專利名稱：聚－γ－谷氨酸作為蘇云金芽胞桿菌制劑保護(hù)劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物農(nóng)藥制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種聚-γ-谷氨酸作為蘇云金芽胞桿菌制劑保護(hù)劑的用途以及在制備蘇云金芽胞桿菌制劑中作為保護(hù)劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
資源與環(huán)境問(wèn)題已成為當(dāng)前世界人類所面臨的重大問(wèn)題。據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織調(diào)查，全世界每年由病蟲(chóng)害造成谷物經(jīng)濟(jì)損失達(dá)1200億美元。為了對(duì)付病蟲(chóng)害，化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期、大量和反復(fù)使用，同時(shí)帶來(lái)了對(duì)土壤、水體和大氣的污染；農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留增加，也直接危害了人類的健康及生存；以及破壞了生態(tài)平衡。近年來(lái)，隨著人類經(jīng)濟(jì)文化水平的提高，人們對(duì)食物安全和環(huán)境安全提出了更高的要求，生物農(nóng)藥也因此得到了迅猛的發(fā)展。
蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis，簡(jiǎn)稱Bt)制劑是目前世界上產(chǎn)量最大、使用最廣泛的微生物殺蟲(chóng)劑，它廣泛用于防治農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)、森林和果樹(shù)害蟲(chóng)，貯藏害蟲(chóng)及醫(yī)學(xué)害蟲(chóng)。然而在其生產(chǎn)和應(yīng)用過(guò)程中也存在一些問(wèn)題導(dǎo)致其殺蟲(chóng)活性減弱甚至失效、殘效期短等缺點(diǎn)(1)噴霧干燥過(guò)程導(dǎo)致其活性降低。噴霧干燥是生產(chǎn)高效價(jià)Bt原粉的重要方法，工業(yè)生產(chǎn)中一般先將發(fā)酵液噴霧干燥制成原粉，再用原粉加工成所需要的劑型。但是高溫干燥容易導(dǎo)致Bt制劑活性成分如伴胞晶體的變性、芽孢失活以及其它熱敏性活性成分的喪失等，最終必然引起制劑殺蟲(chóng)活性的下降；(2)在田間應(yīng)用過(guò)程中殘效期短，效果不穩(wěn)定。這是由于Bt不耐紫外線(UV)，陽(yáng)光中的UV是降低Bt制劑田間防治效果的首要因素。同時(shí)，雨水沖刷是降低其田間防治效果的另一主要因素。
在申請(qǐng)?zhí)枮?00310121196.1(一種提高生物農(nóng)藥抗太陽(yáng)光照射的辦法)，記載了利用含-NH2、-COOH或-NH2、-COOH二者并存的化合物據(jù)稱可以作為蘇云金芽胞桿菌保護(hù)劑抗陽(yáng)光照射。但是該專利文獻(xiàn)沒(méi)有公開(kāi)該保護(hù)劑的具體組分及其配比，人們無(wú)法實(shí)施其發(fā)明，亦無(wú)法達(dá)到該專利文獻(xiàn)所示的效果。
已有一些作者研究發(fā)現(xiàn)某些生物高分子聚合物具有抗UV照射和高溫?fù)p傷的能力。例如Y.Murat Elcin(Y.Murat Elcin.Bacillus sphaericus 2362-calcium alginate microcapsule for mosquitocontrol.Enzyme and Microbial Technology，1995，17587-591)研究發(fā)現(xiàn)海藻酸鹽(alginate)可以有效地提高Bt對(duì)UV和高溫的耐受性，從而提高Bt的田間使用效果。另外，Masakazu Furuta等人(Furuta M，Huy N Q，Tsuchiya H N，Hayashi T.Protective effect of poly(α-L-glutamate)against UV and γ-irradiation.Radiat Phys Chem.2004，71111-114)發(fā)現(xiàn)聚-α-谷氨酸[poly(a-l-glutamate)]可以提高α-淀粉酶對(duì)γ射線和UV照射的抗性。從化學(xué)結(jié)構(gòu)上看，藻酸鹽和聚-α-谷氨酸的高分子長(zhǎng)鏈上均含有眾多的反應(yīng)活性較高的游離羧基，然而到目前為止對(duì)于二者的保護(hù)機(jī)理還沒(méi)有完全闡明。
聚-γ-谷氨酸[英文名稱是Poly(γ-glutamic acid)，簡(jiǎn)稱γ-PGA]是自然界中微生物發(fā)酵產(chǎn)生的陰離子型多聚氨基酸，由D型谷氨酸(D-Glu)和L型谷氨酸(L-Glu)通過(guò)α-氨基和γ-羧基以肽鍵形式形成的高分子聚合物，在每一個(gè)重復(fù)單元的α-碳原子還有一個(gè)游離的羧基。平均分子量10,000-10,000,000道爾頓。聚-γ-谷氨酸的水溶性、吸水性、生物可降解性、對(duì)金屬離子的親和性、無(wú)毒、抗凍、對(duì)環(huán)境友好和對(duì)蛋白酶的抗性等特點(diǎn)使它在農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、輕化工等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。與藻酸鹽和聚-α-谷氨酸結(jié)構(gòu)類似，γ-PGA有望成為一種潛在的Bt保護(hù)劑。γ-PGA是微生物合成的一種高分子聚合物，具有生產(chǎn)快、產(chǎn)量高和成本低等優(yōu)勢(shì)。隨著全球環(huán)保意識(shí)的不斷加強(qiáng)，人類回歸自然、保護(hù)生態(tài)平衡的愿望愈來(lái)愈強(qiáng)烈，γ-PGA的應(yīng)用有著不可估量的前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，利用一種聚-γ-谷氨酸作為蘇云金芽胞桿菌制劑的保護(hù)劑以及在制備蘇云金芽胞桿菌制劑中作為保護(hù)劑的應(yīng)用。該保護(hù)劑可有效保護(hù)蘇云金芽胞桿菌制劑的生物活性，減少紫外線、環(huán)境等對(duì)蘇云金芽胞桿菌制劑穩(wěn)定性的損失，以提高蘇云金芽胞桿菌的應(yīng)用效果。
本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的作為本發(fā)明實(shí)施的保護(hù)劑選自聚-γ-谷氨酸(γ-PGA)。
γ-PGA由D型谷氨酸(D-Glu)和L型谷氨酸(L-Glu)通過(guò)α-氨基和γ-羧基以肽鍵形式形成的高分子聚合物，在每一個(gè)重復(fù)單元的α-碳原子還有一個(gè)游離的羧基。
所述的γ-PGA用于Bt液體或固體制劑(如Bt發(fā)酵液、粉劑、可濕性粉劑和懸浮劑或乳化劑)等劑型的應(yīng)用。該γ-PGA的應(yīng)用可以是在Bt制劑化中的應(yīng)用(例如在噴霧干燥中的應(yīng)用，或者是產(chǎn)品復(fù)配中的應(yīng)用，例如Bt原粉與γ-PGA制備的粉劑、可濕性粉劑；或是Bt原粉與γ-PGA和乳化劑制備的懸浮劑或乳劑等)。
所述的γ-PGA產(chǎn)品的生產(chǎn)可按照本申請(qǐng)人的專利號(hào)為ZL 03118908.3公開(kāi)的文獻(xiàn)生產(chǎn)，或者商業(yè)購(gòu)買(mǎi)。
所述的蘇云金芽胞桿菌發(fā)酵菌液的生產(chǎn)可參照本申請(qǐng)人的專利號(hào)ZL95106749.4(蘇云金芽胞桿菌高毒力菌株YBT-1520及發(fā)酵工藝與產(chǎn)品)文獻(xiàn)所公開(kāi)方法進(jìn)行。
本發(fā)明中涉及蘇云金芽胞桿菌制劑的生產(chǎn)(或稱之為“制劑化”，如發(fā)酵原液、粉劑、可濕性粉劑、懸浮劑和油劑)生產(chǎn)參照本申請(qǐng)人的專利號(hào)為ZL 01128475.7(蘇云金芽胞桿菌基因工程菌WG001及生產(chǎn)工藝與產(chǎn)品)文獻(xiàn)所公開(kāi)的方法生產(chǎn)。
所述的γ-PGA的應(yīng)用包括在Bt制劑加工過(guò)程中的應(yīng)用以及在Bt制劑施用前的應(yīng)用。
γ-PGA在Bt制劑化中的應(yīng)用按照以下的步驟進(jìn)行
1、γ-PGA作為保護(hù)劑在Bt噴霧干燥制備Bt原粉中的應(yīng)用以重量/體積比(w/v)計(jì)，將0.1-1.0％的分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA加入Bt發(fā)酵液，攪拌均勻后噴霧干燥。噴霧干燥工藝條件為進(jìn)風(fēng)口溫度150-250℃，出風(fēng)口溫度50-100℃，噴頭壓力0.10-0.25Mpa，使制劑的含水量控制在4％以下。本制劑化中的具體應(yīng)用參照專利文獻(xiàn)ZL 01128475.7報(bào)道的方法生產(chǎn)。
2、γ-PGA作為Bt液體制劑保護(hù)劑的田間施用前的應(yīng)用以重量/體積比(w/v)計(jì)，將分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA以0.1-1.0％使用量加入Bt液體制劑中，混合均勻，將上述混合了γ-PGA的Bt液體劑型按商品說(shuō)明書(shū)要求使用的濃度和方法進(jìn)行，在蟲(chóng)害發(fā)生前期進(jìn)行葉面噴施，以抵抗陽(yáng)光中紫外線照射和雨水沖刷。
3、γ-PGA作為Bt可濕性粉劑保護(hù)劑的田間施用前的應(yīng)用以質(zhì)量百分比(w/w)計(jì)，將分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA以1.5-15.0％使用量加入商品Bt可濕性粉劑中，混合均勻，將上述混合了γ-PGA的Bt可濕性粉劑按商品說(shuō)明書(shū)要求使用的濃度和方法進(jìn)行，在蟲(chóng)害發(fā)生前期進(jìn)行葉面噴施，以抵抗陽(yáng)光中紫外線照射和雨水沖刷。
本發(fā)明的有益效果(1)生物可降解性。γ-PGA是微生物合成的由谷氨酸通過(guò)α-氨基和γ-羧基以肽鍵形式形成的高分子聚合物，可被微生物完全降解，對(duì)人和環(huán)境友好。
(2)γ-PGA作為Bt制劑的應(yīng)用，可以減少Bt粉劑制劑在噴霧干燥過(guò)程中的活性損失，與對(duì)照相比，本發(fā)明制劑的殺蟲(chóng)活性、晶體蛋白和芽孢含量可分別提高約18.55％、11.24％和20.38％；(3)本發(fā)明提高了Bt制劑在實(shí)際使用過(guò)程中的抗陽(yáng)光中紫外線照射能力。陽(yáng)光照射7天后，其殺蟲(chóng)活性為對(duì)照的4.30倍；(4)本發(fā)提高了Bt制劑在植株上的黏附能力，耐雨水沖刷，其殺蟲(chóng)活性可達(dá)到對(duì)照的2.23倍以上，從而延長(zhǎng)殘效期。


圖1γ-PGA對(duì)Bt發(fā)酵液噴霧干燥過(guò)程的保護(hù)效果圖2不同出風(fēng)口溫度條件下γ-PGA對(duì)Bt發(fā)酵液噴霧干燥的保護(hù)效果圖3不同進(jìn)風(fēng)口溫度條件下γ-PGA對(duì)Bt發(fā)酵液噴霧干燥的保護(hù)效果圖4γ-PGA對(duì)Bt制劑抗紫外線的應(yīng)用效果圖5不同紫外線照射時(shí)間下γ-PGA對(duì)Bt制劑抗紫外線的應(yīng)用效果圖6不同降雨量條件下γ-PGA對(duì)Bt制劑殘留生物活性影響圖7不同陽(yáng)光照射時(shí)間γ-PGA對(duì)Bt制劑的殘留生物活性影響具體實(shí)施方式
實(shí)施例1γ-PGA作為Bt發(fā)酵液噴霧干燥過(guò)程中保護(hù)劑的應(yīng)用分別取分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA 0g、0.2g、0.4g、0.6g、0.8g、1.0g、1.2g、1.4g、1.8g、2.0g溶解于200ml Bt發(fā)酵液中，發(fā)酵液的殺蟲(chóng)晶體蛋白含量為5.43mg/ml，芽孢數(shù)為6.77×109cfu/ml，致死率(稀釋4000倍時(shí))為91.27％。攪拌均勻后分別進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥工藝條件為進(jìn)風(fēng)口溫度180±5℃，出風(fēng)口溫度70±2℃，噴頭壓力0.15Mpa，使制劑的含水量控制在4％以下。測(cè)量不同條件下噴霧干燥后Bt制劑殺蟲(chóng)晶體蛋白、芽孢和殺蟲(chóng)活性，以噴霧干燥前Bt制劑殺蟲(chóng)晶體蛋白、芽孢和殺蟲(chóng)活性為對(duì)照，計(jì)算殺蟲(chóng)晶體蛋白殘留率、芽孢殘留率和殘留生物活性。
計(jì)算公式如下殺蟲(chóng)晶體蛋白殘留率＝(處理后晶體蛋白含量/處理前晶體蛋白含量)×100％，芽孢殘留率＝(處理后芽孢含量/處理前芽孢含量)×100％，殘留生物活性＝(處理后致死率/處理前致死率)×100％實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1和圖1所示。
表1噴霧干燥過(guò)程中不同濃度γ-PGA對(duì)Bt制劑的影響

表1和圖1說(shuō)明，加入不同濃度γ-PGA后，與對(duì)照相比，Bt制劑的殘留生物活性均有明顯提高。γ-PGA濃度為0.1-0.8％(w/v)對(duì)Bt制劑有明顯的保護(hù)效果，當(dāng)γ-PGA濃度為0.3％(w/v)時(shí)對(duì)殘留生物活性的保護(hù)效果最好，其殘留生物活性比對(duì)照高18.55％。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)γ-PGA對(duì)Bt制劑主效成分-晶體和芽孢有明顯保護(hù)效果，可以明顯提高晶體和芽孢殘留率。當(dāng)γ-PGA濃度為0.3％(w/v)時(shí)，晶體和芽孢殘留率分別比對(duì)照提高了11.24％和20.38％。
實(shí)施例2γ-PGA作為Bt發(fā)酵液噴霧干燥過(guò)程中不同出風(fēng)口溫度條件下保護(hù)劑的應(yīng)用取分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA 3.6g溶解于Bt發(fā)酵液1200ml，發(fā)酵液的殺蟲(chóng)晶體蛋白含量為5.43mg/ml，芽孢數(shù)為6.77×109cfu/ml，致死率(稀釋4000倍時(shí))為91.27％。攪拌均勻后平均分成六份，分別進(jìn)行噴霧干燥。考察在不同出風(fēng)口溫度下γ-PGA對(duì)噴霧干燥Bt原粉芽孢和晶體含量影響時(shí)，控制進(jìn)風(fēng)口溫度180±5℃，出風(fēng)口溫度50-100±5℃，噴頭壓力0.15Mpa，使制劑的含水量控制在4％以下。測(cè)量不同條件下Bt制劑殘留生物活性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2和圖2所示表2不同出風(fēng)口溫度下添加0.3％γ-PGA(w/v)對(duì)Bt制劑生物活性殘留率的影響

注相對(duì)效果＝含0.3％γ-PGA(w/v)Bt制劑生物活性殘留率/對(duì)照生物活性殘留率結(jié)果表明，出風(fēng)口溫度越高，γ-PGA的相對(duì)保護(hù)效果越好。當(dāng)出風(fēng)口溫度為100℃時(shí)，添加0.3％γ-PGA樣品的殘留生物活性為對(duì)照的1.47倍。以上結(jié)果表明，γ-PGA能顯著降低高溫對(duì)Bt制劑中活性物質(zhì)損傷，提高它們對(duì)高溫的耐受性實(shí)施例3γ-PGA作為Bt發(fā)酵液噴霧干燥過(guò)程中不同進(jìn)風(fēng)口溫度條件下保護(hù)劑的應(yīng)用取分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA 3.6g溶解于1200ml Bt發(fā)酵液，發(fā)酵液的殺蟲(chóng)晶體蛋白含量為5.43mg/ml，芽孢數(shù)為6.77×109cfu/ml，致死率(稀釋4000倍時(shí))為91.27％。攪拌均勻后平均分成六份，分別噴霧干燥?？疾煸诓煌M(jìn)風(fēng)口溫度下γ-PGA對(duì)噴霧干燥Bt原粉芽孢和晶體含量影響時(shí)，控制出風(fēng)口溫度70±2℃，進(jìn)風(fēng)口溫度150-250℃，噴頭壓力0.15Mpa，使制劑的含水量控制在4％以下。測(cè)量不同條件下Bt制劑殘留生物活性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2和圖3所示表2 不同進(jìn)風(fēng)口溫度下添加0.3％γ-PGA(w/v)對(duì)Bt制劑生物活性殘留率的影響

注相對(duì)效果＝含0.3％γ-PGA(w/v)Bt制劑生物活性殘留率/對(duì)照生物活性殘留率結(jié)果表明，進(jìn)風(fēng)口溫度在150-190℃時(shí)γ-PGA的相對(duì)保護(hù)效果較好，優(yōu)選的進(jìn)風(fēng)口溫度應(yīng)控制在170-190℃。
實(shí)施例4γ-PGA作為Bt制劑的抗紫外線保護(hù)劑的應(yīng)用分別取分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA 0.01g、0.02g、0.03g、0.04g、0.05g、0.06g溶解于Bt發(fā)酵液各10ml，發(fā)酵液的殺蟲(chóng)晶體蛋白含量為5.43mg/ml，芽孢數(shù)為6.77×109cfu/ml，致死率(稀釋4000倍時(shí))為91.27％。于60℃下處理30min殺死營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，移取6ml于直徑為10cm的滅菌培養(yǎng)皿中，置于30W的紫外燈下，培養(yǎng)皿與燈的垂直距離為20cm。每隔15min搖動(dòng)一次培養(yǎng)皿，照射2h后取0.2ml按1∶10稀釋到2ml用于芽孢計(jì)數(shù)、蛋白測(cè)定和生物活性測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3和圖4所示表3 紫外線照射對(duì)含γ-PGA Bt液體制劑的影響

結(jié)果表明，經(jīng)2個(gè)小時(shí)紫外線照射后，添加γ-PGA的Bt制劑的殘留生物活性明顯高于對(duì)照，其中以添加γ-PGA濃度為0.3％(w/v)時(shí)效果最佳，UV照射2h后其殘留生物活性為87.67％。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)UV照射2h后，加入γ-PGA能有效提高Bt制劑晶體蛋白和芽孢的殘留率。加入γ-PGA后晶體和芽孢殘留率與殘留生物活性的變化趨勢(shì)基本一致。當(dāng)γ-PGA濃度為0.3％(w/v)時(shí)，晶體和芽孢殘留率分別比對(duì)照高23.12％和25.34％。
實(shí)施例5γ-PGA作為Bt制劑抗紫外線保護(hù)劑的應(yīng)用取分子量為100,000-10,000,000道爾頓的γ-PGA 0.03g溶解于Bt發(fā)酵液10ml，發(fā)酵液的殺蟲(chóng)晶體蛋白含量為5.43mg/ml，芽孢數(shù)為6.77×109cfu/ml，致死率(稀釋4000倍時(shí))為91.27％。處理參照實(shí)施例4，分別在紫外線照射第0、1、2、3、4和5h取樣。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4和圖5所示
表4 不同紫外線照射時(shí)間下γ-PGA對(duì)Bt制劑的影響

結(jié)果表明，對(duì)于未加γ-PGA的Bt原粉，紫外線處理的失活效應(yīng)非常顯著，隨著UV照射時(shí)間的延長(zhǎng)，殘留殺蟲(chóng)活性迅速降低，5h后其殘留殺蟲(chóng)活性僅為13.46％。對(duì)于含0.3％γ-PGA的Bt制劑，延長(zhǎng)UV照射時(shí)間，與對(duì)照相比，其殘留殺蟲(chóng)活性下降緩慢，5h后其殘留殺蟲(chóng)活性僅為46.26％。同樣，添加0.3％γ-PGA制劑的晶體蛋白殘留率和芽孢存活率隨著UV照射時(shí)間的延長(zhǎng)也存在一定程度的下降，但與對(duì)照相比下降速率要慢。UV照射5h后，加入0.3％γ-PGA制劑的晶體蛋白殘留率和芽孢存活率分別為對(duì)照的2.06倍和2.77倍。
實(shí)施例6陽(yáng)光照射條件下對(duì)γ-PGA作為Bt制劑保護(hù)劑的應(yīng)用將田間長(zhǎng)勢(shì)良好、整齊一致未施過(guò)農(nóng)藥的小白菜(品種上海青)移至花盆內(nèi)備用。將含有0和0.3％(w/v)γ-PGA(分子量為100,000-10,000,000道爾頓)的Bt懸浮劑(4000IU/μl)分別稀釋200倍后對(duì)小白菜進(jìn)行噴霧，將花盆置于室外日光照射(以自然太陽(yáng)光照射10小時(shí)/天)，分別于第3、5和7天剪下菜葉，置于培養(yǎng)皿內(nèi)，培養(yǎng)皿內(nèi)預(yù)先放一張潤(rùn)濕的濾紙。每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)接入10頭三齡棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)，6個(gè)重復(fù)。28℃下置于黑暗處培養(yǎng)2天后檢測(cè)死亡率。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5和圖7所示表5 陽(yáng)光照射下γ-PGA對(duì)Bt制劑的影響

注相對(duì)效果＝含0.3％γ-PGA(w/v)Bt制劑生物活性殘留率/對(duì)照生物活性殘留率結(jié)果表明，γ-PGA包被能很好地保護(hù)Bt殺蟲(chóng)活性物質(zhì)免受陽(yáng)光中的紫外線破壞。
實(shí)施例7雨水沖刷條件下對(duì)γ-PGA作為Bt制劑保護(hù)劑的應(yīng)用將長(zhǎng)勢(shì)良好、整齊一致未施過(guò)農(nóng)藥的田間種植的小白菜(品種上海青)移至花盆內(nèi)，取Bt可濕性粉劑(32000IU/mg)1g，分別加0.015g，0.05g，0.15g固體γ-PGA(分子量為100,000-10,000,000道爾頓)后加水稀釋2000倍并混合均勻，對(duì)小白菜進(jìn)行噴霧，自然風(fēng)干，用噴霧器噴灑清水，模擬降雨(5mm、20mm和50mm)，旁邊放置一量筒用于測(cè)定降雨量。待風(fēng)干后剪下葉片參照實(shí)施例6的方法測(cè)定殘留生物活性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6和圖6。
表6 雨水沖刷下γ-PGA對(duì)Bt制劑的影響

結(jié)果表明，添加0.3％γ-PGA制劑有較強(qiáng)的抵抗雨水的沖刷作用，這是由于γ-PGA能較好的黏附于植物葉片表面。
權(quán)利要求
1.聚-γ-谷氨酸作為蘇云金芽胞桿菌制劑保護(hù)劑的應(yīng)用。
2.聚-γ-谷氨酸在制備蘇云金芽胞桿菌制劑中作為保護(hù)劑的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中的應(yīng)用包含液體制劑或固體制劑中的應(yīng)用。
4.包含權(quán)利要求1保護(hù)劑的蘇云金芽胞桿菌制劑。
5.權(quán)利要求4所述的制劑，其中的制劑包含液體或固體狀態(tài)的。
全文摘要
本發(fā)明屬于微生物農(nóng)藥制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種聚－γ－谷氨酸(γ－PGA)作為蘇云金芽胞桿菌制劑保護(hù)劑的用途以及在制備蘇云金芽胞桿菌制劑中作為保護(hù)劑的應(yīng)用。γ－PGA作為Bt制劑的應(yīng)用，可以減少Bt粉劑制劑在噴霧干燥過(guò)程中的活性損失，與對(duì)照相比，本發(fā)明制劑的殺蟲(chóng)活性、晶體蛋白和芽孢含量分別提高約18.55％、11.24％和20.38％。此外，本發(fā)明的應(yīng)用提高了Bt制劑在實(shí)際使用過(guò)程中的耐紫外線照射的能力，陽(yáng)光照射7天后，其殺蟲(chóng)活性為對(duì)照的4.30倍。本發(fā)明的應(yīng)用提高了Bt制劑在植株上的黏附能力，耐雨水沖刷，其殺蟲(chóng)活性可達(dá)到對(duì)照的2.23倍以上，從而延長(zhǎng)殘效期。
文檔編號(hào)C12R1/07GK1948463SQ20061012493
公開(kāi)日2007年4月18日 申請(qǐng)日期2006年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月3日
發(fā)明者陳守文, 喻子牛, 吳廣濤, 蔡皓, 冀志霞, 孫明, 柯云 申請(qǐng)人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)