專利名稱：小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的ssr標(biāo)記及其獲得方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記及其獲得方法，提供了與小麥 抗白粉病基因復(fù)壯30緊密連鎖的分子標(biāo)記，屬于作物遺傳育種學(xué)領(lǐng)域?？梢杂?效用于復(fù)壯30的跟蹤檢測和標(biāo)記輔助育種。
二背景技術(shù)：
由專性寄生真菌小麥白粉菌引起的小麥白粉病是危害小麥生產(chǎn)的一種世界 性病害。小麥白粉菌具有小種多、變異快、適應(yīng)范圍廣等特點(diǎn)，小麥生產(chǎn)中使 用抗性基因時(shí)，白粉菌群體往往會(huì)因寄主抗性基因的選擇作用而發(fā)生協(xié)同進(jìn)化， 克服抗性基因，導(dǎo)致病害大流行(植物病理學(xué)報(bào)，1995， 25: 116)。近年來白粉 病在我國各大麥區(qū)常有發(fā)生和流行，危害程度日趨嚴(yán)重，已成為影響和限制小 麥高產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)的一大障礙?；瘜W(xué)防治白粉病雖有一定成效，但需花費(fèi)大量的人 力、物力，而且還會(huì)引起環(huán)境污染等生態(tài)問題。培育和推廣抗病品種被公認(rèn)為 是防治小麥白粉病最經(jīng)濟(jì)、有效、安全的途徑(張?jiān)銎G等2002中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002, 35(7) :789-793)。隨著分子標(biāo)記技術(shù)的產(chǎn)生和不斷發(fā)展完善，利用分子標(biāo)記技術(shù) 標(biāo)記抗病基因，并用于標(biāo)記輔助育種已成為篩選抗病基因聚合體、選育抗病品 種的有效方法(張慶利等2004 Agricultural Science in China, 2004， 3(6): 409-415)。而建立與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，是進(jìn)行分子標(biāo)記輔助育種的 基礎(chǔ)。尋找基因分子標(biāo)記的最常用方法之一是Michelmore(1991 /Voce饑iV"f""/. JowfeWc.&z>we.t/5^,.1991， 88: 9828-9832)提出的分離群體分組分析法(BSA)。在小麥中，SSR已被證實(shí)是一種非常有效的分子標(biāo)記，它與其 它標(biāo)記技術(shù)相比能檢測到更高的多態(tài)性(Roder等1995 Mol.Gen.Genet. 1995, 248:163-167)。
小麥品種復(fù)壯30是由陜西涇惠農(nóng)場從涇陽30系統(tǒng)選育而成，它攜帶的抗 白粉病基因?qū)Ξ?dāng)前我國各大麥區(qū)流行的小麥白粉菌優(yōu)勢小種表現(xiàn)高抗或免疫， 本研究經(jīng)田間和溫室抗性鑒定，證明其對(duì)白粉病的抗性達(dá)到高抗至免疫水平， 因此是小麥抗白粉病育種中的一個(gè)優(yōu)良抗源。該基因已被定位到7B染色體上， 現(xiàn)己被定名為戶m5e。目前，已報(bào)道的尸m^基因的SSR標(biāo)記的研究報(bào)道較少。 而與其緊密連鎖的分子標(biāo)記還未見報(bào)道。
本研究利用F2分離群體分組法(BSA)對(duì)抗白粉病基因復(fù)壯30進(jìn)行了 SSR 標(biāo)記分析，尋找與復(fù)壯30連鎖的SSR標(biāo)記。
本研究以復(fù)壯30、感病品種Chancellor為材料，配制雜交組合復(fù)壯 30xChancellor，獲得雜種F,， Fi代自交，獲得F2分離群體。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是:提供了與小麥抗白粉病基因復(fù)壯30緊密連鎖的分子標(biāo)記， 有效用于復(fù)壯30的跟蹤檢測和標(biāo)記輔助育種；而且利用該分子標(biāo)記在早代就可 以進(jìn)行選擇，提高選擇的準(zhǔn)確性，縮小育種群體，并且不受環(huán)境、生長季節(jié)的 限制，結(jié)合加代技術(shù)能大大縮短育種年限、提高育種效率。
1、小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記，其特征在于.'
采用已定位在7B染色體上的56對(duì)SSR引物分析結(jié)果表明，8個(gè)引物能在
親本間穩(wěn)定的揭示多態(tài)性差異，3個(gè)引物Xwmc364 、 Barc065和Xwmc517在
抗、感親本，抗、感池間和F2分離群體的抗、感單株間擴(kuò)增出特異 帶，經(jīng)5 次以上重復(fù)擴(kuò)增，結(jié)果穩(wěn)定。3對(duì)引物所擴(kuò)增的特異譜帶分別記為Xwmc364175、Barc0659o和Xwmc517細(xì)，它們與復(fù)壯30中的抗白粉病基因/>m5e間的遺傳距離 分別為4.9cM， 5.1cM和18.5cM，可作為戶w5e的SSR標(biāo)記。其中標(biāo)記 Xwmc364175和Barc06590與抗病基因緊密連鎖，在對(duì)戶/w^的標(biāo)記輔助選擇中具 有利用價(jià)值。
2、權(quán)利要求1所述小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記的獲得方法，包
括-
步驟一分離群體的創(chuàng)建
復(fù)壯30xChancellor獲得Fi種子，^自交，得F2分離群體。 步驟二白粉病抗性接種及鑒定
用當(dāng)前小麥白粉菌的優(yōu)勢小種Nai5號(hào)小種對(duì)抗、感親本、所有的F2單株 進(jìn)行兩次接種， 一次在三葉期， 一次在拔節(jié)期，同時(shí)以感病親本Chancellor為感 病對(duì)照。在感病對(duì)照充分發(fā)病的條件下，調(diào)査抗、感分離情況，每隔2-3天重復(fù) 調(diào)査一次，病級(jí)鑒定按盛寶欽等(盛寶欽等1988植物保護(hù)，1988， l'. 49-501988) 提出的反應(yīng)型標(biāo)準(zhǔn)(0-4級(jí))進(jìn)行。
步驟三F2代群體的分子標(biāo)記分析
(1) 用Devos (Theor.Appl.Genet， 1992， 84:567-572)的酚-氯仿提取法,稍有 改動(dòng)，適于1.5ml離心管提取。
提取抗、感親本及F2代群體各單株的DNA;
(2) 首先用已定位在7B染色體上的56對(duì)SSR引物在抗病親本復(fù)壯30和 感病親本Chancellor間進(jìn)行多態(tài)性篩選，利用第一輪篩選出的在抗、感材料間具 有多態(tài)性差異的引物在抗、感池間進(jìn)行第二輪篩選-
建立抗病池和感病池從復(fù)壯30 x Chancellor的F2代分離群體中隨機(jī)選取 10個(gè)抗病單株的DNA等量混合，隨機(jī)選取10個(gè)感病單株的DNA等量混合。SSR-PCR反應(yīng)體系:PCR反應(yīng)體積為25nl，其中含有2.5nl 10xPCRBuffer(100 mmol/L Tris-HCI (pH 8.3), 500 mmoi/L KCI)， 2pl 30 ng膜板DNA， 0. 2^1 (5U4U) Taq酶,2nl (25Mm) MgCI2,3pl (2.5nmol/L)引物，2pl (2.5mmol/L )dNTP。
SSR擴(kuò)增程序擴(kuò)增反應(yīng)在Thermal Cycler 9600 PCR上進(jìn)行。先進(jìn)行一次 預(yù)擴(kuò)增95'C變性5分鐘，然后進(jìn)行30個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，每個(gè)循環(huán)95'C變性1分 鐘，55'C (復(fù)性溫度因引物不同而異)復(fù)性l分鐘，72'C延伸1分鐘，最后 72'C延伸5分鐘。
擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測擴(kuò)增產(chǎn)物在6%聚丙烯酰胺非變性凝膠上穩(wěn)壓110V電泳， 銀染顯色，然后用TancmGis-2010型凝膠成像系統(tǒng)照相觀察，記錄結(jié)果
選擇在親本間和F2代群體的抗、感池間擴(kuò)增出相同有多態(tài)性的引物為與復(fù) 壯30連鎖的SSR分子標(biāo)記3對(duì)，將這3對(duì)分子標(biāo)記在F2代群體單株中擴(kuò)增獲 取群體各單株的抗、感反應(yīng)型資料。
步驟四分子標(biāo)記獲得
根據(jù)連鎖交換規(guī)律，利用擴(kuò)增獲得的F2代群體各單株基因型資料與田間鑒 定獲得的對(duì)應(yīng)各單株的抗、感反應(yīng)型資料構(gòu)建3對(duì)SSR標(biāo)記與復(fù)壯30的連鎖圖 譜，利用MAPMARKER3.0計(jì)算各標(biāo)記與復(fù)壯30中的抗白粉病基因戶附5e間 的遺傳距離分別為4.9cM， 5.1cM和18.5cM，其中標(biāo)記Xwmc364175和Barc065 與復(fù)壯30基因表現(xiàn)為緊密連鎖。
本發(fā)明的有益效果是
1、 本發(fā)明在國際上首次獲得了 2個(gè)與小麥抗白粉病基因復(fù)壯30緊密連鎖 的SSR標(biāo)記；
2、 鑒定方便，提高效率。SSR標(biāo)記的特點(diǎn)是多態(tài)性強(qiáng)、共顯性、在整個(gè)基因組中隨機(jī)分布、穩(wěn)定性好、操作簡單；在小麥中，SSR已被證實(shí)是一種非 常有效的分子標(biāo)記。利用緊密連鎖標(biāo)記在早代就可以進(jìn)行選擇，提高選擇的準(zhǔn) 確性，縮小育種群體，并且不受環(huán)境、生長季節(jié)的限制，結(jié)合加代技術(shù)能大大 縮短育種年限、提高育種效率。
3、可用于克隆抗白粉病基因尸m^的研究。圖位克隆Pm5e基因的前提在 于獲得與/^&基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。標(biāo)記Xwmc364ns和Barc065與復(fù)壯 30基因表現(xiàn)為緊密連鎖。
以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
四

圖l從左至右分別為引物Barc065、 Xwmc364和Xwmc517在抗、感親本，抗、 感池間的擴(kuò)增結(jié)果。(M:標(biāo)準(zhǔn)分子量，S:感病池，R:抗病池，SP:感病親 本Chancellor, RP:抗病親本復(fù)壯30)。
圖2引物Xwmc364在F2分離群體中的部分?jǐn)U增結(jié)果(S表示感病單株，R表 示抗病單株，M表示標(biāo)準(zhǔn)分子量)。
圖3引物Barc065在F2分離群體中的部分?jǐn)U增結(jié)果(S表示感病單株，R表示 抗病單株，M表示標(biāo)準(zhǔn)分子量)。
圖4引物Xwmc517在F2分離群體中的部分?jǐn)U增結(jié)果(S表示感病單株，R表 示抗病單株，M表示標(biāo)準(zhǔn)分子量)。
圖5小麥染色體7B上戶m^基因與SSR標(biāo)記的連鎖圖譜。
五具體實(shí)施例方式
本試驗(yàn)所用材料冬小麥品種復(fù)壯30來源于陜西涇惠農(nóng)場，從涇陽30系統(tǒng) 選育而成，它攜有一對(duì)抗白粉病隱性基因，該基因?qū)ξ覈餍械陌追鄄⌒》N表現(xiàn)為高抗或免疫。本研究以復(fù)壯30、感病品種Chancellor為材料，利用&分離 群體分組分析法(BSA)對(duì)復(fù)壯30的抗白粉病基因進(jìn)行SSR標(biāo)記分析。
目前獲得的Pm5e的SSR標(biāo)記很少，而與其緊密連鎖的分子標(biāo)記還未見報(bào)道。
本研究篩選出3個(gè)與基因連鎖的SSR標(biāo)記，其中2個(gè)為緊密連鎖標(biāo) 記，它們可有效地用于戶附5e基因的標(biāo)記輔助選擇。以該標(biāo)記為路標(biāo)，可以進(jìn)行 P加^基因的精細(xì)定位或通過染色體步移法接近戶w5e基因，從而為P附5e基因 的克隆打下基礎(chǔ)。
步驟一分離群體的創(chuàng)建
復(fù)壯30xChancellor獲得F,種子，R自交，得F2分離群體。 步驟二白粉病抗性接種及鑒定
用當(dāng)前小麥白粉菌的優(yōu)勢小種N0.15號(hào)小種對(duì)抗、感親本、所有的F2單株 進(jìn)行兩次接種， 一次在三葉期， 一次在拔節(jié)期，同時(shí)以感病親本Chancellor為感 病對(duì)照。在感病對(duì)照充分發(fā)病的條件下，調(diào)査抗、感分離情況，每隔2-3天重復(fù) 調(diào)査一次，病級(jí)鑒定按盛寶欽等提出的反應(yīng)型標(biāo)準(zhǔn)(0-4級(jí))進(jìn)行。
步驟三F2代群體的分子標(biāo)記分析
(1) 用Dews (1992)的酚-氯仿提取法，稍有改動(dòng)，適于1.5ml離心管提取。 提取抗、感親本及F2代群體各單株的DNA;
(2) 首先用已定位在7B染色體上的56對(duì)SSR引物在抗病親本復(fù)壯30和 感病親本Chancellor間進(jìn)行多態(tài)性篩選，利用第一輪篩選出的在抗、感材料間具 有多態(tài)性差異的引物在抗、感池間進(jìn)行第二輪篩選
建立抗病池和感病池從復(fù)壯30 x Chancellor的F2代分離群體中隨機(jī)選取10個(gè)抗病單株的DNA等量混合，隨機(jī)選取10個(gè)感病單株的DNA等量混合。
SSR-PCR反應(yīng)體系PCR反應(yīng)體積為25jil，其中含有2.5nl 10xPCRBuffer(100 mmol/L Tris-HCI (pH 8.3)， 500 mmol/L KCI)， 2|il 30 ng膜板DNA， 0. 2^1 (5UV1) Taq酶,2^(25Mm)MgCl2，3nl (2.5nmol/L)引物,2^1 (2.5mmol/L)dNTP。
SSR擴(kuò)增程序擴(kuò)增反應(yīng)在Thermal Cyder 9600 PCR上進(jìn)行。先進(jìn)行一次 預(yù)擴(kuò)增95'C變性5分鐘，然后進(jìn)行30個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，每個(gè)循環(huán)95'C變性1分 鐘，55'C (復(fù)性溫度因引物不同而異)復(fù)性l分鐘，72'C延伸1分鐘，最后 72'C延伸5分鐘。
擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測擴(kuò)增產(chǎn)物在6%聚丙烯酰胺非變性凝膠上穩(wěn)壓110V電泳， 銀染顯色，然后用TaiionGis-2010型凝膠成像系統(tǒng)照相觀察，記錄結(jié)果
選擇在親本間和F2代群體的抗、感池間擴(kuò)增出相同有多態(tài)性的引物為與復(fù) 壯30連鎖的SSR分子標(biāo)記3對(duì)，將這3對(duì)分子標(biāo)記在F2代群體單株中擴(kuò)增獲 取群體各單株的抗、感反應(yīng)型資料。
步驟四分子標(biāo)記獲得
根據(jù)連鎖交換規(guī)律，利用擴(kuò)增獲得的F2代群體各單株基因型資料與田間鑒 定獲得的對(duì)應(yīng)各單株的抗、感反應(yīng)型資料構(gòu)建3對(duì)SSR標(biāo)記與復(fù)壯30的連鎖圖 譜，利用MAPMARKER3.0計(jì)算各標(biāo)記與復(fù)壯30中的抗白粉病基因P附56間 的遺傳距離分別為4.9cM， 5.1cM和18.5cM，其中標(biāo)記Xwmc364175和Barc065 與復(fù)壯30基因表現(xiàn)為緊密連鎖。 步驟五結(jié)果與分析
采用定位于小麥7B染色體上的56對(duì)SSR引物，在抗病親本復(fù)壯30和感 病親本Chancellor間進(jìn)行多態(tài)性篩選，均能擴(kuò)增出明顯可辨的帶,其中8對(duì)引物、的擴(kuò)增產(chǎn)物在抗、感材料間具有多態(tài)性差異，經(jīng)多次重復(fù)結(jié)果穩(wěn)定。從復(fù)壯30x Chancellor的F2代分離群體中隨機(jī)選取10個(gè)抗病單株將其DNA等量混合，隨 機(jī)選取10個(gè)感病單株將其DNA等量混合，分別建立抗病池和感病池。利用第 一輪篩選出的8對(duì)引物在抗、感池間進(jìn)行第二輪擴(kuò)增檢測，結(jié)果有3個(gè)引物 Xwmc364、 Barc065和Xwmc517在抗、感親本，抗、感池間和F;j分離群體的 抗、感單株間擴(kuò)增出特異譜帶，經(jīng)5次以上重復(fù)擴(kuò)增，結(jié)果穩(wěn)定。引物Xwmc364、 Barc065和Xwmc517，擴(kuò)增的差異片段長分別約為:175bp、 90bp和200bp。
將復(fù)壯30 xChancellorF2分離群體，種植于試驗(yàn)網(wǎng)室，并在12月上旬移栽于 溫室內(nèi)。利用15號(hào)白粉病菌種在苗期和拔節(jié)期分別接種，待充分發(fā)病后進(jìn)行抗 病性調(diào)査并記載反應(yīng)型。在調(diào)查的F2群體中，苗期共調(diào)査191株，其中62株表 現(xiàn)抗病，129株表現(xiàn)感病，經(jīng)chi-squaref檢驗(yàn)，抗病株感病株符合1: 3分離 比例(X2=2.126<x2-3.841)。成株期(灌漿期)共調(diào)査154株，其中，55株表現(xiàn) 抗病，99株表現(xiàn)感病，經(jīng)chi-squaref檢驗(yàn)，抗病株感病株符合l: 3分離比 例(3.536<x2(0,o5> -3.841)。進(jìn)一步證明Pm5e是1個(gè)抗白粉病隱性基因。利用篩 選出的3對(duì)特異引物對(duì)154株F2植株進(jìn)行擴(kuò)增，獲得了穩(wěn)定的特異標(biāo)記帶，分 別記為Xwmc364175、 Barc065鄰和Xwmc517200，利用MAPMARKER3.0計(jì)算各 標(biāo)記與復(fù)壯30中的抗白粉病基因P附5e間的遺傳距離分別為4.9cM、 5.1cM和 18.5cM (圖5)，其中標(biāo)記Xwmc364175和Barc065與復(fù)壯30基因表現(xiàn)為緊密連 鎖。引物Xwmc364、 Barc065和Xwmc517在抗、感親本，抗、感池間及F2分 離群體中的部分?jǐn)U增結(jié)果分別見圖l、圖2、圖3和圖4。
權(quán)利要求
1、小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記，其特征在于采用已定位在7B染色體上的56對(duì)SSR引物分析結(jié)果表明，8個(gè)引物能在親本間穩(wěn)定的揭示多態(tài)性差異，3個(gè)引物Xwmc364、Barc065和Xwmc517在抗、感親本，抗、感池間和F2分離群體的抗、感單株間擴(kuò)增出特異譜帶，經(jīng)5次以上重復(fù)擴(kuò)增，結(jié)果穩(wěn)定；3對(duì)引物所擴(kuò)增的特異譜帶分別記為Xwmc364175、Barc06590和Xwmc517200，它們與復(fù)壯30中的抗白粉病基因Pm5e間的遺傳距離分別為4.9cM，5.1cM和18.5cM，可作為Pm5e的SSR標(biāo)記；其中標(biāo)記Xwmc364175和Barc06590與抗病基因緊密連鎖，在對(duì)Pm5e的標(biāo)記輔助選擇中具有利用價(jià)值。
2、 權(quán)利要求1所述小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記的獲得方法，包括步驟一分離群體的創(chuàng)建復(fù)壯30xChancellor獲得F,種子，F(xiàn),自交，得F2分離群體； 注Chancellor為感白粉病親本；步驟二白粉病抗性接種及鑒定用當(dāng)前小麥白粉菌的優(yōu)勢小種N0.15號(hào)小種對(duì)抗、感親本、所有的F2單株 進(jìn)行兩次接種， 一次在三葉期， 一次在拔節(jié)期，同時(shí)以感病親本Chancellor為感 病對(duì)照，在感病對(duì)照充分發(fā)病的條件下，調(diào)查抗、感分離情況，每隔2-3天重復(fù) 調(diào)查一次，病級(jí)鑒定按盛寶欽等(l訴8)提出的反應(yīng)型標(biāo)準(zhǔn)(04級(jí))進(jìn)行；步驟三F2代群體的分子標(biāo)記分析U)用Devos (1992)的酚-氯仿提取法，稍有改動(dòng)，適于L5ml離心管提取， 提取抗、感親本及F2代群體各單株的DNA;(2)首先用已定位在7B染色體上的56對(duì)SSR引物在抗病親本復(fù)壯30和 感病親本Chancellor間進(jìn)行多態(tài)性篩選，利用第一輪篩選出的在抗、感材料間具有多態(tài)性差異的引物在抗、感池間進(jìn)行第二輪篩選-建立抗病池和感病池從復(fù)壯30 x Chancellor的F2代分離群體中隨機(jī)選取 10個(gè)抗病單株的DNA等量混合，隨機(jī)選取10個(gè)感病單株的DNA等量混合；SSR-PCR反應(yīng)體系PCR反應(yīng)體積為25nl，其中含有2.5nl 10xPCR Buffer(lOO mmol/L Tris-HCI (pH 8.3)， 500 mmol/L KCI)， 2^1 30 ng膜板DNA, 0. 2^1 (5U/pl) Taq酶，2nl (25Mm) MgCI2, 3^1 (2.5pmol/L)引物，2^1 (2.5mmol/L )d^fTP;SSR擴(kuò)增程序擴(kuò)增反應(yīng)在Thermal Cyder 9600 PCR上進(jìn)行，先進(jìn)行一次 預(yù)擴(kuò)增95X:變性5分鐘，然后進(jìn)行30個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，每個(gè)循環(huán)95"C變性1分 鐘，55°C (復(fù)性溫度因引物不同而異)復(fù)性l分鐘，72'C延伸1分鐘，最后 72t:延伸5分鐘；擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測擴(kuò)增產(chǎn)物在6%聚丙烯酰胺非變性凝膠上穩(wěn)壓110V電泳， 銀染顯色，然后用TanonGis-2010型凝膠成像系統(tǒng)照相觀察，記錄結(jié)果-選擇在親本間和F2代群體的抗、感池間擴(kuò)增出相同有多態(tài)性的引物為與復(fù) 壯30連鎖的SSR分子標(biāo)記3對(duì)，將這3對(duì)分子標(biāo)記在F2代群體單株中擴(kuò)增獲 取群體各單株的抗、感反應(yīng)型資料；步驟四；分子標(biāo)記獲得根據(jù)連鎖交換規(guī)律，利用擴(kuò)增獲得的F2代群體各單株基因型資料與田間鑒定獲得的對(duì)應(yīng)各單株的抗、感反應(yīng)型資料構(gòu)建3對(duì)SSR標(biāo)記與復(fù)壯30的連鎖圖 譜，利用MAPMARKER3,0計(jì)算各標(biāo)記與復(fù)壯30中的抗白粉病基因戶w5e間 的遺傳距離分別為4.9cM, 5.1cM和18.5cM，其中標(biāo)記Xwmc364175和Barc065與復(fù)壯30基因表現(xiàn)為緊密連鎖。
全文摘要
本發(fā)明小麥抗白粉病基因復(fù)壯30的SSR標(biāo)記及其獲得方法，屬于作物遺傳育種學(xué)領(lǐng)域。本研究篩選出3個(gè)與復(fù)壯30中的抗白粉病基因Pm5e連鎖的SSR標(biāo)記，其中2個(gè)為緊密連鎖標(biāo)記，它們可有效地用于復(fù)壯30中抗白粉病基因Pm5e的標(biāo)記輔助選擇。以該標(biāo)記為路標(biāo)，可以進(jìn)行Pm5e基因的精細(xì)定位或通過染色體步移法接近Pm5e基因，從而為Pm5e基因的克隆打下基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK101659988SQ20081013907
公開日2010年3月3日 申請(qǐng)日期2008年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月29日 公開號(hào)200810139073.發(fā)明者祥 李 申請(qǐng)人:祥 李 被以下專利引用 (1),