專利名稱:無菌雞全血清的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種無菌雞全血清的制備方法。
背景技術(shù):
作為輔料加入制備副雞嗜血桿菌或禽多殺巴氏桿菌等細菌的培養(yǎng)基的雞全血清, 主要應(yīng)用于細菌培養(yǎng),現(xiàn)市場購買雞血清,價格高,質(zhì)量參差不齊,往往影響生產(chǎn)的穩(wěn)定性和半成品的含菌量。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種營養(yǎng)豐富、價格低廉,可直接應(yīng)用于細菌培養(yǎng)的無菌雞全血清的制備方法。本發(fā)明的具體技術(shù)方案為無菌雞全血清的制備方法,它包括以下步驟
(1)雞血用離心機離心,收集濾過液,凍存;
(2)7-10天后取出化凍,用離心機離心后取上清液,冷凍保存;
(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,進行兩次粗濾澄清;
(4)過濾除菌;
(5)室溫放置,然后置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。無菌雞全血清的制備方法,優(yōu)選方案包括以下步驟
(1)雞血用管式離心機或立式冷凍離心機離心,用血清瓶收集濾過液,置于-20°c凍
存;
(2)7-10天后取出化凍,用小離心機離心后取上清液分裝在干凈的血清瓶中,置于-20°C冷凍保存;
(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,先用桶式濾器加孔徑為1. 5mm的濾板粗濾澄清,提供壓力約0. 1 — 0. 3MPa ;再用同種方法用孔徑為0. 5mm的濾板粗濾;
(4)然后用滅菌的兩層濾板一起過濾除菌;
(5)室溫放置一天后,置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。無菌雞全血清的制備方法,最優(yōu)選方案包括以下步驟
(1)雞血用GQ105型管式離心機10000轉(zhuǎn)/分或立式冷凍離心機3000轉(zhuǎn)/分離心 15min,用血清瓶收集濾過液,置于-20°C凍存;
(2)7-10天后取出化凍,用小離心機4000轉(zhuǎn)/分離心40min后取上清液分裝在干凈的血清瓶中,置于-20°C冷凍保存;
(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,然后用桶式濾器加孔徑為1. 5mm的濾板粗濾澄清,提供壓力約0. 1 — 0. 3MPa ;再用同種方法用孔徑為0. 5mm的濾板粗濾;
(4)然后用滅菌的孔徑分別為0.5mm和0. 2mm兩層濾板一起過濾除菌;
(5)室溫放置一天后,置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。步驟(3)所述壓力由氣體壓縮機提供。
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步驟(3)所述桶式濾器為2000ml桶式濾器。本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明方法制備的雞全血清營養(yǎng)豐富,價格低廉,可作為輔料代替成品雞血清加入制備副雞嗜血桿菌或禽多殺巴氏桿菌等細菌的培養(yǎng)基,直接應(yīng)用于細菌培養(yǎng),用于細菌抗原的批量生產(chǎn)。一方面可提高細菌培養(yǎng)的含菌量,極大的提高半成品的質(zhì)量,另一方面可極大的降低生產(chǎn)成本。
具體實施例方式實施例
(1)在屠宰場買雞血50000ml左右,用GQ105型管式離心機10000轉(zhuǎn)/分或立式冷凍離心機3000轉(zhuǎn)/分離心15min,用血清瓶收集濾過液,置于_20°C凍存;
(2)7-10天后取出化凍,用小離心機4000轉(zhuǎn)/分離心40min后取上清液分裝在干凈的血清瓶中,置于-20°C冷凍保存;
(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,然后用2000ml桶式濾器加孔徑為1. 5mm的濾板粗濾澄清,氣體壓縮機提供壓力約0. 1 — 0. 3MPa ;再用同種方法用孔徑為 0. 5mm的濾板粗濾;
(4)然后用滅菌的孔徑分別為0.5mm和0. 2mm兩層濾板一起過濾除菌;
(5)室溫放置一天后,置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時后,用普通平板或斜面做無菌檢驗,檢驗合格后4°C或_20°C保存?zhèn)溆谩J褂眯Чe例按照實施例方法制備的雞全血清可作為輔料代替成品雞血清加入制備副雞嗜血桿菌或禽多殺巴氏桿菌等細菌的培養(yǎng)基,用于細菌抗原的批量生產(chǎn)。一方面可提高細菌培養(yǎng)的含菌量,另一方面可極大的降低生產(chǎn)成本。具體數(shù)據(jù)列表如下
權(quán)利要求
1.無菌雞全血清的制備方法,其特征是,它包括以下步驟(1)雞血用離心機離心,收集濾過液,凍存;(2)7-10天后取出化凍,用離心機離心后取上清液,冷凍保存;(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,進行兩次粗濾澄清;(4)過濾除菌;(5)室溫放置,然后置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無菌雞全血清的制備方法,其特征是,它包括以下步驟(1)雞血用管式離心機或立式冷凍離心機離心,用血清瓶收集濾過液,置于-20°C凍存;(2)7-10天后取出化凍,用小離心機離心后取上清液分裝在干凈的血清瓶中,置于-20°C冷凍保存;(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,先用桶式濾器加孔徑為1. 5mm的濾板粗濾澄清,提供壓力約0. 1 — 0. 3MPa ;再用同種方法用孔徑為0. 5mm的濾板粗濾;(4)然后用滅菌的兩層濾板一起過濾除菌;(5)室溫放置一天后,置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。
3.、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的無菌雞全血清的制備方法,其特征是,它包括以下步驟(1)雞血用GQ105型管式離心機10000轉(zhuǎn)/分或立式冷凍離心機3000轉(zhuǎn)/分離心 15min,用血清瓶收集濾過液,置于-20°C凍存;(2)7-10天后取出化凍,用小離心機4000轉(zhuǎn)/分離心40min后取上清液分裝在干凈的血清瓶中,置于-20°C冷凍保存;(3)凍存3— 5天后,取出放在溫室中將血清化開,然后用桶式濾器加孔徑為1. 5mm的濾板粗濾澄清,提供壓力約0. 1 — 0. 3MPa ;再用同種方法用孔徑為0. 5mm的濾板粗濾;(4)然后用滅菌的孔徑分別為0.5mm和0. 2mm兩層濾板一起過濾除菌;(5)室溫放置一天后,置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時,即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的無菌雞全血清的制備方法,其特征是,步驟(3)所述壓力由氣體壓縮機提供。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的無菌雞全血清的制備方法,其特征是,步驟(3)所述桶式濾器為2000ml桶式濾器。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種無菌雞全血清的制備方法。其目的在于提供一種營養(yǎng)豐富、價格低廉,可直接應(yīng)用于細菌培養(yǎng)的無菌雞全血清的制備方法。本發(fā)明的具體技術(shù)方案為無菌雞全血清的制備方法,它包括以下步驟(1)雞血用離心機離心,收集濾過液,凍存;(2)7-10天后取出化凍,用離心機離心后取上清液,冷凍保存;(3)凍存3-5天后,取出放在溫室中將血清化開,進行兩次粗濾澄清;(4)過濾除菌;(5)室溫放置,然后置于37℃環(huán)境培養(yǎng)24小時,即得。本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明方法制備的雞全血清營養(yǎng)豐富,價格低廉,可作為輔料直接應(yīng)用于細菌培養(yǎng),一方面可提高細菌培養(yǎng)的含菌量,另一方面可極大的降低生產(chǎn)成本。
文檔編號C12N1/20GK102424810SQ20111045550
公開日2012年4月25日 申請日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者李本科, 楊靈芝, 董新榮, 賈紅梅, 馬景霞 申請人:山東濱州博萊威生物技術(shù)有限公司