專利名稱：硫酸鹽還原菌測(cè)試液及其測(cè)試瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細(xì)菌的測(cè)試方法及其測(cè)試器具，特別是涉及一種水質(zhì)、污泥、沉積物等其它物質(zhì)中硫酸鹽還原菌的測(cè)試液及其測(cè)試瓶。
背景技術(shù)：
硫酸鹽還原菌是一類有機(jī)化能異養(yǎng)細(xì)菌，在自然界分布極廣。在厭氧條件下，硫酸鹽還原菌更多的存在于供水、排水管道中水、污泥和沉積物中，它能夠利用附著于金屬表面的有機(jī)物作為碳源，并利用細(xì)菌生物膜內(nèi)產(chǎn)生的氫，將硫酸鹽還原成硫化氫。硫化氫腐蝕性極強(qiáng)，能與金屬基體發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致化學(xué)腐蝕。反應(yīng)生成的鐵硫化物沉積于金屬表面，改變了基體金屬的表面性質(zhì)。同時(shí)，在環(huán)境中離子(尤其是Cl-)的協(xié)同作用下，可能引起更嚴(yán)重的腐蝕。因此，人們普遍認(rèn)為硫酸鹽還原菌能誘發(fā)腐蝕，在金屬細(xì)菌腐蝕中占主導(dǎo)地位。
國(guó)內(nèi)外針對(duì)硫酸鹽還原菌的生理、生態(tài)和生化特征及其腐蝕機(jī)理和防護(hù)措施等開展了一系列的研究，但目前，水質(zhì)樣品中硫酸鹽還原菌的測(cè)試方法尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，大多數(shù)采用傳統(tǒng)的多管發(fā)酵法，多管發(fā)酵法中涉及到的主要儀器為高壓蒸氣滅菌器、恒溫培養(yǎng)箱、無(wú)菌操作臺(tái)、電子天平、酒精燈、鎳鉻絲接種棒、培養(yǎng)皿、試管、吸管、燒杯、錐形瓶和采樣瓶等。
多管發(fā)酵法的主要操作步驟為第一步 采集水樣以無(wú)菌操作方法用滅菌吸管吸取一定量的水樣；第二步 無(wú)菌水的制備；第三步 器皿、試劑滅菌將各種器皿清洗后放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)，滅菌一定時(shí)間；第四步 培養(yǎng)基的配制檢驗(yàn)并稱量各種試劑，以無(wú)菌水溶解配制；第五步 逐級(jí)稀釋和接種水樣；第六步 細(xì)菌的培養(yǎng)；第七步 菌落計(jì)數(shù)與報(bào)告。
傳統(tǒng)的測(cè)定方法多管發(fā)酵法，該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及操作人員要求極為嚴(yán)格，包括從采樣技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室條件、儀器設(shè)備、器皿、試劑質(zhì)量、操作人員的專業(yè)知識(shí)、操作技能、實(shí)際經(jīng)驗(yàn)直至質(zhì)量控制等全部監(jiān)測(cè)過程及控制程序。操作程序繁瑣、復(fù)雜、冗長(zhǎng)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)的不慎都有可能造成測(cè)試結(jié)果的誤差。該多管發(fā)酵法測(cè)定過程一般需要20天。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的克服現(xiàn)有技術(shù)中硫酸鹽還原菌測(cè)試方法中的不足，提供種高選擇性、快速、具有較長(zhǎng)儲(chǔ)存期的簡(jiǎn)易硫酸鹽還原菌測(cè)試液及其測(cè)試瓶。
本發(fā)明的技術(shù)方案本發(fā)明提供一種硫酸鹽還原菌測(cè)試液，該測(cè)試液為高選擇性液體培養(yǎng)基，以重量含量為單位，由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1.0～10‰和蒸餾水955.5～991.8‰組成。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液是由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～5‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～0.5‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽5～10‰和蒸餾水962～987.8‰組成。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液是由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽5～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.5～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1～5‰和蒸餾水961～987.4‰組成。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液中乳酸鹽為乳酸鈉或乳酸鈣；氯化物為氯化鈉或氯化鉀；硫酸鹽為硫酸鎂或硫酸亞鐵銨；亞鐵鹽為硫酸亞鐵銨；維生素為維生素C；乙酸鹽為乙酸鈉。
一種硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，該測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，測(cè)試瓶中裝有硫酸鹽還原菌測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比為H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶中所述的測(cè)試液，以重量含量為單位，由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1.0～10‰和蒸餾水955.5～991.8‰組成。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，其中所述的測(cè)試液由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～5‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～0.5‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽5～10‰和蒸餾水962～987.8‰組成。
所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，其中所述的測(cè)試液由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽5～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.5～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1～5‰和蒸餾水961～987.4‰組成。
本發(fā)明的測(cè)試瓶可以選用5～15毫升西林瓶或口服液瓶。
使用本發(fā)明硫酸鹽還原菌測(cè)試液及其測(cè)試瓶用來測(cè)定水質(zhì)時(shí)的操作方法為用無(wú)菌注射器將水質(zhì)樣品吸取1.0(或0.5)毫升，注入到測(cè)試瓶中，搖勻后放置于35℃干燥箱或水浴鍋中14天，根據(jù)瓶中液體的變化來判斷陰性或陽(yáng)性反應(yīng)。瓶中液體本身無(wú)顏色，若無(wú)變化為陰性，出現(xiàn)黑色沉淀為陽(yáng)性，此為定性分析；按此方法做2組或3組平行樣，按逐級(jí)稀釋法查MPN表，即可進(jìn)行定量測(cè)試。污泥等其它固體樣品則須用水溶解或浸提，處理成液體后再按上述方法進(jìn)行測(cè)定。
本發(fā)明的積極有益效果1.本發(fā)明的測(cè)試液密封貯存于玻璃瓶中，有較長(zhǎng)貯存期，省去多管發(fā)酵法第二、三、四的操作步驟，只須配置無(wú)菌注射器即可完成全部操作，檢測(cè)時(shí)間僅需14天，大大減輕了勞動(dòng)強(qiáng)度，縮短了測(cè)試時(shí)間。
2.本發(fā)明若與硫化氫試驗(yàn)測(cè)試管配合使用，則檢測(cè)時(shí)間可以減少至3～5天。
3.本發(fā)明免除了傳統(tǒng)方法中必須的無(wú)菌環(huán)境條件，使得生化檢驗(yàn)可以在一般環(huán)境中進(jìn)行，節(jié)省大量的基礎(chǔ)建設(shè)投資。
4.細(xì)菌代謝產(chǎn)物與測(cè)試液中試劑的特征沉淀反應(yīng)是在無(wú)菌的細(xì)菌測(cè)試瓶中自動(dòng)進(jìn)行，可避免傳統(tǒng)方法多步驟操作過程中易引起的污染和干擾，從而大大提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性；本方法的最低檢出限符合國(guó)家水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)要求。
5.本發(fā)明可應(yīng)用于各種水質(zhì)中硫酸鹽還原菌的簡(jiǎn)易快速測(cè)試，非專業(yè)人員數(shù)分鐘即可學(xué)會(huì)操作。
6.本發(fā)明將細(xì)菌檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品化、商品化，將預(yù)先配置好的測(cè)定液封裝于透明玻璃瓶中，可直接用于細(xì)菌的測(cè)定，攜帶、使用方便，測(cè)定簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確，保存時(shí)間長(zhǎng)。可用于水質(zhì)、食品、藥品、化妝品等多種物質(zhì)的細(xì)菌定性、定量檢測(cè)。
四

圖1硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶的結(jié)構(gòu)示意圖五具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例僅為了進(jìn)一步說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例一硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉2‰，氯化鈉10‰，硫酸鎂1‰，酵母浸膏3‰，硫酸亞鐵0.5‰，維生素C 0.1‰，乙酸鈉5‰和蒸餾水978.4‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為3厘米，留空高度H2為1.5厘米。
實(shí)施例二硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈣10‰，氯化鉀3‰，硫酸鎂5‰，酵母浸膏1‰，硫酸亞鐵銨0.1‰，維生素C 0.5‰，乙酸10‰和蒸餾水970.4‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為4厘米，留空高度H2為1.2厘米。
實(shí)施例三硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉6‰，氯化鉀7‰，硫酸鎂3‰，酵母浸膏2‰，硫酸亞鐵銨0.3‰，維生素C 0.3‰，乙酸8‰和蒸餾水973.4‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為3.5厘米，留空高度H2為2.8厘米。
實(shí)施例四硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈣4‰，氯化鈉5‰，硫酸鎂7‰，酵母浸膏3‰，硫酸亞鐵銨1.0‰，維生素C 0.2‰，乙酸5‰和蒸餾水974.8‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為4.5厘米，留空高度H2為2.7厘米。
實(shí)施例五硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉8‰，氯化鉀8‰。硫酸鎂10‰，酵母浸膏1‰，硫酸亞鐵銨0.5‰，維生素C 0.4‰，乙酸鈉1.0‰和蒸餾水971.1‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為5厘米，留空高度H2為2厘米。
實(shí)施例六硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉2‰，氯化鈉10‰，硫酸鎂5‰，酵母浸膏2‰，硫酸亞鐵0.7‰，維生素C 0.3‰，乙酸鈉3‰和蒸餾水977‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為3厘米，留空高度H2為1.5厘米。
實(shí)施例七硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈣2‰，氯化鉀10‰，硫酸鎂1‰，酵母浸膏3‰，硫酸亞鐵銨0.1‰，維生素C 0.5‰，乙酸10‰和蒸餾水973.4‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為4厘米，留空高度H2為1.2厘米。
實(shí)施例八硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉10‰，氯化鉀3‰，硫酸鎂10‰，酵母浸膏1‰，硫酸亞鐵銨1‰，維生素C 0.1‰，乙酸1‰和蒸餾水973.9‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為3.5厘米，留空高度H2為2.8厘米。
實(shí)施例九硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈣5‰，氯化鈉8‰，硫酸鎂3‰，酵母浸膏2‰，硫酸亞鐵銨0.3‰，維生素C 0.2‰，乙酸3‰和蒸餾水978.5‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5-7.2，按每瓶9.0毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為9.0毫升，測(cè)試液的高度H1為4.5厘米，留空高度H2為2.7厘米。
實(shí)施例十
硫酸鹽還原菌測(cè)試液配方為由乳酸鈉7‰，氯化鉀5‰。硫酸鎂7‰，酵母浸膏3‰，硫酸亞鐵銨0.7‰，維生素C 0.3‰，乙酸鈉7‰和蒸餾水970‰組成。
將上述測(cè)試液配好后調(diào)節(jié)PH值為6.5～7.2，按每瓶4.5毫升封裝于無(wú)菌、無(wú)色透明小玻璃瓶中，經(jīng)高壓滅菌即可。
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶實(shí)施方法參見圖1，圖中1為鋁皮蓋，2為膠塞，3為等截面玻璃瓶，4為測(cè)試液；H1為測(cè)試液的高度，H2為留空高度，本實(shí)施例中測(cè)試瓶為4.5毫升，測(cè)試液的高度H1為5厘米，留空高度H2為2厘米。
權(quán)利要求
1.一種硫酸鹽還原菌測(cè)試液，該測(cè)試液為高選擇性液體培養(yǎng)基，其特征是以重量含量為單位，由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1.0～10‰和蒸餾水955.5～991.8‰組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液，其特征是由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～5‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～0.5‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽5～10‰和蒸餾水962～987.8‰組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液，其特征是由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽5～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.5～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1～5‰和蒸餾水961～987.4‰組成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試液，其特征是所述乳酸鹽為乳酸鈉或乳酸鈣；氯化物為氯化鈉或氯化鉀；硫酸鹽為硫酸鎂或硫酸亞鐵銨；亞鐵鹽為硫酸亞鐵銨；維生素為維生素C；乙酸鹽為乙酸鈉。
5.一種硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，該測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，其特征是測(cè)試瓶中裝有硫酸鹽還原菌測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比為H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，其特征是所述的測(cè)試液，以重量含量為單位，由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1.0～10‰和蒸餾水955.5～991.8‰組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，其特征是所述的測(cè)試液由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～5‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～0.5‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽5～10‰和蒸餾水962～987.8‰組成。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶，其特征是所述的測(cè)試液由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽5～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.5～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1～5‰和蒸餾水961～987.4‰組成。
全文摘要
本發(fā)明提供一種硫酸鹽還原菌測(cè)試液及其測(cè)試瓶。硫酸鹽還原菌測(cè)試液以以質(zhì)量含量為單位，由乳酸鹽2～10‰，氯化物3～10‰，硫酸鹽1～10‰，酵母浸膏1～3‰，亞鐵鹽0.1～1.0‰，維生素0.1～0.5‰，乙酸或乙酸鹽1.0～10‰和蒸餾水955.5～991.8‰組成。硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶為帶膠塞和鋁皮蓋的無(wú)菌、無(wú)色透明玻璃瓶，測(cè)試瓶中裝有硫酸鹽還原菌測(cè)試液，測(cè)試液在瓶中的高度H
文檔編號(hào)C12M1/34GK101029328SQ20061012831
公開日2007年9月5日 申請(qǐng)日期2006年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月30日
發(fā)明者劉五一, 白莉, 崔紀(jì)周, 李樹華, 張玉忠 申請(qǐng)人:白莉