專利名稱：一種蹄甲肽的提取方法
技術領域：
本發(fā)明方法涉及豬蹄甲深加工技術領域，具體涉及一種蹄甲肽的提取方法，是一種以豬蹄甲為原料，通過生物工程技術提取蹄甲肽的方法。
背景技術：
豬蹄甲味咸、平，可以治療咳嗽喘息、痔瘡、白禿、凍瘡。豬蹄甲主要含角蛋白、肽類、氨基酸類、酯類、糖類、留體化合物及無機鹽等化學成分，一些成分具有明顯的藥理活性。對豬蹄甲的止血成分分析表明，其無機成分所含9種元素一鈣、鎂、磷、硼、鐵、銅、錳和硅，均無止血作用；非蛋白質有機成分中的留體類、酚類、糖類和氨基酸類物質亦無止血作用；蛋白質成分含膠原蛋白、彈性蛋白和角蛋白，除膠原蛋白外，均與止血作用有關。對豬蹄甲粉酸水解后進行氨基酸及酸性多糖分析證實，豬蹄甲含17種氨基酸，總量為93. 9% ；其中必需氨基酸7種，占總量27. 9% ；非必需氨基酸10種，占總量的66% ；酸性多糖含量以氨基己糖計為0.85%。而蹄甲肽是豬蹄甲提取物，是角蛋白部分水解生成的多肽。豬蹄甲肽有直接興奮心肌的作用，使血壓先略升而后明顯下降。以蹄甲肽為原料的產(chǎn)品婦血寧具有促凝血和抗纖溶雙重作用，并且可能對凝血和纖溶系統(tǒng)的平衡有調節(jié)作用。通過豬蹄甲對溴醋酸抑制巰基酶的影響，以及對巰基封閉劑溶血作用和對冷藏血液中紅細胞的影響實驗證明，豬蹄甲對紅細胞巰基酶、膜巰基蛋白和紅細胞本身都有保護作用。研究比較豬蹄甲和穿山甲消癰作用，證明豬蹄甲和穿山甲消癰作用機制與增強白細胞吞噬功能，提高血清S0D(超氧化物岐化酶)活性、消除自由基、降低MDA (丙二醛)含量有關，在消癰作用方面豬蹄甲對穿山甲似有可替代性。且蹄甲肽具有雙向調節(jié)細胞免疫的作用，其作用顯著而持久。蹄甲肽可興奮子宮，增加子宮收縮的頻率和幅度，節(jié)律性地興奮子宮肌影響內膜的血管，使血管呈擴張和收縮的雙相變化，從而改善“功血”的子宮內膜血管血流障礙；本品還可調節(jié)內分泌，通過促進腎上腺束狀帶分泌糖皮質激素，抑制纖維蛋白溶解，減少血管通透性，穩(wěn)定溶酶體膜等作用，從而改善或制止“功血”時出血。同蹄甲多肽相比，蹄甲肽具有更好的療效，具有更加廣闊的市場前景。傳統(tǒng)蹄甲多肽的生產(chǎn)方法主要是豬蹄甲清洗、烘干、粉碎、配水、堿提取(兩次)、 濃縮、烘干、粉碎。此工藝生產(chǎn)時間長，堿溶液使用量過大，容易破壞藥效成分，環(huán)境污染嚴重，所生產(chǎn)的產(chǎn)品分子量大，人體吸收利用率低?？傊壳疤崛√慵锥嚯牡膫鹘y(tǒng)工藝存在的問題有堿用量大、環(huán)境污染嚴重、和收率偏低，屬于初加工，不能直接利用。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術中存在的不足，提供一種產(chǎn)品收率高、 便于于工業(yè)化生產(chǎn)的蹄甲肽的提取方法。為了為解決上述技術問題，本發(fā)明采取如下技術方案1)取健康豬蹄甲用40-45°C水清洗洗凈，加蹄甲重量5-8倍水升溫至90-95°C蒸煮 1. 5-2h，烘干；
2 )將烘干的豬蹄甲用粉碎機粉碎，過80目篩得蹄甲粉；
3)按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升溫至90-95°C，蒸煮1.5_2h，再降溫至50_55°C，調節(jié)pH值至7. 5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入復合蛋白酶，恒溫攪拌酶解4-5h，酶解過程中保持體系PH值穩(wěn)定；
4)將得到的酶解液升溫至90-95°C，恒溫滅酶10-15min；
5)將酶解液趁熱過濾，得上清液；
6)將上清液冷卻至50-55°C，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脫色、除腥，攪拌 1-1. 5h，過濾除去活性炭，得濾液；
7)將濾液用膜分離裝置進行分離，脫鹽并濃縮；
8)濃縮液經(jīng)干燥后，得到產(chǎn)品蹄甲肽。所述的粉碎先用粗碎機粉碎，篩孔徑為5mm，再用超微粉碎機粉碎，粉碎后過80目篩。所述的蹄甲肽分子量小于2000道爾頓。所述的干燥為噴霧干燥。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明方法的優(yōu)點和有益效果如下
1、采用本發(fā)明工藝生產(chǎn)出來的蹄甲肽的分子量1000道爾頓以下肽的含量可達到90% 以上，人體吸收率達99%以上，改善了人體吸收難的問題；
2、采用本發(fā)明的兩次蒸煮工藝，第一次蒸煮即去掉了產(chǎn)品中的異味，又軟化了產(chǎn)品中的角質層；第二次蒸煮提高了液體物料的乳化型，有利于與酶的反應，可以縮短酶解時間、 提高產(chǎn)品收率，收率達45%以上；
3、本發(fā)明方法不產(chǎn)生任何有毒有害物質，安全，無毒副作用，可廣泛用于食品、藥品、保健品和生物合成等領域；
4、本發(fā)明采用先粗碎后超微粉碎的方法，即改善了豬蹄甲粉碎難的問題，又可以為酶解提供了條件。
具體實施例方式下面通過具體的實施例對本發(fā)明方法做進一步的詳細說明。實施例1
稱取健康豬蹄甲1kg，用41°C水清洗兩次、洗凈，加5kg水升溫至90°C蒸煮2h，用電熱烘箱烘干；烘干的豬蹄甲先用粗碎機粉碎，篩孔徑為5mm，再用超微粉碎機粉碎，粉碎后過80目篩得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入12kg水，升溫至90°C，蒸煮2h，再降溫至55°C，用食品級氫氧化鈉調節(jié)PH值至8，加入IOg復合蛋白酶，恒溫攪拌酶解5h，酶解過程中用氫氧化鈉保持體系PH值穩(wěn)定；將得到的酶解液升溫至90°C，恒溫滅酶15min ；將酶解液趁熱過濾，得上清液；上清液冷卻至55°C，加入30g活性炭脫色、除腥，攪拌lh，過濾除去活性炭，得濾液； 將濾液用膜分離裝置進行分離，脫鹽并濃縮；濃縮液經(jīng)噴霧干燥后，得到產(chǎn)品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道爾頓。表1實施例1所得產(chǎn)品的檢測報告
權利要求
1.一種蹄甲肽的提取方法，其特征是包括以下步驟1)取健康豬蹄甲用40-45°C水清洗洗凈，加蹄甲重量5-8倍水升溫至90-95°C蒸煮 1. 5-2h，烘干；2 )將烘干的豬蹄甲用粉碎機粉碎，過80目篩得蹄甲粉；3)按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升溫至90-95°C，蒸煮1.5_2h，再降溫至50_55°C，調節(jié)pH值至7. 5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入復合蛋白酶，恒溫攪拌酶解4-5h，酶解過程中保持體系PH值穩(wěn)定；4)將得到的酶解液升溫至90-95°C，恒溫滅酶10-15min；5)將酶解液趁熱過濾，得上清液；6)將上清液冷卻至50-55°C，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脫色、除腥，攪拌 1-1. 5h，過濾除去活性炭，得濾液；7)將濾液用膜分離裝置進行分離，脫鹽并濃縮；8)濃縮液經(jīng)干燥后，得到產(chǎn)品蹄甲肽。
2.如權利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的粉碎先用粗碎機粉碎，篩孔徑為5mm，再用超微粉碎機粉碎，粉碎后過80目篩。
3.如權利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的蹄甲肽分子量小于2000道爾頓。
4.如權利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的干燥為噴霧干燥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蹄甲肽的提取方法，該方法采用健康豬蹄甲為原料，經(jīng)過升溫蒸煮、烘干、粉碎機粉碎、蹄甲粉配水、升溫蒸煮、酶解、滅酶、活性炭脫色、膜分離，將得到的濾液經(jīng)干燥后即獲蹄甲肽。本發(fā)明方法生產(chǎn)成本低、收率高、不產(chǎn)生任何有毒有害物質，而且所得產(chǎn)品安全性高，可廣泛用于藥品、保健品等領域。
文檔編號C12P21/06GK102367466SQ20111031545
公開日2012年3月7日 申請日期2011年10月18日 優(yōu)先權日2011年10月18日
發(fā)明者張曉東, 鄭和平 申請人:得利斯集團有限公司