一種海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種海盤(pán)車(chē)多糖在預(yù)防和治療神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應(yīng)用。所述的海盤(pán)車(chē)多糖來(lái)源于羅氏海盤(pán)車(chē)和多棘海盤(pán)車(chē)，系采用稀酸提取，經(jīng)過(guò)過(guò)濾，脫鹽等步驟制得海盤(pán)車(chē)多糖。海盤(pán)車(chē)多糖具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用，對(duì)神經(jīng)毒素?fù)p傷兩種細(xì)胞系具有明顯的修復(fù)作用，表明它們可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及海盤(pán)車(chē)多糖在制備治療帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人類(lèi)平均壽命的逐年增加，世界正步入全球老齡化時(shí)代。與年齡有關(guān)的神經(jīng)退化性疾病也隨之增加，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面，主要表現(xiàn)為興奮與抑制過(guò)程減弱，大腦功能降低，記憶力減退和喪失，隨后出現(xiàn)識(shí)別功能的進(jìn)行性減退和情緒紊亂的加重等。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病。目前，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%。而老年性癡呆因其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)理，近期在防治上不可能取得突破性進(jìn)展，故西方有專(zhuān)家預(yù)言，老年性癡呆將是21世紀(jì)人類(lèi)第一殺手。帕金森病又稱(chēng)震顫麻痹，是中老年人常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，帕金森病的主要病理特征是是因位于中腦部位"黑質(zhì)"中的細(xì)胞發(fā)生病理性改變后，多巴胺的合成減少，抑制乙酰膽堿的功能降低，則乙酰膽堿的興奮作用相對(duì)增強(qiáng)。兩者失衡的結(jié)果便出現(xiàn)了“震顫麻痹”。最新資料表明，中國(guó)有I 7 O萬(wàn)帕金森病患者，其中5 5歲以上的人群中每I O O人就有I個(gè)帕金森病人，估計(jì)每年新增帕金森病人約I Q萬(wàn)人。老年性癡呆和帕金森病對(duì)患者、家庭和社會(huì)都帶來(lái)巨大的壓力，使得全世界對(duì)其給予眾多的關(guān)注，老年癡呆和帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的治療藥物研究成為老年醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個(gè)重要課題。
[0003]海洋是地球上所占面積最大的區(qū)域，因此開(kāi)發(fā)海洋藥物越來(lái)越受到重視，而海洋物質(zhì)提取在制備和開(kāi)發(fā)抗帕 金森藥物及在神經(jīng)保護(hù)方面有著不可估計(jì)的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
[0004]海盤(pán)車(chē)，屬于棘皮動(dòng)物門(mén)，海星綱，生活在潮間帶和近岸的平靜海域，以吞食各種貝類(lèi)、軟體動(dòng)物、海膽等為食。海盤(pán)車(chē)作為中藥已有幾千年的歷史，具有鎮(zhèn)驚安神、和胃止痛、厚腸止瀉，清熱解毒等功效，主治胃酸過(guò)多、胃潰瘍、腹瀉、癲癇等癥。近年來(lái)，海盤(pán)車(chē)體內(nèi)的活性成分相繼被發(fā)現(xiàn)，如留類(lèi)糖苷，留醇，蛋白酶，氨基酸，多肽，蛋白多糖，脂類(lèi)，生物堿等。但是以往的研究?jī)A向于海盤(pán)車(chē)提取物中留類(lèi)糖苷化合物的藥理學(xué)活性及其作用機(jī)理。而對(duì)海盤(pán)車(chē)多糖的研究卻不多。少量的文獻(xiàn)報(bào)道了海盤(pán)車(chē)酸性粘多糖具有抗凝血，抑制紅細(xì)胞凝聚及血栓形成等作用，但海盤(pán)車(chē)中其他多糖及生物活性卻鮮有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種海盤(pán)車(chē)多糖在預(yù)防和治療神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應(yīng)用。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一種海盤(pán)車(chē)多糖在治療和預(yù)防神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應(yīng)用。
[0007]并進(jìn)一步提供所述海盤(pán)車(chē)多糖的制備方法:首先采用異丙醇和乙醇分別處理海盤(pán)車(chē)脫脂，然后將脫脂后的海盤(pán)車(chē)采用稀酸提取法提取，過(guò)濾，提取液用堿調(diào)PH至接近中性，透析脫鹽，濃縮透析袋內(nèi)溶液，將濃縮液噴霧干燥、冷凍干燥或乙醇沉淀法制得海盤(pán)車(chē)多糖。
[0008]其中，所述的海盤(pán)車(chē)多糖主要組成單糖為甘露糖和葡萄糖，兩者的比例為1:3-1:10，硫酸基含量為5%-20%。
[0009]優(yōu)選的，所述的海盤(pán)車(chē)多糖來(lái)源于海星綱鉗棘目海盤(pán)車(chē)科海盤(pán)車(chē)屬羅氏海盤(pán)車(chē){Asterias roBesiofli)或多棘海盤(pán)車(chē)(A amurensis')。
[0010]優(yōu)選的，所述的海盤(pán)車(chē)多糖分子量為IKD~1000KD。
[0011]神經(jīng)細(xì)胞凋亡在神經(jīng)細(xì)胞損傷中起十分重要的作用，藥物可通過(guò)干預(yù)凋亡過(guò)程阻止其進(jìn)一步 發(fā)展，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞起到保護(hù)作用。SH-SY5Y細(xì)胞來(lái)源于人的神經(jīng)母細(xì)胞瘤，其形態(tài)和生理功能與正常神經(jīng)元相似，呈錐形，且具有明顯的軸突，是目前國(guó)際上研究神經(jīng)細(xì)胞功能較好的一種細(xì)胞。SY5Y細(xì)胞和MES23.5多巴胺能細(xì)胞分別是研究阿爾茨海默病和帕金森病常用的神經(jīng)細(xì)胞模型，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)海盤(pán)車(chē)多糖分別對(duì)神經(jīng)毒素?fù)p傷兩種細(xì)胞系具有明顯的修復(fù)作用，表明它們可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0012]圖1海盤(pán)車(chē)多糖SF-1對(duì)6-OHDA損傷的多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。其結(jié)果以平均值土SD表示。** (P<0.01)與6-OHDA進(jìn)行對(duì)比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
圖2海盤(pán)車(chē)多糖SF-2對(duì)6-OHDA損傷的多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。其結(jié)果以平均值土SD表示。* (P〈0.05)，與6-OHDA進(jìn)行對(duì)比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附后權(quán)利要求書(shū)限定的范圍。
[0014]本發(fā)明指出一種海盤(pán)車(chē)多糖，可在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應(yīng)用。所述葡聚糖的制備方法如下:
實(shí)施例1:羅氏海盤(pán)車(chē)多糖的制備
(I)將200g干羅氏海盤(pán)車(chē)粉碎，分別用3倍體積的異丙醇處理兩次，過(guò)濾，棄去異丙醇，然后將海盤(pán)車(chē)?yán)^續(xù)用3倍體積的乙醇處理兩次，過(guò)濾，棄去乙醇,將海盤(pán)車(chē)干燥。得率為80%。
[0015](2)將脫脂的海盤(pán)車(chē)160g，用3倍體積的0.1 M HCl溶液提取2h，過(guò)濾，提取液用堿調(diào)PH至5-8，濃縮，用截留分子量為3500Da透析袋透析2天，濃縮透析袋內(nèi)溶液，凍干得海盤(pán)車(chē)多糖(以SF-1表示)18.02g，得率為9.01%。
[0016]羅氏海盤(pán)車(chē)多糖的化學(xué)組分分析，單糖比例分析，硫酸根含量，分子量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。IR譜圖結(jié)果表明SF-1為硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出現(xiàn)硫酸基特征吸收峰。
[0017]實(shí)施例2:多棘海盤(pán)車(chē)多糖的制備
(I)將200g干多棘海盤(pán)車(chē)粉碎，分別用3倍體積的異丙醇處理兩次，過(guò)濾，棄去異丙醇，然后將海盤(pán)車(chē)?yán)^續(xù)用3倍體積的乙醇處理兩次，過(guò)濾，棄去乙醇,將海盤(pán)車(chē)干燥。得率為84%。
[0018](2)將脫脂的海盤(pán)車(chē)168g，用3倍體積的0.01 M HCl溶液提取3h，過(guò)濾，提取液用堿調(diào)pH至5-8,濃縮,用截留分子量為3500Da透析袋透析2天,濃縮透析袋內(nèi)溶液,加至食用乙醇中至乙醇終濃度為75%，得白色沉淀，將沉淀以95%乙醇洗滌，減壓干燥后得海盤(pán)車(chē)多糖(以SF-2表示)20.3g，得率為10.15%。
[0019]多棘海盤(pán)車(chē)多糖的化學(xué)組分分析，單糖比例分析，硫酸根含量，分子量分析結(jié)果見(jiàn)表1。IR譜圖結(jié)果表明SF-2為硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出現(xiàn)硫酸基特征吸收峰。
[0020]表1海盤(pán)車(chē)多糖及其分級(jí)樣品的化學(xué)分析
【權(quán)利要求】
1.一種海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用，其特征在于，所述海盤(pán)車(chē)多糖可在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用，其特征在于，所述海盤(pán)車(chē)多糖按照以下方法制備:首先采用異丙醇和乙醇分別處理海盤(pán)車(chē)脫脂，然后將脫脂后的海盤(pán)車(chē)采用稀酸提取法提取，過(guò)濾，將提取液中和，透析脫鹽，將透析截留液濃縮，將濃縮液噴霧干燥、冷凍干燥或乙醇沉淀法制得海盤(pán)車(chē)多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用，所述的海盤(pán)車(chē)多糖主要組成單糖為甘露糖和葡萄糖，兩者的摩爾比例為(1-3):10，硫酸基含量為5%-25%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用，其特征在于:所述的海盤(pán)車(chē)多糖來(lái)源于海星綱鉗棘目海盤(pán)車(chē)科海盤(pán)車(chē)屬羅氏海盤(pán)車(chē)(Asieria1S roIIestoni )或多棘海盤(pán)車(chē)(Aamurensis)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述海盤(pán)車(chē)多糖的應(yīng)用，其特征在于:所述的海盤(pán)車(chē)多糖分子量范圍為 1-1OOkD。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK103919801SQ201310010387
【公開(kāi)日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2013年1月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月11日
【發(fā)明者】張全斌, 張文靜, 王晶, 金維華 申請(qǐng)人:南通中國(guó)科學(xué)院海洋研究所海洋科學(xué)與技術(shù)研究發(fā)展中心, 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所