專利名稱：前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及基因芯片，尤其涉及前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片。
背景技術(shù)：
納米金標記芯片具有簡單、快速、靈敏度高、特異性強、價廉、樣品所需量少等優(yōu)點，可以進行定性及半定量檢測。現(xiàn)在納米金標記芯片技術(shù)存在納米金與探針結(jié)合困難，納米金濃度及顯色條件難掌握，以納米金為標記物的免疫分析法及其它速測技術(shù)的開發(fā)過程需投入巨大的資金和較長時間。近年來，我國男性前列腺癌(PCa)發(fā)病率呈明顯上升趨勢，在歐美國家，前列腺癌已連續(xù)多年居男性惡性腫瘤發(fā)病率首位，其發(fā)病率超過肺癌，死亡率在男性惡性腫瘤中居 第二位。我國PCa的發(fā)病率雖然較低，但發(fā)現(xiàn)時多屬中晚期，在中國前列腺癌已經(jīng)成為常見惡性腫瘤。對前列腺癌的早期診斷有助于早期治療，提高生存率。基因芯片技術(shù)具有高通量、高特異性等特點，在疾病診斷等領(lǐng)域應用前景廣泛。納米金為球狀生物相容性物質(zhì)，由惰性硅質(zhì)組成，表層通常包被一層薄金，可以作為雜交探針應用于單核苷酸多態(tài)性(SNP)研究，或者檢測癌癥等疾病的分子標記。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)不足而提供本發(fā)明提供了一種前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，所述芯片包含在前列腺癌和前列腺增生中表達差異明顯的11個基因、前列腺癌細胞株RNA、納米金標寡核苷酸探針，所述 11 個基因為 IGFl、P27、AR、PSMA, KLK3、PCNA, Ki_67、KLK1、KLK2、TMPRSS2 和SREBF2。IGFl是由前列腺基質(zhì)細胞產(chǎn)生并對雄激素的刺激具有反應并通過旁分泌的形式促進前列腺上皮細胞的增殖的生長因子。P27是細胞周期素依賴激酶抑制劑家族中的一種，P27是一個公認的腫瘤抑制基因。AR為雄激素受體。PSMA是前列腺特異性膜抗原。KLK1/KLK2/KLK3/TMPRSS2 :同屬于人激肽釋放酶基因家族。Ki-67蛋白是一個可靠而迅速地反映惡性腫瘤增生率的指標。PCNA為非組織酸性核蛋白。SREBF2基因編碼一種廣泛表達的轉(zhuǎn)錄因子，這種轉(zhuǎn)錄因子通過刺激固醇調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄來控制膽固醇的動態(tài)平衡。較佳的，所述納米金標寡核苷酸探針的序列如下表
權(quán)利要求
1.一種前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，其特征在于，所述芯片包含在前列腺癌和前列腺增生中表達差異明顯的11個基因DNA、前列腺癌細胞株RNA、納米金標寡核苷酸探針，所述 11 個基因為 IGFl、P27、AR、PSMA、KLK3、PCNA、Ki-67、KLKl、KLK2、TMPRSS2 和SREBF2。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，其特征在于，所述芯片為硝酸纖維素制成的芯片。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，其特征在于，所述芯片載體為氨基修飾的玻璃芯片。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，其特征在于，所述納米金標寡核苷酸探針長度為60-70個堿基。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，其特征在于，所述芯片的納米金濃度為O. 250D/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的納米金標記芯片，在診斷前列腺癌和前列腺增生的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片，主要包含基于經(jīng)過基因芯片篩選并經(jīng)熒光定量PCR驗證后得到的在前列腺癌和前列腺增生中表達差異明顯的11個基因(IGF1、P27、AR、PSMA、KLK3、PCNA、Ki-67、KLK1、KLK2、TMPRSS2、SREBF2)，前列腺癌細胞株RNA，納米金標寡核苷酸探針，硝酸纖維素制成的芯片。本發(fā)明前列腺癌多基因診斷的納米金標記芯片可應用于臨床上對前列腺癌的早期診斷。
文檔編號C12Q1/68GK102888450SQ20121000349
公開日2013年1月23日 申請日期2012年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月5日
發(fā)明者陳清標, 陳錫彬, 鐘惟德 申請人:廣州市第一人民醫(yī)院, 鐘惟德, 陳清標, 陳錫彬