專利名稱：通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飲料及其制備方法，特別是涉及一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料及其制備方法。
背景技術(shù)：
松露(學(xué)名Tubermagnatum ;melanosporum ;sinensis ;indicum)是一種多生長在松樹、櫟樹、橡樹下，一年生的天然真菌類植物。因其是被豬從地下拱出 ，國人稱“豬拱菌”、“拱菌”，亦稱“無根藤果”、“隔山撬”;法國名"perigord truffle”，英國名“truffle”。屬真菌門、子囊菌綱、塊菌目、塊菌屬食用真菌。它與肥鵝肝、魚子醬合稱為“法國三大美食珍品”。松露對生長環(huán)境的要求極其苛刻，造成了它的珍稀昂貴。松露與生俱來的獨(dú)特香味更使它成為在法國菜、意大利菜中極為珍貴的調(diào)味圣品。歷史上最大的白松露發(fā)現(xiàn)于1951年，重約4磅，當(dāng)時售價(jià)為5000美元左右。在第二次世界大戰(zhàn)結(jié)束不久的年代里，5000美元的珍貴程度可想而知。目前，國內(nèi)外的相關(guān)研究主要集中在松露功能因子的提取及藥理、藥效上。但是，在松露子實(shí)體的人工栽培領(lǐng)域，卻受到很多的技術(shù)限制，很少大規(guī)模地進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)以及廣泛地民用化使用，同時，該技術(shù)領(lǐng)域也難以商業(yè)化使用。十年前，自然界中松露子實(shí)體的年保有量約有I萬噸，但是目前的保有量卻只有約5千噸，而且，如上所述，松露子實(shí)體又由于技術(shù)上原因，難以大量的人工生產(chǎn)，因此，人們對松露保健功效和治療功效的渴求與松露子實(shí)體保有量的短缺產(chǎn)生了顯著的矛盾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷而提供一種能夠大規(guī)模地進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，并且能夠以較低的成本生產(chǎn)出效用較高的松露子實(shí)體的通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下設(shè)計(jì)方案本發(fā)明的一種通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，本發(fā)明所述的制備方法包括如下步驟:A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為
O.8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到松露保健飲料。優(yōu)選地，在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。優(yōu)選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。優(yōu)選地，在所述步驟B中，發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5，折光糖度達(dá)到
2.8 3. 8%,以及菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%。 優(yōu)選地，在所述步驟D中，松露菌發(fā)酵液與松露菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7，折光糖度為2 6%。本發(fā)明的另一目的在于提供一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料，所述松露保健飲料是由如下方法制備而成A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用 水提取，浸提比為O. 8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到松露保健飲料。優(yōu)選地，在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。優(yōu)選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明采用菌種原產(chǎn)地的松露菌進(jìn)行分離、純化和培育，采用工業(yè)化液體深層發(fā)酵技術(shù)，使得松露菌種能夠在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行大量的繁殖，并且，所得的代謝產(chǎn)物以及菌絲體中均含有與原松露菌效用相同的有效成分，此外，本發(fā)明還使得松露菌的子實(shí)體能夠在工業(yè)化條件進(jìn)行生產(chǎn)和培育，工藝簡單、成本可控，從而能夠顯著地降低生產(chǎn)成本，使得普通消費(fèi)者也能使用上名貴的保健飲料。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :如下為本發(fā)明一種通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法的優(yōu)選實(shí)施例，本發(fā)明所述的制備方法包括以下主要步驟A、首先，將松露菌接入培養(yǎng)液中，本發(fā)明的培養(yǎng)液可以為現(xiàn)有技術(shù)中的各種適于松露菌液體培養(yǎng)的培養(yǎng)液，并在18°C的溫度下以300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72小時，獲得菌種液；B、然后，將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8%大麥芽、重量份6%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5%，并在27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、再將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 8:5，浸提溫度為95°C，浸提時間為2小時，從而獲得松露菌絲體提取液；進(jìn)一步，本發(fā)明主要利用工業(yè)化液體深層發(fā)酵技術(shù)獲得的松露發(fā)酵液及濕菌體，來制備及生產(chǎn)松露保健飲料；D、最后，將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2倍，從而得到松露保健飲料。因此，通過本發(fā)明的制備方法，可以生產(chǎn)大眾直飲產(chǎn)品，包括保健品和飲料。并且，本發(fā)明的制備方法可以直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)，且成本低，所得產(chǎn)品營養(yǎng)功能高，有利于消費(fèi)者及人民大眾的日常保健。
更具體地，本發(fā)明的制備方法能夠直接進(jìn)行工業(yè)化大規(guī)模的連續(xù)生產(chǎn)。批量生產(chǎn)后，通過本發(fā)明的制備方法可以每日生產(chǎn)10噸以上的松露菌發(fā)酵液，及每日生產(chǎn)20噸 50噸以上的最終產(chǎn)品。另一方面，在本發(fā)明制備方法的步驟D中，用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍，優(yōu)選地，在本實(shí)施例中，用水將所述混合液稀釋2倍；并且，進(jìn)一步，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。這些輔料可以提高本發(fā)明方法所制備飲料的口感，使得消費(fèi)者在飲用本發(fā)明所述的保健飲料時，能夠減少或去除中藥的味苦，而更多的是日常飲料的爽口。并且，通過本發(fā)明方法獲得的一定量的松露保健飲料，其功能性成分的含量與松露子實(shí)體相近或高于松露子實(shí)體，其效用與直接服用松露相當(dāng)。更優(yōu)選地，在本實(shí)施例所述的步驟B中，發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5，折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%，同時菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%，上述三種指標(biāo)(pH值、折光糖度、菌絲體得率)優(yōu)選為同時達(dá)到各自相應(yīng)的參數(shù)，即可終止發(fā)酵。
另外，在本實(shí)施例所述的步驟D中，松露菌發(fā)酵液與松露菌絲體提取液相互混合后的自然PH值為6 7，折光糖度為2 6%。本發(fā)明方法所得產(chǎn)物的功能性成分含量和質(zhì)量均非常穩(wěn)定，并高于現(xiàn)代藥理學(xué)研究分析對天然蛹蟲草成分含量的數(shù)值認(rèn)定范圍。本發(fā)明制備方法的工業(yè)化控制能力強(qiáng)，且其成本遠(yuǎn)低于天然原料。實(shí)施例2 如下將提供本發(fā)明制備方法的另一種優(yōu)選實(shí)施例。本實(shí)施例的制備方法包括A、首先，選用食、藥用菌松露，將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在28°C的溫度下以200次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份12%大麥芽、重量份3%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為10%，并在23°C的溫度下通氣培養(yǎng)72小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為1: 2，浸提溫度為90°C，浸提時間為3小時，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋5倍，從而得到松露保健飲料。實(shí)施例3 如下將提供本發(fā)明制備方法的再一種優(yōu)選實(shí)施例。本實(shí)施例的制備方法包括如下步驟A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在22°C的溫度下以260次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)80小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份10%大麥芽、重量份5%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為7%，并在25°C的溫度下通氣培養(yǎng)60小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 9:4，浸提溫度為93°C，浸提時間為2. 5小時，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋4倍，從而得到松露保健飲料。實(shí)施例4 本實(shí)施例提供一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料，所述松露保健飲料是由如下方法制備而成A、將選用食、藥用松露菌接入培養(yǎng)液中，并在18 28°C的溫度(本實(shí)施例優(yōu)選為20°C )下以200 300次/分鐘(本實(shí)施例優(yōu)選為260次/分鐘)的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(本實(shí)施例優(yōu)選為82小時)，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12% (本實(shí)施例優(yōu)選為11%)大麥芽、重量份3 6% (本實(shí)施例優(yōu)選為5%)大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5 10% (本實(shí)施例優(yōu)選為8%)，并在23 27°C(本實(shí)施例優(yōu)選為26°C )的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(本實(shí)施例優(yōu)選為56小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 8 1:2 5 (本實(shí)施例優(yōu)選為1:3)，浸提溫度為90 95°C (本實(shí)施例優(yōu)選為92°C)，浸提時間為2. 5小時，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到松露保健飲料。其中，在步驟D中，用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍，并且優(yōu)選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。這些輔料可以提高本發(fā)明所述飲料的口感，使得消費(fèi)者在飲用本發(fā)明的保健飲料時，能夠減少或去除中藥的味苦，而更多的是日常飲料的爽口。并且，本發(fā)明的松 露保健飲料，其功能性成分的含量與松露子實(shí)體相近或高于松露子實(shí)體，其效用與直接服用松露相當(dāng)。優(yōu)選地，在本實(shí)施例所述的步驟B中，發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5，折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%，同時菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%，上述三種指標(biāo)(pH值、折光糖度、菌絲體得率)同時達(dá)到各自相應(yīng)的指標(biāo)，即可終止發(fā)酵。另外，在本實(shí)施例所述的步驟D中，松露菌發(fā)酵液與松露菌絲體提取液相互混合后的PH值為6 7，折光糖度為2 6%。本發(fā)明一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料的其他實(shí)施例與上述實(shí)施例
1、2和3相同或相近，在此不再贅述。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，不難從上述實(shí)施例1、2和3中獲得相關(guān)的技術(shù)啟示，并用以制備或生產(chǎn)松露保健飲料。顯而易見，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，可以用本發(fā)明的一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料及其制備方法，形成各種類型的保健飲料及其制備方法。上述實(shí)施例僅供說明本發(fā)明之用，而并非是對本發(fā)明的限制，有關(guān)技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明范圍的情況下，還可以作出各種變化和變型，因此所有等同的技術(shù)方案也應(yīng)屬于本發(fā)明的范疇，本發(fā)明的專利保護(hù)范圍應(yīng)由各權(quán)利要求限定。
權(quán)利要求
1.通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，其特征在于所述制備方法包括如下步驟 A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時，獲得菌種液； B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液； C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O.8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得松露菌絲體提取液； D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到松露保健飲料。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，其特征在于在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟B中，發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5，折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%，以及菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的通過液體深層發(fā)酵制備松露保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟D中，松露菌發(fā)酵液與松露菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7，折光糖度為2 6% ο
6.一種通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料，其特征在于所述松露保健飲料是由如下方法制備而成 A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時，獲得菌種液； B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時，經(jīng)過生物發(fā)酵，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液； C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O.8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得松露菌絲體提取液； D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到松露保健飲料。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料，其特征在于在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料，其特征在于在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過液體深層發(fā)酵制備的松露保健飲料及其制備方法。其中制備方法包括A、將松露菌接入培養(yǎng)液中，并在搖床上震蕩培養(yǎng)，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含大麥芽、大豆的液體培養(yǎng)基中，通氣培養(yǎng)后，獲得發(fā)酵的松露菌絲體以及松露菌發(fā)酵液；C、將步驟B中得到的松露菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后，用水提取，從而獲得松露菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的松露菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的松露菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2～5倍，從而得到松露保健飲料。本發(fā)明采用液體深層發(fā)酵技術(shù)，使得松露菌種能夠在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行工業(yè)化的大量繁殖，因此，工藝簡單、成本較低。
文檔編號A23L1/29GK102771860SQ201210254920
公開日2012年11月14日 申請日期2012年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月20日
發(fā)明者黃曉青 申請人:黃曉青