專利名稱：用于檢測(cè)親密度影響指數(shù)的試劑、試劑盒、方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于衛(wèi)生健康領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及檢測(cè)親密度影響指數(shù)的方法、該方法所涉及的試劑和試劑盒及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人類作為一個(gè)龐大的生物群體，時(shí)時(shí)刻刻存在著人際之間的交往。人際關(guān)系和交往對(duì)其個(gè)人的生活素質(zhì)和發(fā)展有著極為重要的影響，尤其是在經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展的全球化時(shí)代，人們都希望得到尊重和喜愛(ài)。人們往往通過(guò)衣著、妝扮、體育鍛煉、生活衛(wèi)生習(xí)慣以及提升生活素養(yǎng)和品質(zhì)等方面來(lái)提升自己的形象，達(dá)到營(yíng)造和諧社會(huì)關(guān)系的目的。這些都是可以看見(jiàn)和感覺(jué)到的影響人際關(guān)系的現(xiàn)象和事物，也是人際關(guān)系參與者本人可掌控和感受到的，屬于視覺(jué)范疇。屬于嗅覺(jué)范疇的現(xiàn)象和事物也直接影響著人際關(guān)系，例如來(lái)自口腔的各種氣味也在不同程度上直接對(duì)人與人之間的交往造成影響。口腔是進(jìn)入人體內(nèi)的通道，許多事件在此發(fā)生?？谇唤邮苁澄铮⒐腆w的食物顆粒變小，與唾液混合，啟動(dòng)消化過(guò)程?？谇徽衬ひ约巴僖合袤w分泌提供潤(rùn)滑液，幫助言語(yǔ)表達(dá)、吞咽和食物消化。因此，口腔特別容易發(fā)生感染、損傷或各種有害狀況，包括齲齒、牙周疾病、口腔潰瘍等。而口腔內(nèi)發(fā)生的有些情況如不良嗅覺(jué)、口臭，甚至多痰、打鼾等都是影響人際關(guān)系的因素。目前，針對(duì)上述影響人際交往中的親密度的各種因素，尚未有一個(gè)統(tǒng)一的檢測(cè)方法或判斷標(biāo)準(zhǔn)。尤其目前尚無(wú)統(tǒng)一的檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)由不良嗅覺(jué)引起的影響人際關(guān)系的因素，更沒(méi)有一個(gè)指標(biāo)來(lái)量化這些因素。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供涉及這一領(lǐng)域的檢測(cè)方法及相關(guān)產(chǎn)品。具體而言，本發(fā)明涉及檢測(cè)不良?xì)馕秾?duì)親密度的影響，該不良?xì)馕兜闹饕獊?lái)源為口腔。為有助于理解本發(fā)明，下面定義了一些術(shù)語(yǔ)。本文定義的術(shù)語(yǔ)具有本發(fā)明相關(guān)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的含義。除非另外說(shuō)明，本文所用的術(shù)語(yǔ)“親密度影響指數(shù)”是指影響人際關(guān)系和親密程度的、可以進(jìn)行科學(xué)檢測(cè)的量化性指標(biāo)。親密度指數(shù)的建立和檢測(cè)有利于人們科學(xué)地了解自身的狀態(tài)，及時(shí)進(jìn)行科學(xué)干預(yù)、消除影響人際關(guān)系和親密程度的負(fù)面性因素。在人與人的交往過(guò)程中，口頭上的語(yǔ)言表達(dá)是至關(guān)重要的；語(yǔ)言上的表達(dá)和溝通需要人與人之間相對(duì)近距離的接觸而實(shí)現(xiàn)?？谇坏慕】禒顟B(tài)是影響近距離交流的重要因素。。在本申請(qǐng)中，所述 “親密度影響指數(shù)”具體由口腔內(nèi)可收集到的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量代表。除非另外說(shuō)明，本文所用的術(shù)語(yǔ)“個(gè)性化的親密度影響指數(shù)”由檢測(cè)對(duì)象口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度的增長(zhǎng)倍數(shù)表示，該指數(shù)的計(jì)算公式如下Ii = nt/nh
其中的Ii為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)；nt為從檢測(cè)對(duì)象中獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度；nh為該檢測(cè)對(duì)象在無(wú)炎癥的健康情況下所獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度。除非另外說(shuō)明，本文所用的術(shù)語(yǔ)“比較性親密度影響指數(shù)”由檢測(cè)對(duì)象的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度，相對(duì)于無(wú)炎癥的健康參照者的增長(zhǎng)倍數(shù)。該指數(shù)的計(jì)算公式如下Ic = nt/nr其中的I。為比較性親密度影響指數(shù)；nt為從檢測(cè)對(duì)象中獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度為無(wú)炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
，無(wú)炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目OO為10，000。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于檢測(cè)親密度指數(shù)和/ 或釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的溶液。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供用于檢測(cè)親密度指數(shù)和/或口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的試劑盒。本發(fā)明又一個(gè)目的是上述溶液和試劑盒在制備檢測(cè)口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的產(chǎn)品中的用途。本發(fā)明再一個(gè)目的是提供檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法。本發(fā)明還一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生改善情況的方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。一方面，本發(fā)明提供一種用于釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的溶液，其特征在于， 所述溶液包括用于釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的鹽離子和酸離子；其中鹽離子和酸離子由化合物提供，優(yōu)選地，提供所述鹽離子和酸離子的化合物選自氯化鉀，氯化鈉和磷酸鈉的一種或多種；所述溶液可進(jìn)一步包含用于提供細(xì)胞所需能量的化合物；優(yōu)選地，提供所述細(xì)胞所需能量的化合物為D-葡萄糖。所述溶液可進(jìn)-步包含用于調(diào)節(jié)該溶液的PH值和緩沖性能的化合物；優(yōu)選地，所述化合物為無(wú)水磷酸二氫鉀，磷酸鈉和無(wú)水磷酸氫二銨的一種或多種。此外，所述溶液還可進(jìn)一步包含用于著色的化合物；優(yōu)選地，所述化合物為酚紅鈉。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述溶液中包含0. 01-10. 00克/L氯化鉀，0. 01-10. 00克/L無(wú)水磷酸二氫鉀，0. 01-10. 00克/L氯化鈉，0. 01-10. 00克/L無(wú)水二元磷酸鈉，0. 01-10. 00克/ LD-葡萄糖和0. 01-0. 02克/L酚紅鈉；更優(yōu)選地，所述溶液包括0. 4克/L氯化鉀，0. 06克/L無(wú)水磷酸二氫鉀，8. 0克/L 氯化鈉，0. 04788克/L無(wú)水二元磷酸鈉，1. 0克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉。并且，所述溶液可以為水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液；優(yōu)選地，所述酒精溶液中的酒精濃度為1-70% (V/V)；或優(yōu)選地，所述葡萄糖溶液中的葡萄糖濃度為0. 1-15% (g/ml)。另一方面，本發(fā)明提供一種用于檢測(cè)口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的試劑盒，所述試劑盒包括上述用于釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的溶液。在上述試劑盒中，還可以進(jìn)一步包括用于特異性固定所述嗜中性白血球細(xì)胞的固定劑和/或用于對(duì)所述嗜中性白血球細(xì)胞進(jìn)行特異性染色的染色劑；優(yōu)選地，所述固定劑為甲醛，所述染色劑為吖啶橙。此外，所述試劑盒還可以進(jìn)一步包括檢測(cè)嗜中性白血球細(xì)胞的特異成分或產(chǎn)物所需的檢測(cè)試劑；優(yōu)先地，所述特異性成分為中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G，髓過(guò)氧化物酶，乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種；其檢測(cè)試劑包括檢測(cè)該特異蛋白所需的抗體及其相應(yīng)的檢測(cè)試劑；其檢測(cè)試劑為酶聯(lián)反應(yīng)所需的試劑。又一方面，本發(fā)明提供上述溶液或上述試劑盒在制備檢測(cè)哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的產(chǎn)品中的用途；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。再一方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法，所述方法包括 檢測(cè)包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的樣本中嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量；優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。其中，上述方法優(yōu)選具體包括1)使所述哺乳動(dòng)物用適量溶液漱口，從而獲得包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的溶液；2)使用固定劑固定經(jīng)步驟1)獲得的溶液中的嗜中性白血球細(xì)胞；3)使用染色劑將經(jīng)步驟2、固定的嗜中性白血球細(xì)胞進(jìn)行染色并計(jì)數(shù)；優(yōu)選地，在步驟2、前，先離心所述包含哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的溶液；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述離心速度為20-100g，時(shí)間為10-30分鐘；更優(yōu)選地，所述離心速度為20g，時(shí)間為 10分鐘。并且，所述步驟1)中的溶液優(yōu)選為上述用于從哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)釋放嗜中性白血球細(xì)胞的溶液；所述步驟2)中的固定劑優(yōu)選為甲醛；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述固定劑為2. 5% (g/ml) 的甲醛水溶液；所述步驟幻中的染色劑優(yōu)選為吖啶橙；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述染色劑為1. 6% (g/ ml)的吖啶橙水溶液。此外，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量和被檢測(cè)哺乳動(dòng)物在健康狀態(tài)下口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的個(gè)性化的親密度影響指數(shù)?？蛇x地，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量和健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量為10000。本發(fā)明還提供另外一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法，所述方法包括檢測(cè)包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的樣本中嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量，所述特異成分如中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G，髓過(guò)氧化物酶，乳鐵蛋白和明膠酶。這些特異蛋白可以采用本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)，使用相應(yīng)的抗體，通過(guò)酶聯(lián)反應(yīng)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。此外，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量和被檢測(cè)哺乳動(dòng)物在健康狀態(tài)下口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的個(gè)性化的親密度影響指數(shù)?？蛇x地，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量和健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的比較性親密度影響指數(shù)。還一方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生改善情況的方法，所述方法包括在對(duì)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生進(jìn)行改善之前和之后，根據(jù)上述任一項(xiàng)方法分別檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)，然后比較改善之前和之后的親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。以下是本發(fā)明的詳細(xì)描述炎癥是一種應(yīng)對(duì)感染、損傷或各種有害狀況的重要免疫反應(yīng)。炎癥過(guò)程對(duì)機(jī)體來(lái)說(shuō)是很重要的，因?yàn)樗?wù)于修復(fù)損傷、殺傷病原微生物和腫瘤的過(guò)程中。本發(fā)明在下文披露了發(fā)生并嵌入口腔黏膜組織中的以前未知的炎癥來(lái)源。清除該炎癥來(lái)源，可以治愈病人的慢性牙周炎和經(jīng)常性潰瘍，以及口臭等不良口腔狀態(tài)。這表明， 嵌入黏膜組織的炎癥是與炎癥相關(guān)的口腔疾病和不良口腔狀態(tài)的一種誘因。選擇參與這項(xiàng)研究的志愿者，該志愿者45歲，患有15年的牙周炎病，由三個(gè)不同的牙周炎專家確診。該患者每三月就需要到牙周炎?？七M(jìn)行專業(yè)清理，也經(jīng)常遭受口腔潰瘍的困擾(圖1A)。采用一個(gè)Y形的特制清洗工具對(duì)該患者粘膜和牙齦組織進(jìn)行了徹底的清潔。該工具的設(shè)計(jì)專門優(yōu)化了清洗能力、并可避免傷害任何有關(guān)組織(圖1B)，被稱之為除炎刷(具體參見(jiàn)CN201010109442. 1)。用除炎刷對(duì)口腔黏膜組織進(jìn)行刷擦，然后用水沖洗。發(fā)白的殘?jiān)鼜目谇火つそM織中釋放出來(lái)，偶爾會(huì)有血跡的出現(xiàn)，但沒(méi)有發(fā)生持續(xù)出血現(xiàn)象。隨后，潰瘍樣點(diǎn)(ulcer-like spot)出現(xiàn)在附近的黏膜牙齦交界處(圖1C)的黏膜組織上。令人驚奇的是，褐色分泌物從潰瘍樣點(diǎn)中釋放出來(lái)(圖2A)。該分泌物用Turk’ s 溶液進(jìn)行染色，然后在熒光顯微鏡下進(jìn)行了觀察。很顯然，該分泌物中含有大量的嗜中性白血球(neutrophil)(圖2B)，這些細(xì)胞都含有典型的多形核特征(圖2C)。該樣本由吖啶橙 (Acridine orange)進(jìn)行了染色，在熒光顯微鏡下被證實(shí)含有嗜中性白血球(圖2D)。該褐色分泌物似乎含有一個(gè)具有結(jié)構(gòu)單元的嗜中性白血球聚集群體，這些匯集一起的嗜中性白血球群體被稱之為口炎斑(oral inflammatory plague)。在褐色分泌物中出現(xiàn)的嗜中性白血球是一種炎癥癥狀；嗜中性白血球釋放可以損傷牙齒和組織的分解酶。從一個(gè)潰瘍樣點(diǎn)中可釋放出多于10個(gè)口炎斑，隨后潰瘍樣點(diǎn)被治愈。然后口炎斑將不會(huì)再?gòu)幕歼^(guò)潰瘍樣點(diǎn)的部位中釋放出來(lái)?？谘装叽嬖谟跐儤狱c(diǎn)中的時(shí)侯，患者會(huì)在該部位有一種熱度和不舒服的感覺(jué)。一旦口炎斑被釋放出來(lái)，患者就立刻感到一種如釋重負(fù)的感覺(jué)。這些都表明口炎斑是一種炎癥反應(yīng)。據(jù)推測(cè)，口炎斑嵌入在黏膜組織中(圖3)。支持這一想法的事實(shí)是，需要花時(shí)間和力量將口炎斑從黏膜組織中釋放出來(lái)。很多口炎斑可匯集在一起，由于黏膜組織的折疊，口炎斑被嵌入其中，形成一種“結(jié)”狀構(gòu)造，被稱之為“口炎結(jié)”(oral inflammatory knotitis)。口炎結(jié)可導(dǎo)致可見(jiàn)的炎癥癥狀，如上述所說(shuō)的潰瘍樣點(diǎn)(圖3)。在潰瘍樣點(diǎn)處可見(jiàn)的白色殘?jiān)虺恋砦锟赡苁怯墒戎行园籽蛩碌募?xì)胞死亡而造成的。通過(guò)除炎刷清洗的過(guò)程，發(fā)現(xiàn)在這個(gè)病患者含有12個(gè)以上的潰瘍樣點(diǎn)。這些潰瘍樣點(diǎn)存在于黏膜牙齦交界處附近、舌頭下邊、腭扁桃體附近，并在臉頰內(nèi)部；這些都是不能輕易被當(dāng)前口腔清潔措施所清理的地方。有些潰瘍樣點(diǎn)比其它更難清除，可能是因?yàn)槠渌诓课?、大小和?fù)雜程度所致。從一個(gè)潰瘍樣點(diǎn)中釋放出來(lái)的口炎斑的數(shù)目有所不同，有的有10個(gè)左右，有的高達(dá)100個(gè)以上。有的口炎斑為褐色，有的口炎斑為黃色?？谘装叩捏w積也有所變化，有的在10微升左右，有的高達(dá)200微升以上。從這個(gè)病患者中釋放的口炎斑總量估計(jì)在10毫升以上。口炎斑中嗜中性白血球的濃度估測(cè)在107ml左右。因此，該病患者的口腔黏膜組織中含有至少IO8個(gè)嗜中性白血球。這可能是一個(gè)具有顯著影響力的炎癥反應(yīng)，由此而導(dǎo)致口腔疾病。當(dāng)12個(gè)潰瘍樣點(diǎn)中的3至5個(gè)被清除后，該病患者注意到他已經(jīng)沒(méi)有牙周炎疾病了。這表明清除潰瘍樣點(diǎn)是治療牙周炎的有效措施。令人驚喜的是，隨著潰瘍樣點(diǎn)的進(jìn)一步清除，患者的口腔潰瘍也較少發(fā)生。在潰瘍樣點(diǎn)清除結(jié)束后，該患者也不再遭受口腔潰瘍的困擾了。這表明口腔炎癥是導(dǎo)致口腔復(fù)發(fā)性潰瘍的誘因。該病患者也注意到，在潰瘍樣點(diǎn)清除以后，他的口臭問(wèn)題也得以消除?？梢韵胂?， 被困在潰瘍樣點(diǎn)里面的微生物是導(dǎo)致口臭的原因(圖幻。有趣的是，他的感覺(jué)系統(tǒng)改善了， 他能聞到更多的氣味。據(jù)推測(cè)，在口腔中的嗜中性白血球可能會(huì)破壞呼吸系統(tǒng)中的感覺(jué)細(xì)胞。因此，清除潰瘍樣點(diǎn)可治療牙齦疾病，也有益于身體健康。上述研究表明，當(dāng)前口腔衛(wèi)生習(xí)慣的不足，導(dǎo)致了食品殘留(圖2B)，細(xì)胞碎片(白色沉淀物，如圖1)和微生物(口臭問(wèn)題)的積累，這些將導(dǎo)致炎癥和不良口腔狀態(tài)，誘發(fā)嗜中性白血球的聚集(圖3)。因此，在口腔內(nèi)的口臭等不良口腔狀態(tài)可以由口腔內(nèi)可收集的嗜中性白血球數(shù)目來(lái)代表。親密度影響指數(shù)可以采用從口腔中取得的嗜中性白血球數(shù)量來(lái)進(jìn)行計(jì)算。這些嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)目可以在進(jìn)行特異性染色之后，在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)算；此外，這些嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)目可以通過(guò)計(jì)算這些嗜中性白血球細(xì)胞的特異性成分或產(chǎn)物的濃度所代表。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
，個(gè)性化的親密度影響指數(shù) (intimacy-interfering index of an individual) (Ii)的表達(dá)方式，為該個(gè)體由炎癥所致的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度的增長(zhǎng)倍數(shù)。該指數(shù)的計(jì)算公式如下Ii = nt/nh其中Ii為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)；nt為從檢測(cè)對(duì)象中獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度；nh為該檢測(cè)對(duì)象在無(wú)炎癥的健康情況下所獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度。在另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，比較性親密度影響指數(shù)(intimacy-interferingindex of comparison) (Ic)的表達(dá)方式為檢測(cè)對(duì)象的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度，相對(duì)于無(wú)炎癥的健康參照者的增長(zhǎng)倍數(shù)。該指數(shù)的計(jì)算公式如下Ic = nt/nr其中I。為比較性親密度影響指數(shù)；nt為從檢測(cè)對(duì)象中獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度；！^為無(wú)炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度。在其中的一個(gè)實(shí)施例中，無(wú)炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目(nr)為10，000。需要指出的是，親密度影響指數(shù)是嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或其特異性成分(或產(chǎn)物)濃度的增長(zhǎng)倍數(shù)，這可以反映親密度影響的程度。此外，嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目或其特異性成分(或產(chǎn)物)從口腔釋放出的效率，受所用取樣緩沖液和條件的影響。本發(fā)明公開(kāi)了可以產(chǎn)生一致性和可重復(fù)性結(jié)果的取樣緩沖液、程序和條件。本發(fā)明提供了涉及檢測(cè)親密度影響指數(shù)的方法及其相關(guān)產(chǎn)品。首先，本發(fā)明提供了一種用于從哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)釋放嗜中性白血球細(xì)胞的新型溶液，采用該溶液作為口腔內(nèi)含物中嗜中性白血球細(xì)胞的取樣溶液，可以從口腔釋放嗜中性白血球，而不傷害人體，并能固定保留嗜中性白血球的多形核特征，可以確保獲得具有一致性和可重復(fù)性的結(jié)果；其次， 基于上述溶液以及包括該溶液的試劑盒，本發(fā)明提供了檢測(cè)親密度影響指數(shù)的方法，通過(guò)測(cè)量口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量，可間接檢測(cè)和評(píng)價(jià)影響人際關(guān)系度的指數(shù)。


以下，結(jié)合附圖來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施例，其中圖1為潰瘍樣點(diǎn)及其清除工具，其中IA 潰瘍出現(xiàn)在腭扁桃體附近；IB —個(gè)專門設(shè)計(jì)的工具“除炎刷”，它可以用來(lái)清除嵌入在口腔中的炎癥源；IC 一個(gè)潰瘍樣點(diǎn)出現(xiàn)在黏膜牙齦交界處附近；ID 潰瘍樣點(diǎn)清洗后痊愈。圖2為口炎斑和嗜中性白血球，其中2A 用除炎刷清洗后，從一個(gè)潰瘍樣點(diǎn)釋放來(lái)的褐色分泌物(箭頭所示)；2B:褐色分泌物用Turk’ s溶液染色，該分泌物含有大量的嗜中性白血球，食物殘?jiān)坪跏窍嚓P(guān)的(箭頭)；2C 分泌物中的細(xì)胞具有典型的多形核特征； 2D 樣品用吖啶橙(Acridineorange)染色，在熒光顯微鏡下觀察。圖3為口腔內(nèi)發(fā)生炎癥提出的模型。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例，并參照數(shù)據(jù)進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例只是為了舉例說(shuō)明本發(fā)明，而非以任何方式限制發(fā)明的范圍。在以下的實(shí)施例中，未詳細(xì)描述的各種過(guò)程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法。 所用試劑的來(lái)源、商品名以及有必要列出其組成成分者，均在首次出現(xiàn)時(shí)標(biāo)明，其后所用相同試劑如無(wú)特殊說(shuō)明，均以首次標(biāo)明的內(nèi)容相同。
實(shí)施例1 對(duì)口腔中釋放的嗜中件白血球細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)此實(shí)施例中測(cè)試了接受潰瘍樣點(diǎn)清除治療的患者(下稱“一號(hào)病人”)和未接受相應(yīng)治療的普通患者(下稱“二號(hào)病人”)在10個(gè)月前后的口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目。所述一號(hào)病人45歲，患有15年牙周炎，伴隨有偶爾的口臭和口腔潰瘍；二號(hào)病人 30歲，患有口腔潰瘍并且經(jīng)常發(fā)生口臭。在2010年1月1日和2010年10月2日分別對(duì)一號(hào)病人和二號(hào)病人分別進(jìn)行了口腔嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)目的檢測(cè)，具體檢測(cè)步驟如下1、收集口腔中的嗜中性白血球細(xì)胞，用適量的取樣緩沖液漱口，以釋放口腔中的嗜中性白血球細(xì)胞。采用15毫升的取樣緩沖液進(jìn)行兩次洗漱口腔，每次30秒，從口中釋放嗜中性白血球細(xì)胞，將所得的漱口液樣本混合為30毫升的樣本。該取樣緩沖液為0. 4克/L 氯化鉀，0. 06克/L無(wú)水磷酸二氫鉀，8. 0克/L氯化鈉，0. 04788克/L無(wú)水二元磷酸鈉，1. 0 克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉；2、用固定液將嗜中性白血球細(xì)胞固定。采用2. 5%的甲醛固定嗜中性白血球細(xì)胞， 然后在4攝氏度環(huán)境下儲(chǔ)藏，直至使用。3、如果嗜中性白血球細(xì)胞濃度偏低，需要將其濃縮，以便于準(zhǔn)確計(jì)算。在這一具體的實(shí)施例中，在20g的離心轉(zhuǎn)速下，集中嗜中性白血球細(xì)胞。4、在進(jìn)行特異性染色之后，檢測(cè)和計(jì)算嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)。在這一具體的實(shí)施例中，嗜中性白血球細(xì)胞由1.6%的吖啶橙(Aridine orange) (AO)染色，然后在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)也可以由該細(xì)胞所特有的成分(或產(chǎn)物)濃度所反映；在口腔取樣時(shí)，可收集這一特有的成分(或產(chǎn)物)，然后進(jìn)行定量分析，測(cè)定其濃度。所測(cè)定的嗜中性白血球細(xì)胞特有成分(或產(chǎn)物)可能是蛋白質(zhì)、去氧核糖核酸、核糖酸或其它在其細(xì)胞所特有的成分(或產(chǎn)物)。這些特有成分(或產(chǎn)物)的檢測(cè)和定量分析，可以由現(xiàn)有的可知的方法進(jìn)行。在科技文獻(xiàn)中，現(xiàn)有很多方法用來(lái)檢測(cè)蛋白質(zhì)、去氧核糖核酸、核糖酸和其它化合物。比如說(shuō)，ELISA可以檢測(cè)蛋白質(zhì)；PCR可以檢測(cè)去氧核糖核酸；特異性探針雜交可以檢測(cè)RNA ；小分子化合物可以由高壓液相色譜或氣象色譜檢測(cè)等等。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)下表1。表1、一號(hào)病人和二號(hào)病人的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)和親密度影響指標(biāo)的比較
權(quán)利要求
1.一種用于釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的溶液，其特征在于，所述溶液包括用于釋放口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞的鹽離子和酸離子；優(yōu)選地，所述鹽離子和酸離子由化合物提供，所述化合物選自氯化鉀，氯化鈉和磷酸鈉的一種或多種。
2.如權(quán)利要求1所述的溶液，其特征在于，所述溶液可進(jìn)一步包含用于提供細(xì)胞所需能量的化合物；優(yōu)選地，提供所述細(xì)胞所需能量的化合物為D-葡萄糖。
3.如權(quán)利要求1或2所述的溶液，其特征在于，所述溶液可進(jìn)一步包含用于調(diào)節(jié)該溶液的PH值和緩沖性能的化合物；優(yōu)選地，所述化合物選自無(wú)水磷酸二氫鉀，磷酸鈉和無(wú)水磷酸氫二銨的一種或多種。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的溶液，其特征在于，所述溶液可進(jìn)一步包含用于著色的化合物；優(yōu)選地，所述化合物為酚紅鈉。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的溶液，其特征在于，所述溶液包含0.01-10. 00克/ L氯化鉀，0.01-10. 00克/L無(wú)水磷酸二氫鉀，0.01-10. 00克/L氯化鈉，0. 01-10. 00克/L 無(wú)水二元磷酸鈉，0. 01-10. 00克/L D-葡萄糖和0. 01-0. 02克/L酚紅鈉；優(yōu)選地，所述溶液包括0. 4克/L氯化鉀，0. 06克/L無(wú)水磷酸二氫鉀，8. 0克/L氯化鈉， 0. 04788克/L無(wú)水二元磷酸鈉，1. 0克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的溶液，其特征在于，所述溶液為水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液；優(yōu)選地，所述酒精溶液中的酒精濃度為1-70% ；優(yōu)選地，所述葡萄糖溶液中的葡萄糖濃度為0. 1-15%。
7.一種用于檢測(cè)口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的溶液。
8.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒進(jìn)一步包括用于特異性固定所述嗜中性白血球細(xì)胞的固定劑；和/或用于對(duì)所述嗜中性白血球細(xì)胞進(jìn)行特異性染色的染色劑；優(yōu)選地，所述固定劑為甲醛；優(yōu)選地，所述染色劑為吖啶橙。
9.如權(quán)利要求7或8所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒進(jìn)一步包括檢測(cè)嗜中性白血球細(xì)胞的特異成分或產(chǎn)物所需的檢測(cè)試劑；優(yōu)先地，所述特異性成分為中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G，髓過(guò)氧化物酶，乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種；其檢測(cè)試劑包括檢測(cè)該特異蛋白所需的抗體及其相應(yīng)的檢測(cè)試劑；其檢測(cè)試劑為酶聯(lián)反應(yīng)所需的試劑。
10.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的溶液或如權(quán)利要求7-9中任一項(xiàng)所述的試劑盒在制備用于檢測(cè)口腔內(nèi)嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)量的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
11.一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法，其特征在于，所述方法包括檢測(cè)包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的樣本中嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量；優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法包括1)使所述哺乳動(dòng)物用適量溶液漱口，從而獲得包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的溶液；2)使用固定劑固定經(jīng)步驟1)獲得的溶液中的嗜中性白血球細(xì)胞；3)使用染色劑將經(jīng)步驟幻固定的嗜中性白血球細(xì)胞進(jìn)行染色并計(jì)數(shù)；優(yōu)選地，在步驟幻前，先離心所述包含哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的溶液；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述離心速度為20-100g，時(shí)間為10-30分鐘；更優(yōu)選地，所述離心速度為20g，時(shí)間為10分鐘。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述步驟1)中的溶液為如權(quán)利要求1-6 中任一項(xiàng)所述的溶液；優(yōu)選地，所述步驟2、中的固定劑為甲醛；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述固定劑為2. 5%的甲醛；優(yōu)選地，所述步驟幻中的染色劑為吖啶橙；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述染色劑為1. 6%的吖啶橙。
14.如權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量和被檢測(cè)哺乳動(dòng)物在健康狀態(tài)下口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的個(gè)性化的親密度影響指數(shù)。
15.如權(quán)利要求10-14中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量和健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞的數(shù)量為 10000。
16.一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法，其特征在于，所述方法包括檢測(cè)包含所述哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)含物的樣本中嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量，所述特異性成分選自中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G，髓過(guò)氧化物酶，乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種；優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量和被檢測(cè)哺乳動(dòng)物在健康狀態(tài)下口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的個(gè)性化的親密度影響指數(shù)。
18.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括通過(guò)將所述樣本中檢測(cè)到的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量和健康狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物參照者口腔內(nèi)的嗜中性白血球細(xì)胞特異成分或產(chǎn)物的含量進(jìn)行比較，計(jì)算所述哺乳動(dòng)物的比較性親密度影響指數(shù)。
19.一種檢測(cè)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生改善情況的方法，其特征在于，所述方法包括在對(duì)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生進(jìn)行改善之前和之后，根據(jù)權(quán)利要求10-18中任一項(xiàng)所述方法分別檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)，然后比較改善之前和之后的親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述親密度影響指數(shù)為個(gè)性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù)；優(yōu)選地，所述哺乳動(dòng)物是人。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于從哺乳動(dòng)物口腔內(nèi)釋放嗜中性白血球細(xì)胞的溶液，以及包含所述溶液的試劑盒。此外，本發(fā)明還提供了檢測(cè)哺乳動(dòng)物親密度影響指數(shù)的方法。所述親密度影響指數(shù)可以由從口腔中所獲取的嗜中性白血球細(xì)胞數(shù)或嗜中性白血球細(xì)胞特有的成分或產(chǎn)物的濃度所表達(dá)。此外，本發(fā)明還公開(kāi)了檢測(cè)哺乳動(dòng)物口腔衛(wèi)生改善情況的方法。
文檔編號(hào)C12Q1/06GK102559836SQ20101058852
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月15日
發(fā)明者潘申權(quán) 申請(qǐng)人:潘申權(quán)