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利用風味定向技術(shù)篩選中國白酒釀造中的β-大馬酮產(chǎn)生菌株及其應用的制作方法

文檔序號:395800閱讀:413來源:國知局
專利名稱:利用風味定向技術(shù)篩選中國白酒釀造中的β-大馬酮產(chǎn)生菌株及其應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種利用風味定向技術(shù)從中國白酒大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境中篩選白酒中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌的篩選方法,以及利用該法篩選中國白酒大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境中的β-大馬酮產(chǎn)生菌株,以及將菌株應用于傳統(tǒng)釀造食品工業(yè)領(lǐng)域和生物香料制備領(lǐng)域。屬于生物工程技術(shù)和釀酒生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
中國白酒是世界著名的六大蒸餾酒之一,深得消費者喜愛。中國白酒具有多種特殊的風格特征。白酒風味物質(zhì)十分復雜,含量微少,種類繁多,對形成白酒的風格特征及其典型性具有很重要的作用。明確白酒重要風味物質(zhì)的來源及其形成機制,并在釀造過程中對這類風味物質(zhì)的合成進行有效的控制,對于白酒行業(yè)不同香型白酒工藝的改造以及白酒行業(yè)的現(xiàn)代化發(fā)展具有舉足輕重的作用。對于任何傳統(tǒng)食品釀造過程,都需要在微生物的作用下才能使加工原料發(fā)生重要的生物化學及物理變化后生成食品,并且發(fā)酵食品獨特的風味和風格也都是建立在微生物生命運動的基礎上。白酒釀造微生物是白酒釀造的原動力,也是造就白酒獨特風味和風格的原因所在。白酒的生產(chǎn)包括制曲和發(fā)酵兩個過程。在制曲過程中依靠自然界各種微生物富集到用淀粉質(zhì)原料制成的曲坯上,經(jīng)過培養(yǎng)、貯藏,成為成品大曲。在發(fā)酵過程中,依靠大曲提供的微生物在密閉發(fā)酵容器中多微共酵,形成復雜的白酒風味成分。因此建立白酒釀造中微生物代謝相關(guān)的重要香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌的篩選方法,篩選風味物質(zhì)產(chǎn)生功能微生物,不但能夠明確白酒重要風味物質(zhì)的來源及其形成機制,深入的認識中國白酒的科學理論價值;而且對于開發(fā)新的生物香料資源,以及生物香料行業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。β -大馬酮(β -damascenone)又名β -突厥烯酮,屬于C13萜烯類芳香化合物。閾值極低,水中為2ng/L,模擬葡萄酒中為50ng/L,具有極高的香氣貢獻度;具有水果香、蜂蜜香、蘋果味等香氣,廣泛存在于葡萄酒、啤酒、蒸餾酒等酒類釀造產(chǎn)品中,是這些產(chǎn)品中的關(guān)鍵香氣成分。目前發(fā)現(xiàn)在葡萄酒釀造過程中存在一些非釀酒酵母,如漢遜德巴利酵母、美極梅奇酵母、異常畢赤酵母、葡萄酒有孢漢遜酵母等能夠以葡萄汁為培養(yǎng)基產(chǎn)生β -大馬酮, 但是β-大馬酮濃度都極低。大馬酮是中國白酒中重要的風味物質(zhì),尤其是清香型白酒中重要的微量特征性風味物質(zhì),但是對于中國白酒中β-大馬酮產(chǎn)生來源卻一無所知,也未有β-大馬酮產(chǎn)生菌株的任何相關(guān)報道。因此,科學的認識中國白酒中β大馬酮的產(chǎn)生機制,并有效改良中國白酒的釀造工藝,提高白酒品質(zhì),最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)就是尋找以及利用產(chǎn)生大馬酮的菌株。另外,β-大馬酮作為一種珍貴的生物香料,主要被用于調(diào)制包括玫瑰香調(diào)在內(nèi)的各種花香、木香、醛香、藥草香和果香香調(diào)。因其價格較高,達2萬元/kg左右,目前主要用于高級香水、高級化妝香精、食品香精和煙用香精中。盡管大馬酮問世較晚,但因其具有獨特的香氣,為一名貴香料,頗受人們重視,目前已得到美國香料提取物制造協(xié)會的認可 (FEMA NO. 3420)。近年來,隨著食品、高級化妝品及煙草工業(yè)的發(fā)展,其需求量有較大的增長。每年全球范圍內(nèi)的需求量為1 10噸。為了滿足市場需求,許多國家都一直致力于其合成方法和工藝的研究,但是到目前為止,國際上主要還是集中于化學法合成β -大馬酮,尚未見生物法規(guī)?;D(zhuǎn)化生產(chǎn)大馬酮方面的研究報道。因此,規(guī)?;镛D(zhuǎn)化生產(chǎn) β-大馬酮的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)也是尋找以及利用高產(chǎn)β-大馬酮的菌株。本發(fā)明所提供的利用風味定向技術(shù)篩選中國白酒釀造過程中的微生物代謝相關(guān)的重要香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌,對于科學地認識和理解中國白酒釀造過程及機制,對中國白酒的技術(shù)發(fā)展和進步具有重要的現(xiàn)實意義;同時,對于食品添加劑行業(yè)中新型生物香料的開發(fā)與生產(chǎn)也具有重要的實用價值。另外,本發(fā)明從中國白酒釀造大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境中篩選所得的菌株是具有生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)大馬酮的功能。為首次從中國白酒釀造過程中獲得的大馬酮產(chǎn)生菌株,不但能夠?qū)崿F(xiàn)高效制備大馬酮的功能,應用于大馬酮生物香料的制備行業(yè);而且能夠解釋中國清香型白酒中特征性風味物質(zhì)大馬酮產(chǎn)生的機制,將該菌株應用于中國白酒的釀造過程中,能夠有效調(diào)控白酒中大馬酮含量,實現(xiàn)中國白酒品質(zhì)的提升。

發(fā)明內(nèi)容
(1)要解決的技術(shù)問題
本發(fā)明要解決的一個技術(shù)問題是提供了一種利用風味定向技術(shù)從中國白酒大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境中篩選白酒中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌的篩選方法,以及將該方法應用于生物香料的制備工業(yè)中對中國白酒釀造中微生物代謝相關(guān)的香料物質(zhì)的開發(fā)。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供了一種β-大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法及其將菌株于傳統(tǒng)白酒釀造行業(yè)和生物香料制備行業(yè)中的應用。(2)本發(fā)明的技術(shù)方案
一種大馬酮產(chǎn)生菌株,其分類命名為
異常畢赤酵母 G0ZcAiaBJY-I,保藏編號 CGMCC No. 4740,
東方伊薩酵母(Issa tchenkia orien talis ) BJY-2,保藏編號 CGMCC No. 4741,
扣囊復膜孢酵母(SaccAarofflj^oAsis) BJY-3,保藏編號 CGMCC No. 4742,
粉狀畢赤酵母 O0ZcAia /ari/70>sa)BJY-4,保藏編號 CGMCC No. 4743,
粟酒裂殖酵母(^bAizosaccAarofflj^^s /70 力e) BJY-5,保藏編號 CGMCC No. 4744,
絲孢酵母(Trichosporon asahii ) BJY-7,保藏編號 CGMCC No. 4746,
釀酒酵母(SaccAarofflj^e1S cererisiae) BJY-8,保藏編號 CGMCC No. 4747,
少孢酵母(Mzachs tania exigua ) BJY-9,保藏編號 CGMCC No. 4748,
嗜滲壓有孢漢遜酵母(Waz^eeia1Spora o^swoMih )BJY-IO,保藏編號 CGMCC No. 4749,
發(fā)酵畢赤酵母(^icAia /eiTse^ia/ 》BJY-11,保藏編號 CGMCC No. 4750,
膜醭畢赤酵母 G0ZcAia 力rafli/acie^dBJY-U,保藏編號 CGMCC No. 4751,
葡萄牙棒孢酵母(CZari1^ora A^iiafliadBJY-lS,保藏編號CGMCC No. 4752,上述菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。所述β-大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法以風味為導向,利用風味定向技術(shù)分析中國白酒釀造過程中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)的含量變化,明確微生物代謝相關(guān)香氣物質(zhì)的產(chǎn)生環(huán)節(jié),以該環(huán)節(jié)的中國白酒大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境作為分離原料,篩選白酒中微生物代謝相關(guān)香氣物質(zhì)的產(chǎn)生菌;
采用色譜法分析中國白酒釀造過程中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)的含量變化,包括 GC、GC/MS、HPLC、HPLC/MS、紙色譜的方法。所述大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法,為盡可能全的篩選白酒中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌,模擬白酒釀造過程的培養(yǎng)基配方,以白酒釀造所用的原料為培養(yǎng)基成分,選用高粱、大麥、小麥、豌豆及其各種不同比例的混合配方,制取原料液體培養(yǎng)基,制作方式為20 200g原料樣品經(jīng)粉碎后,加mL/g計1 4倍體積的水,蒸煮l_5h,呈糊狀,冷卻后加入10 50U/g的糖化酶,于40 80°C保持2 10h,過濾、離心所得濾液,調(diào)節(jié)糖度為ΚΓ δΤχ,調(diào)節(jié)pH為4 6。所述β-大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法,將大曲、小曲、酒醅、原料與無菌水混合后, 經(jīng)過稀釋涂布平板,對獲得的菌株進行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)條件為 40°C,150rpm,培養(yǎng)M 120h,發(fā)酵液經(jīng)過頂空固相微萃取后,采用GC/MS測定β -大馬酮含量,篩選獲得產(chǎn)生大馬酮的菌株。所述β-大馬酮產(chǎn)生菌株的應用,在傳統(tǒng)和現(xiàn)代食品釀造工業(yè)、生物香料制備工業(yè)中的應用。所述傳統(tǒng)和現(xiàn)代食品釀造工業(yè)為中國白酒釀造工業(yè)。所述生物香料制備工業(yè)為β -大馬酮的生物轉(zhuǎn)化香料制備工業(yè)。風味定向技術(shù)的篩選方法
風味物質(zhì)產(chǎn)生環(huán)節(jié)的測定跟蹤白酒釀造的過程,取中國大曲或小曲及每隔2飛天的發(fā)酵酒醅,各5 50g,加入2 5倍質(zhì)量的超純水,加入5g NaCl,室溫浸泡6 Mh,超聲 10 60min,10000r/min離心20min,取上清液5 8mL,HS-SPME-GC-MS測定。根據(jù)曲和酒醅中風味物質(zhì)的濃度變化,分析風味物質(zhì)產(chǎn)生的環(huán)節(jié),選擇該環(huán)節(jié)的樣品作為分離原料。風味物質(zhì)產(chǎn)生菌株的篩選模擬白酒釀造過程的培養(yǎng)基配方。以白酒釀造所用的原料為培養(yǎng)基成分,包括高粱、大麥、小麥、豌豆及其各種不同比例的混合配方,制取原料液體培養(yǎng)基,制作方式為20 200g原料樣品經(jīng)粉碎后,加1 4倍體積的水,蒸煮l-5h,呈糊狀,冷卻后加入10 50U/g的糖化酶,于40 80°C保持2 10h,過濾、離心所得濾液, 糖度為10 15°Bx,調(diào)節(jié)pH為4 6。培養(yǎng)條件為28 40°C,150rpm,培養(yǎng)M 120h。搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵液采用HS-SPME-GC-MS檢測。篩選獲得產(chǎn)生風味物質(zhì)的菌株。β -大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選采用風味定向技術(shù)的篩選方法,分析β -大馬酮產(chǎn)生于大、小曲和培養(yǎng)初期的酒醅中,取大、小曲或培養(yǎng)0 5天的酒醅0. 5 5g,溶于 15 150mL無菌生理鹽水搖床振蕩30 150分鐘,再稀釋,涂布平板后單菌落移接斜面培養(yǎng)基,25 35°C恒溫培養(yǎng)2 5天,單菌落移接斜面,挑取菌株進行搖瓶培養(yǎng),采用 HS-SPME-GC-MS方法測定發(fā)酵液中β-大馬酮含量,篩選獲得β-大馬酮產(chǎn)生菌株。β -大馬酮濃度測定采用HS-SPME-GC-MS方法,15 mL頂空瓶中加入5 10 mL 澄清發(fā)酵液,進行頂空固相微萃取。頂空固相微萃取的條件為三相(Car/DVB/PDMQ萃取頭,60°C預熱5 10 min,萃取吸附30 50 min, GC解吸5 10 min。β -大馬酮產(chǎn)生菌株在中國白酒釀造工業(yè)中的應用將菌株制成液體或固體菌制劑,添加于白酒大曲或酒醅中,能夠有效增加中國大曲或酒醅中該菌株的生物量,并有效提高酒醅中大馬酮的含量,最終提高中國白酒中大馬酮的含量。β -大馬酮產(chǎn)生菌株生物轉(zhuǎn)化制備β -大馬酮香料的應用菌株采用大麥汁培養(yǎng)基,25 ;35°C,150rpm,培養(yǎng)M 120h后,β -大馬酮含量達到46 μ g/L。(3)本發(fā)明的有益效果
本發(fā)明提供了一種利用風味定向技術(shù)篩選中國白酒曲和酒醅中的微生物代謝相關(guān)的重要香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌,對于科學地認識和理解中國白酒釀造過程及機制,對中國白酒的技術(shù)發(fā)展和進步具有重要的現(xiàn)實意義;同時,對于食品添加劑行業(yè)中新型生物香料的開發(fā)與生產(chǎn)也具有重要的實用價值。另外,本發(fā)明從中國白酒釀造大、小曲、酒醅、原料、環(huán)境中篩選所得的菌株是具有生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)大馬酮的功能。為首次從中國白酒釀造過程中獲得的大馬酮產(chǎn)生菌株,不但能夠?qū)崿F(xiàn)高效制備大馬酮的功能,應用于大馬酮生物香料的制備行業(yè);而且能夠解釋中國清香型白酒中特征性風味物質(zhì)大馬酮產(chǎn)生的機制,將該菌株應用于中國白酒的釀造過程中,能夠有效調(diào)控白酒中大馬酮含量,實現(xiàn)中國白酒品質(zhì)的提升。生物材料樣品保藏β -大馬酮產(chǎn)生菌株,其分類命名為
異常畢赤酵母G0Zdia anomala)m~l,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所,保藏編號CGMCC No. 4740,保藏日期2011年4月6日。東方伊薩酵母(Jl5lSaicAez^ia oriental is風Ti_2,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4741,保藏日期2011年4月6日??勰覐湍ゆ呓湍?feccAarofflj^oAsis fibuligera)^X_ >,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4742,保藏日期2011年4月6日。粉狀畢赤酵母G0ZcAia farinosa)m~^已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4743,保藏日期2011年4月6日。粟酒裂殖酵母(SbAizo1SaccAarofflJ^e1S 知)BJY_5,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4744,保藏日期2011年4月6日。絲孢酵母(rr/cAospoirw sssAii)BJY~7,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4746,保藏日期2011年4月6日。釀酒酵母iSdccharomycGS cerevisiae) BJY-8,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4747,保藏日期2011年4月6日。少孢酵母(JazacAsexigua)^X-9,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4748,保藏日期2011年4月6日。嗜滲壓有孢漢遜酵母osmophila) BJY-10,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4749,保藏日期2011年4月6 曰。發(fā)酵畢赤酵母ipichia fermentans) BJY-11,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4750,保藏日期2011年4月6日。
膜醭畢赤酵母QPichia membranifaciens)BJY-12,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4751,保藏日期2011年4月6日。葡萄牙棒孢酵母(CZaW1^ora lusitaniae)節(jié)^i-Yi,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No. 4752,保藏日期2011年4月6日。


圖1 菌株細胞形態(tài)電鏡照片。圖2 葡萄牙棒孢酵母CGMCC No. 4752高粱糖化液體培養(yǎng)基發(fā)酵液質(zhì)譜圖。
具體實施例方式實施例1
β-大馬酮產(chǎn)生環(huán)節(jié)的確定跟蹤白酒釀造的過程,取中國大曲或小曲及每隔2飛天的發(fā)酵酒醅各20g,加入3倍質(zhì)量的超純水,室溫浸泡6 Mh,超聲10 60min,10000r/min 離心20min,取上清液5 8mL,加入5g NaCl,HS-SPME-GC-MS測定。根據(jù)酒醅中風味物質(zhì)的濃度變化,結(jié)果見表1。從結(jié)果中看出,β -大馬酮主要在發(fā)酵的O 5天產(chǎn)生,因此選擇發(fā)酵2天的酒醅樣品作為分離原料。表1清香型白酒發(fā)酵酒醅中β -大馬酮濃度變化
權(quán)利要求
1.β-大馬酮產(chǎn)生菌株,其分類命名為異常畢赤酵母 G0ZcAiaBJY-I,保藏編號 CGMCC No. 4740,東方伊薩酵母(Issa tchenkia orien talis ) BJY-2,保藏編號 CGMCC No. 4741, 扣囊復膜孢酵母(SaccAarofflj^oAsis) BJY-3,保藏編號 CGMCC No. 4742,粉狀畢赤酵母 O0ZcAia /ari/70>sa)BJY-4,保藏編號 CGMCC No. 4743, 粟酒裂殖酵母(SbAizo1SaccAarofflj^e1S /70 力e)BJY-5,保藏編號 CGMCC No. 4744, 絲孢酵母(Trichosporon asahii ) BJY-7,保藏編號 CGMCC No. 4746, 釀酒酵母(SaccAarofflj^e1S cererisiae) BJY-8,保藏編號 CGMCC No. 4747, 少孢酵母(Mzachs tania exigua ) BJY-9,保藏編號 CGMCC No. 4748, 嗜滲壓有孢漢遜酵母(Waz^eeia1Spora o^swoMih )BJY-IO,保藏編號 CGMCC No. 4749, 發(fā)酵畢赤酵母{pichia fermentans) BJY-11,保藏編號 CGMCC No. 4750, 膜醭畢赤酵母 G0ZcAia 力rafli/acie^dBJY-U,保藏編號 CGMCC No. 4751, 葡萄牙棒孢酵母(CZari1^ora A^iiafliadBJY-lS,保藏編號CGMCC No. 4752,上述菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。
2.—種權(quán)利要求1所述大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法,其特征在于以風味為導向, 利用風味定向技術(shù)分析中國白酒釀造過程中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)的含量變化,明確微生物代謝相關(guān)香氣物質(zhì)的產(chǎn)生環(huán)節(jié),以該環(huán)節(jié)的中國白酒大曲、小曲、酒醅、原料、環(huán)境作為分離原料,篩選白酒中微生物代謝相關(guān)香氣物質(zhì)的產(chǎn)生菌;采用色譜法分析中國白酒釀造過程中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)的含量變化,包括 GC、GC/MS、HPLC、HPLC/MS、紙色譜的方法。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法,其特征在于為盡可能全的篩選白酒中微生物代謝相關(guān)的香氣物質(zhì)產(chǎn)生菌,模擬白酒釀造過程的培養(yǎng)基配方,以白酒釀造所用的原料為培養(yǎng)基成分,選用高粱、大麥、小麥、豌豆及其各種不同比例的混合配方, 制取原料液體培養(yǎng)基,制作方式為20 200g原料樣品經(jīng)粉碎后,加mL/g計1 4倍體積的水,蒸煮l_5h,呈糊狀,冷卻后加入10 50U/g的糖化酶,于40 80°C保持2 10h,過濾、離心所得濾液,調(diào)節(jié)糖度為1(Γ 5°Βχ,調(diào)節(jié)ρΗ為4 6。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述大馬酮產(chǎn)生菌株的篩選方法,其特征在于將大曲、小曲、 酒醅、原料與無菌水混合后,經(jīng)過稀釋涂布平板,對獲得的菌株進行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)條件為 40°C,150rpm,培養(yǎng)M 120h,發(fā)酵液經(jīng)過頂空固相微萃取后,采用GC/MS測定 β-大馬酮含量,篩選獲得產(chǎn)生大馬酮的菌株。
5.一種權(quán)利要求1所述β -大馬酮產(chǎn)生菌株的應用,其特征在于在傳統(tǒng)和現(xiàn)代食品釀造工業(yè)、生物香料制備工業(yè)中的應用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述大馬酮產(chǎn)生菌株的應用,其特征在于所述傳統(tǒng)和現(xiàn)代食品釀造工業(yè)為中國白酒釀造工業(yè)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述大馬酮產(chǎn)生菌株的應用,其特征在于所述生物香料制備工業(yè)為大馬酮的生物轉(zhuǎn)化香料制備工業(yè)。
全文摘要
利用風味定向技術(shù)篩選中國白酒釀造中的β-大馬酮產(chǎn)生菌株及其應用,屬于生物工程技術(shù)和釀酒生物技術(shù)領(lǐng)域。β-大馬酮是我國清香型白酒重要的微量特征性風味物質(zhì)。所述菌株為異常畢赤酵母CGMCC4740、東方伊薩酵母CGMCC4741、扣囊復膜孢酵母CGMCC4742、粉狀畢赤酵母CGMCC4743、粟酒裂殖酵母CGMCC4744、絲孢酵母CGMCC4746、釀酒酵母CGMCC4747、少孢酵母CGMCC4748、嗜滲壓有孢漢遜酵母CGMCC4749、發(fā)酵畢赤酵母CGMCC4750、膜醭畢赤酵母CGMCC4751、葡萄牙棒孢酵母CGMCC4752中任一一株。菌株是從中國多家名酒廠的大、小曲以及酒醅、釀造原料、釀造環(huán)境中分離得到。該菌株可用于傳統(tǒng)食品釀造領(lǐng)域,及β-大馬酮生物香料的制備中。
文檔編號C12N1/16GK102242072SQ201110122420
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月12日
發(fā)明者吳群, 徐巖, 王薇 申請人:江南大學
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