專利名稱：：一種微生物油脂的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于微生物油脂的生產(chǎn)，特別涉及一種利用產(chǎn)油微生物轉(zhuǎn)化含有葡萄糖和木糖的碳源制備微生物油脂的方法。
背景技術(shù)：
：微生物油脂又稱單細(xì)胞油脂，是由酵母、霉菌、細(xì)菌和藻類等微生物在一定的條件下，將碳水化合物轉(zhuǎn)化為油脂積累在細(xì)胞內(nèi)。凡是可以在胞內(nèi)積累油脂超過細(xì)胞干重20襯％的微生物，稱為產(chǎn)油微生物。據(jù)報(bào)道，部分微生物積累油脂達(dá)到細(xì)胞干重的70%以上(李永紅，劉波，趙宗保，白鳳武.圓紅冬孢酵母菌發(fā)酵產(chǎn)油脂培養(yǎng)基及發(fā)酵條件的優(yōu)化研究.生物工程學(xué)報(bào)，2006，22(4):650-656)。與油料植物生產(chǎn)相比，微生物轉(zhuǎn)化碳水化合物生產(chǎn)油脂，不受場(chǎng)地、季節(jié)及氣候變化的影響，可以實(shí)現(xiàn)油脂規(guī)模化連續(xù)生產(chǎn)。微生物油脂經(jīng)轉(zhuǎn)酯化制得的生物柴油與動(dòng)植物油脂制得的生物柴油組成相似，因此微生物油脂技術(shù)可為生物能源產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供新原料，具有重要應(yīng)用前景。木質(zhì)纖維素材料成本低廉、來源廣泛、資源總量豐富，其化學(xué)成份主要是纖維素、半纖維素和木質(zhì)素。纖維素水解主要產(chǎn)物為葡萄糖；半纖維素水解得到葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖等混合物。如果能夠以木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物為碳源培養(yǎng)產(chǎn)油微生物，將顯著降低微生物油脂生產(chǎn)成本。微生物利用己糖和戊糖的混合物時(shí)，絕大多數(shù)微生物優(yōu)先利用葡萄糖，待葡萄糖耗盡或處于很低濃度時(shí)才開始利用其它碳源，這種現(xiàn)象稱為碳源代謝阻遏，或稱葡萄糖效應(yīng)(GoerkeB，StulkeJ.Carboncataboliterepressioninbacteria:manywaystomakethemostoutofnutrients.NatRevMicrobiol,2008,6(8)613-624；NicholsNN，DienBS，BothastRJ.Useofcataboliterepressionmutantsforfermentationofsugarmixturestoethanol.ApplMicrobiolBiotechnol,2001,56(1-2):120_125)o據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，產(chǎn)油微生物斯達(dá)氏油脂酵母Lipomycesstarkeyi(孔祥莉，劉波，趙宗保，馮斌.斯達(dá)氏油脂酵母利用混合糖發(fā)酵產(chǎn)油脂.生物加工過程，2007，5(2):36-41)、發(fā)酵性絲孢酵母Trichosporonfermentans(HuangC，ZongM，WuH，LiuQ.MicrobialoilproductionfromricestrawhydrolysatebyTrichosporonfermentans.BioresourTechnol,2009,100(19)=4535-4538)等在利用葡萄糖和木糖的混合物時(shí)，優(yōu)先利用葡萄糖，而后才開始利用木糖。這會(huì)使得微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)物的生成過程出現(xiàn)延滯期，即二次生長(zhǎng)現(xiàn)象，此現(xiàn)象導(dǎo)致發(fā)酵周期延長(zhǎng)、效率降低。因此尋找能夠同步且高效利用己糖和戊糖的微生物對(duì)于提高發(fā)酵效率具有重要意義。解除碳源代謝阻遏的相關(guān)研究已有文獻(xiàn)報(bào)道。在連續(xù)發(fā)酵過程中，將葡萄糖濃度維持在一個(gè)較低的水平，并且在一個(gè)較合適的稀釋速率下實(shí)現(xiàn)了葡萄糖和木糖的同步利用(KastnerJ，JonesW，RobertsR.SimultaneousutilizationofglucoseandD-xylosebyCandidashehataeinachemostat.JIndMicrobiolBiot，1998，20(6):339_343)。其次，通過前期誘導(dǎo)產(chǎn)生木糖代謝所需要的酶，也可以實(shí)驗(yàn)混合糖的同步利用(KastnerJ，RobertsR.SimultaneousfermentationofD-xyloseandglucosebyCandidashehatae.BiotechnolLett,1990,12(1)=57-60)0另外，通過篩選葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移酶突變株，也能解除葡萄糖抑制作用，實(shí)現(xiàn)葡萄糖和木糖同步利用，消除二次生長(zhǎng)現(xiàn)象(DienB,NicholsN,BothastR.FermentationofsugarmixturesusingEscherichiacolicataboliterepressionmutantsengineeredforproductionofL-Iacticacid.JIndMicrobiolBiot，2002，29(5)-.221-221)。
發(fā)明內(nèi)容當(dāng)碳源中含有葡萄糖和木糖，大部分產(chǎn)油微生物優(yōu)先利用葡萄糖，只有當(dāng)葡萄糖完全消耗或濃度降到很低后才開始利用木糖，稱為葡萄糖抑制，其直接結(jié)果就是微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)物積累過程中出現(xiàn)二次生長(zhǎng)現(xiàn)象。油脂發(fā)酵過程的二次生長(zhǎng)現(xiàn)象導(dǎo)致發(fā)酵周期延長(zhǎng)、效率降低、生產(chǎn)成本提高。發(fā)明人認(rèn)為解除產(chǎn)油的二次生長(zhǎng)現(xiàn)象可顯著促進(jìn)廉價(jià)碳源有效利用，改善微生物油脂的技術(shù)經(jīng)濟(jì)性。因此，發(fā)明人利用大量產(chǎn)油微生物進(jìn)行了科學(xué)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)部分產(chǎn)油微生物菌株具有同步消耗葡萄糖和木糖的生理特性。本發(fā)明的目的在于提供一種同步利用含有葡萄糖和木糖的碳源培養(yǎng)產(chǎn)油微生物，生產(chǎn)含有一種或多種脂肪酸及其衍生物的微生物油脂的方法。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)便、方法易行、可以更高效地利用和轉(zhuǎn)化成份復(fù)雜的碳源，如木質(zhì)纖維素原料水解產(chǎn)物，改善微生物油脂生產(chǎn)的技術(shù)經(jīng)濟(jì)性。本發(fā)明通過下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)1、制備產(chǎn)油培養(yǎng)基。通過下述方法的一種或它們的必要組合方法實(shí)現(xiàn)A.將葡萄糖和木糖混合，制成總糖濃度為2%10%的水溶液，添加其它必要的營(yíng)養(yǎng)成份，pH4.O8.0，滅菌后備用；B.參照文獻(xiàn)方法將木質(zhì)纖維素原料水解，產(chǎn)物制成含有葡萄糖和木糖的水溶液，添加其它必要的營(yíng)養(yǎng)成份，pH4.O8.0，滅菌后備用；或，C.參照文獻(xiàn)方法水解含碳水化合物的生物基原料，產(chǎn)物中添加葡萄糖或木糖以及其它必要的營(yíng)養(yǎng)成份，PH4.O8.0，滅菌后備用。其它必要的營(yíng)養(yǎng)成份為常規(guī)的用于產(chǎn)油微生物培養(yǎng)的物質(zhì)，如酵母粉等。2)產(chǎn)油微生物培養(yǎng)。向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接種產(chǎn)油微生物種子液，接種量2%20%(ν/ν)，在25°C37°C下通氣培養(yǎng)，至醪液中殘余糖濃度低于1%。3)菌體收集和微生物油脂提取。培養(yǎng)結(jié)束后，采用離心、過濾或其它必要的方法濃縮收集產(chǎn)油微生物細(xì)胞。參照文獻(xiàn)(李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28(6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法抽提獲得油脂，計(jì)算菌體油脂含量。所述的微生物油脂可以進(jìn)一步加工制成柴油機(jī)燃料或者與柴油機(jī)燃料混合使用的混合物。本發(fā)明使用的產(chǎn)油微生物為經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后菌體油脂含量可超過細(xì)胞干重20%(w/w)，并且具有同步消耗葡萄糖和木糖的生理特性的真菌、細(xì)菌或微藻。它們包括皮狀絲孢酵母Trichosporoncutaneum、彎曲隱球酵母Cryptococcuscurvatus和紅冬孢酵母Rhodosporidiumtoruloides。這些菌株可以直接從包括中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)及美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)等菌種保藏機(jī)構(gòu)購(gòu)買或從自然界中分離，也可以使用與原來菌株性狀不同的人工或自然突變菌株。本發(fā)明采用將葡萄糖和木糖混合的方法、水解含有葡萄糖單元或木糖單元生物基原料的方法、或者必要的組合方法，制備含有葡萄糖和木糖的碳源。生物基原料水解參照文獻(xiàn)方法(CaraC,RuizE,OlivaJM,SaezF,CastroE.Conversionofolivetreebiomassintofermentablesugarsbydiluteacidpretreatmentandenzymaticsaccharification.BioresourTechnol，2008，99(6)1869-1876)進(jìn)行。木質(zhì)纖維素原料為含有纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的材料，包括植物體、農(nóng)作物秸稈和林業(yè)加工廢棄物，例如玉米秸稈、麥稈、稻草、松木、云杉等。本發(fā)明的有益效果是1)與傳統(tǒng)的由動(dòng)植物油脂制備生物柴油的方法相比，本發(fā)明技術(shù)簡(jiǎn)單有效，周期短，節(jié)約耕地；2)微生物同步利用葡萄糖和木糖，克服了葡萄糖對(duì)其它單糖利用的抑制，過程中避免了二次生長(zhǎng)現(xiàn)象，提高了發(fā)酵過程的效率；3)微生物利用葡萄糖和木糖積累微生物油脂，為高效轉(zhuǎn)化木質(zhì)纖維素原料制備微生物油脂提供了方便。圖1實(shí)施例1中底物消耗和生物量生成曲線，其中，·葡萄糖；木糖；▲生物量。具體實(shí)施例方式下面是由混合糖制備微生物油脂的具體實(shí)施例，通過實(shí)施例可了解到不同工藝條件對(duì)微生物油脂生成的影響。實(shí)施例11)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖47g/L，木糖23g/L，添加1.Og/L酵母粉，0.lg/L氯化銨，1.Og/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，11.8g/L磷酸二氫鉀，3.7g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(v/v)，余量為水，PH6.0，所得培養(yǎng)基1211滅菌151^11后備用；2)產(chǎn)油酵母TrichosporoncutaneumAS2.571(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)20小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量10%(ν/ν)，在30°C下通氣培養(yǎng)120h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0.lg/L,1.9g/L；固液分離收集菌體并用生理鹽水洗滌兩遍，最終得干菌體23.8g/L，油脂含量49.7%。實(shí)施例21)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖10g/L，木糖10g/L，添加2g/L酵母粉，0.5g/L氯化銨，0.2g/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，0.4g/L磷酸二氫鉀，0.lg/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν)，ρΗ5.0，所得培養(yǎng)基121°C滅菌15min后備用；2)產(chǎn)油酵母RhodosporidiumtoruloidesAS2.1389(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)18小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量2%(ν/ν)，在25°C下通氣培養(yǎng)60h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0.lg/L,1.2g/L；固液分離收集菌體并用生理鹽水洗滌兩遍，烘干得干菌體5.lg/L；經(jīng)有機(jī)溶劑提取得到油脂含量18%。實(shí)施例31)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖10g/L，木糖50g/L，添加0.7g/L酵母粉，0.2g/L氯化銨，1.lg/L氯化鎂，0.5g/L硫酸鈉，8g/L磷酸二氫鉀，2g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν),ρΗ6.5，所得培養(yǎng)基1211滅菌151^11后備用；2)產(chǎn)油酵母CryptococcuscurvatusATCC20509(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)24小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量5%(ν/ν)，在28°C下通氣培養(yǎng)144h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0g/L，6.6g/L；按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體15.7g/L，油脂含量43.2%。實(shí)施例41)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖30g/L，木糖60g/L，添加0.3g/L酵母粉，0.5g/L氯化銨，1.2g/L氯化鎂，0.3g/L硫酸鈉，12g/L磷酸二氫鉀，4g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν)，ρΗ7.0，所得培養(yǎng)基121°C滅菌15min后備用；2)產(chǎn)油酵母CryptococcuscurvatusATCC20509(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)22小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量15%(ν/ν)，在32°C下通氣培養(yǎng)144h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0.2g/L，2.5g/L；按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體26.9g/L，油脂含量48.6%。實(shí)施例51)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖95g/L，木糖5g/L，添加1.2g/L酵母粉，1.Og/L氯化銨，0.6g/L氯化鎂，0.4g/L硫酸鈉，10g/L磷酸二氫鉀，6g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν),ρΗ日^，所得培養(yǎng)基口丨！滅菌巧！^??！后備用；2)產(chǎn)油酵母CryptococcuscurvatusATCC20509(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)28小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量20%(ν/ν)，在34°C下通氣培養(yǎng)168h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為7.2g/L，0g/L；按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體24.3g/L，油脂含量40.1%。實(shí)施例61)將葡萄糖和木糖配制成混合糖溶液，葡萄糖20g/L，木糖10g/L，添加0.2g/L酵母粉，0.3g/L氯化銨，0.8g/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，6g/L磷酸二氫鉀，lg/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν),ρΗ6.2，所得培養(yǎng)基1211滅菌151^11后備用；2)產(chǎn)油酵母TrichosporoncutaneumAS2.571(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心)在液體種子培養(yǎng)基中，于30°C，200轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)26小時(shí)；3)向步驟(1)所述培養(yǎng)基中接入步驟(2)制備的產(chǎn)油微生物種子液，接種量12%(ν/ν)，在37°C下通氣培養(yǎng)72h；4)終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0.5g/L，2.lg/L；按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體6.6g/L，油脂含量23.5%。實(shí)施例7參照文獻(xiàn)方法(KootstraA,BeeffinkH,ScottE,SandersJ.Comparisonofdilutemineralandorganicacidpretreatmentforenzymatichydrolysisofwheatstraw.BiochemEngJ,2009,46(2):126-131)，以玉米秸稈為原料，干燥，粉碎過60目篩，和50mM馬來酸溶液混合，料液比為10%(w/w)，浸泡24h，170°C消化30min，稀釋至料液比為5%(w/w),ilpH4.8，纖維素酶加入量為50FPU/g固體，60°C、150rpm反應(yīng)72h，過濾，調(diào)整總還原糖濃度為25g/L，其中葡萄糖17g/L，木糖8g/L。在此糖液中加入葡萄糖50g/L，1.Og/L酵母粉，0.6g/L氯化銨，0.8g/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，5g/L磷酸二氫鉀，2g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν)調(diào)pH5.0。121°C滅菌15min后，以10%(ν/ν)接種量接入TrichosporoncutaneumAS2.571(購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心)種子液，于35°C通氣培養(yǎng)144小時(shí)。終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為2.lg/L和0.2g/L。按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體22.4g/L，油脂含量38.5%。實(shí)施例8參照文獻(xiàn)(SassnerP,MartenssonCG,GalbeM,ZacchiG.SteampretreatmentofH2S04-impregnatedSalixfortheproductionofbioethanol.BioresourTechnol,2008，99(1):137-145)方法，以柳樹為原料，干燥，粉碎過60目篩，在過量的0.5%硫酸中浸泡90min；過濾，得到料液固體含量為40%，200°C停留8min，然后進(jìn)行蒸汽爆破；過濾，將固體物質(zhì)加水稀釋到固體含量為2%，加入纖維素酶65FPU/g和葡萄糖苷酶393IU/g，40°C反應(yīng)96h；過濾，調(diào)整總還原糖濃度為60g/L，其中葡萄糖45g/L，木糖15g/L。在此糖液中加入1.5g/L酵母粉，1.Og/L氯化銨，0.5g/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，7.5g/L磷酸二氫鉀，2.5g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν)調(diào)pH6.0。121°C滅菌15min后，以15%(ν/ν)接種量接入TrichosporoncutaneumAS2.571種子液，于32°C通氣培養(yǎng)100小時(shí)。終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為0.8g/L和0.lg/L。按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體19.6g/L，油脂含量33.5%。實(shí)施例9參照文獻(xiàn)(SunY,ChengJJ.Diluteacidpretreatmentofryestrawandbermudagrassforethanolproduction.BioresourTechnol,2005,96(14)1599-1606)方法，以黑麥稿桿為原料，干燥，粉碎過60目篩，與1.5%(w/w)稀硫酸混合，料液比為10%(w/w)，121°C消化90min；過濾，固體物質(zhì)中加入纖維素酶(25FPU/g固體)和葡萄糖苷酶(75IU/g固體)，50°C、IOOrpm反應(yīng)48h；過濾，調(diào)整總還原糖濃度為90g/L，其中葡萄糖56g/L，木糖34g/L。在此糖液中加入1.2g/L酵母粉，0.3g/L氯化銨，0.9g/L氯化鎂，0.lg/L硫酸鈉，6g/L磷酸二氫鉀，3g/L磷酸氫二鉀，微量元素溶液(ν/ν)調(diào)pH5.5。121°C滅菌15min后，以20%(ν/ν)接種量接入CryptococcuscurvatusATCC20509(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)種子液，于28°C通氣培養(yǎng)132小時(shí)。終止發(fā)酵，此時(shí)發(fā)酵液中殘余葡萄糖和木糖濃度分別為3.lg/L和1.6g/L。按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行后處理，最終得干菌體23.8g/L，油脂含量39.4%0與常規(guī)的優(yōu)先利用葡萄糖的發(fā)酵過程相比，本發(fā)明涉及葡萄糖和木糖的同步利用，能夠消除發(fā)酵過程中的二次生長(zhǎng)現(xiàn)象，提高底物轉(zhuǎn)化速率，縮短發(fā)酵周期，從而降低生產(chǎn)成本；與生物轉(zhuǎn)化其他原料制備微生物油脂的方法相比，本發(fā)明使用的原料是含有葡萄糖和木糖的木質(zhì)纖維素生物質(zhì)，如樹木、秸稈等，具有資源豐富、來源廣泛、價(jià)格低廉的優(yōu)點(diǎn)，而且發(fā)酵獲取油脂的方法易行、成本低，是一種利用可再生資源生產(chǎn)微生物油脂的新途徑。權(quán)利要求1.一種微生物油脂的制備方法，其特征在于采用含有葡萄糖和木糖的碳源培養(yǎng)產(chǎn)油微生物，獲得含有一種或多種脂肪酸及其衍生物的油脂，葡萄糖和木糖被產(chǎn)油微生物同步消耗；所述碳源中葡萄糖含量為5%95%；所述的產(chǎn)油微生物為皮狀絲孢酵母Trichosporoncutaneum、彎曲隱球酵母Cryptococcuscurvatus、tdffi—Rhodosporidiumtoruloides巾白勺一禾中$$禾中。2.按照權(quán)利要求1所述微生物油脂的制備方法，其特征在于所述產(chǎn)油微生物培養(yǎng)在有氧條件下進(jìn)行，培養(yǎng)溫度20°C37°C，pH4.O8.O。3.按照權(quán)利要求1所述微生物油脂的制備方法，其特征在于所述含有葡萄糖和木糖的碳源是通過將葡萄糖和木糖混合制得，或者將木質(zhì)纖維素原料進(jìn)行水解處理制得。4.按照權(quán)利要求3所述微生物油脂的制備方法，其特征在于所述木質(zhì)纖維素原料為含有纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的生物材料。5.按照權(quán)利要求3所述微生物油脂的制備方法，其特征在于所述木質(zhì)纖維素原料為農(nóng)作物秸稈或林業(yè)加工廢棄物。全文摘要一種制備微生物油脂的方法。以含有葡萄糖和木糖的碳源為原料，通氣培養(yǎng)獲得發(fā)酵物，并從發(fā)酵物中提取微生物油脂。該方法能夠同步轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中的葡萄糖和木糖，解除了混合糖利用中葡萄糖對(duì)其它底物利用的抑制作用，消除了過程中的二次生長(zhǎng)現(xiàn)象，底物轉(zhuǎn)化速率快，可顯著降低生產(chǎn)成本，在利用木質(zhì)纖維素材料生產(chǎn)微生物油脂方面具有較大的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)C12P7/64GK102250974SQ20101017659公開日2011年11月23日申請(qǐng)日期2010年5月19日優(yōu)先權(quán)日2010年5月19日發(fā)明者胡翠敏,趙宗保申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所