專利名稱：哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種生物體外培養(yǎng)材料，具體是ー種哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液。
背景技術(shù)：
人類聽カ功能的基礎(chǔ)是存在于顳骨耳蝸內(nèi)的聽覺感受器官，即柯蒂氏器官(organof Corti) 0柯蒂氏器官內(nèi)特殊的感覺神經(jīng)上皮細(xì)胞，又稱為毛細(xì)胞，可以將通過外耳和中耳傳入內(nèi)耳基底膜的聲能轉(zhuǎn)化為神經(jīng)沖動傳入大腦。大多數(shù)感音神經(jīng)性耳聾是由于各種原因造成內(nèi)耳毛細(xì)胞死亡或損傷所致。在現(xiàn)實(shí)生活中，有很多因素如噪音、耳神經(jīng)毒性藥物(氨基糖甙類抗生素、抗腫瘤藥物等)和缺血等都可能造成內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷。因此，研究內(nèi)耳毛細(xì)胞功能和損傷引起毛細(xì)胞的病理改變及其機(jī)制是了解感音神經(jīng)性耳聾發(fā)生和發(fā)展 的重要基礎(chǔ)。在體內(nèi)情況下，耳蝸毛細(xì)胞浸浴在柯蒂氏器內(nèi)淋巴液中。在進(jìn)行體外培養(yǎng)試驗(yàn)吋，通常使用目前在細(xì)胞培養(yǎng)中常規(guī)使用的培養(yǎng)液，為高鈉離子濃度和低鉀離子濃度。在以往的研究工作中，已經(jīng)有人注意到培養(yǎng)液中的鉀離子濃度過低，導(dǎo)致耳蝸毛細(xì)胞在在普通培養(yǎng)液中無法正常生長。但是采取簡單地在普通培養(yǎng)液基礎(chǔ)上增加鉀離子濃度的方法無法提高耳蝸毛細(xì)胞體外培養(yǎng)成功的機(jī)會。因此需要對現(xiàn)有的細(xì)胞體外培養(yǎng)液進(jìn)行改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供ー種能夠用于哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞體外培養(yǎng)、延長細(xì)胞體外成活時(shí)間的哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液。本發(fā)明的培養(yǎng)液中溶劑為蒸餾水，每升培養(yǎng)液中除蒸餾水外還包括以下重量的物質(zhì)成份葡萄糖4. 5g、酚紅鈉O. 0159g、丙酮酸鉀O. llg、鹽酸左旋精氨酸O. 084g、胱氨酸O. 048g、丙氨酰谷氨酸O. 868g、甘氨酸O. 03g、組氨酸O. 042g、左旋異白氨酸O. 105g、亮氨酸O. 105g、鹽酸左旋賴氨酸O. 146g、左旋蛋氨酸O. 03g、苯丙氨酸O. 066g、絲氨酸O. 042g、左旋蘇氨酸O. 095g、左旋色氨酸O. 016g、左旋酪氨酸O. 072g、頡胺酸O. 094g、泛酸鈣O. 004g、氯化膽堿O. 004g、葉酸O. 004g、肌醇O. 0072g、煙酰胺O. 004g、鹽酸吡多辛O. 004g、核黃素O. 0004g、鹽酸硫胺O. 004g，培養(yǎng)液中還包含有無機(jī)鹽，其特征是，加入無機(jī)鹽后使培養(yǎng)液的鉀離子水平范圍在100-150mEq/L，鈉離子水平范圍為< 10mEq/L。本發(fā)明作為較接近內(nèi)淋巴液離子成分的毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液，可實(shí)現(xiàn)成熟耳蝸毛細(xì)胞體外培養(yǎng)達(dá)到3天以上，為耳蝸毛細(xì)胞的體外研究奠定了基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例本發(fā)明實(shí)施例中，每升培養(yǎng)液中的除蒸餾水外的成份配方表如下無機(jī)鹽g/L
權(quán)利要求
1. ー種哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液，其中溶劑為蒸餾水，每升培養(yǎng)液中除蒸餾水外還包括以下重量的物質(zhì)成份葡萄糖4. 5g、酚紅鈉O. 0159g、丙酮酸鉀O. llg、鹽酸左旋精氨酸0.0848、胱氨酸0.0488、丙氨酰谷氨酸0.8688、甘氨酸0.03 g、組氨酸O. 042 g、左旋異白氨酸O. 105 g、亮氨酸O. 105 g、鹽酸左旋賴氨酸O. 146 g、左旋蛋氨酸O. 03 g、苯丙氨酸O. 066 g、絲氨酸O. 042 g、左旋蘇氨酸O. 095 g、左旋色氨酸O. 016 g、左旋酪氨酸O. 072g、頡胺酸O. 094 g、泛酸鈣O. 004 g、氯化膽堿O. 004 g、葉酸O. 004 g、肌醇O. 0072 g、煙酰胺O. 004 g、鹽酸吡多辛O. 004 g、核黃素O. 0004 g、鹽酸硫胺O. 004 g，培養(yǎng)液中還包含有無機(jī)鹽；其特征是加入無機(jī)鹽后使培養(yǎng)液的鉀離子水平范圍在100-150mEq/L，鈉離子水平范圍為〈10mEq/L。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物體外培養(yǎng)材料，具體是一種哺乳動物耳蝸毛細(xì)胞專用培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中溶劑為蒸餾水，除蒸餾水外還包括以下重量的物質(zhì)成份葡萄糖、酚紅鈉、丙酮酸鉀、鹽酸左旋精氨酸、胱氨酸、丙氨酰谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、左旋異白氨酸、亮氨酸、鹽酸左旋賴氨酸、左旋蛋氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、左旋蘇氨酸、左旋色氨酸、左旋酪氨酸、頡胺酸、泛酸鈣、氯化膽堿、葉酸、肌醇、煙酰胺、鹽酸吡多辛、核黃素、鹽酸硫胺，培養(yǎng)液中還包含有無機(jī)鹽，加入無機(jī)鹽后使培養(yǎng)液的鉀離子水平范圍在100-150mEq/L，鈉離子水平范圍為<10mEq/L。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)成熟耳蝸毛細(xì)胞體外培養(yǎng)達(dá)到3天以上，為耳蝸毛細(xì)胞的體外研究奠定了基礎(chǔ)。
文檔編號C12N5/071GK102676447SQ201110054539
公開日2012年9月19日 申請日期2011年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月8日
發(fā)明者錢煒 申請人:錢煒