專利名稱：一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物技術領域，尤其是一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法。
背景技術：
國內(nèi)現(xiàn)有的新霉素發(fā)酵使用的原料主要是糧食加工類原料，如碎米、花生餅、黃豆餅等，為了能夠提高這些原材料的生物利用度，通常情況下需要將上述原料進行粉碎過篩，制成米粉、花生粉和黃豆粉。為了節(jié)省成本，目前，制造企業(yè)長期使用花生餅作為新霉素發(fā)酵生產(chǎn)原料，花生餅主要是由花生經(jīng)過熱榨或冷榨之后得到的剩余物，由于花生餅多為農(nóng)間小作坊生產(chǎn)，存在質(zhì)量不穩(wěn)定，質(zhì)量不均一的情況，因小作坊加工控制不嚴而導致黑色花生餅的情況發(fā)生(正 常的花生餅應為棕褐色)，黑色花生餅在經(jīng)過粉碎過篩后顏色不易辨別，企業(yè)將黑色花生餅應用于新霉素發(fā)酵生產(chǎn)后，使得發(fā)酵代謝異常，菌絲畸形嚴重，給發(fā)酵生產(chǎn)帶來了非常大的不利影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，可以解決花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定的問題，有效的保障了新霉素發(fā)酵生產(chǎn)。為解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案是一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于該方法由以下步驟組成I)培養(yǎng)斜面孢子將砂土孢子經(jīng)密封，干燥后，于0 4°C貯藏制得斜面孢子；2)培養(yǎng)斜面孢子懸浮液將斜面孢子于28±2°C，4 12天培養(yǎng)制得斜面孢子懸浮液；3)種子罐培養(yǎng)將斜面孢子懸浮液放入種子培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，種子罐中花生柏的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的I 2% ；4)發(fā)酵罐培養(yǎng)將經(jīng)種子罐培養(yǎng)的培養(yǎng)液送入發(fā)酵培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液中的花生柏的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的0 4% ；5)向發(fā)酵液中加入732樹脂，將發(fā)酵液濃度稀釋至13000u/ml以下，中和至pH值6. 4 7. 0制得稀發(fā)酵液，完成發(fā)酵步驟。步驟3)中，種子罐中的花生柏的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的1%。步驟3)中，發(fā)酵罐中的花生柏的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的2%?；ㄉ厥且悦摎せㄉ麨樵辖?jīng)有機溶劑提取或預壓浸提法提取油脂后的副產(chǎn)品?；ㄉ靥娲ㄉ灪蠓N子罐和發(fā)酵罐中培養(yǎng)液配方比例的變化如表I所示(％為質(zhì)量百分比)表I
本發(fā)明提供的一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，有益效果如下I、解決了花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定的難題由于新霉素發(fā)酵工藝中大量使用糧食類加工產(chǎn)品作為微生物發(fā)酵的碳源和氮源，因此，糧食類原材料的質(zhì)量穩(wěn)定性對于新霉素發(fā)酵生產(chǎn)水平和工藝控制至關重要?；ㄉ炞鳛榛ㄉ魑锏拇旨庸じ碑a(chǎn)品，存在著產(chǎn)量低、供應無保障、制備工藝粗糙、質(zhì)量不穩(wěn)定、產(chǎn)品均一性難以保障等諸多缺點。長期以來，新霉素發(fā)酵生產(chǎn)水平波動和工藝控制偏差都與花生餅原料的質(zhì)量不穩(wěn)定有著密切的聯(lián)系。通過使用花生柏替代花生餅用于硫酸新霉素發(fā)酵，很好的解決了這一難題，花生柏來自于工業(yè)化大生產(chǎn)的油脂加工企業(yè)，其質(zhì)量穩(wěn)定可靠、供應有保障，能夠滿足企業(yè)新霉素發(fā)酵生產(chǎn)的工藝要求。2、解決了花生餅質(zhì)量不均一的難題花生餅的來源絕大多數(shù)是農(nóng)村個體小作坊，其質(zhì)量均一性很難保障，往往一批的花生餅中混有數(shù)個甚至數(shù)十個不同來源的產(chǎn)品，新霉素生產(chǎn)企業(yè)現(xiàn)行的產(chǎn)品抽樣檢驗程序和工藝控制管理都無法避免和解決這一問題。而花生柏來自于大型的油脂加工企業(yè)，其企業(yè)規(guī)模大，生產(chǎn)穩(wěn)定，有良好的工藝控制和質(zhì)量管理，來自于這樣企業(yè)的花生柏其質(zhì)量穩(wěn)定，產(chǎn)品均一，很好的解決了原材料質(zhì)量不均一導致生產(chǎn)發(fā)生波動的難題，對穩(wěn)定企業(yè)新霉素發(fā)酵生產(chǎn)起到了非常積極的作用。3、減少了影響發(fā)酵生產(chǎn)的主要波動因素新霉素發(fā)酵生產(chǎn)受原材料、蒸汽、空氣、攪拌、工藝控制等多因素的影響，往往在生產(chǎn)遇到波動的時候，需要判斷和排除的因素非常多。在以往的生產(chǎn)中，花生餅的質(zhì)量狀況是影響新霉素發(fā)酵生產(chǎn)的一個重要因素，在生產(chǎn)發(fā)生波動時，往往需要通過搖瓶試驗，增加檢驗項目或?qū)ｍ棿蠊拊囼瀬砼袛嗪驮u估花生餅對生產(chǎn)的影響程度，由于花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定，產(chǎn)品不均一，給判斷和評估帶來了非常大的困難。而花生柏在應用后，在新霉素發(fā)酵生產(chǎn)表現(xiàn)非常穩(wěn)定，即使在生產(chǎn)遇到波動的時候，也能夠準確的判斷和評估其對生產(chǎn)的影響程度，降低了生產(chǎn)波動后對發(fā)酵工藝控制和調(diào)整的難度。4、提高了供貨的可靠性，有效的保障了新霉素發(fā)酵生產(chǎn)花生柏較之花生餅，其來源更加穩(wěn)定，供貨及時有保障，出現(xiàn)供貨斷檔、產(chǎn)品不合格退貨等情況的幾率大大降低。特別是每年春節(jié)期間，由于作坊停工、物資運輸?shù)葐栴}，使得花生餅的供應更加難以保障，而花生柏由于其生產(chǎn)企業(yè)屬大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品供應穩(wěn)定，供貨合同執(zhí)行有保障，很好的解決了物資供應不穩(wěn)定的問題。使用花生柏替代花生餅后，經(jīng)檢測，生產(chǎn)出的硫酸新霉素質(zhì)量沒有任何變化，檢驗結果如表2、表3所不表2 :使用花生餅時期(2011. 1-4月)成品質(zhì)量情況
權利要求
1.一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于該方法由以下步驟組成 1)培養(yǎng)斜面孢子將砂土孢子經(jīng)密封，干燥后，于O 4°c貯藏制得斜面孢子； 2)培養(yǎng)斜面孢子懸浮液將斜面孢子于28±2°C，4 12天培養(yǎng)制得斜面孢子 懸浮液； 3)種子罐培養(yǎng)將斜面孢子懸浮液放入種子培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，種子罐中花生柏 的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的I 2% ； 4)發(fā)酵罐培養(yǎng)將經(jīng)種子罐培養(yǎng)的培養(yǎng)液送入發(fā)酵培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，發(fā)酵罐中的 培養(yǎng)液中的花生柏的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的O 4% ； 向發(fā)酵液中加入732樹脂，將發(fā)酵液濃度稀釋至13000 u /ml以下，中和 至 pH值6. 4 7. 0制得稀發(fā)酵液，完成發(fā)酵步驟。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于步驟3)中，種子罐中的花生柏的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的1%。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于步驟3)中，發(fā)酵罐中的花生柏的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的2%。
全文摘要
一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于該方法由以下步驟組成1)培養(yǎng)斜面孢子將砂土孢子制得斜面孢子；2)培養(yǎng)斜面孢子懸浮液將斜面孢子于28±2℃，4～12天培養(yǎng)制得斜面孢子懸浮液；3)種子罐培養(yǎng)將斜面孢子懸浮液放入種子培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，種子罐中花生粕的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的1～2%；4)發(fā)酵罐培養(yǎng)將經(jīng)種子罐培養(yǎng)的培養(yǎng)液送入發(fā)酵培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液中的花生粕的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的0～4%；5)將發(fā)酵液濃度稀釋稀發(fā)酵液，完成發(fā)酵步驟。本發(fā)明提供的一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，可以解決花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定的問題，有效的保障了新霉素發(fā)酵生產(chǎn)。
文檔編號C12P19/52GK102965417SQ20121046566
公開日2013年3月13日 申請日期2012年11月19日 優(yōu)先權日2012年11月19日
發(fā)明者沈聯(lián)兵, 周云, 李文豪, 何連明, 姚明高 申請人:宜昌三峽制藥有限公司