專利名稱：：提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種提高試劑盒穩(wěn)定性的方法，尤其涉及一種提高含酶的生化試劑盒穩(wěn)定性的方法。
背景技術(shù)：
：穩(wěn)定性是生化試劑盒必須具有的基本屬性，是確保產(chǎn)品在使用過程中安全有效的重要指標(biāo)。當(dāng)前大部分的生化試劑盒幾乎都應(yīng)用了酶試劑，而酶屬于生物大分子，大多數(shù)的酶都是蛋白質(zhì)，酶的高級結(jié)構(gòu)對環(huán)境十分敏感，容易受各種因素影響，穩(wěn)定性較差，即使在最適反應(yīng)條件下，隨著反應(yīng)時間的延長，酶分子也會逐漸失活。因此，酶的穩(wěn)定性直接影響到含酶試劑盒的穩(wěn)定性。酶的穩(wěn)定性(enzymestability)是指酶分子抵抗各種不利因素影響，維持一定空間結(jié)構(gòu)，保持生物活性相對穩(wěn)定的能力。生物催化功能是酶最重要的特征，也是我們研究和應(yīng)用酶的前提。酶分子維持穩(wěn)定的生物活性，首先要求結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，特別是高級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。在細(xì)胞內(nèi)，酶分子受到內(nèi)膜系統(tǒng)保護(hù)，而且處于還原性環(huán)境，不易被氧化失活。而試劑盒保存的環(huán)境條件比細(xì)胞內(nèi)環(huán)境惡劣很多，酶不穩(wěn)定的缺點顯得尤為突出。在臨床生化含酶試劑盒的生產(chǎn)、提取、精制加工、保存、運(yùn)輸和使用過程中，其中的酶分子都將受到各種不利因素的影響，其高級結(jié)構(gòu)和生物功能也將發(fā)生改變，嚴(yán)重情況下發(fā)生酶蛋白變性、酶降解，酶活力銳減或完全喪失，甚至可能產(chǎn)生毒害。因此，酶的穩(wěn)定性關(guān)系到含酶試劑盒在臨床應(yīng)用中的成本和效果，酶的穩(wěn)定性不足將大大降低含酶試劑盒在臨床使用中的應(yīng)用范圍。因此，改善和提高臨床生化含酶試劑盒中酶的穩(wěn)定性對試劑盒本身的穩(wěn)定性具有重要意義。，當(dāng)前，改善和穩(wěn)定酶分子的方法主要通過兩大途徑來實現(xiàn)。一是改造酶分子，即通過破譯高穩(wěn)定性酶分子的特殊結(jié)構(gòu)規(guī)律，就可指導(dǎo)我們利用蛋白質(zhì)工程或化學(xué)修飾手段設(shè)計并獲得所需的高穩(wěn)定性酶。二是通過優(yōu)化微環(huán)境，改良酶的作用體系，改善和提高酶的穩(wěn)定性。酶分子改造又包括蛋白質(zhì)工程、化學(xué)修飾這兩種手段。蛋白質(zhì)工程(proteinengineering)是綜合了分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、計算生物學(xué)等的一門交叉學(xué)科，它以蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系為基礎(chǔ)，按照人們的需要，進(jìn)行計算機(jī)輔助分子設(shè)計，采用分子生物學(xué)新技術(shù)來改造天然蛋白質(zhì)，并創(chuàng)造出性能更為優(yōu)良的新蛋白質(zhì)分子。目前，提高酶分子穩(wěn)定性是蛋白質(zhì)工程最活躍、效果最顯著的領(lǐng)域之一，用蛋白質(zhì)工程方法改造酶分子，可以從根本上塑造出結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定的新分子，但經(jīng)過改造后的酶分子一般只對一種不利因素的穩(wěn)定性增加，例如對高溫、氧化劑、變性劑或酸堿中的某一條件具有抗性，而對其它因素的穩(wěn)定性不足，且穩(wěn)定性增加的程度有限?；瘜W(xué)修飾法是通過化學(xué)試劑特異性修飾酶分子的某個或某類氨基酸，從而穩(wěn)定蛋白質(zhì)的構(gòu)象，提高其穩(wěn)定性。在天然酶分子上接一些化學(xué)基團(tuán)，可望得到多種多樣的修飾酶，只要選擇合適的修飾劑，利用化學(xué)修飾法可快速、廉價地提高酶的穩(wěn)定性，甚至可合成新的酶種。酶分子可離解的基團(tuán)如氨基(-NH2)、羧基(-COOH)、羥基(-OH)、巰基(-SH)、咪唑基等都可進(jìn)行修飾。然而，化學(xué)修飾法也存在一些問題，例如可能導(dǎo)致酶的生物活性降低，某些耦聯(lián)物在不同環(huán)境條件下穩(wěn)定性可能會有較大差異，另外某些有害化學(xué)修飾劑的使用還可能影響到含酶試劑盒的使用和正常效果。優(yōu)化微環(huán)境的方法又可借助以下幾種手段和措施予以實現(xiàn)(1)添加穩(wěn)定劑。添加穩(wěn)定劑來穩(wěn)定酶是一種方便、經(jīng)濟(jì)、有效的方法，對大部分的酶均有效。穩(wěn)定劑主要包括防腐劑、多羥基化合物、食用膠、鹽類、氨基酸等多種物質(zhì)。(2)采用緩沖溶液保存。pH值會影響酶的結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，過酸、過堿的微環(huán)境會強(qiáng)烈影響酶蛋白的構(gòu)象，甚至使酶變性，通過添加pH值為6~8的緩沖溶液可有效提高酶分子的穩(wěn)定性。G)添加共溶劑。糖類、多元醇、氨基酸及其衍生物、無機(jī)鹽、甘油、多聚物(如聚乙二醇)等一般稱為蛋白質(zhì)共溶劑，高濃度的共溶劑能穩(wěn)定蛋白質(zhì)，并且共溶劑混合使用時增強(qiáng)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的效果遠(yuǎn)大于單一共溶劑穩(wěn)定能力之和。(4)添加抗氧化保護(hù)劑和還原劑。一些酶分子表面含Cys，易被空氣中的氧緩慢氧化，使其電荷和形態(tài)改變而失活，加入半胱氨酸、巰基乙醇、還原谷光甘肽等巰基試劑可以防止這種破壞。由上可見，酶的穩(wěn)定性研究已取得長足進(jìn)展，所以才有今天臨床生化含酶試劑盒應(yīng)用的突飛猛進(jìn)。上述的各種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的手段和措施，都具有一定作用和效果，部分手段和措施甚至可合并使用以加強(qiáng)效果。然而即使如此，現(xiàn)有臨床生化含酶試劑盒的穩(wěn)定性依然不夠高，應(yīng)用范圍還是受到限制，穩(wěn)定性的不斷提高、使用期限的不斷延長是本領(lǐng)域技術(shù)人員一直所要追求的目標(biāo)。此外，不同種類的臨床生化含酶試劑盒，提高其穩(wěn)定性的現(xiàn)有方法可能各不相同，這也為一些臨床生化含酶試劑盒的生產(chǎn)廠家?guī)砹酥T多困難。因此，開發(fā)一種低成本、易操作且具有高兼容性和高通用性的提高生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的技術(shù)與方法，對于每一個臨床生化含酶試劑盒生產(chǎn)廠家來說都具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種工藝簡單、容易操作、成本低廉、.兼容性強(qiáng)、通用性強(qiáng)、且能有效延長含酶試劑盒使用期的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案為一種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟中，向攪拌容器的混合配料中和/或混合配料液面上方持續(xù)通入惰性氣體，使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中。上述技術(shù)方案的基本原理是當(dāng)影響酶試劑活性的其它條件一致時，則與氧的接觸是影響含酶試劑盒穩(wěn)定性的最終因素，也是最重要的因素；而上述技術(shù)方案通過在含酶試劑盒生產(chǎn)的混合攪拌過程中使用惰性氣體進(jìn)行保護(hù)，有效隔斷了混合攪拌配制試劑過程中試劑,氧的接觸，使試劑中酶被氧化的可能性進(jìn)一步降低，大大延長了成品含酶試劑盒的使用期，相比于普通的含酶試劑盒，經(jīng)上述技術(shù)方案處理后，含酶試劑盒的使用期能延長34個月，明顯提高了含酶試劑盒的穩(wěn)定性。上述技術(shù)方案打破了提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性常規(guī)方法的思路，即不使用穩(wěn)定性添加劑，也不對試劑本身的組分進(jìn)行改進(jìn)，而是通過優(yōu)化臨床生化含酶試劑盒的制備方法和制備工藝，來達(dá)到延緩臨床生化含酶試劑盒失效期的目的。在上述技術(shù)方案的同一技術(shù)構(gòu)思下，本發(fā)明還提出了另一種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于在臨床生化含酶試劑盒的制備過程中，使混合攪拌后得到的混合配料在惰性氣體的保護(hù)下進(jìn)行灌封，所述灌封的具體操作方式為先向灌裝用的空試劑瓶中充填惰性氣體，待惰性氣體充滿試劑瓶后同時向試劑瓶中灌注配制好的混合配料，直至試劑瓶封蓋。在制備臨床生化含酶試劑盒的灌封過程中用惰性氣體進(jìn)行保護(hù)與在混合攪拌過程中用惰性氣體進(jìn)行保護(hù)的方法，均具有相同的技術(shù)思路，即都是通過優(yōu)化制備工藝的氣體環(huán)境來降低含酶試劑盒制備過程中與氧的接觸機(jī)會，同時使最后的成品含酶試劑盒也處于缺氧環(huán)境中，從而延長成品含酶試劑盒的使用期，提高含酶試劑盒的穩(wěn)定性。相比于普通試劑盒，上述對灌封過程進(jìn)行惰性氣體保護(hù)后能使試劑盒的穩(wěn)定期至少延長810個月。作為對上述技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)和優(yōu)化，還可將上述兩種方法結(jié)合起來，即先6在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟中，向攪拌容器的混合配料中和/或混合配料液面上方持續(xù)通入惰性氣體，使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中；再在混合攪拌步驟完成后的灌封試劑步驟中，使所述混合配料在惰性氣體的保護(hù)下進(jìn)行灌封，灌封的具體操作方式為先向灌裝用的空試劑瓶中充填惰性氣體，待惰性氣體充滿試劑瓶后同時向試劑瓶中灌注配制好的混合配料，直至試劑瓶封蓋。通過結(jié)合上述兩種方法，能使臨床生化含酶試劑盒成品的穩(wěn)定期延長至少一年，進(jìn)一步加強(qiáng)了本發(fā)明的技術(shù)效果。在上述的各個技術(shù)方案中，向攪拌容器的混合配料中持續(xù)通入惰性氣體可以通過下述操作實現(xiàn)先在配制混合配料的攪拌容器中植入通氣管道，通氣管道的出氣口應(yīng)盡量靠近攪拌容器底部，然后在試劑的混合攪拌過程中通過該通氣管道向沒過出氣口的混合配料中持續(xù)通入惰性氣體，使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中。在上述的各個技術(shù)方案中，向攪拌容器的混合配料液面上方持續(xù)通入惰性氣體可以通過下述操作實現(xiàn)在攪拌容器的頂部靠近容器壁的位置安裝一根通氣管道，并使該通氣管道的出氣口盡量接近混合配料液面但不讓液面沒過出氣口，這樣也能夠使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中。當(dāng)配制試劑的量較多、盛裝混合配料的容器體積較大時，優(yōu)選采用第一種操作方式或合并采用兩種操作方式實現(xiàn)；當(dāng)配制試劑的量少、容器體積不大時，可采用第二種操作方式實現(xiàn)。上述的各種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法中，所述灌封試劑步驟中的惰性氣體優(yōu)選是通過針頭充填到試劑瓶中，這樣更易對灌封過程進(jìn)行操控，更便于實現(xiàn)灌封過程的自動化?？刂七M(jìn)入針頭的氣壓優(yōu)選為0.4Mpa0.6Mpa。灌封過程中以看見試劑瓶中的試劑被惰性氣體吹起小窩窩為佳，且盡量保證試劑瓶中的試劑不溢出，這樣可保證試劑盒成品合格率達(dá)到95%100%。如果氣體壓力過大，試劑瓶中的試劑易被吹出而污染灌裝設(shè)備，造成不必要的浪費(fèi)，且灌裝劑量容易出現(xiàn)較大偏差；如果氣體壓力太小，則試劑瓶內(nèi)的空氣有可能驅(qū)趕不盡，達(dá)不到最好的灌封效果。上述^I各種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法中，所述灌封試劑步驟中惰性氣體的充填流量和充填時間優(yōu)選能夠保證試劑瓶的試劑液面與瓶蓋間的空隙中全部充滿惰性氣體，以盡最大可能減少試劑瓶中氧氣的含量，因為試劑瓶液面上方空隙中的氧含量對試劑的穩(wěn)定性有很大影響。惰性氣體的充填流量和充填時間可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)試劑瓶的容量大小、氣體流量和灌封速度來確定，惰性氣體的充填流量優(yōu)選控制在2L/min10L/min。上述的各種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法中，所述惰性氣體優(yōu)選為密度比空氣大的惰性氣體(例如氬氣)，這樣更有利于惰性氣體對攪拌容器中的混合配料和試劑瓶中的試劑形成保護(hù)，也更有利于排出攪拌容器或試劑瓶中的空氣成分。上述各技術(shù)方案的混合攪拌步驟中，向混合配料中持續(xù)通入的惰性氣體優(yōu)選為氮?dú)?，因為氮?dú)獬杀鞠鄬Ρ阋?，且來源廣泛，氮?dú)馔獾臅r間建議不少于10min，通氣時的氮?dú)饬髁績?yōu)選控制在2L/min10L/min;但由于氮?dú)饷芏扰c空氣密度接近(比空氣略小)，最后在液面上方形成的惰性氣體保護(hù)層效果達(dá)不到最好，因此可在混合配料液面上方再通入一定量的氬氣以形成氬氣為主的惰性氣體保護(hù)層，因為氬氣是一種無色、無味、無毒且密度比空氣大的氣體(密度為1.7836kg/m3((TC下)，大于相同條件下的空氣密度1.2928kg/m3)，空氣中的含量為1%，同時氬氣也是一種較為經(jīng)濟(jì)的惰性氣體(但相對于氮?dú)庖再F)；氬氣通入量的多少可根據(jù)混合配料持續(xù)使用和保存時間的長短來確定，使用時間較長則通氬氣的量相對較多；氬氣流量優(yōu)選控制在2L/min10L/min。如果經(jīng)濟(jì)條件允許，也可在混合攪拌全程中持續(xù)通入氬氣，最終在液面上方形成氬氣的惰性氣體保護(hù)層。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于提供了多種延長含酶試劑盒使用期、提高含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法。本發(fā)明的方法不僅非常簡單、容易操作，而且成本低廉，效果顯著，最高能延長臨床生化含酶試劑盒使用期達(dá)一倍以上。本發(fā)明的方法在突破傳統(tǒng)的思路的基礎(chǔ)上，通過制備工藝上的優(yōu)化設(shè)計，取得了意想不到的技術(shù)效果。本發(fā)明的方法并不排斥4專統(tǒng)的提高含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，換言之，本發(fā)明的方法完全可以與現(xiàn)有的多種傳統(tǒng)方法合并使用而互不影響，兼容性強(qiáng)，可以在現(xiàn)有方法的基礎(chǔ)上取得更進(jìn)一步的技術(shù)效果。此外，本發(fā)明的方法適用于各種臨床生化含酶試劑盒，具有很強(qiáng)的通用性，生產(chǎn)不同種類含酶試劑盒的廠家均可以應(yīng)用。圖1為本發(fā)明實施例1的工藝流程圖；圖2為本發(fā)明實施例2的工藝流程圖3》本發(fā)明實施例3的工藝流程圖。具體實施例方式實施例l:提高丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒穩(wěn)定性的方法一種丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒，該診斷試劑盒的主要原料成份包括Rl試劑a.Tris緩沖液(pH=7.8)b.L-丙氨酸c.蘋果酸脫氫酶(MDH)d.乳酸脫氫酶(LDH)啟動液a.煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)b.a-酮戊二酸80mmol/L450mmol/L>600U/L〉1200U/L0.18mmol/L18mmol/L在該丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒的制備過程中，通過本發(fā)明的方法來提高該診斷試劑盒的穩(wěn)定性，具體工藝流程如圖1所示1、領(lǐng)料從倉庫中領(lǐng)取制備上述丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒所需的各種原料成份，通過傳遞窗傳入潔凈室；2、工藝設(shè)備的預(yù)處理取試劑瓶，經(jīng)洗滌、恒溫干燥箱干燥后，送入傳遞窗，用紫外燈滅菌，再傳送至分裝間，并按照質(zhì)檢要求對試劑瓶的質(zhì)量進(jìn)行質(zhì)檢；用稀鹽酸清洗量筒等稱量器具，再用純化水沖洗干凈，烘干稱量器具；所有的通氣管道、分裝管道用純化水沖洗，沖洗用的純化水為管道容積的IO倍以上，沖洗完后將管道甩干備用；3、混合攪拌(1)根據(jù)所需的試劑配制總量以及各組分濃度，計算出各組成成分的用量，然后用稱量器具進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；(2)準(zhǔn)備啟動液先用純化水清洗配料桶，向清洗后的配料桶中加入配制總量80%的純化水，再依次加入NADH和a-酮戊二酸，攪拌至完全溶解，再加入純化水補(bǔ)足至配制總量得到啟動液；G)配制R1試劑清洗配料桶，然后向配料桶中加入配制總量80。/。的Tris緩沖液，再依次加入L-丙氨酸、MDH和LDH，攪拌至完全溶解，最后再加入Tris緩沖液補(bǔ)足至總量，攪拌均勻；將氮?dú)馔夤艿啦迦肱淞贤暗撞坎⒊掷m(xù)通入氮?dú)?，氮?dú)饬髁靠刂圃?L/min，通氮?dú)?0min后再利用配料桶頂部設(shè)置的一氬氣通氣管道向混合配料的液面上方通入一定量的氬氣，氬氣流量控制在為2L/min,以使得配料桶的液面上方處于氬氣為主的惰性氣氛保護(hù)中；最后密封配料桶后進(jìn)入下一工序；4、灌封試劑將上述配制好的R1試劑和啟動液按常規(guī)的灌裝機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行灌裝，將灌裝后的試劑盒半成品裝入周轉(zhuǎn)籃，送至傳遞窗交下一工序；5、貼印、包裝打印標(biāo)簽，在灌封好的試劑瓶上貼標(biāo)，粘貼瓶簽時應(yīng)對試劑瓶的密封性進(jìn)行檢測，防止試劑瓶密封不好、試劑泄露而造成包裝污染；標(biāo)簽粘貼完后將試劑瓶傳到組裝操作臺上，將已貼標(biāo)簽的試劑瓶按標(biāo)示規(guī)格裝入包裝盒內(nèi)，檢驗合格后，用熱收縮機(jī)對試劑盒進(jìn)行覆膜，完成試劑盒的整個制備過程。在上述的整個工藝流程中，操作時應(yīng)選擇離回風(fēng)近的地方，操作過程中如發(fā)現(xiàn)通氣管道的通氣壓力不足，應(yīng)及時停止操作，并把配制好的混合配料密封好。開瓶穩(wěn)定性實驗-對本實施例1制備的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒進(jìn)行開瓶穩(wěn)定性實驗(儀器AU400)，并以未采用本發(fā)明方法的普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒開瓶作為對比，取同批號同一質(zhì)控血清(靶值86U/L)連續(xù)測定35天，其測試結(jié)果如下表l所示-表l:實施例1中試劑盒開瓶穩(wěn)定性測試對比實驗數(shù)據(jù)(單位mmol/L)序號本發(fā)明試劑盒普通試劑盒序號本發(fā)明試劑盒普通試劑盒184.385.11986.685.6285.691.62084.783.2387.384.22185.482.5483.886.02286.291.7584.682.32381.887.0686.084.42486.582.4781.985.82584.681.6887.191.42685.085.5984.583.32786.788.410.82.884.02887.984.31184.786.42989.482.71288.880.13085.581.81381.389.73184.380.31486.284.33288.278.21585.183.63387.175.31685.587.93483.672.11787.482.53586.269.71885.282.5本實施例1的診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計均值(X)=85.4U/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=1.89U/L變異系數(shù)(CV%)=2.21%普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計均值(X)-83.6U/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=4.77U/L變異系數(shù)(CV%)=5.71%以上統(tǒng)計結(jié)果顯示，本實施例1制備的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒比未用惰性氣體保護(hù)的普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒變異系數(shù)要小，穩(wěn)定性更好。10保存期觀察實驗對本實施例1制備的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒進(jìn)行保存期觀察實驗，用同一批號的本實施例診斷試劑盒，分成24瓶，每月開啟一瓶作留樣觀察，在AU400生化儀上定標(biāo)，并記錄水空白、標(biāo)準(zhǔn)點的吸光度值(S2ABS)、K因子值和試劑空白值，實驗結(jié)果如下表2所示，標(biāo)準(zhǔn)品為羅氏公司產(chǎn)品(ALT為86.00mmol/L)。表2:實施例1制備的試劑盒測定同一校準(zhǔn)品16個月內(nèi)的實驗數(shù)據(jù)列表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>根據(jù)以上表2、表3的穩(wěn)定性對比實驗數(shù)據(jù)，我們分別從水空白、S2ABS、K因子值和試劑空白值幾個方面進(jìn)行比較-1、本實施例1的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒的水空白變化量在-0.0001-0.0014之間變化，而未加惰性氣體的普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒其水空白變化量在-0.0002~-0.0058之間變化?？梢娢醇佣栊詺怏w試劑的水空白變化量較大，說明該試劑的本底值在進(jìn)行性增高，該試劑在沒有參加化學(xué)反應(yīng)前，自身已經(jīng)發(fā)生了化學(xué)變化；而本實施例1方法制備得到的試劑水空白變化量小。兩相比較，本實施例1的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通試劑盒要穩(wěn)定。2、本實施例1的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒的試劑空白變化量在1.2749~1.4236之間變化，而未加惰性氣體的普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒其試劑空白變化量在0.63721.4222之間變化?？梢娢醇佣栊詺怏w試劑的試劑空白變化量較大，說明試劑中的成份NAD.H在進(jìn)行性降低，且降低幅度大，在第14個月時已超過試劑標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍(〉0.9000);而本實施例1方法制備得到的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒試劑空白變化量小，且在試劑穩(wěn)定期末的試劑空白值還在試劑標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍內(nèi)。兩相比較，本實施例1的診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通診斷試劑盒要穩(wěn)定。'3、本實施例1的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒的S2ABS變化量在-0.0186~-0.0168之間變化，而未加惰性氣體的普通丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒其S2ABS變化量在-0.0180~-0.0062之間變化。本實施例1的診斷試劑盒K因子值[K—示準(zhǔn)液濃度(S)/(S2ABS-水空白)]變化量在-4725-5584之間變化，而未加惰性氣體的普通診斷試劑盒的K因子值在-4859~-215000之間變化?？梢?，未加惰性氣體試劑K因子值在進(jìn)行性增高，且幅享較大。而在臨床檢測過程中，K因子值應(yīng)維持在一較窄的波動范圍內(nèi)，否則在測定樣本過程中，易造成較大的誤差，誤差造成的原因也主要是因為試劑穩(wěn)定性不夠。因此兩相比較，得出的結(jié)論同樣是本實施例1的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通試劑盒穩(wěn)定。通過上述工藝制備得到的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒，其在2'C8'C條件下密閉避光Cr存可穩(wěn)定16個月，開瓶上機(jī)2'C8'C條件下避光儲存可穩(wěn)定35天，而現(xiàn)有的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶診斷試劑盒的穩(wěn)定期一般只有12個月，開瓶穩(wěn)定期一般不到20天。實施例2:提高碳酸氫根(HC03')診斷試劑盒穩(wěn)定性的方法一種可用于定量測定人血清(或血漿)中碳酸氫根含量的碳酸氫根診斷試劑盒，該碳酸氫根診斷試劑盒的主要原料成份包括Tris緩沖液50.0mmol/L磷酸烯醇丙酮酸(PEP)5.0mmol/L煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)0.5mmol/L磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(PEPC)2U/mL疊氮化鈉(NaN3)0.03g/L硫酸鎂lO.Ommol/L蘋果酸脫氫酶(MDH)1U/mL。上述診斷試劑盒的PH值范圍為7.60土0.10，在該診斷試劑盒的制備過程中，通過本發(fā)明的方法來提高該碳酸氫根診斷試劑盒的穩(wěn)定性，具體工藝流程如圖2所示1、領(lǐng)料從倉庫中領(lǐng)取制備碳酸氫根診斷試劑盒所需的各種原料，通過傳遞窗傳入潔凈室；2、n:.藝設(shè)備的預(yù)處理取試劑瓶，經(jīng)洗滌、恒溫干燥箱干燥后，送入傳遞窗，用紫外燈滅菌，再傳送至分裝間，并按照質(zhì)檢要求對試劑瓶的質(zhì)量進(jìn)行質(zhì)檢；用稀鹽酸清洗量筒等稱量器具，再用去離子純化水沖洗干凈，烘干稱量器具；所有的通氣管道、分裝管道用純化水沖洗，沖洗用的純化水為管道容積的IO倍以上，沖洗完后將管道甩干備用；3、混合攪拌根據(jù)所需的試劑配制總量以及各組分濃度，計算出各組成成分的用量，然后用稱量器具進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；將稱量后的原料倒入攪拌容器中進(jìn)行攪拌，混合均勻，配制后各原料成分的濃度滿足上述要求4、灌封試劑將上述配制好的混合配料按常規(guī)灌裝機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行灌裝，整個灌封過程是在氬氣保護(hù)下進(jìn)行，具體的操作方式為灌封前先檢査氬氣氣體儲存瓶的壓力是否正爭，如果壓力不足，說明氬氣儲量不足，需及時更換和補(bǔ)充；檢査完畢后連接好氬氣的通氣管道，本實施例設(shè)有一根從氬氣儲存瓶接至灌裝試劑瓶處的氬氣通氣管道；該通氣管道固定在注液用的分裝管道上，該通氣管道的管口與分裝管道的管口平行；然后打開供氣閥，檢査通氣管道是否漏氣，如不漏氣，及時關(guān)閉閥門，如有漏氣，及時修復(fù)；通氣管道的末端需用75%的酒精進(jìn)行消毒；然后打開氬氣瓶閥門，控制氬氣流量為5L/min，利用通氣管道先向空試劑瓶中充填氬氣，1000ml的試劑瓶12s基本能充滿，500ml的試劑瓶6s能充滿(充填時間完全可根據(jù)氣體流量和試劑瓶容積大小進(jìn)行確定)，但最13低不少于3秒，因為充填時間過短會影響本實施例試劑盒的封存效果；待試劑瓶中的空氣排出后，開啟注液闊并利用分裝管道同時向試劑瓶中分裝配制好的混合配料，分裝過程中繼續(xù)通入氬氣，直至試劑瓶封蓋；灌封過程中隨時檢查氣壓，灌封完成后及時關(guān)閉各個閥門；將灌封后的試劑盒半成品裝入周轉(zhuǎn)籃，送至傳遞窗交下一工序；5、貼印、包裝打印標(biāo)簽，在灌封好的試劑瓶上貼標(biāo)，粘貼瓶簽時應(yīng)對試劑瓶的密封性進(jìn)行檢測，防止試劑瓶密封不好、試劑泄露而造成包裝污染；標(biāo)簽粘貼完后將試劑瓶傳到組裝操作臺上，將已貼標(biāo)簽的試劑瓶按標(biāo)示規(guī)格裝入包裝盒內(nèi)，檢驗合格后，用熱收縮機(jī)對試劑盒進(jìn)行覆膜，完成試劑盒的整個制備過程。在上述的整個工藝流程中，操作時應(yīng)選擇離回風(fēng)近的地方，操作過程中如發(fā)現(xiàn)氬氣通氣管道的通氣壓力不足，應(yīng)及時停止操作，并把配制好的混合試劑密封好。為了控制灌封過程中的氣體壓力，需要在氬氣的通氣管路上安裝三塊壓力表在氬氣儲存瓶出口附近的管哮上安裝第一塊壓力顯示表，以便直觀地看到出儲存瓶的氬氣氣壓；第二塊壓力表安裝于灌封設(shè)備之前，以顯示進(jìn)入灌封設(shè)備之前的氣體壓力；第三塊壓力表則安裝于灌封設(shè)備的流量計上，以便最終控制進(jìn)入通氣管道末端的氣壓。開瓶穩(wěn)定性實驗對本實施例2制備的碳酸氫根診斷試劑盒進(jìn)行開瓶穩(wěn)定性實驗(儀器AU400)，并以未采用本發(fā)明方法的普通碳酸氫根診斷試劑盒開瓶作為對比，取同批號同一質(zhì)控血清(耙值14.6mmol/L)連續(xù)測定35天，其測試結(jié)果如下表4所示表4:實施例2中試劑盒開瓶穩(wěn)定性測試對比實驗數(shù)據(jù)(單位mmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本實施例2的診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計均值(X)44.4mmol/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=0.6196mmol/L變異系數(shù)(CV%)=4.24%普通碳酸氫根診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計均值(X)=11.42mmol/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=2.44mmol/L變異系數(shù)(CV%)=16.75%以上統(tǒng)計結(jié)果顯示，本實施例2的診斷試劑盒比未用惰性氣體保護(hù)的普通診斷試劑盒變異系數(shù)要小，穩(wěn)定性更好，且未加惰性氣體的普通診斷試劑盒在第29天就檢測不出結(jié)果。保存期觀察實驗對本實施例2的碳酸氫根診斷試劑盒進(jìn)行保存期觀察實驗，用同一批號的本實施例診斷試劑食，分成24瓶，每月開啟一瓶作留樣觀察，在AU400生化儀上定標(biāo)，并記錄水空白、標(biāo)準(zhǔn)點的吸光度值(S2ABS)、K因子值和試劑空白值，實驗結(jié)果如下表5所示，標(biāo)準(zhǔn)品為四川邁克公司產(chǎn)品(C02為25.00mmol/L)。表5:實施例2制備的碳酸氫根診斷試劑盒測定同一校準(zhǔn)品兩年內(nèi)的實驗數(shù)據(jù)列表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>根據(jù)上表5兩年內(nèi)水空白、S2ABS、K因子值和試劑空白數(shù)據(jù)，其變化量相對穩(wěn)定，其檢測數(shù)據(jù)均在可接受范圍內(nèi)，可見本實施例2的診斷試劑盒在兩年之內(nèi)穩(wěn)定性良好。而未采用惰性氣體保護(hù)的普通碳酸氫根診斷試劑盒的保存期觀察實驗數(shù)據(jù)如下表6所示-表6:普通碳酸氫根診斷試劑盒測定同一校準(zhǔn)品兩年內(nèi)的實驗數(shù)據(jù)列表月份12345678水空白0.00670.00640馬90.00710扁90.00720.00710.0072S2ABS0.03640.03730.03690.03720.03670扁50.0370.0364K因子842809833831839853836856試劑空白1.37251.36481.35891.34631.33491.32711.31381.3066月份910111213141516水空白0駕40細(xì)70.0090.00960.01090.01070.01170.0128S2ABS0.03530.03490.03540.0350.03480.03560.03470.0339K因子9299549479841046100410871185試劑空白1.26291.20761.10131.01610.91590.86710.77380.7254月份1718192021222324水空白0.0130.01430.01490.01540.01730.01970扁50.0243S2ABS0.03330.03250.03220.03150扁50.02870.02560.0252K因子123213741445155318942778409227778試劑空白0.70320.66530.62690.58470.54680.53220.51780.5015根據(jù)以上表5、表6的穩(wěn)定性對比實驗數(shù)據(jù)，我們分別從水空白、S2ABS、K因子值和試劑空白值幾個方面進(jìn)行比較1、本實施例2的碳酸氫根診斷試劑盒的水空白變化量在0.0065~0.0108之間變化，而未加惰性氣體的普通碳酸氫根診斷試劑盒其水空白變化量在0.00640.0243之間變化?？梢娢醇佣栊詺怏w試劑的水空白變化量較大，說明該試劑的本底值在進(jìn)行性增高，該試劑在沒有參加化學(xué)反應(yīng)前，自身已經(jīng)發(fā)生了化學(xué)變化；而本實施例方法制備得到的碳酸氫根診斷試劑盒水空白變化量小。兩相比較，本實施例2的診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通診斷試劑盒要穩(wěn)定。2、本實施例2的碳酸氫根診斷試劑盒的試劑空白變化量在1.3703~1.2148之間變化，而未加惰性氣體的普通碳酸氫根診斷試劑盒其試劑空白變化量在1.3725-0.5015之間變化?？梢娢醇佣栊詺怏w試劑的試劑空白變化量較大，說明試劑中的成份NADH在進(jìn)行性降低，且降低幅度大，已超過試劑標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍(〉0.9000);而本實施例方法制備得到的碳酸氫根診斷試劑盒試劑空白變化量小，且在試劑穩(wěn)定期末的試劑空白值還在試劑標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍內(nèi)。兩相比較，本實施例2的診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通診斷試劑盒要穩(wěn)定。3、本實施例2的碳酸氫根診斷試劑盒的S2ABS變化量在0.0343-0.0376之間變化，而未加惰性氣體的普通碳酸氫根診斷試劑盒其S2ABS變化量在0.0252~0.0372之間變化。本實施例2的碳酸氫根診斷試劑盒K因子值[K—示準(zhǔn)液濃度(S)/(S2ABS-水空白)]變化量在827-1063之間變化，而未加惰性氣體的普通碳酸氫根診斷試劑盒的K因子值在809-27778之間變化?？梢姡醇佣栊詺怏w試劑K因子值在進(jìn)行性增高，且幅度較大。而在臨床檢測過程中，K因子值應(yīng)維持在一較窄的波動范圍內(nèi)，否則在測定樣本過程中，易造成較大的誤差，誤差造成的原因也主要是因為試劑穩(wěn)定性不夠。因此兩相比較，得出的結(jié)論同樣是本實施例2的診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通試劑盒穩(wěn)定。由上可見，通過本實施例2工藝制備得到的碳酸氫根診斷試劑盒，其在2。C8。C條件下密閉避光貯存可穩(wěn)定22個月以上(普通的碳酸氫根試劑盒穩(wěn)定期一般只有12個月)，而開瓶上機(jī)2。C8t:條件下避光儲存可穩(wěn)定35天。實施例3:提高酶法葡萄糖診斷試劑盒穩(wěn)定性的方法一種酶法葡萄糖診斷試劑盒，該診斷試劑盒的主要原料成份包括葡萄糖氧化酶(GOD)>15U/ml過氧化物酶(POD)〉1.5U/ml變旋酶〉2.0U/ml4-氨基安替比林0.25mmol/L苯酚0.75mmol/L在該診斷試劑盒的制備過程中，通過本發(fā)明的方法來提高該葡萄糖診斷試劑盒的穩(wěn)定性，具體工藝流程如圖3所示1、領(lǐng)料從倉庫中領(lǐng)取制備葡萄糖診斷試劑盒所需的各種原料，通過傳遞窗傳入潔凈室；2、工藝設(shè)備的預(yù)處理取試劑瓶，經(jīng)洗滌、恒溫干燥箱干燥后，送入傳遞窗，用紫外燈滅菌，再傳送至分裝間，并按照質(zhì)檢要求對試劑瓶的質(zhì)量進(jìn)行質(zhì)檢；用稀鹽酸清洗量筒等稱量器具，再用去離子純化水沖洗干凈，烘干稱量器具；所有的通氣管道、分裝管道用純化水沖洗，沖洗用的純化水為管道容積的IO倍以上，沖洗完后將管道甩干備用；3、混合攪拌(1)根據(jù)所需的試劑配制總量以及各組分濃度，計算出各組成成分的用量，然后用稱量器具進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；(2)首先用純化水清洗配料桶，再向配料桶中加入配制總量80%的純化水；然后加入取用的4-氨基安替比林和苯酚，攪拌至完全溶解；將氮?dú)馔夤艿啦迦肱淞贤暗撞坎⒊掷m(xù)通入氮?dú)?，氮?dú)饬髁靠刂圃?L/min，通氣30min以盡可能排除配料桶中的空氣；再依次加入葡萄糖氧化酶、過氧化物酶和變旋酶，攪拌至溶解，最后加入純化水至配制總量，再繼續(xù)通氮?dú)?5min;本實施例3設(shè)有兩根氬氣通氣管道，進(jìn)氣口均共同連通至氬氣儲存瓶，一根氬氣通氣管道的出氣口設(shè)在配料桶的頂部，管口離配料桶中的液面約2cm，另一根氬氣通氣管道的出氣口接至灌封設(shè)備用于充填試劑瓶；在上述的氮?dú)馔馔戤吅螅ㄟ^配料桶頂部設(shè)置的氬氣通氣管道向混合配料的液面上方再持續(xù)通入氬氣，氬氣流量控制在為2L/min，以使得配料桶的液面上方保持氬氣氣氛，并進(jìn)入下一工序；在通上述惰性氣體前應(yīng)先檢査惰性氣體儲存瓶的壓力是否正常，如果壓力不足，說明惰性氣#儲量不足，需及時更換和補(bǔ)充；4、灌封試劑將上述配制好的試劑按常規(guī)灌裝機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行灌裝，整個灌封過程是在氬氣保護(hù)下進(jìn)行，具體的操作方式為將接至試劑瓶的氬氣通氣管道固定在注液用的分裝管道上，該通氣管道的管口與分裝管道的管口平行；然后打開供氣閥，檢查各通氣管道是否漏氣，如不漏氣，及時關(guān)閉閥門，如有漏氣，及時修復(fù)；通氣管道的末端安裝一針頭，針頭用75%的酒精進(jìn)行消毒;然后打開管道閥門，控制氬氣流量為5L/min，控制進(jìn)入針頭的氣壓為0.4Mpa0.6Mpa，利用通氣管道末端的針頭先向空試劑瓶中充填氬氣，待試劑瓶中的空氣排出后，開啟注液閥同時向試劑瓶中分裝配置好的混合配料，分裝過程中繼續(xù)通入氬氣，直至試劑瓶封蓋；在灌封過程中，接至配料桶的氬氣通氣管道繼續(xù)通入氬氣，以保證灌封時配料桶中待分裝的混合配料也處于氬氣的保護(hù)環(huán)境中；灌封過程中隨時檢査氣壓，灌封完成后及時關(guān)閉各個閥門；將灌封后的試劑盒半成品裝入周轉(zhuǎn)籃，送至傳遞窗交下一工序；5、貼印、包裝打印標(biāo)簽，在灌封好的試劑瓶上貼標(biāo)，粘貼瓶簽時應(yīng)對試劑瓶的密封性進(jìn)行檢測，防止試劑瓶密封不好、試劑泄露而造成包裝污染；標(biāo)簽粘貼完后將試劑瓶傳到組裝操作臺上，將已貼標(biāo)簽的試劑瓶按標(biāo)示規(guī)格裝入包裝盒內(nèi)，檢驗合格后，用熱收縮機(jī)對試劑盒進(jìn)行覆膜，完成試劑盒的整個制備過程。在上述的整個工藝流程中，操作時應(yīng)選擇離回風(fēng)近的地方，操作過程中如發(fā)現(xiàn)氮?dú)饣驓鍤馔夤艿赖耐鈮毫Σ蛔?，?yīng)及時停止操作，并把配制好的混合配料密封好。為了控制灌封過程中的氣體壓力，需要在氬氣的通氣管路上安裝三塊壓力表在氬氣儲存瓶出口附近的管路上安裝第一塊壓力顯示表，以便直觀地看到出儲存瓶的氬氣氣壓；第二塊壓力表安裝于灌封設(shè)備之前，以顯示進(jìn)入灌封設(shè)備之前的氣體壓力；第三塊壓力表則安裝于寧封設(shè)備的流量計上，以便最終控制進(jìn)入通氣管道末端針頭的氣壓。開瓶穩(wěn)定性實驗對本實施例3制備的葡萄糖診斷試劑盒進(jìn)行開瓶穩(wěn)定性實驗(儀器AU400),并以未采用本發(fā)明方法的普通葡萄糖診斷試劑盒開瓶作為對比，取同批號同一質(zhì)控血清(耙值8.5mmol/L)連續(xù)測定35天，其測試結(jié)果如下表7所示表7:實施例3中試劑盒開瓶穩(wěn)定性測試對比實驗數(shù)據(jù)(單位mmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>本實施例3診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計均值(X)=8.49mmol/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=0.1086mmol/L變異系數(shù)(CV%)=1.28%普通葡萄糖診斷試劑盒結(jié)果統(tǒng)計-.均值(X)=8.45mmol/L標(biāo)準(zhǔn)差(SD)=0.1555mmol/L變異系數(shù)(CV%)=1.83%以上統(tǒng)計結(jié)果顯示，本實施例3的診斷試劑盒比普通葡萄糖診斷試劑盒的變異系數(shù)要小，穩(wěn)定性更好。保存期觀察實驗對本實施例3制備的葡萄糖診斷試劑盒進(jìn)行保存期觀察實驗，用同一批號的本實施例診斷試劑盒，分成24瓶，每月開啟一瓶作留樣觀察，在AU400生化儀上定標(biāo)，并記錄水空白、標(biāo)準(zhǔn)點的吸光度值(S2ABS)和K因子值，實驗結(jié)果如下表8所示，標(biāo)準(zhǔn)品為LEADMAN公司產(chǎn)品(GLU為10.0mmol/L)。表8:-實施例3制備的葡萄糖診斷試劑盒測定同一校準(zhǔn)品兩年內(nèi)的實驗數(shù)據(jù)列表<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>根據(jù)以上表8的實驗數(shù)據(jù)可知，兩年內(nèi)的水空白、S2ABS、K因子值的變化量相對穩(wěn)定，其檢測數(shù)據(jù)均在可接受范圍內(nèi)，因此本實施例3的診斷試劑盒在兩年內(nèi)的穩(wěn)定性良好。而未采用惰性氣體保護(hù)的普通葡萄糖診斷試劑盒的保存期觀察實驗數(shù)據(jù)如下表9所示表9:普通葡萄糖診斷試劑盒測定同一校準(zhǔn)品兩年內(nèi)的實驗數(shù)據(jù)列表<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>根據(jù)以上表8、表9的穩(wěn)定性對比實驗數(shù)據(jù)，我們分別從水空白、S2ABS和K因子值幾個方面進(jìn)行比較1、本實施例3的葡萄糖診斷試劑盒的水空白變化量在0.03340.0494之間變化，而未加惰性氣體的普通葡萄糖診斷試劑盒其水空白變化量在0.03770.1057之間變化。可見未加惰性氣體試劑的水空白變化量較大，說明該試劑的本底值在進(jìn)行性增高，該試劑在沒有參加化學(xué)反應(yīng)前，自身己經(jīng)發(fā)生了化學(xué)變化，且本底值超過了試劑要求的范圍(<0.1000);而本實施例3方法制備得到的試劑水空白變化量小，本底值還在要求的范圍內(nèi)。兩相比較，本實施例3的葡萄糖診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通葡萄糖診斷試劑盒要穩(wěn)定。2、本實施例3的葡萄糖診斷試劑盒的S2ABS變化量在0.1676-0.1759之間變化，而未加惰性氣體的普通葡萄糖診斷試劑盒其S2ABS變化量在0.1526-0.1751之間變化。本實施例3的診斷試劑盒K因子值[&=標(biāo)準(zhǔn)液濃度(S)/(S2ABS-水空白)]變化量在74.46~81.50之間變化，而未加惰性氣體的普通診斷試劑盒的K因子值在76.57~213.22之間變化。可見，未加惰性氣體試劑K因子值在進(jìn)行性增高，且幅度較大。而在臨床檢測過程中，K因子值應(yīng)維持在一較窄的波動范圍內(nèi)，否則在測定樣本過程中，易造成較大的誤差，誤差造成的原因也主要是因為試劑穩(wěn)定性不夠。因此兩相比較，得出的結(jié)論同樣是本實施例3的葡萄糖診斷試劑盒比未加惰性氣體的普通試劑盒穩(wěn)定。通過上述工藝制備得到的葡萄糖診斷試劑盒，其在2'C8'C條件下密閉避光貯存可穩(wěn)定2年，開瓶上機(jī)2"C8'C條件下避光儲存可穩(wěn)定35天，而現(xiàn)有的葡萄糖診斷試劑盒的穩(wěn)定期一般只有12個月，開瓶穩(wěn)定期一般不到20天。權(quán)利要求1、一種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟中，向攪拌容器的混合配料中和/或混合配料液面上方持續(xù)通入惰性氣體，使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟完成后的灌封試劑步驟中，使所述混合配料在惰性氣體的保護(hù)下進(jìn)行灌封，灌封的具體操作方式為先向灌裝用的空試劑瓶中充填惰性氣體，待惰性氣體充滿試劑瓶后同時向試劑瓶中灌注配制好的混合配料，直至試劑瓶封蘭3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述灌封試劑步驟中，惰性氣體是通過針頭充填到試劑瓶中，控制進(jìn)入針頭的氣壓為0.4Mpa0.6Mpa。4、根據(jù)權(quán)利要求13中任一項所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述惰性氣體為密度比空氣大的惰性氣體。5、根據(jù)權(quán)利要求13中任一項所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述混合攪拌步驟中，向混合配料中持續(xù)通入的惰性氣體為氮?dú)?，通氣時間不少于10min，通氣時的氮?dú)饬髁靠刂圃?L/min10L/min;所述混合攪拌步驟中，在混合配料液面上方通入的并最終形成氣氛保護(hù)的惰性氣體為氬氣，通氣流量控制在2L/min1OL/min。6、一種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于在臨床生化含酶試劑盒的制備過程中，使混合攪拌后得到的混合配料在惰性氣體的保護(hù)下進(jìn)行灌封，所述灌封的具體操作方式為先向灌裝用的空試劑瓶中充填惰性氣體，待惰性氣體充滿試劑瓶后同時向試劑瓶中灌注配制好的混合配料，直至試劑瓶封蓋。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述灌封操作中，惰性氣體是通過針頭充填到試劑瓶中，控制進(jìn)入針頭的氣壓為0.4MpaO掘pa。8、根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述灌封操作中，惰性氣體的充填流量和充填時間能夠保證灌裝完畢后試劑瓶中試劑液面與瓶蓋間的空隙充滿惰性氣體。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，其特征在于所述惰性氣體為密度比空氣大的惰性氣體，惰性氣體的充填流量控制在2L/min10L/min。全文摘要本發(fā)明公開了一種提高臨床生化含酶試劑盒穩(wěn)定性的方法，即在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟中，向攪拌容器的混合配料中和/或混合配料液面上方持續(xù)通入惰性氣體，使混合配料液面上方處于惰性氣體的氣氛保護(hù)中；還可在制備臨床生化含酶試劑盒的混合攪拌步驟完成后的灌封試劑步驟中，使混合配料在惰性氣體的保護(hù)下進(jìn)行灌封，灌封的具體操作方式為先向灌裝用的空試劑瓶中充填惰性氣體，待惰性氣體充滿試劑瓶后同時向試劑瓶中灌注配制好的混合配料，直至試劑瓶封蓋。本發(fā)明的方法具有工藝簡單、容易操作、成本低廉、通用性強(qiáng)、且能有效延長生化含酶試劑盒使用期的特點。文檔編號C12Q1/00GK101649345SQ200910044220公開日2010年2月17日申請日期2009年8月31日優(yōu)先權(quán)日2009年8月31日發(fā)明者窮吳,進(jìn)李,籃月華,敏鄧,華鐘,黃石龍申請人:湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司