專利名稱：：具有益生菌的果汁飲料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及飲料。特別地，其涉及益生菌飲料。
背景技術(shù)：
：消費(fèi)者在使它們的日常飲食作為維持或改善他們的健康的手段方面顯示日益增加的興趣。現(xiàn)代生活方式減少了準(zhǔn)備食物和進(jìn)食的時(shí)間，這促成了不健康的飲食，例如，通過增加消費(fèi)不健康方便食品而導(dǎo)致的不健康飲食，所述方便食品由于它們的制備或貯存所涉及的方法而被認(rèn)為是營養(yǎng)價(jià)值較低。加工食品的消費(fèi)與有益的腸道細(xì)菌數(shù)目的減少相關(guān)。已知的減少有益細(xì)菌在腸道中的存活的其他因素包括壓力以及紅肉和酒精的消費(fèi)。減少的有益細(xì)菌使得不期望的細(xì)菌在胃腸道中生長并且減少由有益細(xì)菌產(chǎn)生的營養(yǎng)物的量。人的提高的壽命正引起增加的老齡市民的數(shù)目。相對于整個(gè)人口，該人口統(tǒng)計(jì)展示了增加的疾病例如胃腸道感染、便秘、腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome)(IBS)、炎性腸病(inflammatoryboweldisease)(IBD)、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、食物過敏、腹瀉、心血管疾病和某些癌癥例如結(jié)腸直腸癌的發(fā)病率。證據(jù)表明此類疾病可與減少的有益細(xì)菌的水平相關(guān)。近年來，以被靶向的方式影響身體的功能以對生理和營養(yǎng)產(chǎn)生積極影響的功能性食品的制造和銷售一直在增加。美國國立補(bǔ)充替代醫(yī)學(xué)中心(TheNationalCenterforComplementaryandAlternativeMedicine)(NCCAM)，國立衛(wèi)生研究院(NIH)將"功能性食物"解釋為"可具有生物活性組分(例如，多酚、植物雌激素、魚油、類胡蘿卜素)的、可提供除基本營養(yǎng)外的健康益處的日常飲食組分"。參見NCCAM，"BACKGROUNDER:BiologicallyBasedPractices:AnOverview"(October,2004)。該文獻(xiàn)可見于美國國立補(bǔ)充替代醫(yī)學(xué)中心(NCCAM)的網(wǎng)站。經(jīng)歷擴(kuò)張發(fā)展的一個(gè)市場是含有益生菌的食品。益生菌是用于通過改善其腸內(nèi)微生物平衡來有益地影響宿主動(dòng)物的健康和營養(yǎng)的補(bǔ)充飲食的活細(xì)菌培養(yǎng)物。(參見Fuller,R.，"ProbioticsinManandAnimals,，，JournalofAppliedBacteriology,66:365-378(1989))。益生菌的有益方面包括減少的腹瀉相關(guān)疾病的發(fā)病率或持續(xù)時(shí)間、腸易激綜合征的減輕以及減少的乳糖不耐性的癥狀。另外的有益方面包括高脂血癥患者中血脂水平的改善和便秘的減輕。還已顯示益生菌的施用減少了兒童和成人中的抗生素相關(guān)性月勤寫。(LewisSJ，F(xiàn)reedmanAR.Reviewarticle:theuseofbiotherapeuticagentsinthepreventionandtreatmentofgastrointestinaldisease.AlimentPharmacolTher.1998S印；12(9):807-22.)。益生元(Prebiotics)是在人胃腸道中不可消化的，還優(yōu)先剌激某些細(xì)菌的生長的物質(zhì)。(SchrezenmeirJ，deVreseM.Probiotics，prebiotics，andsynbiotics__approachingadefinition.Am.J.Clin.Nutr.2001Feb;73(2S卯pl):361S-364S)。已知的益生元包括果聚糖例如菊粉和低聚果糖(fructooligosaccharide)(F0S);低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide)(G0S);乳果糖和麥芽糊精。低聚果糖在小腸中不被水解，而是通過小腸進(jìn)入大腸，在這里它們優(yōu)先支持乳桿菌屬(lactobacillus)和雙岐桿菌屬(bifidobacterium)的益生菌株系的生長，增加此類益生菌在結(jié)腸的定殖。相比之下，低聚果糖不支持不期望的細(xì)菌例如類桿菌(bacteroide)、梭菌屬(Clostridia)禾口梭桿菌屬(Fusobacteria)的禾中的生長(參見RaoAV.JDose—responseeffectsofi皿linandoligofructoseonintestinalbifidogenesiseffects.Nutr.1999Jul;129(7S聊l):1442S-5S)。合生素(Synbiotic)產(chǎn)物包含益生元和益生菌(參見RolfeRD.Theroleofprobioticculturesinthecontrolofgastrointestinalhealth.JNutr.2000Feb;130(2SSu卯l):396S-402S和其中的參考文獻(xiàn))。益生元可促進(jìn)益生菌的生長。合生素乳制品在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。然而，某些人群可能不消費(fèi)乳制品。此外，存在對為消費(fèi)者提供益生菌以增強(qiáng)有益細(xì)菌在腸道中生長的不同產(chǎn)品的持續(xù)需要。因此，在本領(lǐng)域內(nèi)存在對當(dāng)被包裝時(shí)保持細(xì)菌成活力且可在胃腸道中促進(jìn)益生菌生長的合生素果汁飲料的需要。發(fā)明概述本發(fā)明的一個(gè)方面是裝在具有防盜蓋(tamperproofseal)的容器中的含有蘋果汁、香蕉汁、菠蘿汁、藍(lán)莓果汁、低聚果糖和益生菌的飲料。益生菌選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)(B.animalis(lactis))和鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)和其混合物。當(dāng)被冷藏36天時(shí)，果汁飲料將保持》108CFU/fl.oz細(xì)菌和提供》0.lg/fl.oz的低聚果糖。本發(fā)明的另一個(gè)方面是裝在具有防盜蓋的容器中的含有桔子汁、芒果汁、菠蘿汁、蘋果汁、低聚果糖和益生菌的飲料。益生菌選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌和其混合物。當(dāng)被冷藏36天時(shí)，果汁飲料將保持^108CFU/fl.oz細(xì)菌和提供^0.lg/fl.oz的低聚果糖。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及制造使大量有活力的細(xì)菌得到保持的飲料的方法。將低聚果糖與蘋果汁或香蕉泥以及一種或多種選自蘋果、香蕉、藍(lán)莓、桔子、芒果和菠蘿的其他果汁組合，從而形成果汁/低聚果糖混合物。將益生菌與果汁/低聚果糖混合物相組合，從而形成果汁飲料?？衫鋬觥⒗鋬龈稍锘蚶洳丶?xì)菌。本發(fā)明的另一個(gè)方面是裝在具有防盜蓋的容器中的含有蘋果汁、香蕉汁、菠蘿汁、藍(lán)莓汁、0.IO至O.15g/floz的低聚果糖和1.0X109至1.0X1012CFU/fl.oz的細(xì)菌的飲料。益生菌選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌以及其混合物。當(dāng)被冷藏36天時(shí)，仍然保持1.0X109至1.0X1012CFU/fl.oz的動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)。本發(fā)明的另外方面是裝在具有防盜蓋的容器中的含有桔子汁、芒果汁、蘋果汁、菠蘿汁、0.IO至O.15g/floz的低聚果糖和1.0X1()8至1.0X109CFU/fl.oz的細(xì)菌的飲料。益生菌選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌以及其混合物。當(dāng)被冷藏36天時(shí)，仍然保持1.0X108至1.0X109CFU/fl.oz的細(xì)菌。本發(fā)明的另外方面是裝在具有防盜蓋的容器中的含有桔子汁和1.0X108至1.0X109CFU/fl.oz的細(xì)菌的飲料。益生菌選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌以及其混合物。當(dāng)被冷藏36天時(shí)，仍然保持1.0X108至1.0X109CFU/fl.oz的細(xì)菌。附圖概述圖1A-1D舉例說明在一段時(shí)間內(nèi)細(xì)菌在不同飲料中的存活。圖1A顯示對于桔子芒果菠蘿(熱帶的)制劑使用冷凍的細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌存活。圖1B顯示對于桔子芒果菠蘿5(熱帶的)制劑使用冷凍干燥的細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌存活。圖ic顯示對于漿果制劑使用冷凍的細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌存活。圖1D顯示對于漿果制劑使用冷凍干燥的細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌存活。圖2比較第36天圖1A至D中顯示的飲料中的細(xì)菌成活力。圖3顯示在一段時(shí)間內(nèi)具有不同的果汁和細(xì)菌的組合的飲料中細(xì)菌成活力的維持。MBBif(漿果與動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)混合)；MBRham(漿果與鼠李糖乳桿菌混合)；0MPBif(桔子-芒果-菠蘿與動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種))；0MPRham(桔子-芒果-菠蘿與鼠李糖乳桿菌)；SBRham(藍(lán)莓-香蕉與鼠李糖乳桿菌)；SBBif(草莓-香蕉與動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種))。4E7和2E8分別代表在0時(shí)刻時(shí)4X107CFU/ml和2X108CFU/ml的接種細(xì)菌水平。圖4顯示在一段時(shí)間內(nèi)具有不同的單一果汁的飲料中細(xì)菌成活力的維持。Rham(鼠李糖乳桿菌);Bif(動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種))。4E7表示4X107CFU/ml的接種細(xì)菌水平。發(fā)明詳述本發(fā)明人的發(fā)現(xiàn)是某些益生菌飲料可獲得長貯存期并且維持高細(xì)菌存活率。當(dāng)甚至在灌注后冷藏36天時(shí)消費(fèi)時(shí)，此類飲料產(chǎn)品還能夠遞送》108CFU細(xì)菌/fl.oz飲料。本文中使用的術(shù)語"貯存期"是指在飲料被包裝后直至其被消費(fèi)或就有活力的細(xì)菌進(jìn)行檢測時(shí)的時(shí)間長度。飲料在其貯存期期間維持大量有活力的細(xì)菌。飲料在它們的貯存期期間維持大量有活力的細(xì)菌，從而在消費(fèi)時(shí)為消費(fèi)者提供》108CFU細(xì)菌/f1.oz飲料、>5X108CFU細(xì)菌/fl.oz飲料、>109CFU細(xì)菌/fl.oz飲料、>5X109CFU細(xì)菌/fl.oz飲料、>1010CFU細(xì)菌/f1.oz飲料、>5X1010CFU細(xì)菌/f1.oz飲料、>10"CFU細(xì)菌/f1.oz飲料或>5X10"CFU細(xì)菌/fl.oz飲料的最低水平。消費(fèi)的時(shí)間可以是第0天至第20天、25天、26天、27天、28天、29天、30天、31天、32天、33天、34天、35天、36天、37天、38天、39天、40天、41天或42天之間的任何時(shí)間。已知雙岐桿菌屬的細(xì)菌對人的健康施以有益的影響。提高的雙岐桿菌數(shù)目導(dǎo)致增加的乳酸和醋酸水平，這減小了消化道中的pH，從而抑制了有害細(xì)菌例如產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridiumperfringens)、艱難梭菌(Clostridiumdifficile)和某些病原性大腸桿菌(Escherichiacoli)的生長。還已知乳桿菌屬的種對許多病癥和疾病包括抗生素誘導(dǎo)的胃腸微生物菌群的不平衡、高膽固醇血癥、陰道感染、大腸桿菌感染和免疫力低下(depressedimmunity)施力口有益影口向。ShaussAG，MethodofAction,ClinicalApplicationandToxicityData,3J.AdvancementMed.163(1990)。體外研究已顯示嗜酸乳桿菌(L.acidipholus)可抑制病原性細(xì)菌例如幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)、金黃色葡萄球菌(St即hylococcusaureus)、銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)禾口藤黃八疊球菌(Sarcinalutea)的生長。ShahaniKM等人，NaturalAntibioticActivityofLactobacillusacidophilusandbulgaricus，llCulturedDairyProductsJ.14(1976)5RolfeRD.Theroleofprobioticculturesinthecontrolofgastrointestinalhealth.JNutr.2000Feb;130(2SSuppl):396S-402S。雙岐桿菌屬的益生菌株系，特別地種短雙岐桿菌(B.breve)、動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)、長雙歧桿菌(B.1ongum)、雙歧雙歧桿菌(B.bifidum)、青春雙歧桿菌(B.adolescentis)、嗜熱雙歧桿菌(B.thermophil咖)和嬰兒雙岐桿菌(B.infantis)可用于飲料。還可使用乳桿菌屬的益生菌，特別地種嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)、干酪乳桿菌(L.casei)、鼠李糖乳桿菌、類干酪乳桿菌(L.paracasei)、約氏乳桿菌(L.johnsonii)、路氏乳桿菌(L.reuteri)和植物乳桿菌(L.plantarum)、德氏乳桿菌乳亞種(L.lactis)、保加利亞乳桿菌(L.bulgaricus)。一些飲料可包含來自多個(gè)種的細(xì)菌。適當(dāng)?shù)闹晗凳强缮藤彨@得的，例如分別由DaniscoUSA，Inc以HOWARUBifido，HOWARURhamnosus和HOWARUAcidophilus銷售的動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)HN019、鼠李糖乳桿菌HNOOl和嗜酸乳桿菌NCFM?！獋€(gè)或多個(gè)細(xì)菌物種可存在于飲料中。一個(gè)細(xì)菌物種對其他種的比例可大范圍變化。比例可以是大約0.00000001比1、大約0.0000001比1、大約0.000001比1、大約0.00001比1、大約0.0001比1、大約0.001比1、大約0.01比1、大約0.1比1、大約1比1。當(dāng)兩種細(xì)菌存在于飲料中時(shí)，細(xì)菌可以是例如動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌?？墒褂闷渌M合。有活力的細(xì)菌數(shù)目通常報(bào)告為CFU或菌落形成單位。當(dāng)以用于單個(gè)菌落形成的適當(dāng)?shù)南♂尪韧坎技?xì)菌時(shí)一個(gè)菌落由單個(gè)有活力的細(xì)菌形成。這對于微生物學(xué)家來說是已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。通常，量表示為液量單位例如毫升(ml)或液盎司(fl.oz)中的CFU的數(shù)目。U.S.regulation21CFR101.9(b)(5)(viii)將液盎司精確地定義為30ml。足夠數(shù)量的有活力的細(xì)菌對于獲得益生菌的有益效應(yīng)可能是必需的。通常以一定水平的有活力的細(xì)菌包裝細(xì)菌；然而，在消費(fèi)前，水平可能減少，從而阻礙消費(fèi)者獲得有益劑量的細(xì)菌。事實(shí)上，美國國立補(bǔ)充替代醫(yī)學(xué)中心(NCCAM)已鑒定了與益生菌產(chǎn)品的質(zhì)量相關(guān)的幾個(gè)問題，包括產(chǎn)品中細(xì)菌的成活力、產(chǎn)品中細(xì)菌的類型和滴度以及在貯存下的穩(wěn)定性。上面引用"BACKGROUNDER-BiologicallyBasedPractices:An0verview，，?？扇芜x地用于供人消費(fèi)的產(chǎn)品的益生元的類型包括菊粉、低聚果糖(F0S)、低聚半乳糖(G0S)、乳果糖和麥芽糊精。此類益生元可以在植物中天然產(chǎn)生、半合成、合成、重組產(chǎn)生等。通常此類益生元將以半純化的狀態(tài)使用，其中植物、果實(shí)、花或蔬菜來源的其他組分或合成或半合成反應(yīng)的其他組分濃度減少和/或被除去。菊粉是由不同聚合程度的低聚物的混合物組成的天然發(fā)生的可溶性纖維。菊粉主要由果糖單位組成并且通常具有末端葡萄糖。植物菊粉通常包含2至140個(gè)果糖單位。菊粉可從多種來源，包括菊芋(Jerusalemartichoke)、大麗花(dahlia)、洋蔥、大蒜和菊苣塊莖獲得。麥芽糊精是從玉米淀粉產(chǎn)生的甜度適中的多糖。乳果糖是合成的非天然發(fā)生的糖。二糖乳果糖(半乳-果糖)是通過葡萄糖至果糖的異構(gòu)化從乳糖(半乳-葡萄糖)合成的。還可例如通過使用從路氏乳桿菌L103純化的P-半乳糖苷酶作為催化劑從乳糖合成低聚半乳糖(G0S)?？赏ㄟ^本領(lǐng)域內(nèi)已知的幾個(gè)方法的任一個(gè)制備低聚果糖。例如，可從天然物質(zhì)提取低聚果糖。低聚果糖存在于許多種類的植物中，包括大麗花、菊苣、洋蔥、大蒜、蔥、小麥、黑麥、朝鮮薊和番茄。還可通過化學(xué)技術(shù)酶促產(chǎn)生低聚果糖。例如，可通過用酶例如果糖基轉(zhuǎn)移酶(EC2.4.1.9)和呋喃果糖苷酶(EC3.2.1.26)處理蔗糖來合成低聚果糖。HidakaH.等人Afructooligosaccharides-producingenzymefromAspergillusnigerATCC20611.Agric.Biol.Chem.1988;52:1181-1187。低聚果糖因用于促進(jìn)雙岐桿菌屬的禾中的生長而特另U聞名。(RossiM，CorradiniC，AmarettiA，NicoliniM，7PompeiA，ZanoniS，MatteuzziD.Fermentationoffructooligosaccharidesandi皿linbybifidobacteria-^comparativestudyofpureandfecalcultures.ApplEnvironMicrobiol.20050ct;71(10):6150-8.)。低聚果糖通常是結(jié)合至末端葡萄糖的果糖的直鏈。低聚果糖可以是短鏈聚合物的混合物。果糖鏈的長度，也稱為聚合的程度或DP，可以是大約2至大約5。通常，果糖鏈長度在2至4之間變化。此類短鏈低聚果糖還可稱為GF2(1-蔗果三糖)、GF3(蔗果四糖(nystose))和GF4(蔗果五糖(1_P-fructofuranosylnystose))?？墒褂眠m當(dāng)?shù)目缮藤彨@得的低聚果糖例如由GTCNutrition(Golden,CO80401)提供的NlItraf1Ora?？梢砸员绢I(lǐng)域內(nèi)已知的多種方法包括例如在含有酪蛋白的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)來制備細(xì)菌。任選地，可在酪蛋白不存在的情況下培養(yǎng)細(xì)菌，從而提供完全不含乳制品的細(xì)菌制劑?？赏ㄟ^冷凍、冷藏或冷凍干燥貯存細(xì)菌而不使成活力減少至期望的水平之下。細(xì)菌可以以它們貯藏時(shí)的狀態(tài)例如冷藏、冷凍干燥或冷凍狀態(tài)加至飲料中。任選地，可在加入至飲料之前解凍細(xì)菌。可在生長之后冷凍細(xì)菌并且以冷凍狀態(tài)維持細(xì)菌直至將它們加入至飲料。在用于制備果汁飲料的一個(gè)方法中，將低聚果糖與果汁組合，對低聚果糖/果汁混合物進(jìn)行巴氏法滅菌，然后將冷凍的細(xì)菌加入低聚果糖/果汁混合物。假如細(xì)菌未進(jìn)行巴氏法滅菌，則可將其他組分進(jìn)行巴氏法滅菌并且以任何適當(dāng)?shù)捻樞蚪M合。果汁可以以不同的形式包括液體、濃縮物、提取物、果泥、果醬(paste)、果肉(pulp)等形式存在。將果汁飲料分配入瓶子、硬紙盒或容器，通過本領(lǐng)域內(nèi)已知的適當(dāng)方法進(jìn)行密封。密封的容器可以任選地在冷藏的情況下運(yùn)輸或貯存。冷藏溫度通常具有大約ot:、大約2t:、大約4t:、大約6t:、大約『C或大約i(TC的下限。冷藏溫度通常具有大約4t:、大約6t:、大約『C或大約i(TC的上限。通常，冷藏溫度為大約2t:至大約6t:。在用于制備果汁飲料的另一個(gè)方法中，向一個(gè)容器中的蘋果汁提取物中加入細(xì)菌，以在使果漿被其他不期望的細(xì)菌污染的程度減少至最低的條件下形成果漿。在分開的容器中，將低聚果糖與果汁組合。果汁可以以不同的形式包括濃縮物、提取物、果泥、果醬、果肉等形式存在。將果漿與果汁/低聚果糖混合物混合在一起，從而形成最終的飲料，將所述飲料分配入瓶子、硬紙盒或容器，然后通過本領(lǐng)域內(nèi)已知的適當(dāng)方法密封?？梢匀芜x地在冷藏的條件下運(yùn)輸或貯藏密封的容器。冷藏溫度通常具有大約ot:、大約2t:、大約4t:、大約6t:、大約『C或大約i(TC的下限。冷藏溫度通常具有大約4t:、大約6t:、大約『C或大約l(TC的上限。通常，冷藏溫度為大約2°C至大約6°C。用于飲料的適當(dāng)?shù)墓M合包括來自蘋果、香蕉、桔子、芒果和菠蘿的果汁。該飲料在本文中稱為桔子-芒果-菠蘿或0MP。在該飲料中展示優(yōu)異存活的細(xì)菌物種包括動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)。稱為"漿果"或"藍(lán)莓"的第二適當(dāng)?shù)墓M合包括來自蘋果、香蕉和藍(lán)莓的果汁。還發(fā)現(xiàn)桔子汁維持優(yōu)異的鼠李糖乳桿菌存活?？上蚬嬃现屑尤刖S生素和礦物質(zhì)?？杉尤肴魏芜m當(dāng)?shù)木S生素。例如，加入的維生素可以是一種或多種下列維生素維生素A、維生素Bl、維生素B2、維生素B3(煙酸)、維生素B5(泛酸)、維生素B6、維生素B7、維生素B9、維生素B12、維生素C、維生素D、維生素E或維生素K。可加入任何適當(dāng)?shù)牡V物質(zhì)。例如，加入的礦物質(zhì)可以是鈣、氯化物、鉻、鎂、磷、鉀、鈉、硫、鈷、銅、氟、碘、鐵、錳、鉬、鎳、硒、釩、鋅中的一種或多種?？梢砸耘c人營養(yǎng)需求相容的任何形式加入維生素和礦物質(zhì)。可將維生素和礦物質(zhì)加至任何期望的水平。飲料中的量可以以任何適當(dāng)百分?jǐn)?shù)的每日參考攝取量(ReferenceDailyIntake)(RDI)存在。例如，維生素或礦物質(zhì)可以以大約2%、5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、100%、150%、200%、300%、400%或大約500%的RDI的上限存在。維生素或礦物質(zhì)可以以大約1%、2%、5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、100%、150%、200%或大約300X的RDI的下限存在。備選地，可以以國際單位(IU)或重量/重量(w/w)來測量加入的維生素或礦物質(zhì)的量。例如，飲料每份可含有100%的RDI的維生素E、維生素B3(煙酸)、維生素B5(泛酸)、維生素B6和維生素B12中的每一種。任選地，可加入已知或預(yù)期具有有益效應(yīng)的額外的組分。例如，飲料可包含一種或多種下列物質(zhì)油例如"-3或co-6、草藥和香料。草藥和香料成分可以以提取的形式存在。本領(lǐng)域內(nèi)已知的任何適當(dāng)?shù)牟菟幒拖懔峡捎米鹘M分?？杉尤氲氖纠圆菟幒拖懔习↘avaKava、貫葉連翹(St.John'sWort)、鋸葉棕(SawPalmetto)和人參。細(xì)菌接種物的狀態(tài)可影響細(xì)菌在果汁飲料中的存活。之前，已以冷凍干燥的形式加入細(xì)菌。本發(fā)明者已發(fā)現(xiàn)冷凍細(xì)菌的加入提供了飲料中細(xì)菌存活的意外提高。在貯存期結(jié)束時(shí)保持活力的加入飲料的細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)具有大約10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%的上限。在貯存期結(jié)束時(shí)保持活力的加入飲料的細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)具有大約10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%或大約90%的下限。果汁彼此之間可以以不同的量存在于飲料中。每一種果汁可以以等量存在。每一種果汁還可以以比一種或多種果汁更大的量存在。一種果汁可以比另一種果汁多大約10-50%，比另一種果汁多大約50-100%，比另一種果汁多大約100-200%，比另一種果汁多大約200-300%，比另一種果汁多大約300-500%或比另一種果汁多大約500-1000%。在槳果果汁混合物中，蘋果汁可以以40至80%的果汁存在；菠蘿汁可以以5至15%的果汁存在；香蕉泥可以以10至25%的果汁存在；以及藍(lán)莓泥可以以2至10%的果汁存在。在熱帶果汁混合物中，蘋果汁可以以大約20至50%的量存在；芒果泥(汁)可以以10至40%的量存在，桔子汁可以以15至35%的量存在，菠蘿汁可以以5至20%的量存在；以及香蕉泥(汁)可以以2至12%的量存在。此類百分?jǐn)?shù)是重量/重量百分?jǐn)?shù)。蘋果汁的量具有大約2%、大約5%、大約10%、大約20%、大約30%或大約35%的總飲料的下限。蘋果汁的量具有大約40%、大約50%、大約60%或大約70%的總飲料的上限。通常，蘋果汁的量為30至70%的總飲料。果汁的白利糖度(Brix)等于果汁中可溶性固體的總量度?？扇苄怨腆w主要包括糖(蔗糖、果糖和葡萄糖)，從而白利糖度被認(rèn)為是存在于果汁中的糖的量度。為說明白利糖度，我們使用等價(jià)于百分?jǐn)?shù)的白利度(Brixdegree)。飲料的白利糖度值具有大約13.5、大約14.0、大約14.5、大約15.0、大約15.5或大約16.0的下限。飲料的白利糖度值具有大約14.0、大約14.5、大約15.0、大約15.5、大約16.0、大約16.5、大約17.0、大約17.5或大約18.0的上限。果汁飲料的白利糖度值通常在大約14.0至大約15.0的范圍內(nèi)。飲料的pH值具有大約3.2、大約3.6、大約3.8或大約4.0的下限。飲料的pH值具有大約3.6、大約3.8、大約4.0或大約4.2的上限。通常，pH范圍是大約3.4至大約3.9。在飲料制備后冷藏的第36天，飲料中含有的細(xì)菌的數(shù)目具有大約106CFU/fl.oz、大約5X106CFU/fl.oz、大約107CFU/fl.oz、大約5X107CFU/fl.oz、大約108CFU/fl.oz、大約5X108CFU/fl.oz、大約109CFU/fl.oz或大約5X109CFU/f1.oz的下限。在飲料制備后冷藏的第36天，飲料中包含的細(xì)菌的數(shù)目具有大約108CFU/fl.oz、大約5X108CFU/fl.oz、大約109CFU/fl.oz、大約5X109CFU/fl.oz、大約10lclCFU/fl.oz、大約5X10lclCFU/f1.oz、大約10"CFU/f1.oz、大約5X10"CFU/f1.oz、大約1012CFU/fl.oz或大約5X1012CFU/f1.oz的上限?？稍谏a(chǎn)后大約30至36天的任何方便的時(shí)間估量成活力。存在于飲料中的低聚果糖的量具有大約0.Olg/fl.oz、大約0.05g/fl.oz、大約0.lg/fl.oz、大約0.13g/fl.oz、大約0.5g/fl.oz、大約lg/fl.oz、大約1.5g/fl.oz或2g/fl.oz的下限。存在于飲料中的低聚果糖的量具有大約O.lg/fl.oz、大約0.5g/fl.oz、大約lg/fl.oz、大約1.5g/fl.oz、大約2g/fl.oz、大約2.5g/fl.oz或3g/fl.oz的上限。通常，將能夠裝10fl.oz的瓶子用作飲料的容器。一般地，按照本方法制造的飲料將長時(shí)間保持足夠的細(xì)菌成活力以使一份10fl.oz的飲料為消費(fèi)者提供》5X109CFU的細(xì)菌和>lg的低聚果糖。通常，一份10fl.oz的飲料具有5X109CFU的細(xì)菌和1.33g的低聚果糖。實(shí)施例1使用冷凍的細(xì)菌進(jìn)行的桔子芒果菠蘿(熱帶的)飲料的制備將蘋果汁、香蕉泥、芒果汁、桔子汁和菠蘿汁與充足的低聚果糖組合，從而產(chǎn)生大約O.lg/fl.oz的低聚果糖。將混合物進(jìn)行短暫的巴氏法滅菌，然后泵入制成品罐。緩慢地以冷凍的形式加入益生菌，將其與果汁混合物混合，從而形成最終的飲料。對于熱帶飲料，每300加侖的果汁/低聚果糖混合物加入大約1151XlO"cfu。實(shí)施例2使用冷凍的細(xì)菌進(jìn)行的漿果飲料的制備按照實(shí)施例1的方法，使用與充足低聚果糖組合的蘋果汁、菠蘿汁、香蕉泥和藍(lán)莓泥制備漿果飲料，從而產(chǎn)生大約O.lg/fl.oz的低聚果糖。對于漿果飲料，每300加侖果汁/低聚果糖混合物加入大約1535DCU。此外，加入維生素和礦物質(zhì)以產(chǎn)生每份飲料100%的RDI的下列維生素:維生素E(30IU)、煙酸(20mg)、泛酸(10mg)、維生素B12(6yg)和維生素B6(2mg)。以0.36^w/w加入抗壞血酸。該組分的組合提供了意料之外的良好細(xì)菌存活。特別地，維生素和礦物質(zhì)的包含產(chǎn)生了與在不使用維生素和礦物質(zhì)的情況下制備的果漿飲料相比提高的細(xì)菌成活力。實(shí)施例3使用冷凍干燥的細(xì)菌進(jìn)行的桔子芒果菠蘿益生菌果汁的制備對蘋果汁進(jìn)行巴氏法滅菌，然后貯存在干凈的產(chǎn)品罐(Producttank)中的2，000加侖的槽中。然后將蘋果汁轉(zhuǎn)移入益生菌接種果漿槽(Slurrytank)。一進(jìn)入槽中就立即攪拌以產(chǎn)生渦旋，加入一袋或多袋細(xì)菌，將其與蘋果汁混合，從而形成果漿。包裝益生菌以防止污染?？蓪⒓?xì)菌低溫貯存大約3個(gè)月或冷凍貯存大約1年。槽已在用于貯存或混合飲料的任何組分之前進(jìn)行了滅菌?？赏ㄟ^任何適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行滅菌。例如，可通過高壓滅菌法或通過使用消毒液進(jìn)行滅菌。在加入果漿槽之前也已對含有益生菌的包裝的外表面進(jìn)行了滅菌。這些和其他方法用于使不期望的生物在最終的飲料中的存在減少至最低程度。緩慢和充分地向蘋果汁中加入益生菌。當(dāng)加入所有細(xì)菌后，繼續(xù)混合直至冷凍干燥的顆粒溶解在蘋果汁中。加入至飲料中以在貯存期結(jié)束時(shí)保持期望量的活細(xì)菌的細(xì)菌的正確量可容易地測定而無需過度的實(shí)驗(yàn)。例如，圖3顯示用于進(jìn)行該測定的細(xì)菌存活數(shù)據(jù)。通常，加入4至8袋(每袋裝有1至2.5Kg的細(xì)菌)細(xì)菌來獲得期望的量。在第二2000加侖的槽中，將剩下的果汁與低聚果糖混合，從而形成果汁/低聚果糖混合物。最后，將果漿從果漿槽轉(zhuǎn)移至裝有果汁/低聚果糖混合物的2000加侖的槽中。將果漿和果汁/低聚果糖混合物充分混合。進(jìn)行2分鐘的時(shí)間，將混合的混合物回流通過果漿槽。然后將完成的飲料傾倒入容器內(nèi)?？梢允褂弥贿M(jìn)行短暫清洗的果漿槽產(chǎn)生另外的批次，只要另外的批次在15分鐘內(nèi)開始。超過該時(shí)間的更長的延遲需要充分清洗果漿槽。在本實(shí)施例中，將細(xì)菌與120加侖蘋果汁在果漿槽中混合?？筛淖兗?xì)菌的量以在最終的飲料中獲得期望量的細(xì)菌。通常，小袋包含大約2kg的細(xì)菌。在本實(shí)施例中使用8小袋。向1680加侖的果汁/低聚果糖混合物中加入果槳，從而產(chǎn)生1800加侖的終體積。這些量可按比例改變來滿足期望的飲料的最終量。權(quán)利要求裝有飲料且具有防盜蓋的容器，所述飲料包含(i)蘋果汁；(ii)香蕉汁；(iii)藍(lán)莓汁；(iv)菠蘿汁；(v)≥0.1g/fl.oz的低聚果糖；和(vi)≥108CFU/fl.oz的選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)(Bifidobacteriumanimalis(lactis))、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)和其混合物的細(xì)菌，其中當(dāng)將所述飲料冷藏36天時(shí)，仍保持≥108CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。2.裝有飲料且具有防盜蓋的容器，所述飲料包含(i)桔子汁;(ii)芒果汁；(iii)菠蘿汁；(iv)蘋果汁;(v)>0.lg/f1.oz的低聚果糖；禾口(vi)>108CFU/f1.oz的選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)、鼠李糖乳桿菌和其混合物的細(xì)菌；其中當(dāng)將所述飲料冷藏36天時(shí)，仍保持》108CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。3.權(quán)利要求1或2的飲料，其包含》0.5g/fl.oz的低聚果糖。4.權(quán)利要求1或2的飲料，其包含》lg/fl.oz的低聚果糖。5.權(quán)利要求1或2的飲料，其包含》5X108CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。6.權(quán)利要求1或2的飲料，其包含》109CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。7.權(quán)利要求1或2的飲料，其中所述細(xì)菌是動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)。8.權(quán)利要求1或2的飲料，其中所述細(xì)菌是鼠李糖乳桿菌。9.權(quán)利要求1或2的飲料，其中所述細(xì)菌是動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌的混合物。10.權(quán)利要求2的容器，其中飲料還包含香蕉汁。11.制備能夠維持大量的有活力的細(xì)菌的果汁飲料的方法，其包括將低聚果糖與蘋果汁和一種或多種選自香蕉、藍(lán)莓、桔子、芒果和菠蘿果汁的果汁組合，從而形成果汁/低聚果糖混合物；將選自動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)、鼠李糖乳桿菌和其混合物的細(xì)菌與果汁/低聚果糖混合物組合，從而形成果汁飲料。12.權(quán)利要求11的方法，其中所述飲料含有^0.lg/fl.oz的低聚果糖。13.權(quán)利要求11的方法，其中所述飲料含有^0.5g/fl.oz的低聚果糖。14.權(quán)利要求11的方法，其中所述飲料含有^lg/fl.oz的低聚果糖。15.權(quán)利要求11的方法，其還包括用果汁飲料填充容器，然后密封填充的容器。16.權(quán)利要求11的方法，其中細(xì)菌是動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)。17.權(quán)利要求ll的方法，其中細(xì)菌是鼠李糖乳桿菌。18.權(quán)利要求ll的方法，其中細(xì)菌是動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)和鼠李糖乳桿菌的混合物。19.權(quán)利要求11的方法，其還包括在冷藏條件下貯存果汁飲料至少30天。20.權(quán)利要求11的方法，其還包括在第30至第36天就有活力的細(xì)菌檢測果汁飲料。21.權(quán)利要求1或2的容器，其中所述飲料包含(i)O.10至0.15g/fl.oz的低聚果糖；禾口(ii)1.0X108至1.0X1012CFU/f1.oz的動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)細(xì)菌；其中當(dāng)將飲料冷藏36天時(shí)，仍然保持1.OX108至1.OX1012CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。22.權(quán)利要求1或2的容器，其中所述飲料包含(i)O.10至0.15g/fl.oz的低聚果糖；禾口(ii)1.0X108至1.0X109CFU/fl.oz的動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)細(xì)菌；其中當(dāng)將飲料冷藏36天時(shí)，仍然保持1.OX108至1.OX109CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。23.權(quán)利要求1或2的容器，其中所述飲料包含(i)O.10至0.15g/fl.oz的低聚果糖；禾口(ii)1.OX109至1.OX1012CFU/fl.oz的動(dòng)物雙歧桿菌(乳酸亞種)細(xì)菌；其中當(dāng)將飲料冷藏36天時(shí)，仍然保持1.OX109至1.OX1012CFU/fl.oz的所述細(xì)菌。24.權(quán)利要求21、22或23的容器，其中所述飲料還包含香蕉汁。全文摘要可使用包含益生菌和低聚果糖的果汁飲料來促進(jìn)有益細(xì)菌在腸中的生長。還公開了用于制備果汁飲料的方法。該方法可獲得長貯存期同時(shí)保持高水平的細(xì)菌成活力?？梢砸岳缋鋬龈稍锘蚶鋬龅男问较蝻嬃现屑尤胍嫔?。文檔編號(hào)A23L2/02GK101715303SQ200880013658公開日2010年5月26日申請日期2008年4月28日優(yōu)先權(quán)日2007年4月27日發(fā)明者L·C·尼卡斯特羅,S·金申請人:格倫多拉無添加果汁公司