低肝組織MDA水平，升高肝組織SOD水平的趨勢(shì)，但無顯著性差異(P>0.05);大棗葉提取物高、中劑量組和聯(lián)苯雙酯組與模型組比較均不同程度地使肝損傷小鼠肝組織MDA水平降低(P〈0.05)，SOD水平升高(P〈0.05)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表I。表I大棗葉提取物對(duì)CCl4致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST及肝臟SOD、MDA的影響(mean土SD, n=10)
權(quán)利要求
1.一種大棗葉提取物，其特征在于，通過以下步驟制備得到: (I)取大棗葉揀選、洗凈、干燥后放入提取罐中，加6 12倍量的509Γ95%乙醇，加熱回流廣3次，過濾、合并提取液，濃縮至無醇味后，得大棗葉的醇提物，備用； (2)取步驟(I)得到的大棗葉醇提物，加廣5倍量水，上大孔吸附樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為60°/Γ95%的乙醇洗脫，收集60°/Γ95%乙醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到大棗葉活性部位粗提物，備用； (3)取步驟(2)得到的大棗葉活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分別用水和20%乙醇洗脫，再用濃度為709Γ95%乙醇洗脫，并收集709Γ95%乙醇洗脫液，濃縮，經(jīng)減壓干燥得到大棗葉活性部位提取物； (4)取步驟(3)得到大棗葉活性部位提取物采用制備液相進(jìn)一步富集得到精制大棗提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大棗葉提取物，其特征在于，步驟(I)中提取條件為加10倍量濃度為80%的乙醇，加熱到80°C持續(xù)回流2小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大棗葉提取物，其特征在于，步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂為非極性大孔吸附樹脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的大棗葉提 取物，其特征在于，所述的非極性大孔吸附樹脂為DlOl型大孔吸附樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大棗葉提取物，其特征在于，步驟(3)中所述的聚酰胺樹脂的粒徑為60-80目。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大棗葉提取物，其特征在于，步驟(4)中所述的制備液相富集的色譜條件為:色譜柱為安捷倫反相C18柱，流動(dòng)相為甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脫，梯度洗脫的條件為:0至35分鐘，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分鐘甲醇的含量由45%上升到83%，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流速為5ml/min，檢測(cè)器為二極管陳列檢測(cè)器。
7.權(quán)利要求1所述的大棗葉提取物在制備防治肝損傷藥物或保健品中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的大棗葉提取物在制備防治肝損傷藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于，將大棗提取物和藥學(xué)上可接受的載體制成片劑、注射劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、湯劑、糖漿劑、合劑、煎膏劑或浸膏劑劑型的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種大棗葉活性提取物及其在制備防治肝損傷藥物或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明首次采用大孔樹脂耦合聚酰胺樹脂，然后通過制備液相制備大棗葉精制提取物，較傳統(tǒng)的分離純化方法分離效率更高，且分離得到的活性成分含量高，生物活性強(qiáng)，安全性高。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究表明，大棗葉提取物可顯著降低CCl4、D-GalN和乙醇所致肝損傷模型小鼠血清ALT、AST活性及肝組織MDA含量，增強(qiáng)肝臟SOD活性，對(duì)肝損傷具有很好的防治功效。因此大棗葉及大棗葉提取物有望開發(fā)成為新一代安全有效，用于防治肝損傷的藥物或保健品，同時(shí)也為大棗葉廢棄資源變廢為寶及棗樹資源綜合利用提供了途徑。
文檔編號(hào)A23L1/29GK103169788SQ20131013299
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2013年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月16日
發(fā)明者郭盛, 段金廒, 錢大瑋, 宿樹蘭 申請(qǐng)人:南京中醫(yī)藥大學(xué)