專利名稱：：樟芝的培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供一種樟芝培養(yǎng)方法，其為將樟芝菌種接種于段木，以大量栽培樟芝子實(shí)體。
背景技術(shù)：
：樟芝又稱牛樟芝或牛樟菇，屬于無褶菌目、多孔菌科、薄孔菌屬(J"^C^)、多年生蕈菌類，是臺灣特有一種真菌，僅生長于臺灣山區(qū)海拔200-2000公尺間，寄生于牛樟木(a朋awowwm/bwe/nya!'/^y)的中空心材內(nèi)壁，或枯死倒伏的牛樟樹木材潮濕表面。其學(xué)名原為爿w,raAacam//orato,但牛樟木中主要芳香物為r^pe"o!'&」而非rca/wp/iorv，后者為存在于香樟木的芳香物，故菇類培植專家張東柱、周文能先生特將牛樟木的學(xué)名正名為^"^oJ/a"'""awowecr.。樟芝子實(shí)體由牛樟木的中空樹干長出，生長最初呈扁平形，貼生于樹干內(nèi)部表面，之后子實(shí)體生長前緣會略巻離樹干而翹起，呈現(xiàn)馬蹄形或不規(guī)則形；其生長愈久，與樹干接觸愈緊，且逐漸木質(zhì)化或木拴化，外觀則呈現(xiàn)皮狀或鐘乳狀，帶有強(qiáng)烈苦味。一年生或多年生的子實(shí)體上表面呈橘紅色、橘褐色至淡肉色，之后變?yōu)楹稚?，表面平滑具同心圓、其菌孔為圓形或多角形，內(nèi)有孢子。子實(shí)體的菌孔表面新鮮時呈橘紅色、橘褐色至淡肉桂色，老化時則呈赭褐色。由于樟芝對于食物中毒，腹瀉，嘔吐，農(nóng)藥中毒等均具解毒作用，為一極佳解毒劑；亦被認(rèn)為其對癌癥或慢性病有不錯的療效。惟因樟芝樟樹本身有濃郁香氣，可驅(qū)蟲，一般真菌不能生長，僅樟芝能寄生于臺灣本土的牛樟樹上，而不會寄生于一般的樟樹、陰陽樟木等類似樹種，故產(chǎn)量本就極為稀少；再加上樟芝所生長的牛樟樹為一級保育樹種，樟芝屬于牛樟樹的附屬品，亦屬于禁采之列，造成樟芝在市場上更為供不應(yīng)求、奇貨可居，因此素有「臺灣紅寶石J之稱，僅產(chǎn)于苗栗南莊、高雄六龜?shù)鹊亍Ｒ恢币詠恚林β约膊〖鞍┌Y的療效令人趨之若鶩，傳頌不已，更增添了樟芝在市場上的價值。事實(shí)上，科學(xué)研究曾指出樟芝對鼠類淋巴血癌細(xì)胞P-388有明顯的毒殺性，樟芝菌絲體在熱水中可溶的多糖，能刺激正常成人血液中的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞激素，以殺死U-937人類淋巴癌細(xì)胞；也可以增加巨噬細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)脾臟細(xì)胞(Splenocytes)的增生以及介白素IL-5的分泌。此外，樟芝亦可抑制金黃色葡萄球菌及須瘡小芽癬菌的生長，及抑制多種腸道菌。牛樟菇基本上具有清血、解毒、益腎、保肝、整腸、強(qiáng)心、調(diào)壓、強(qiáng)壯、抗寒、抗菌、止咳、化痰、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗癌、消腫瘤，排毒等功能，實(shí)為一種功效廣泛的藥用真菌。為了使樟芝的食用普及化，平抑居高不下的市場價格，維護(hù)牛樟樹的長期保育，人工大量栽培樟芝為相關(guān)產(chǎn)業(yè)積極尋求突破的一個重大瓶頸。目前，樟芝人工栽培方法多以液態(tài)發(fā)酵培育出菌絲體或以固態(tài)方式培養(yǎng)菌絲體后，再將此菌種接種于太空包，以長成樟芝子實(shí)體。但以現(xiàn)有技術(shù)培養(yǎng)樟芝時，菌絲體的生長狀況不佳，利用太空包進(jìn)行子實(shí)體室內(nèi)培養(yǎng)時，包體較為松軟，也易生長雜菌。此外，以太空包培養(yǎng)而得的樟芝子實(shí)體相較于野生樟芝子實(shí)體薄，三萜類含量與野生樟芝仍有其明顯差異。再者，太空包難為土壤所分解，造成環(huán)保問題，目前由生物可分解材質(zhì)所制成的太空包雖已問世，但價格偏高，在真菌、菇類的大量栽培成本上，無異是一大負(fù)擔(dān)。最重要的，由于野生樟芝的孢子在感染段木時，具有明顯的宿主專一性，僅能感染牛樟木而寄生于其上，進(jìn)而長成子實(shí)體，故就現(xiàn)有技術(shù)而言，人工培養(yǎng)菌絲體無法感染不同樹種所鋸成的段木，僅是直接取用已受樟芝孢子感染的野生牛樟樹段木進(jìn)行子實(shí)體培養(yǎng)。即便如此，此種人工栽培方式亦不易長成具有多量且厚實(shí)子實(shí)體的樟芝培養(yǎng)物，其三碎類及多糖體含量亦屬有限。市售子實(shí)體多為單薄的一年生菌體，而肥厚多年生者極為少見，即可得知市場上對于樟芝需求日殷，而天然野生者又不易取得，樟芝在采集方面確有極大的壓力。因此，開發(fā)一種具有厚實(shí)子實(shí)體、富含三萜類的人工段木樟芝栽培技術(shù)，以有效供應(yīng)品質(zhì)優(yōu)良的樟芝，為值得深入研究的
技術(shù)領(lǐng)域：
。
發(fā)明內(nèi)容樟芝為臺灣特有菇菌，又名牛樟菇，僅生長于臺灣的牛樟木，此樹種為保育類植物，因此，生長于牛樟木中空樹干的樟芝，取得極為不易、產(chǎn)量極為稀少。本發(fā)明的目的在于提供一種樟芝菌絲體的固態(tài)培養(yǎng)方法，將樟芝菌種接種至含酵母培養(yǎng)基及木屑的器皿中培養(yǎng)，以形成菌絲體。本發(fā)明的另一目的在于提供一種樟芝菌絲體的液態(tài)培養(yǎng)方法，將一樟芝菌種接種至含酵母培養(yǎng)基的器皿中培養(yǎng)，以形成菌絲體。本發(fā)明的目的還在于提供一種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，可將含有樟芝菌絲體的基質(zhì)接種至段木，培養(yǎng)一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。本發(fā)明的目的還在于提供一種樟芝子實(shí)體，其藉由所述樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)而成，含有豐富三碎類，為深具生物利用潛力的藥用真菌。為達(dá)上述目的，本發(fā)明提供一種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法，該方法包含下列步驟(a)取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；(b)加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌；(c)將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；(d)將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(e)取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器皿中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體。上述培養(yǎng)方法為固態(tài)培養(yǎng)方法。優(yōu)選地，,斤述步驟(a)的培養(yǎng)基包含1~8%津唐、0.06~1.2%酵母、0.01~0.4%硫酸鎂及0.01~0.4%磷酸二氬鉀，該含酵母的培養(yǎng)基需進(jìn)行7-14天發(fā)酵。優(yōu)選地，所述步驟(c)于濕度60-90%(最優(yōu)選80%)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。優(yōu)選地，所述步驟(e)的樟芝菌種在203(TC培養(yǎng)。本發(fā)明的還提供一種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法，該方法包含下列步驟(a)取含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；(b)將所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基置于器皿中；(c)將裝有培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(d)取樟芝菌種接種至所述滅菌過的培養(yǎng)基中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體。該培養(yǎng)方法為液態(tài)培養(yǎng)方法。優(yōu)選地，所述步驟(a)的培養(yǎng)基包含糖、酵母、硫酸鎂和磷酸二氫鉀；更優(yōu)選包含:1~8%糖、0.06~1.2%酵母、0.01~0.4%硫酸鎂及0.01~0.4%磷酸二氫鉀，該含酵母的培養(yǎng)基需進(jìn)行7-14天的發(fā)酵。優(yōu)選地，所述步驟(d)的樟芝菌種在2030。C培養(yǎng)。本發(fā)明還提供一種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，包含下列步驟(a)將含有樟芝菌絲體的基質(zhì)接種至一段木；(b)將所述已接種菌種的段木置于溫度535°C、濕度65~85%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；(c)清除段木上殘余的基質(zhì)后，將段木置溫度15~35°C、濕度80~98%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。該方法所使用的樟芝菌絲體可使用本發(fā)明前述方法培養(yǎng)的菌絲體或其它方式培養(yǎng)的菌絲體，不受特別限制。優(yōu)選地，所述步驟(a)的含有樟芝菌絲體的基質(zhì)包含固態(tài)基質(zhì)或液態(tài)基質(zhì)，該固態(tài)基質(zhì)可為木屑。優(yōu)選地，所述步驟(b)的段木的培養(yǎng)環(huán)境為溫度25~30。C、濕度75~85%,且至少培養(yǎng)一個月以上。優(yōu)選地，所述步驟(c)的培養(yǎng)環(huán)境為溫度26~30°C、濕度80~98%,且至少培養(yǎng)三個月以上。優(yōu)選地，所述步驟(b)及(c)在二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)。本發(fā)明還提供一種樟芝的培養(yǎng)方法，包含下列步驟(a)取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；(b)加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌；(c)將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；(d)將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(e)取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器皿中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體；(f)將所述含有樟芝菌絲體的木屑接種至一段木；(g)將所述已接種菌種的段木置于一溫度535。C、濕度6585%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；及(h)清除段木上殘余的木屑后，將段木置溫度15~35°C、濕度80~98%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。優(yōu)選地，所述步驟(c)的器皿中的濕度為60~90%，更優(yōu)選為80%。優(yōu)選地，所述步驟(g)的段木培養(yǎng)環(huán)境為溫度2530。C、濕度7585%，且二氧化碳濃度低于2%。優(yōu)選地，所述步驟(h)的段木培養(yǎng)環(huán)境為溫度2630。C、濕度90~98%且二氧化碳濃度低于2%。優(yōu)選地，所述步驟(g)的段木培養(yǎng)時間為至少一個月以上。優(yōu)選地，所述步驟(h)的樟芝子實(shí)體的栽培時間為至少三個月以上。本發(fā)明的還提供一種樟芝子實(shí)體，其由上述樟芝培養(yǎng)方法培養(yǎng)而成。綜上可知，本發(fā)明所提供的樟芝培養(yǎng)方法，為可利用人工發(fā)酵培養(yǎng)基所培養(yǎng)的樟芝菌絲體接種至多種樹種所鋸成的段木上；藉由突破其寄生宿主的專一性而達(dá)到大量栽培樟芝子實(shí)體的目的，以滿足市場上對樟芝的迫切需求、增加其在生技醫(yī)藥應(yīng)用的范圍。圖1:本發(fā)明利用香樟木段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的影像圖；圖2:本發(fā)明利用相思樹段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的影像圖；圖3:本發(fā)明利用牛樟木段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的影像圖；圖4:樟芝市售品(膠嚢)的HPLC分析圖譜；圖5:野生樟芝的HPLC分析圖鐠；圖6:本發(fā)明利用香樟木段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的HPLC分析圖語；圖7:本發(fā)明利用相思樹段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的HPLC分析圖鐠；圖8:本發(fā)明利用牛樟木段木培養(yǎng)樟芝子實(shí)體的HPLC分析圖語。具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖詳細(xì)說明本發(fā)明，但不限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。本發(fā)明利用樟芝菌絲體人工接種段木的方式，提高在段木上出菇的產(chǎn)率，以大量培育活性與成分同于或優(yōu)于野生樟芝的厚實(shí)子實(shí)體。尤其天然牛樟芝僅生長于牛樟木，若能使樟芝菌種成功接種于不同樹種所裁切而成的段木，則對于人工段木栽培技術(shù)而言，不畬為一項(xiàng)重大的突破。本發(fā)明提供一種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法，包含下列步驟取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天，由于經(jīng)過發(fā)酵，可使培養(yǎng)基中的微生物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，有助于后續(xù)樟芝培養(yǎng)物對于營養(yǎng)成分的利用；再加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌；將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器亞滅菌；最后，取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器皿中，并于5-35。C下培養(yǎng)形成活性強(qiáng)的菌絲體。本發(fā)明還提供一種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，包含下列步驟先將含有樟芝菌絲體的基質(zhì)接種至一段木；再將所述已接種菌種的段木置于一溫度5~35°C、濕度65~85%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；之后，清除段木上殘余的基質(zhì)后，將段木置溫度15~35°C、濕度80~98%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。所述含有樟芝菌絲體的基質(zhì)可為固態(tài)或液態(tài)基質(zhì)。本發(fā)明所使用的樟芝菌絲體可使用本發(fā)明前述方法培養(yǎng)的菌絲體或其它方式培養(yǎng)的菌絲體，不受特別限制。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，包含下列步驟先取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌；將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器亞中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體；將所述含有樟芝菌絲體的木屑接種至一段木；將所述已接種菌種的段木置于一溫度5~35°C、濕度65~85%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；并清除段木上殘余的木屑后，將段木置溫度1535。C、濕度80~98%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。(如香樟、冇樟)、大陸樟或雜木，例如湘思樹、土肉桂、杉木、楠木、楓木、蕃石榴樹、華木科、金縷梅科、殼斗科等樹種，尤以木頭材質(zhì)堅硬的樹種為佳。本發(fā)明的方法可適用于任何樟芝菌種，例如已寄存于食品科學(xué)研究所的編號:BCRC35396、BCRC35716、BCRC35398或BCRC36401等可自由分讓的樟芝菌種皆可。實(shí)施例一:利用香樟木段木培養(yǎng)樟的子實(shí)體取一含酵母的培養(yǎng)基，于28'C下發(fā)酵14天，由于經(jīng)過發(fā)酵，可使培養(yǎng)基中的微生物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，有助于后續(xù)樟芝培養(yǎng)物對于營養(yǎng)成分的利用；再加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌，再將所述木屑和培養(yǎng)基置于一三角瓶中，并將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶于高溫下滅菌，最后，取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶中，并于28。C下培養(yǎng)2.5個月，即形成菌絲體。將所述培養(yǎng)的含有樟芝菌絲體的木屑接種于該香樟木段木上，再將所述已接種菌種的段木置于一溫度5~35°C、濕度6585%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)2.5個月，待段木已感染樟芝菌絲體后清除段木上殘余的木屑，再將段木置溫度15~35°C、濕度80~98%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下栽培7個月后，即可形成樟芝子實(shí)體，如圖1所示，由圖l可明顯看出，利用本發(fā)明的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)的樟芝子實(shí)體，具有厚實(shí)的子實(shí)體，已相當(dāng)接近天然野生的樟芝子實(shí)體型態(tài)，至于其三辟類成分含量分析詳述如后。實(shí)施例二:利用相思樹段木培養(yǎng)樟的子實(shí)體取一含酵母的培養(yǎng)基，于28。C下發(fā)酵14天，由于經(jīng)過發(fā)酵，可使培養(yǎng)基中的微生物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，有助于后續(xù)樟芝培養(yǎng)物對于營養(yǎng)成分的利用；再加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌，再將所述木屑和培養(yǎng)基置于一三角瓶中，并將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶于高溫下滅菌，最后，取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體培養(yǎng)3個月。將所述培養(yǎng)的含有樟芝菌絲體的木屑接種于該相思樹段木上，再將所述已接種菌種的段木置于一溫度535°C、濕度6585%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)3個月，待段木已感染樟芝菌絲體后清除段木上殘余的木屑，再將段木置溫度15~35°C、濕度80~98%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下栽培6個月后，即可形成樟芝子實(shí)體，如圖2所示，由圖2可明顯看出，利用本發(fā)明的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)的樟芝子實(shí)體，具有厚實(shí)的子實(shí)體，已相當(dāng)接近天然野生的樟芝子實(shí)體型態(tài)，至于其三薛類成分含量分析詳述如后。實(shí)施例三:利用牛樟木段木培養(yǎng)樟的子實(shí)體取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天，由于經(jīng)過發(fā)酵，可使培養(yǎng)基中的微生物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，有助于后續(xù)樟芝培養(yǎng)物對于營養(yǎng)成分的利用；再加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基并攪拌，再將所述木屑和培養(yǎng)基置于一三角瓶中，并將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶于高溫下滅菌，最后，取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的三角瓶中，并于5-35。C下培養(yǎng)2.5個月，即形成菌絲體。再將所述培養(yǎng)的含有樟芝菌絲體的木屑接種于該牛樟木段木上，再將所述已接種菌種的段木置于一溫度5~35。C、濕度65~85%且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下培養(yǎng)2.5個月，待段木已感染樟芝菌絲體后清除段木上殘余的木屑，再將段木置溫度15~35°C、濕度80~98°/。且二氧化碳濃度低于2%的環(huán)境下栽培8個月后，即可形成樟芝子實(shí)體，如圖3所示，由圖3可明顯看出，利用本發(fā)明的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)的樟芝子實(shí)體，具有厚實(shí)的子實(shí)體，已相當(dāng)接近天然野生的樟芝子實(shí)體型態(tài)，至于其三萜類成分含量分析詳述如后。實(shí)施例四:比較本發(fā)明培養(yǎng)的樟芝、野生樟芝以及市售樟芝的成分含量利用高壓液相層析(HPLC)分析各檢品的指紋圖語，基于同品種具有相同成分的原則，而使用此指紋圖語比對各檢品之間的物種同源性，并分析比對成分總含量，以進(jìn)行品質(zhì)評價評估。檢液制備本實(shí)驗(yàn)是針對野生樟芝子實(shí)體、樟芝市售品(67mg/ml)膠嚢內(nèi)含粉末以及利用本發(fā)明培養(yǎng)方法于三種不同段木-牛樟木、香樟木、相思樹…人工栽培樟芝子實(shí)體(所述實(shí)施例一至三)等五種檢體進(jìn)行分析。首先，將上述五種檢品細(xì)切或研粉，置于60。C恒溫烘箱連續(xù)干燥20小時，取出后置于千燥器放冷；再將各檢品精確秤量800毫克置于25毫升定量瓶中，并精確加入15毫升曱醇，蓋緊瓶蓋。之后，在超音波震蕩器內(nèi)震蕩抽取3小時，并將抽取液經(jīng)0.45inm濾膜過濾后，取得的澄清液體即可作為分析用檢液。高壓液相層析本分析使用的高壓液相層析儀為HITACHID-7000系列泵L-7100、偵測儀(Detector):L-7420、自動進(jìn)樣器(Autosampler):L-7200;其中，層析管RP-18管柱長度250mm,內(nèi)徑4.6mm(粒徑5iam)。分析條件為流速每分鐘lmL，檢測吸光波長為UV210nm，注入體積25ML，分析終止的時間為190分鐘。移動相(流動相)使用兩種溶媒系統(tǒng)做梯度沖提(Gradient),移動相A:10%乙腈(內(nèi)含1%磷酸)，移動相B:100%乙腈(內(nèi)含1%磷酸)，梯度沖提(或稱為梯度洗脫)條件如表1所示。表l.HPLC移動相梯度沖提條件<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>吸收峰面積(PeakArea)由內(nèi)建軟件自動計算，其中，吸收峰面積剔除值(Peakrejectionlevel)設(shè)定為200,000,且凡吸收峰面積未達(dá)200,000的視為噪聲，將舍棄不予列入計算；吸收峰面積達(dá)到200,000而吸收峰呈現(xiàn)不規(guī)則形狀者，亦經(jīng)人工篩選而舍棄；最后將各分析用檢液可信賴的吸收峰面積加合(加總)，并互相比較，以進(jìn)行品質(zhì)評估。如下列表2所示，野生樟芝子實(shí)體的吸收峰總面積積分值為139,983,370,相思樹段木人工栽培樟芝子實(shí)體的總面積積分值為76,165,715,香樟木段木人工栽培樟芝子實(shí)體的總面積積分值為111,356,206,牛樟木段木人工栽培樟芝子實(shí)體的總面積積分值為152,760,267;而樟芝市售品膠囊的總面積積分值為21,126,138，與上述四種檢品相去甚遠(yuǎn)。表2.不同種類的人工栽培樟芝子實(shí)體檢液的吸收峰面積<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*吸收峰面積剔除值200,000;、己錄時間限制180分鐘結(jié)果取上述五種檢品，將樟芝市售品(膠嚢)、野生樟芝和利用三種不同段木--牛樟木、香樟木、相思樹進(jìn)行人工栽培的樟芝子實(shí)體的指紋圖鐠比對后(參見圖4至圖8)，可觀察到前述三種人工栽培的樟芝子實(shí)體均與野生樟芝子實(shí)體的指紋圖譜在相同位置(即在相同的滯留時間)呈現(xiàn)相同的吸光基團(tuán)，僅吸光強(qiáng)度互有差異而已；而樟芝市售品的指紋圖譜與上述四種檢品的指紋圖語有明顯的差異，且吸光強(qiáng)度極其微弱。圖5至圖8的結(jié)果非常清楚的顯示出，利用牛樟木、香樟發(fā)明使用不同段木所栽培的樟芝子實(shí)體具有與野生樟芝子實(shí)體相類似的三萜類成分和相同的生理活性和用途。由上述分析結(jié)果可知，本發(fā)明提供一種可大量人工栽培樟芝子實(shí)體的方法，且所培養(yǎng)出來的樟芝子實(shí)體厚實(shí)，其活性與成分同于或優(yōu)于野生樟芝或市售人工培養(yǎng)芝樟，為人工培養(yǎng)樟芝子實(shí)體技術(shù)的一大突破。其它實(shí)施態(tài)樣雖然本發(fā)明已以優(yōu)選實(shí)施例揭露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技藝者，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，當(dāng)可作各種的更動與潤飾，因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍，當(dāng)權(quán)利要求書所界定的內(nèi)容為準(zhǔn)。權(quán)利要求1、一種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法，其包含下列步驟(a)取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35℃下發(fā)酵3-30天；(b)加木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基中并攪拌；(c)將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；(d)將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(e)取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器皿中，并于5～35℃培養(yǎng)形成菌絲體。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其為一種固態(tài)培養(yǎng)方法。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述步驟(c)器亞的濕度為60~90%。4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述步驟(c)器皿的濕度為80%。5.—種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法，其包含下列步驟(a)取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；(b)將所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基置于一器皿中；(c)將裝有培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(d)取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的培養(yǎng)基中，并于5~35。C下培養(yǎng)形成菌絲體。6.如權(quán)利要求5所述的方法，其為一種液態(tài)培養(yǎng)方法。7.如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中所述步驟(a)為發(fā)酵7-14天。8.如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中所述培養(yǎng)基的成分包含糖、酵母、硫酸鎂和磷酸二氬鉀。9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述培養(yǎng)基成分包含1~8%糖、0.06~1.2%酵母、0.01~0.4%石克酸4美和0,01~0.4%石舞酸二氫鉀。10.如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中所述樟芝菌種在2030C培養(yǎng)。11.一種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，其包含下列步驟(a)將含有樟芝菌絲體的基質(zhì)接種至段木；(b)將所述已接種菌種的段木置于溫度5~35°C、濕度65~85%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；及(c)清除段木上殘余的基質(zhì)后，將段木置溫度15-35。C、濕度80-98%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述步驟(a)的含有樟芝菌絲體的基質(zhì)包含固態(tài)基質(zhì)或液態(tài)基質(zhì)。13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述固態(tài)基質(zhì)為木屑。14.如權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(b)的段木在溫度2530。C、濕度7585%的環(huán)境中培養(yǎng)。15.如權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(c)的段木在溫度2630。C、濕度90~98%的環(huán)境下栽培。16.如權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(b)的培養(yǎng)時間為至少一個月。17.如權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(c)的樟芝子實(shí)體的栽培時間為至少三個月。18.—種樟芝子實(shí)體的培養(yǎng)方法，其包含下列步驟(a)取一含酵母的培養(yǎng)基，于5-35。C下發(fā)酵3-30天；(b)加入木屑于所述發(fā)酵后的培養(yǎng)基中并攪拌；(c)將所述木屑和培養(yǎng)基置于一器皿中；(d)將所述裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；及(e)取一樟芝菌種接種至所述滅菌過的含有木屑和培養(yǎng)基的器皿中，并于535。C下培養(yǎng)形成菌絲體；(f)將所述含有樟芝菌絲體的木屑接種至段木；(g)將所述已接種菌種的段木置于溫度5~35°C、濕度65~85%的環(huán)境下培養(yǎng)一段時間；及(h)清除段木上殘余的木屑后，將段木置溫度1535。C、濕度80~98%的環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體。19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中步驟(c)的器皿的濕度為60-90%。20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中步驟(c)的器皿的濕度為80%。21.如權(quán)利要求18所述的方法，其中步驟(g)的段木在溫度25~30。C、濕度75~85%的環(huán)境中培養(yǎng)。22.如權(quán)利要求18所述的方法，其中步驟(h)的段木在溫度2630。C、濕度90~98%的環(huán)境下栽培。23.如權(quán)利要求18所述的方法，其中步驟(g)的培養(yǎng)時間為至少一個月。24.如權(quán)利要求18所述的方法，其中步驟(h)的樟芝子實(shí)體的栽培時間為至少三個月。25.—種樟芝子實(shí)體，其為根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法培養(yǎng)而成。全文摘要本發(fā)明提供一種樟芝子實(shí)體培養(yǎng)方法，包括取含酵母的培養(yǎng)基，5-35℃下發(fā)酵3-30天；加入木屑于發(fā)酵后的培養(yǎng)基中并攪拌；將木屑和培養(yǎng)基置于器皿中；將裝有木屑和培養(yǎng)基的器皿滅菌；取樟芝菌種接種至滅菌過的含木屑和培養(yǎng)基的器皿中，5-35℃下培養(yǎng)形成菌絲體；將含有樟芝菌絲體的木屑接種至段木；將已接種菌種的段木置于溫度5～35℃、濕度65～85％的環(huán)境下培養(yǎng)；清除段木上殘余的木屑后，將其置溫度15～35℃、濕度80～98％環(huán)境下栽培一段時間后即可形成樟芝子實(shí)體；本發(fā)明還提供一種樟芝菌絲體的培養(yǎng)方法和由上述方法培養(yǎng)得到的樟芝子實(shí)體，本發(fā)明方法培養(yǎng)的樟芝子實(shí)體，具有子實(shí)體厚實(shí)且三萜類的含量與野生樟芝相近的特點(diǎn)。文檔編號C12N1/14GK101191120SQ20061016276公開日2008年6月4日申請日期2006年11月28日優(yōu)先權(quán)日2006年11月28日發(fā)明者蔡達(dá)銘申請人:蔡達(dá)銘