專利名稱：用于治療胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(tslp)介導(dǎo)的病癥的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總體而言涉及胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)和TSLP介導(dǎo)的病癥，更具體而言，本發(fā)明涉及TSLP和TSLP受體介導(dǎo)的病癥(例如，免疫系統(tǒng)的紊亂、變應(yīng)性炎癥 (allergic inflammation)、變應(yīng)性氣道炎癥(allergic airway inflammation)、DC 介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、變應(yīng)性哮喘(allergic asthma)、哮喘、阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病和食物變態(tài)反應(yīng)(food allergies)、炎性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、IgE介導(dǎo)的紊亂和鼻結(jié)膜炎)。特別優(yōu)選的方面涉及通過施用本文所公開的包含至少一種動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(包括富含氣體(例如富含氧)的動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體)的治療組合物，以及在進(jìn)一步聯(lián)合療法方面中通過將所述動(dòng)電學(xué)流體與至少一種另外的治療劑聯(lián)合施用，來調(diào)整(例如治療)TSLP和TSLP受體介導(dǎo)的病癥。相關(guān)申請的交叉引用本申請要求均于2008年10月22日提交的美國臨時(shí)專利申請系列號61/107，480 和61/107，453、以及2008年10月M日提交的美國實(shí)用新型專利申請系列號12/258,210 的優(yōu)先權(quán)，這兩份申請文件以弓I用方式全文并入本文。
背景技術(shù)：
胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)是IL_7樣細(xì)胞因子，其促發(fā)樹狀細(xì)胞介導(dǎo)的Th2-型炎性反應(yīng)，并被認(rèn)為是變應(yīng)性炎癥的總開關(guān)。TSLP 是B細(xì)胞和T細(xì)胞發(fā)育和成熟的必要生長因子。特別是，鼠TSLP支持B淋巴細(xì)胞增殖并且是B細(xì)胞增殖所需要的。鼠TSLP在控制T細(xì)胞受體-γ (TCRy)基因座重排中起重要作用并且對胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞具有明顯刺激作用。參見例如Friend等，Exp. Hematol.， 22 :321-328,1994 ；Ray 等，Eur. J. Immunol. ,26 10-16，1996 ；Candeias 等，Immunology Letters, 57 :9-14,1997。TSLP具有與IL-7類似的細(xì)胞因子活性例如，TSLP可以取代IL_7刺激B細(xì)胞增殖反應(yīng)(Friend等，同上)。盡管TSLP和IL-7介導(dǎo)類似的對靶細(xì)胞的作用，但是它們似乎具有不同的信號傳導(dǎo)途徑并且可能具有不同的生物反應(yīng)。例如，盡管TSLP調(diào)整STAT5的活性，但是其未能活化任何Janus家族酪氨酸激酶成員(Levin等，J. Immunol. , 162 =677-683, 1999)。TSLP對樹突細(xì)胞和TNF生成的作用在人TSLP和人TSLP受體在2001年被克隆后，發(fā)現(xiàn)人TSLP有效活化不成熟的⑶Ilc+髓樣樹狀細(xì)胞(mDC)(參見例如，Reche等， J. Immunol.，167 :336-343,2001 和 Soumelis 等，Nat. Immunol.，3 :673-680,2002)。Th2 細(xì)胞一般在免疫學(xué)教科書和文獻(xiàn)中被定義產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的⑶4+T細(xì)胞。 而Thl細(xì)胞(例如⑶4+T細(xì)胞)產(chǎn)生IFN- γ和有時(shí)產(chǎn)生TNF。當(dāng)TSLP-DC用于在體外刺激未致敏的同種異體CD4+T細(xì)胞時(shí)，Th2細(xì)胞的獨(dú)特型被誘導(dǎo)，其產(chǎn)生經(jīng)典的Th2細(xì)胞因子 IL-4、IL-5和IL-13和大量TNF，但很少或沒有IL-10或干擾素-γ (Reche等，同上)(還參見例如，Soumelis 等，Nat. Immunol.，3 =673-680,2002)。TNF 通常不被認(rèn)為是 Th2 細(xì)胞因子。然而，TNF在哮喘氣道中是重要的，并且與增加的TNF分泌關(guān)聯(lián)的基因型與增加的哮喘風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。參見 Shah 等，Clin. Exp. Allergy. ,25 :1038-1044,1995 以及 Moffatt，Μ. F.和 Cookson, W. 0. , Hum. Mol. Genet.，6 :551-554,1997。TSLP誘導(dǎo)人mDC以在mRNA和蛋白質(zhì)兩個(gè)水平上表達(dá)TNF超家族蛋白0X40L(Ito 等，J. Exp. Med.，202 :1213-1223)。TSLP-DC對0X40L的表達(dá)對于炎性Th2細(xì)胞的加工是重要的。因此，TSLP活化的DC通過上調(diào)0X40L而不誘導(dǎo)產(chǎn)生Thl極化的細(xì)胞因子而產(chǎn)生Th2 許可的微環(huán)境。同上。TSLP表達(dá)、變應(yīng)原特異性反應(yīng)和哮喘早期研究已經(jīng)顯示TSLPmRNA由人原代皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和肺成纖維細(xì)胞高度表達(dá)(Soumelis等，Nat. Immunol.，3 :673_680，200 。因?yàn)門SLP主要表達(dá)在表皮頂層的角質(zhì)形成細(xì)胞中，這表明 TSLP生成是完全分化的角質(zhì)形成細(xì)胞的特征。特應(yīng)性皮炎患者中TSLP的表達(dá)與朗格漢斯細(xì)胞遷移和原位活化相關(guān)，這表明TSLP可以直接促成這些細(xì)胞的活化，隨后這些細(xì)胞遷移入引流淋巴結(jié)并引發(fā)變應(yīng)原特異性反應(yīng)。同上。在更近期的研究中，通過原位雜交顯示， TSLP表達(dá)在哮喘氣道中增加并與Th2吸引趨化因子的表達(dá)和疾病嚴(yán)重度相關(guān)，提供了 TSLP 與哮喘之間的關(guān)聯(lián)(Ying 等，J. Immunol.，174 :8183-8190,2005) TSLP受體(TSLPR)和變應(yīng)性哮喘TSLP受體(TSLPR)是大約50kDa的蛋白并且與共用Y-鏈具有顯著相似性。TSUR是新的1型細(xì)胞因子受體，其與IL-7Rα (⑶127)組合， 構(gòu)成例如Pandey等，Nat. Immunol.，1 :59-64, 2000描述的TSLP受體復(fù)合物。TSLPR在其羧基末端附近具有酪氨酸殘基，其可以與磷酸化STAT5締合并在結(jié)合TSLP時(shí)介導(dǎo)多種生物功能(Isaksen 等，J. Immunol.，168 :3288-3294, 2002)。人TSLPR由單核細(xì)胞和⑶Ilc+樹狀細(xì)胞表達(dá)，并且TSLP結(jié)合誘導(dǎo)吸引TH2細(xì)胞的趨化因子CCL17和CCL22的表達(dá)。而且，如上所述，TSLPR誘導(dǎo)的樹狀細(xì)胞活化間接導(dǎo)致 Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加，這可以能是調(diào)節(jié)⑶4+T細(xì)胞體內(nèi)平衡所必需的。在小鼠中，TSLPR的缺乏對淋巴細(xì)胞數(shù)目沒有影響。然而，TSUR和共用Y-鏈的缺乏導(dǎo)致與僅缺乏公共Y-鏈的小鼠相比更少的淋巴細(xì)胞。參見Reche等，J. Immunol. , 167 336-343，2001 和 Soumelis 等，Nat. Immunol.，3 :673-680, 2002。研究發(fā)現(xiàn)，TSLP和TSUR在小鼠中引發(fā)變應(yīng)性疾病中起重要作用。在一項(xiàng)研究中，證明了被改造為在皮膚中過表達(dá)TSLP的小鼠發(fā)生特應(yīng)性皮炎，特征為含有炎性浸潤的濕疹性皮膚損害、循環(huán)Th2細(xì)胞的急劇增加和血清IgE升高(Yoo等，J. Exp. Med.，202 541-549,2005).研究表明TSLP可以直接活化小鼠中的DC。在Li等進(jìn)行的另一項(xiàng)研究中， 該研究組證實(shí)在皮膚中過表達(dá)TSLP的轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)生特應(yīng)性皮炎，這加強(qiáng)了 TSLP與發(fā)生特應(yīng)性皮炎之間的關(guān)聯(lián)。另一組研究證明，TSLP是在小鼠體內(nèi)引發(fā)變應(yīng)性氣道炎癥所需要的。在一項(xiàng)研究中，^lou等證明了 TSLP轉(zhuǎn)基因的肺特異性表達(dá)誘導(dǎo)了變應(yīng)性氣道炎癥(哮喘)，其特征為大量白細(xì)胞浸潤(包括Th2細(xì)胞)、杯狀細(xì)胞增生和上皮下纖維化，以及增加的血清IgE水平(Zhou等，Nat. Immunol.，6 1047-1053，2005)。然而，相反，缺乏TSLPR的小鼠未能響應(yīng)吸入的抗原而發(fā)生哮喘(Zhou等，同上，和Al-Shami等，J. Exp. Med.，202 =829-839, 2005)。 因此，這些研究一起證明了 TSLP是引發(fā)小鼠變應(yīng)性氣道炎癥所需要的。另外，在^ng-Jim等進(jìn)行的研究中，證明了上皮細(xì)胞衍生的TSLP在人中促發(fā)DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)，這表明TSLP是上皮細(xì)胞-DC界面的變應(yīng)性炎癥的總開關(guān)(Yong-Jun 等，J. Exp. Med.，203 :269-273, 2006)。在最近研究中顯示，通過抑制TSUR調(diào)整DC功能減輕了小鼠中的嚴(yán)重度(Liyim Shi 等，Clin. Immunol.，129 =202-210,2008) 在另一組研究中，證明 TSLPR 不僅在 DC 中表達(dá)，而且在巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞和⑶4+T細(xì)胞上表達(dá)(Rochman等，J. Immunol.，178 6720-6724，2007，和 Omori M.和 Ziegler S.，J. Immunol.，178 1396-1404，2007)。為了相除TSUR中和對CD4+T細(xì)胞或變應(yīng)性炎癥中其他效應(yīng)細(xì)胞的直接影響，Liyun Shi等進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，其中OVA-負(fù)載的DC在過繼轉(zhuǎn)移至未致敏小鼠氣道之前用抗TSLPR體內(nèi)治療。之前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，OVA-DC促發(fā)強(qiáng)嗜酸性氣道炎癥并伴隨諸如IL-4和IL-5等Th2細(xì)胞因子的大量產(chǎn)生(Sung 等，J. Immunol.，166 :1261-1271 和 Lambrecht 等，J. Clin. Invest.，106 :551-559, 2000)。然而，用抗-TSLPR預(yù)治療OVA-DC導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤以及IL-4和 IL-5水平的顯著下降，進(jìn)一步說明了 TSLra在DC引發(fā)的變應(yīng)性疾病中起的作用。該結(jié)果還支持TSLPR對DC的阻斷將幫助控制氣道炎癥(Liyim Shi等，同上)。有越來越多的實(shí)驗(yàn)涉及TSLP/TSLPR在各種生理和病理過程中的作用。TSLP的生理學(xué)作用包括調(diào)整免疫系統(tǒng)，特別是刺激B和T細(xì)胞增殖、發(fā)育和成熟。TSLP在變應(yīng)性哮喘的病理學(xué)和局部抗體介導(dǎo)的TSLP受體功能阻斷以緩解變應(yīng)性疾病中起至關(guān)重要的作用。 因此，TSLP和TSLP受體之間的相互作用被認(rèn)為在許多生理疾病過程中是重要的，例如變應(yīng)性炎癥、患有特應(yīng)性皮炎或特應(yīng)性濕疹的患者的皮膚損害、變應(yīng)性哮喘和哮喘。附圖簡述

圖1示出本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Rev-60和Solas)分別減少支氣管上皮細(xì)胞(BEC)中的DEP誘導(dǎo)的TSLP受體表達(dá)大約90%和50%，而生理鹽水(賂)僅有邊際效應(yīng)。此外，非動(dòng)電學(xué)對照壓力罐流體PP60導(dǎo)致DEP誘導(dǎo)的TSLP受體表達(dá)減少大約50%。圖2示出本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Revera 60和Solas)分別抑制支氣管上皮細(xì)胞中的DEP誘導(dǎo)的細(xì)胞表面結(jié)合的MMP9水平大約80%和70%，而生理鹽水(NS) 僅有邊際效應(yīng)。此外，非動(dòng)電學(xué)對照壓力罐流體PP60導(dǎo)致DEP誘導(dǎo)的細(xì)胞表面結(jié)合的MMP9 水平減少大約30%。圖3A-C證實(shí)一系列膜片鉗實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，所述實(shí)驗(yàn)在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)(15分鐘(左圖板)和2小時(shí)(右圖板))和不同的電壓方案中評價(jià)動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，RNS-60和 Solas)對上皮細(xì)胞膜極性和離子通道活性的作用。關(guān)于圖3A-C所涉及的實(shí)驗(yàn)，圖4A-C示出在3種電壓方案中(A，從OmV階躍；B， 從-60mV階躍；C，從-120mV階躍)和2個(gè)時(shí)間點(diǎn)(15分鐘(空心圓)和2小時(shí)(實(shí)心圓))， RNS-60電流數(shù)據(jù)減去Solas電流數(shù)據(jù)所得到的圖。圖5A-D證實(shí)一系列膜片鉗實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，所述實(shí)驗(yàn)利用不同的外部鹽溶液和在不同的電壓方案中(圖板A和C顯示從OmV的階躍；圖板B和D顯示從_120mV的階躍)評價(jià)動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，Solas (圖板A和B)和RNS-60(圖板C和D))對上皮細(xì)胞膜極性和離子通道活性的作用。關(guān)于圖5A-D所涉及的實(shí)驗(yàn)，圖6A-D示出對于Solas (圖板A和B)和Revera 60 (圖板C和D)，在2種電壓方案中(圖板A和C，從OmV階躍；圖板B和D，從_120mV階躍)從 20mM CaCl2 (菱形符號)和40mM CaCl2 (方形符號)電流數(shù)據(jù)中減去CsCl電流數(shù)據(jù)(顯示于圖5中)所得到的圖。圖7A和B證明了膜片鉗試驗(yàn)的結(jié)果，所述試驗(yàn)評價(jià)了稀釋動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體(例如，RNS-60)對上皮細(xì)胞膜極性和離子通道活性的作用。發(fā)明_既述具體方面提供了用于治療TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，包括向需要所述方法的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的動(dòng)電學(xué)改變的水性流體，所述水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以在所述流體與活細(xì)胞相接觸時(shí)足以提供對細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方法方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是所述流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。在具體的實(shí)施方案中，所述流體中作為所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在的溶解氧分子的百分比是選自由以下各項(xiàng)組成的組的百分比大于0.01%、大于 0. 1%、大于1%、大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于25% ；大于30% ；大于 35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于65% ；大于70% ；大于 75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；和大于95%。在具體的方面中，全部的溶解氧基本上以所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在。在某些實(shí)施方案中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于選自由以下各項(xiàng)組成的組的尺寸的平均直徑90nm ；80nm ；70nm ；60nm ； 50nm ；40nm ； 30nm ； 20nm ； IOnm ；禾口小于 5nm。在具體的方法方面中，所述離子水性溶液包括鹽水溶液。在某些方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是超氧合的。在具體的方法方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子的形式。在某些方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的改變包括所述流體暴露于流體動(dòng)力誘導(dǎo)的局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)。在某些實(shí)施方案中，暴露于所述局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖中的至少一種。在具體的方面中，所述流體暴露于流體動(dòng)力誘導(dǎo)的局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)包括所述流體暴露于用以產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導(dǎo)動(dòng)電學(xué)效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。在具體的方面中，TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥包括免疫系統(tǒng)的疾病或紊亂，包括但不限于變應(yīng)性炎癥。在具體方面，變應(yīng)性炎癥包括變應(yīng)性氣道炎癥、DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、哮喘、阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、IgE介導(dǎo)的紊亂、鼻結(jié)膜炎和食物變態(tài)反應(yīng)中的至少一種。在某些實(shí)施方案中，TSLP介導(dǎo)的或TSLPR 介導(dǎo)的疾病或病癥包括炎性關(guān)節(jié)炎，例如包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病中的至少一種。在某些方面中，所述的方法進(jìn)一步包括聯(lián)合療法，其中至少一種另外的治療劑被施用于患者。在具體的實(shí)施方案中，所述至少一種另外的治療劑選自由下列各項(xiàng)組成的組短效β 2_激動(dòng)劑、長效β 2-激動(dòng)劑、抗膽堿能藥、皮質(zhì)類固醇、全身性皮質(zhì)類固醇、 肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑、白三烯調(diào)節(jié)劑、甲基黃嘌呤及其組合。在某些方面，所述至少一種另外的治療劑選自由下列各項(xiàng)組成的組由β 2_激動(dòng)劑組成的支氣管擴(kuò)張劑，所述β2-激動(dòng)劑包括沙丁胺醇(albuterol)、左旋沙丁胺醇(Ievalbuterol)、吡布特羅(pirbuterol)、 阿福特羅(artformoterol)、福莫特羅(formoterol)沙美特羅(salmeterol)；和抗膽堿能藥，諸如異丙托銨(ipratropium)和噻托銨(tiotropium)；皮質(zhì)類固醇，包括倍氯米松(beclomethasone)、布地奈德(budesonide)、氟尼縮松(flunisolide)、氟替卡松(fluticasone)、莫米松(mometasone)、曲安西龍(triamcinolone)、甲潑尼龍 (methyprednisolone)、撥尼松龍(prednisolone)、撥尼松(prednisone)；白三烯調(diào)節(jié)齊[J, 包括孟魯司特(montelukast)、扎魯司特(zafirlukast)和齊留通(zileuton)；肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑，包括色甘酸(cromolyn)和奈多羅米(nedocromil)；甲基黃嘌呤(methylxanthine)， 包括茶堿(theophylline)；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪(hydroxyzine)、苯海拉明(diphenhydramine)、 氯雷他定(Ioratadine)、西替禾Ij嗪(cetirizine)、和氫化可的松(hydrocortisone)；免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)藥物，包括他克莫司(tacrolimus)和吡美莫司(pimecrolimus)；環(huán)孢霉素 (cyclosporine) ； /lp坐口票吟(azathioprine)；嗎替麥考酷酉旨(mycophenolatemofetil)；以及它們的組合。在具體方面，所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSUR拮抗劑，并且在特定實(shí)施方案中，所述TSLP和/或TSLPR拮抗劑選自由下列各項(xiàng)組成的組對TSLP與 TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼超過一個(gè)受體鏈的組分的多肽。在具體方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)或功能中的至少一種，所述改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白或構(gòu)成成分的構(gòu)象、配體結(jié)合活性和催化活性中的至少一種。在某些方面，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細(xì)胞內(nèi)附著蛋白、細(xì)胞黏附蛋白、整聯(lián)蛋白等。在某些實(shí)施方案中，所述跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。在具體方面，所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用，例如，其中所述G蛋白α亞基包括選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種G α s、G α ρ G α ,和G α 12，并且在某些實(shí)施方案中，所述至少一種G蛋白α亞基是Ga^。在具體方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整全細(xì)胞電導(dǎo)，例如其中調(diào)整全細(xì)胞電導(dǎo)包括調(diào)整所述全細(xì)胞電導(dǎo)的線性和非線性電壓依賴性貢獻(xiàn)中的至少一種。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整鈣依賴性細(xì)胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整磷脂酶C活性性。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整與選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種病癥或癥狀有關(guān)的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)免疫系統(tǒng)的疾病或紊亂、變應(yīng)性炎癥、變應(yīng)性氣道炎癥、DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、哮喘、阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、IgE介導(dǎo)的紊亂、鼻結(jié)膜炎、食物變態(tài)反應(yīng)、炎性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病。具體方法方面包括將所述動(dòng)電學(xué)流體施用于細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)?，并且還包括調(diào)整其中的細(xì)胞間連接。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏附區(qū)(zona adherin)和橋粒(desmasome)組成的組的至少一種。在具體的方面中，所述細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)影ㄟx自由肺上皮細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞組成的組的至少一種。在某些方法方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是氧合的，并且其中所述流體中的氧在大氣壓下以至少％)pm、至少M(fèi)ppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少 60ppm氧的量存在。在某些方法方面，所述動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子、和動(dòng)電學(xué)改性或荷電的氧物種中的至少一種，例如，其中所述溶劑化電子或者動(dòng)電學(xué)改性或荷電的氧物種的形式以至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少 7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。在某些方面，所述動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括由分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子的形式。在某些方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少2個(gè)月、至少3個(gè)月、至少4個(gè)月、至少5個(gè)月、至少6個(gè)月、至少12個(gè)月或更長的時(shí)間。在某些方面，在所述動(dòng)電學(xué)改變的流體的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)中存在的氧的量為在大氣壓下至少％)pm、至少M(fèi)ppm、至少20ppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或者至少60ppm氧。 在具體方面，治療包括通過局部、吸入、鼻內(nèi)和靜脈內(nèi)中的至少一種方式施用。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了用于治療TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括施用動(dòng)電學(xué)改變的水性流體，該水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療TSLP介導(dǎo)的或TSLPR介導(dǎo)的疾病或病癥的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。優(yōu)選的是，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以足以提供調(diào)整細(xì)胞膜電位和/或電導(dǎo)率的量穩(wěn)定地配置在所述流體中。包括調(diào)整或下調(diào)TSLP表達(dá)和/或活性的某些方面具有用于治療本文公開的TSLP介導(dǎo)的或TSLPR介導(dǎo)的疾病或病癥(例如，免疫系統(tǒng)的紊亂、變應(yīng)性炎癥、變應(yīng)性氣道炎癥、DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、哮喘、阻塞性氣道疾病、 慢性阻塞性肺病和食物變態(tài)反應(yīng)、炎性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、IgE介導(dǎo)的紊亂和鼻結(jié)膜炎)的效用。動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體如本文所用的“動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體”是指出于本文工作實(shí)施例的目的通過本文詳細(xì)描述的示例性混合裝置(還參見US200802190088和W02008/052143，通過引用將二者整體并入本文)而產(chǎn)生的申請人發(fā)明的動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體。如本文公開和呈現(xiàn)的資料所證明，動(dòng)電學(xué)流體表示相對于現(xiàn)有技術(shù)非動(dòng)電學(xué)流體，包括相對于現(xiàn)有技術(shù)氧合的非動(dòng)電學(xué)流體(例如壓力罐氧合的流體及類似物)的新穎的且從根本上不同的流體。如在本文各方面中所公開的那樣，動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體具有獨(dú)特且新穎的物理和生物特性，包括但不限于以下在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于約100納米的平均直徑并以足以在流體與活細(xì)胞接觸時(shí)提供對細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在離子水性流體中。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體是指在流體動(dòng)力誘導(dǎo)的、局部化(例如就全部流體體積而言是非均一的)的動(dòng)電學(xué)效應(yīng)(例如電壓/電流的脈沖)例如本文所述的裝置
10部件-局部化效應(yīng)的存在下產(chǎn)生的流體。在具體的方面，所述流體動(dòng)力誘導(dǎo)的、局部化的動(dòng)電學(xué)效應(yīng)與本文公開并討論的表面相關(guān)的雙層和/或流動(dòng)電流效應(yīng)組合。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體適合于調(diào)整其中溶解的報(bào)告溶質(zhì)(例如海藻糖(trehelose))的13C-NMR線寬。NMR線寬效應(yīng)是在測量例如在具體工作實(shí)施例中如本文所述的測試流體中的溶質(zhì)“翻滾”的間接方法中。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的特征為以下至少一種 在-0. 14V、-0. 47V、-1. 02V和-1. 36V的任何一個(gè)下的明顯不同的方波伏安峰差異；在-0. 9 伏特的極譜峰；以及在-0. 19和-0. 3伏特不存在極譜峰，在-0. 19和-0. 3伏特的極譜峰是具體工作實(shí)施例中本文所公開的動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體所獨(dú)有的。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體適合于改變細(xì)胞膜電導(dǎo)率(例如在本文公開的膜片鉗研究中測量的全細(xì)胞電導(dǎo)的電壓依賴性貢獻(xiàn))。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少M(fèi)ppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體具有小于15ppm、小于IOppm的大氣壓下的溶解氧或大致環(huán)境氧水平。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是氧合的，其中在該流體中的氧的存在量在大約8ppm與大約15ppm之間，并且在這種情況中有時(shí)在本文稱作“Solas”。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子(例如，通過分子氧穩(wěn)定) 和動(dòng)電學(xué)改變和/或荷電的氧物種的至少一種，并且其中在某些實(shí)施方案中所述溶劑化電子和/或動(dòng)電學(xué)改變或帶電的氧物種的存在量為至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、 至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體適合于改變細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)或功能(例如改變膜相關(guān)蛋白的構(gòu)象、配體結(jié)合活性或催化活性)至足以提供對細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)整， 其中在具體的方面，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種受體、跨膜受體 (例如G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR) ,TSLP受體、β 2腎上腺素能受體、緩激肽受體等)、離子通道蛋白、細(xì)胞內(nèi)附著蛋白、細(xì)胞粘附蛋白和整聯(lián)蛋白。在某些方面，發(fā)揮效應(yīng)的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白的α亞基(例如G α s、G α ρ G α q禾口 G α 12)相互作用。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體適合于調(diào)整細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括鈣依賴性細(xì)胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)的調(diào)整(例如磷脂酶C活性的調(diào)整或腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性的調(diào)整)。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的特征為本文所述的各種生物活性(例如細(xì)胞因子、受體、酶和其他蛋白質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑的調(diào)控)。在具體的方面，如本文中所示，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體表現(xiàn)出與沙丁胺醇，和與布地奈德的協(xié)同作用。在具體的方面，如本文工作實(shí)施例所示，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體降低支氣管上皮細(xì)胞(BEC)中的DEP誘導(dǎo)的TSLP受體的表達(dá)。在具體的方面，如本文工作實(shí)施例所示，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體抑制在支氣管上皮細(xì)胞(BEC)中DEP誘導(dǎo)的細(xì)胞表面結(jié)合的MMP9水平。在具體的方面，如本文中所示，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的生物效應(yīng)被白喉毒素抑制，表明β阻斷、GPCR阻斷和鈣離子阻斷影響動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的活性(例如，對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的功能的影響)。在具體的方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的物理和生物效應(yīng)(例如改變細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)或功能至足以提供對細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)整的能力)在一個(gè)封閉的容器(例如，封閉的氣密容器)中持續(xù)至少兩個(gè)月、至少三個(gè)月、至少四個(gè)月、至少五個(gè)月、至少六個(gè)月或更長的時(shí)間。因此，其他方面提供所述動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的溶液和制備動(dòng)電學(xué)改變的氧合的水性流體或溶液的方法，所述方法包括在相對運(yùn)動(dòng)的兩個(gè)間隔的表面間提供流體材料流，并且在所述兩個(gè)間隔的表面間界定混合體積，其中流動(dòng)的流體材料在混合體積內(nèi)和穿過混合體積的單次通過的滯留時(shí)間為大于0. 06秒或大于0. 1秒；和在適于將至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并動(dòng)電學(xué)改變所述流體或溶液的條件下將氧引入混合體積內(nèi)的流動(dòng)的流體材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200 毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將氧注入材料中。在具體實(shí)施方案中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。其他方面提供制備動(dòng)電學(xué)改變的氧合的水性流體或溶液的方法，所述方法包括 在兩個(gè)間隔的表面間提供流體材料流，所述兩個(gè)間隔的表面在其間界定了混合體積；在適于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內(nèi)將至少20ppm、至少 25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧擴(kuò)散到材料中的條件下將氧引入在混合體積中的流動(dòng)的材料中。在某些方面，在混合體積內(nèi)的所述流動(dòng)的材料的滯留時(shí)間為大于 0. 06秒或大于0. 1秒。在具體實(shí)施方案中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。在具體的方面中，所施用的本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體包括足以調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的量的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。在某些實(shí)施方案中，動(dòng)電學(xué)改變的流體是超氧合的(例如RNS-20、RNS-40和RNS-60，在標(biāo)準(zhǔn)鹽水中分別包含20ppm、 40ppm和60ppm的溶解氧)。在具體的實(shí)施方案中，動(dòng)電學(xué)改變的流體是非超氧合的(例如 RNS-10或Solas，包含IOppm(例如，在標(biāo)準(zhǔn)鹽水中為大約環(huán)境水平的溶解氧))。在某些方面中，在以動(dòng)電學(xué)方式產(chǎn)生所述流體時(shí)建立本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體的鹽度、無菌性、PH 等，并且通過合適的途徑施用所述無菌流體。備選地，在施用所述流體之前，對所述流體的鹽度、無菌性、PH等中的至少一種進(jìn)行適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)(例如使用無菌鹽水或合適的稀釋液)， 從而使其與給藥途徑是生理學(xué)相容的。優(yōu)選的是，用于調(diào)節(jié)所述流體的鹽度、無菌性、pH等中的至少一種的稀釋液和/或鹽水溶液和/或緩沖液組合物也是動(dòng)電學(xué)流體，或者否則也是相容的。在具體的方面中，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體包括鹽水(例如一種或多種溶解鹽；例如基于堿金屬的鹽(Li、Na、K、Rb、Cs等)，基于堿土金屬的鹽(例如Mg、Ca)等，基于過渡金屬的鹽(例如Cr、Fe、C0、Ni、Cu、ai等)，以及任何合適的陰離子/反離子成分)。具體的方面包括基于混合鹽的動(dòng)電學(xué)流體(例如Na、K、Ca、Mg等，以不同的組合和濃度)。在具體的方面中，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體包括標(biāo)準(zhǔn)鹽水(例如，大約0.9%NaCl，或者大約0. 15M NaCl)。在具體的方面中，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體包括濃度為至少0. 0002M、至少 0. 0003M、至少 0. 001M、至少 0. 005M、至少 0. 01M、至少 0. 015M、至少 0. 1M、至少 0. 15M 或
12者至少0. 2M的鹽水。在具體的方面中，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體的電導(dǎo)率為至少10 μ S/ cm、至少 40μ S/cm、至少 80μ S/cm、至少 100μ S/cm、至少 150 μ S/cm、至少 200 μ S/cm、至少 300 μ S/cm、或至少 500 μ S/cm、至少 lmS/cm、至少 5mS/cm、10mS/cm、至少 40mS/cm、至少 80mS/cm、至少 100mS/cm、至少 150mS/cm、至少 200mS/cm、至少 300mS/cm 或者至少 500mS/ cm。在具體的方面中，可以使用任何鹽來制備本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)改變的流體，只要它們可以形成本文所公開的具有生物學(xué)活性的鹽穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)(例如，鹽穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu))即可。根據(jù)具體的方面，本發(fā)明的包含電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)的流體組合物的生物學(xué)效應(yīng)可以通過改變例如上文所述的流體的離子成分和/或通過改變所述流體的氣體成分來調(diào)整(例如增加、降低、調(diào)節(jié)等)。在優(yōu)選的方面中，使用氧來制備本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體。在另外的方面中，使用氧與選自氮、氧、氬、二氧化碳、氖、氦、氪、氫和氙中的至少一種其他氣體的混合物。示例件優(yōu)詵實(shí)施方案具體方面提供了用于治療TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，包括向需要所述方法的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的動(dòng)電學(xué)改變的水性流體，所述水性流體包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的離子水性溶液，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于大約100納米的平均直徑，并且以足以治療TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)以在所述流體與活細(xì)胞相接觸時(shí)足以提供對細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整的量穩(wěn)定地配置在所述離子水性流體中。在某些方法方面中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是所述流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。在具體的實(shí)施方案中，所述流體中作為所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在的溶解氧分子的百分比是選自由以下各項(xiàng)組成的組的百分比大于0.01%、大于 0. 1%、大于1%、大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于25% ；大于30% ；大于 35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于65% ；大于70% ；大于 75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；和大于95%。在具體的方面中，全部的溶解氧基本上以所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)存在。在某些實(shí)施方案中，所述電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上具有小于選自由以下各項(xiàng)組成的組的尺寸的平均直徑90nm ；80nm ；70nm ；60nm ； 50nm ；40nm ； 30nm ； 20nm ； IOnm ；禾口小于 5nm。在具體的方法方面中，所述離子水性溶液包括鹽水溶液。在某些方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是超氧合的。在具體的方法方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子的形式。在某些方面中，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體的改變包括所述流體暴露于流體動(dòng)力誘導(dǎo)的局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)。在某些實(shí)施方案中，暴露于所述局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖中的至少一種。在具體的方面中，所述流體暴露于流體動(dòng)力誘導(dǎo)的局部動(dòng)電學(xué)效應(yīng)包括所述流體暴露于用以產(chǎn)生所述流體的裝置的誘導(dǎo)動(dòng)電學(xué)效應(yīng)的結(jié)構(gòu)部件。在具體的方面中，TSLP介導(dǎo)的或TSUR介導(dǎo)的疾病或病癥包括免疫系統(tǒng)的疾病或紊亂，包括但不限于變應(yīng)性炎癥。在具體方面，變應(yīng)性炎癥包括變應(yīng)性氣道炎癥、DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、哮喘、阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、IgE介導(dǎo)的紊亂、鼻結(jié)膜炎和食物變態(tài)反應(yīng)中的至少一種。在某些實(shí)施方案中，TSLP介導(dǎo)的或TSLPR 介導(dǎo)的疾病或病癥包括炎性關(guān)節(jié)炎，例如包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病中的至少一種。在某些方面中，所述的方法進(jìn)一步包括聯(lián)合療法，其中至少一種另外的治療劑被施用于患者。在具體的實(shí)施方案中，所述至少一種另外的治療劑選自由下列各項(xiàng)組成的組 短效β 2_激動(dòng)劑、長效β 2-激動(dòng)劑、抗膽堿能藥、皮質(zhì)類固醇、全身性皮質(zhì)類固醇、肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑、白三烯調(diào)節(jié)劑、甲基黃嘌呤及其組合。在某些方面，所述至少一種另外的治療劑選自由下列各項(xiàng)組成的組由β 2_激動(dòng)劑組成的支氣管擴(kuò)張劑，所述β 2_激動(dòng)劑包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特羅、阿福特羅、福莫特羅、沙美特羅；和抗膽堿能藥，諸如異丙托銨和噻托銨；皮質(zhì)類固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲潑尼龍、潑尼松龍、潑尼松；白三烯調(diào)節(jié)劑，包括孟魯司特、扎魯司特和齊留通；肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑，包括色甘酸和奈多羅米；甲基黃嘌呤，包括茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氫化可的松；免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環(huán)孢霉素；硫唑嘌呤；嗎替麥考酚酯；以及它們的組合。在具體方面，所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSLPR拮抗劑，并且在特定實(shí)施方案中，所述TSLP和/或TSLPR拮抗劑選自由下列各項(xiàng)組成的組對TSLP與TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP 受體融合蛋白，包括TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼超過一個(gè)受體鏈的組分的多肽。在具體方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)或功能中的至少一種，所述改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)或功能包括改變膜相關(guān)蛋白或構(gòu)成成分的構(gòu)象、配體結(jié)合活性和催化活性中的至少一種。在某些方面，所述膜相關(guān)蛋白包括選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細(xì)胞內(nèi)附著蛋白、細(xì)胞黏附蛋白、整聯(lián)蛋白等。在某些實(shí)施方案中，所述跨膜受體包括G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。在具體方面，所述G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用，例如，其中所述G蛋白α亞基包括選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種G α s、G α ρ G α ,和G α 12，并且在某些實(shí)施方案中，所述至少一種G蛋白α亞基是Ga^。在具體方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整全細(xì)胞電導(dǎo)，例如其中調(diào)整全細(xì)胞電導(dǎo)包括調(diào)整所述全細(xì)胞電導(dǎo)的線性和非線性電壓依賴性貢獻(xiàn)中的至少一種。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整鈣依賴性細(xì)胞信息傳遞途徑或系統(tǒng)。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整磷脂酶C活性性。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性。在某些方法方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種包括調(diào)整與選自由以下各項(xiàng)組成的組的至少一種病癥或癥狀有關(guān)的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)免疫系統(tǒng)的疾病或紊亂、變應(yīng)性炎癥、變應(yīng)性氣道炎癥、DC介導(dǎo)的炎性Th2反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性濕疹、哮喘、阻塞性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、IgE介導(dǎo)的紊亂、鼻結(jié)膜炎、食物變態(tài)反應(yīng)、炎性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病。具體方法方面包括將所述動(dòng)電學(xué)流體施用于細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)樱⑶疫€包括調(diào)整其中的細(xì)胞間連接。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏附區(qū)(zona adherin)和橋粒(desmasome)組成的組的至少一種。在具體的方面中，所述細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)或?qū)影ㄟx自由肺上皮細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞組成的組的至少一種。在某些方法方面，動(dòng)電學(xué)改變的水性流體是氧合的，并且其中所述流體中的氧在大氣壓下以至少％)pm、至少M(fèi)ppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少 60ppm氧的量存在。在某些方法方面，所述動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括溶劑化電子、和動(dòng)電學(xué)改性或荷電的氧物種中的至少一種，例如，其中所述溶劑化電子或者動(dòng)電學(xué)改性或荷電的氧物種的形式以至少0. Olppm、至少0. lppm、至少0. 5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少 7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。在某些方面，所述動(dòng)電學(xué)改變的水性流體包括由分子氧穩(wěn)定的溶劑化電子的形式。在某些方面，調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的能力在封閉的氣密容器中持續(xù)至少2個(gè)月、至少3個(gè)月、至少4個(gè)月、至少5個(gè)月、至少6個(gè)月、至少12個(gè)月或更長的時(shí)間。在某些方面，在所述動(dòng)電學(xué)改變的流體的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)中存在的氧的量為在大氣壓下至少％)pm、至少M(fèi)ppm、至少20ppm、至少^ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或者至少60ppm氧。在具體方面，治療包括通過局部、吸入、鼻內(nèi)和靜脈內(nèi)中的至少一種方式施用。示例件的相關(guān)分子相互作用傳統(tǒng)上，量子特性被認(rèn)為是屬于小于10,米的基本粒子，而我們?nèi)粘Ｉ畹暮暧^世界則被稱為是經(jīng)典的，因?yàn)樗裱ｎD運(yùn)動(dòng)定律。近來，分子已被描述為形成尺寸隨著稀釋而增加的簇。測得這些簇的直徑為若干微米，并且已經(jīng)報(bào)道尺寸隨著稀釋呈非線性增加。推測測量為直徑為100納米的量子相干域在純水中產(chǎn)生，并且相干域中的水分子的集合振動(dòng)可最終成為鎖定為電磁場波動(dòng)的相， 提供水中的穩(wěn)定振蕩，以激發(fā)長久的相干震蕩的形式提供“記憶”形式，該長久的相干震蕩對于改變水的集合結(jié)構(gòu)的水中溶解物質(zhì)具有特異性，這可依次地確定發(fā)生的特異性相干震蕩。當(dāng)這些震蕩由磁場相耦合變?yōu)榉€(wěn)定時(shí)，稀釋時(shí)水仍可傳播“種子”相干震蕩。當(dāng)分子的簇尺寸增加時(shí)，其電磁信號相應(yīng)擴(kuò)大，增強(qiáng)由水傳播的相干震蕩。盡管溶解分子的簇尺寸和水的詳細(xì)微觀結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，但是相干震蕩的特異性可能存在。一種考慮水的性質(zhì)變化的模型基于對結(jié)晶的考慮。在申請人之前的專利申請WO 2009/0557 中顯示了形成納米級籠8700的簡化的質(zhì)子化水簇。質(zhì)子化水簇通常呈現(xiàn)H+(H2O)n形式。一些質(zhì)子化水簇是天然存在的，如在電離層中。不受任何具體理論的束縛，并且根據(jù)具體方面，其他類型的水簇或結(jié)構(gòu)(簇、納米籠等)是可行的，包括包含傳遞給本發(fā)明的輸出材料的氧和穩(wěn)定化電子的結(jié)構(gòu)。氧原子可以被捕獲到所得結(jié)構(gòu)中。半結(jié)合的納米籠的化學(xué)性質(zhì)容許氧和/或穩(wěn)定化電子在延長的時(shí)間段內(nèi)保持溶解。諸如醫(yī)藥化合物的其他原子或分子可以被籠蔽以用于持續(xù)遞送的目的。 溶液材料與溶解化合物的特定化學(xué)性質(zhì)取決于那些材料的相互作用。之前通過實(shí)驗(yàn)已經(jīng)顯示了該混合裝置所處理的流體，所述流體表現(xiàn)出不同的結(jié)構(gòu)特征，這與在簇結(jié)構(gòu)的情況下對流體的分析是一致的。參見，例如，WO 2009/055729。電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)(例如電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu))如之前申請人的WO 2009/055729中所述，“雙層效應(yīng)” “滯留時(shí)間” “輸注速率”和“泡尺寸測量”，動(dòng)電學(xué)混合裝置采用復(fù)雜的動(dòng)力學(xué)湍流，在幾毫秒內(nèi)產(chǎn)生第一材料和第二材料的獨(dú)特非線性流體動(dòng)力學(xué)相互作用，提供與大量表面積有效接觸(包括裝置的表面積和小于IOOnm的特別小氣泡的表面積)的復(fù)雜混合，從而提供本文所公開的新型動(dòng)電學(xué)效應(yīng)。此外，使用包括絕緣的轉(zhuǎn)子和定子部件的專門設(shè)計(jì)的混合裝置證明了部件局部化的動(dòng)電學(xué)效應(yīng)(電壓/電流)。如本領(lǐng)域已公認(rèn)的，已知電荷再分配和/或溶劑化電子在水溶液中高度不穩(wěn)定。 根據(jù)具體的方面，申請人的動(dòng)電學(xué)效應(yīng)(例如電荷再分配，包括，具體方面中的溶劑化電子)在輸出材料(例如，鹽水溶液，離子溶液)中驚人地穩(wěn)定。事實(shí)上，如本文所述，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體(例如RNS-60或Solas)的性質(zhì)和生物活性的穩(wěn)定性可在氣密性容器中保持?jǐn)?shù)月，這說明溶解的氣體(例如氧)的參與有助于產(chǎn)生和/或保持和/或介導(dǎo)本發(fā)明的溶液的性質(zhì)和活性。顯著地，電荷再分配和/或溶劑化電子可以穩(wěn)定地配置在本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)離子水性流體中，其量足以在流體與活細(xì)胞(例如，哺乳動(dòng)物細(xì)胞)接觸時(shí)提供對細(xì)胞膜電位或細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的調(diào)整(例如，參見WO 2009/0557 的細(xì)胞膜片鉗工作實(shí)施例23和如本文所公開的)。 如本文“分子相互作用，，部分所描述的，為了解釋本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體(例如，動(dòng)電學(xué)鹽水溶液)的穩(wěn)定性和生物相容性，申請人已提出水分子和溶解于水中的物質(zhì)(例如氧)分子之間的相互作用改變水的集合結(jié)構(gòu)并提供納米籠簇，包括包含傳遞給本發(fā)明的輸出材料的氧和/或穩(wěn)定化電子的納米結(jié)構(gòu)。不受機(jī)制的約束，在具體的方面納米結(jié)構(gòu)的配置如下含有(至少用于形成和/或穩(wěn)定性和/或生物活性)溶解的氣體(例如氧)；在與細(xì)胞膜或其相關(guān)構(gòu)成成分接觸時(shí)，這樣的配置使動(dòng)電學(xué)流體(例如RNS-60或Solas鹽水流體)能夠調(diào)整(例如傳遞或接受)電荷和/或電荷效應(yīng)；和在具體的方面，以生物學(xué)相關(guān)形式提供用于穩(wěn)定的(例如，攜帶、容納、捕獲)溶劑化電子。根據(jù)具體的方面以及由本發(fā)明所支持，在離子或鹽水(例如標(biāo)準(zhǔn)鹽水，NaCl)溶液中，本發(fā)明的納米結(jié)構(gòu)包括電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)(例如平均直徑小于lOOnm)，該納米結(jié)構(gòu)可以包含電荷穩(wěn)定的水合外層中的至少一種溶解的氣體分子(例如氧)。根據(jù)其他的方面， 電荷穩(wěn)定的水合外層可包括容納有至少一種溶解的氣體分子(例如，氧)的籠或空隙。根據(jù)進(jìn)一步的方面，由于提供合適的電荷穩(wěn)定的水合外層，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可另外地包含溶劑化電子(例如穩(wěn)定的溶劑化電子)。不受機(jī)理和具體理論的限制，本發(fā)明的優(yōu)先權(quán)日之后，已經(jīng)提出了與環(huán)境氣體(大氣)平衡的水性液體中被離子穩(wěn)定的電荷穩(wěn)定的微泡(Bimkin等，Journal of Experimental and Theoretical Physics，104 :486_498，2007 ；通過引用并入本文)。根據(jù)本發(fā)明的具體方面，申請人的新的動(dòng)電學(xué)流體包括電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的新的生物活性形式，并可進(jìn)一步包括這種結(jié)構(gòu)的新陣列(array)、簇或締合。根據(jù)電荷穩(wěn)定的微泡模型，水結(jié)構(gòu)的短程分子序態(tài)被氣體分子(例如，開始與非吸附離子復(fù)合的溶解的氣體分子提供短程序態(tài)缺陷)的存在所破壞，提供離子液滴的凝聚，其中，所述缺陷被水分子的第一和第二配位層包圍，所述水分子的第一和第二配位層可選地被配位層中占據(jù)六個(gè)和12個(gè)空缺位的吸附性離子(例如獲取Na+離子屏蔽層以形成電雙層)和非吸附性離子(例如占據(jù)第二配位層Cl-離子)填充。在不飽和離子溶液中 (例如不飽和鹽水溶液)，這種水合的“核”保持穩(wěn)定直至第一和第二層分別被六個(gè)吸附性
16離子和五個(gè)吸附性離子填充，然后，經(jīng)過庫倫擴(kuò)增產(chǎn)生含氣體分子的內(nèi)部空隙，其中吸附性離子(例如，Na+離子)被吸附至形成的空隙的表面，同時(shí)非吸附性離子(或一些部分)被分散進(jìn)入溶液(同上Bimkin等)。在這個(gè)模型中，納米結(jié)構(gòu)的空隙防止吸附至其表面的離子 (例如，Na+離子)之間的庫倫排斥所導(dǎo)致的塌陷。含空隙的納米結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性被假設(shè)為由于具有類似電荷的溶解離子選擇性吸附在空隙/氣泡表面上和在溶解氣體和氣泡內(nèi)的氣體之間的擴(kuò)散平衡所引起的，其中得到的電雙層所施加的朝向外部的負(fù)性靜電壓力為表面張力提供穩(wěn)定的代償，并且氣泡內(nèi)部的氣體壓力與環(huán)境壓力平衡。根據(jù)這個(gè)模型，這些微泡的形成需要離子組分，在特定方面，粒子之間碰撞介導(dǎo)的締合可提供更大序態(tài)的簇(陣列) 的形成(同前)。電荷穩(wěn)定的微泡模型說明粒子可以是氣體微泡，但是僅考慮離子溶液中形成同時(shí)與環(huán)境空氣平衡的這些結(jié)構(gòu)，其不能表征并且不能表示是否氧能夠形成這些結(jié)構(gòu)，以及同樣不表示是否溶劑化電子可通過這些結(jié)構(gòu)締合和/或穩(wěn)定。根據(jù)具體的方面，本發(fā)明的包括電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的動(dòng)電學(xué)流體是新穎的，并且根據(jù)微泡模型從根本上不同于假設(shè)的非動(dòng)電學(xué)的大氣電荷穩(wěn)定的微泡結(jié)構(gòu)。顯著地，這個(gè)結(jié)論是無法回避的，至少部分來自下面的事實(shí)，即對照鹽水溶液不具有本發(fā)明公開的生物學(xué)性質(zhì)，而申請人的電荷穩(wěn)定的納米提供新的，生物活性形式的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明的具體的方面，申請人的新的動(dòng)電學(xué)裝置和方法提供新的動(dòng)電學(xué)改變的流體，所述流體包含非常大量的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)，該量超過了在與空氣平衡的離子流體中可能自發(fā)或不自發(fā)存在的量，或在任何非動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的流體中的量。在具體的方面， 電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)包含電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)。在另外的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)是所有或基本上所有電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)是動(dòng)電學(xué)流體中主要的電荷穩(wěn)定的含氣體納米結(jié)構(gòu)物種。根據(jù)又進(jìn)一步的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可包括或容納溶劑化電子，從而提供新的穩(wěn)定的溶劑化電子載體。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)提供新型電極(或倒置電極)，這與常規(guī)的具有單一有機(jī)配位陽離子的溶質(zhì)電極相反，其具有多個(gè)繞空隙或含氧原子的空隙穩(wěn)定排列的陽離子，其中，所排列的鈉離子可與水合外層配位，而不是與有機(jī)分子配位。根據(jù)具體的方面，溶劑化電子可由水分子的水合外層來容納，或優(yōu)選地容納在分布在所有陽離子上的納米結(jié)構(gòu)空隙中。在特定的方面，本發(fā)明的納米結(jié)構(gòu)提供溶液中的新型“超級電極”結(jié)構(gòu)，其不僅通過提供溶劑化電子在多個(gè)陣列的鈉陽離子上的分布/穩(wěn)定，還提供溶劑化電子與空隙中捕獲的(多個(gè))氧分子的締合或部分締合一溶劑化電子分布在鈉原子和至少一個(gè)氧原子的陣列上。根據(jù)具體的方面，因此，作為本發(fā)明公開的與本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體締合的“溶劑化電子”在包括被水分子直接水合的傳統(tǒng)模型中可能不被溶劑化?？蛇x地，與干燥的電極鹽類相同之處很少，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體中的溶劑化電子可分布在多個(gè)電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)上以提供“格點(diǎn)粘合劑(lattice glue)”以穩(wěn)定水性溶液中的較高序態(tài)陣列。在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)能夠與細(xì)胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，容納了溶劑化電子的本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)能夠與細(xì)胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)作為電荷和/或電荷效應(yīng)供體(遞送)和/或作為電荷和/電荷效應(yīng)受體與細(xì)胞膜或其組分或蛋白質(zhì)等發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，容納了溶劑化電子的本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)作為電荷和/或電荷效應(yīng)供體和/或作為電荷和/或電荷效應(yīng)受體與細(xì)胞膜發(fā)生相互作用以介導(dǎo)生物活性。在具體的方面，本發(fā)明的電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)與所觀察到的本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體的穩(wěn)定性和生物性質(zhì)一致且是所觀察到的本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體的穩(wěn)定性和生物性質(zhì)的原因并進(jìn)一步提供新的電極(或倒置電極(inverted electride))，所述電極提供水性離子溶液(例如鹽水溶液，NaCl等)中穩(wěn)定的溶劑化電子。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本上包括，采取下面的形式或可產(chǎn)生， 電荷穩(wěn)定的含氧納米氣泡。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧簇提供形成電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)的相對較大的陣列和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米氣泡或其陣列。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)可提供在與疏水表面接觸之后形成疏水納米氣泡。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本含有至少一個(gè)氧分子。在特定的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)基本含有至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少10至少 15、至少20、至少50、至少100或更多個(gè)氧分子。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)含有或產(chǎn)生約20nmX 1. 5nm的納米氣泡(例如疏水納米氣泡)，含有約12個(gè)氧分子(例如基于氧分子的尺寸(約0. 3nmX0. 4nm)，假設(shè)為理想氣體并應(yīng)用η = PV/RT，其中P = Iatm, R = O. 082 □ 057 □ 1. atm/mol. K ;T = 295Κ ；V = pr2h = 4. 7xl(T22L，其中 r = 10xl(T9m，h =1. 5x10、，且 η = 1. 95xl(T22mol)。在特定的方面，流體中存在的氧分子的百分比是選自由下列各項(xiàng)組成的組的百分比量大于0. ；大于；大于2% ；大于5% ；大于10% ；大于15% ；大于20% ；大于 25% ；大于30% ；大于35% ；大于40% ；大于45% ；大于50% ；大于55% ；大于60% ；大于 65% ；大于70% ；大于75% ；大于80% ；大于85% ；大于90% ；且大于95%，所述氧分子處于離子水性流體中的具有電荷穩(wěn)定的配置的所述納米結(jié)構(gòu)或其陣列中。優(yōu)選地，此百分比大于約5%，大于約10%，大于約15%，或大于約20%。在另外的方面，在離子水性流體中具有電荷穩(wěn)定的構(gòu)造的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)或其陣列的大體尺寸選自由下列各項(xiàng)組成的組小于IOOnm ；小于90nm ；小于80nm ；小于70nm ；小于60nm ；小于50nm ；小于40nm ；小于30nm ；小于20nm ；小于IOnm ；小于5nm ；小于4nm ；小于3nm ；小于2nm ；禾口小于Inm0優(yōu)選地,這個(gè)尺寸小于約50nm，小于約40nm，小于約30nm，小于約20nm或小于約10nm。在特定的方面，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體包含溶劑化電子。在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體包含電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)，和/或其陣列，其包括下列中的至少一種一種或多種溶劑化電子；和獨(dú)特的電荷分布(極性、對稱、非對稱電荷分布)。在具體的方面，電荷穩(wěn)定的納米結(jié)構(gòu)和/或電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)和/或其陣列具有順磁性。相反，相對于本發(fā)明的動(dòng)電學(xué)流體，對照壓力罐氧合流體(非動(dòng)電學(xué)流體)等不含有能夠調(diào)整細(xì)胞膜電位和細(xì)胞膜電導(dǎo)率中的至少一種的這種動(dòng)電學(xué)產(chǎn)生的電荷穩(wěn)定的生物學(xué)活性納米結(jié)構(gòu)和/或生物學(xué)活性的電荷穩(wěn)定的含氧納米結(jié)構(gòu)和/或其陣列。
用于制備富含氣體的流體的系統(tǒng)本發(fā)明公開的系統(tǒng)和方法容許以高濃度穩(wěn)定地富集氣體(例如，氧)而具有最小限度的被動(dòng)損失。這種系統(tǒng)和方法可以有效地用于將很多種氣體以較高的百分比富集到很多種流體中。僅舉例來說，使用公開的系統(tǒng)和/或方法，在室溫下通常具有約 2-3ppm(百萬分率)的溶解氧的去離子水可以達(dá)成如下范圍內(nèi)的溶解氧水平至少約5ppm、 至少約lOppm、至少約15ppm、至少約20ppm、至少約25ppm、至少約30ppm、至少約35ppm、至少約40ppm、至少約45ppm、至少約50ppm、至少約55ppm、至少約60ppm、至少約65ppm、至少約70ppm、至少約75ppm、至少約80ppm、至少約85ppm、至少約90ppm、至少約95ppm、至少約lOOppm、或更高或在它們之間的任何值。根據(jù)具體的示例性實(shí)施方案，可以產(chǎn)生具有約 30-60ppm溶解氧水平的富含氧的水。表1說明了在用富含氧的鹽水溶液(表1)處理的愈合傷口和在本發(fā)明的富含氣體的富含氧的鹽水溶液的樣品中進(jìn)行的各種分壓測量。表1
組織氧測量探針Z082BO在空氣中171 mmHg23 0C列分壓(mmHg)Bl32-36B2169-200B320-180*B440-60*傷口深度最小，大多數(shù)>150，偶爾20 sTSLP和TSLP介導(dǎo)的病癥TSLP和TSUR激動(dòng)劑/拮抗劑對正常由天然存在的物質(zhì)刺激的細(xì)胞受體具有親和性并且刺激該細(xì)胞受體的生理活性、從而引發(fā)生化反應(yīng)的藥劑。TSLP受體激動(dòng)劑對TSLP 受體具有親和性并刺激通過TSLP與其受體的結(jié)合而誘導(dǎo)的活性。例如，TSLP/TSLP受體激動(dòng)劑是結(jié)合TSLP受體并誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的分子。相反，“拮抗劑”是抑制正常由天然存在的物質(zhì)刺激的細(xì)胞受體的活性的藥劑。因此，TSLP/TSLP受體拮抗劑結(jié)合TSLP或TSLP 受體并抑制TSLP與TSLP受體的結(jié)合和/或抑制正常通過TSLP與其受體的結(jié)合而誘導(dǎo)的活性。例如，TSLP/TSLP受體拮抗劑可以結(jié)合TSLP或TSLP受體并例如，通過阻斷TSLP與 TSLP受體的結(jié)合而減少或阻止結(jié)合。可選地，TSLP/TSLP受體拮抗劑可以結(jié)合TSLP受體并減少或阻止正常通過TSLP與其受體的結(jié)合而誘導(dǎo)的下游信號傳導(dǎo)。激動(dòng)劑和拮抗劑可以包括多種類別的分子，包括多肽，例如配體樣多肽、抗體及其片段或子序列。激動(dòng)劑和拮抗劑還可以包括融合多肽、抗體、肽(例如長度小于約20個(gè)氨基酸的肽)和小分子。示例性拮抗劑包括對TSLP和TSLP受體特異的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，例如TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼多于一個(gè)受體鏈的組分的多肽，從而模擬生理受體異二聚體或更高級的寡聚體。如果受體包括超過一個(gè)多肽鏈，則可以利用單鏈融合?？贵w包括至少一個(gè)輕鏈或重鏈免疫球蛋白可變區(qū)的多肽配體，其特異性識別并結(jié)合表位(例如，抗原，例如TSLP或其片段，或TSLP受體或其片段)。這包括完整的免疫球蛋白和本領(lǐng)域公知的它們的變體和部分，例如Fab'片段、F(ab)' 2片段、單鏈Fv蛋白 (“scFv”)和二硫鍵穩(wěn)定化的Fv蛋白(“dsFv”)。scFv蛋白是其中免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)和免疫球蛋白重鏈可變區(qū)通過接頭結(jié)合的融合蛋白，而在dsFv中，鏈被突變而引入二硫鍵以穩(wěn)定化鏈的締合。該術(shù)語還包括遺傳改造形式，例如嵌合抗體(例如人源化鼠抗體)、異源綴合抗體(heteroconjugate antibodies)(例如雙特異性抗體)。還參見Pierce Catalog and Handbook,1994-1995(Pierce Chemical Co. ,Rockford,111. ) ；Kuby,J. , Immunology, 3rd Ed. ,W. H. Freeman & Co.，New York，1997。通常，免疫球蛋白具有重鏈和輕鏈。每個(gè)重鏈和輕鏈含有恒定區(qū)和可變區(qū)(該區(qū)也稱為“結(jié)構(gòu)域”)。組合時(shí)，重鏈和輕鏈可變區(qū)特異性結(jié)合抗原。輕鏈和重鏈可變區(qū)含有被三個(gè)高變區(qū)間隔的“構(gòu)架”區(qū)，高變區(qū)還稱為“互補(bǔ)決定區(qū)，，或“CDR”。構(gòu)架區(qū)和⑶R的范圍已經(jīng)被確定(參見，Kabat等，Sequences of Proteins oflmmunological Interest (免疫學(xué)感興趣的蛋白的序列)，美國衛(wèi)生與公共服務(wù)部，1991， 其在此通過引用并入)。Kabat數(shù)據(jù)庫目前維持在線。不同輕鏈或重鏈的構(gòu)架區(qū)序列在物種內(nèi)相對保守。抗體的構(gòu)架區(qū)是由組成的輕鏈和重鏈構(gòu)成的組合構(gòu)架區(qū)，用于在三維空間中定位和排列CDR?？贵w包括單克隆抗體、人源化抗體等。TSLP拮抗劑包括小分子拮抗劑、TSLP抗體、TSLP受體抗體和TSLP受體融合蛋白， 例如TSLPR-免疫球蛋白Fc分子或編碼多于一個(gè)受體鏈的組分的多肽，從而模擬生理受體異二聚體或更高級的寡聚體等。還顯示TSLP直接結(jié)合I型細(xì)胞因子受體超家族成員(其還已知為促紅細(xì)胞生成素受體超家族成員)TSLPR。已經(jīng)克隆了 TSLPR。TSLP的功能性高親和性體已經(jīng)被證明包括兩個(gè)多肽，TSUR和IL-7受體α鏈。因此，TSLP和IL-7兩者共享 IL-7Ra作為其受體組分。然而，這些受體明顯不同，其區(qū)別在于TSLP受體還含有TSLPR， 而IL-7受體還含有常見的細(xì)胞因子受體γ鏈，其是各種細(xì)胞因子受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)組分。 TSLPR(和該受體鏈的Fc融合體)記載在例如公開的美國專利申請?zhí)?002/0160949中，其在此通過應(yīng)用并入。TSLP多肽的抗體是本領(lǐng)域公知的。此外，抗TSLPR抗體可通過商購獲得(R&D Systems,Minneapolis,Minn. , cat. no. MAB981 ；DNAX Research,Inc. , Palo Alto,Calif.)。 還通過用特定表位免疫而制備針對TSLP受體或TSLP的抗體，所述表位例如通過Welling plot of Vector NTI. RTM. Suite (Informax, Inc, Bethesda, Md.)確定的抗原性增加的區(qū)。 TSLP受體序列和人TSLP受體中抗原性增加的區(qū)公開在美國專利
發(fā)明者安東尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸賓, 理查德·L·華森 申請人:利發(fā)利希奧公司