左旋5，10-亞甲基四氫葉酸的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種制備左旋5,10-亞甲基四氫葉酸的新型方法，采用對甲苯磺酸作 為拆分劑，利用左旋和右旋的5, 10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽在水中溶解性的差異對 其進(jìn)行手性拆分。5,10-亞甲基四氫葉酸（5,10-CH=THF)是還原的葉酸，可用于抗貧血和腫 瘤藥物的解毒拮抗劑等。
【背景技術(shù)】
[0002] 5, 10-亞甲基四氫葉酸，（5, l〇-Methenyltetrahydrofolate，簡稱為 5，1〇-〇1=1'冊)，化學(xué)名稱4-[4-(3-氨基-1-氧代-1，4,5,6,6&，7-六氫-8-咪唑[1，5，幻 并碟啶-10-正離子-8-基）苯甲酰]-L-谷氨酸，結(jié)構(gòu)式如下：
它是還原的葉酸，直接或間接轉(zhuǎn)化為5,10-亞甲基四氫葉酸的聚谷氨酸鹽后，作為胸 甘氨酸合成酶的輔因子起作用，可用于抗貧血和腫瘤藥物的解毒拮抗劑等。臨床上常將 5-FU與5-甲酰四氫葉酸組合使用來對抗腫瘤。最新研究表明，就人體對藥物的回應(yīng)率而 言，與5-FU和5-甲酰四氫葉酸的組合使用相比，5，10_亞甲基四氫葉酸可將回應(yīng)率提高 10%-30%，5-FU和5-甲酰四氫葉酸的組合藥物回應(yīng)率較低的原因是多數(shù)患者服用后，在體 內(nèi)代謝的過程中，不能將其有效的代謝為5,10-亞甲基四氫葉酸。
[0003] 合成的5, 10-亞甲基四氫葉酸含有兩個(gè)不對稱中心，通常在5,6位雙鍵加氫時(shí)在6 位形成光學(xué)活性碳原子以外消旋形成存在，而左旋5, 10-亞甲基四氫葉酸在人體內(nèi)具有活 性成分。本發(fā)明采用對甲苯磺酸作為拆分劑，利用左旋和右旋的5, 10-亞甲基四氫葉酸對 甲苯磺酸鹽在水中溶解性的差異對其進(jìn)行手性拆分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種新型的左旋5,10-亞甲基四氫葉酸的制備方法。以對 甲苯磺酸作為拆分劑將5,10-亞甲基四氫葉酸消旋體的進(jìn)行拆分得到左旋5,10-亞甲基四 氫葉酸。利用左旋和右旋的5, 10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽在水中溶解性的差異對其 進(jìn)行手性拆分，采用本發(fā)明的方法，可以獲得比旋度為[αΓ0_36°，（c=l，0.04N NaOH)的 5,10-亞甲基四氫葉酸，其中（6R) -5,10-亞甲基四氫葉酸含量彡89%。
[0005] 本發(fā)明提供的左旋5，10-亞甲基四氫葉酸的制備方法是以新合成的5，10-亞甲基 四氫葉酸和對甲苯磺酸為原料，具體的合成路線如下：
1)在惰性氣體保護(hù)下，先用硼氫化鈉還原葉酸，整個(gè)過程溫度保持在20°C以下，滴加 HC1調(diào)pH值=3-4，有固體析出，過濾，惰性氣體氛圍干燥得黃色四氫葉酸固體。
[0006] 2)四氫葉酸固體溶于含有三氟乙酸的無水甲酸液中，攪拌，旋蒸，靜止析晶，過濾， 惰性氛圍干燥得5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體。
[0007] 3)5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體與對甲苯磺酸，分別溶于蒸餾水中，惰性氣體 保護(hù)，混合，升溫到45-50°C反應(yīng)4-6 h，過濾，惰性氣體氛圍干燥得左旋5,10-亞甲基四氫 葉酸對甲苯磺酸鹽固體。優(yōu)選50°C下反應(yīng)4 h。
[0008] 4)左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽固體溶于蒸餾水，惰性氣體保護(hù)，加 入2M氫氧化鈉溶液，冰浴下攪拌5-6h，過濾，惰性氛圍干燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸， [a ]2°D> -36。，（c=l，0· 04N NaOH)。
[0009] 所述的5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽和對甲苯磺酸的摩爾比為1 :2.0-2. 5,優(yōu)選 1 :2〇
[0010] 所述的惰性氣體為N2。
[0011] 本發(fā)明提供了一種拆分劑-對甲苯磺酸，利用左旋和右旋的5, 10-亞甲基四氫葉 酸對甲苯磺酸鹽在水中溶解性的差異對其進(jìn)行手性拆分。采用本發(fā)明的方法，可以獲得比 旋度為[a ]2°D>-36°，（c=l，0. 04N NaOH)的 5，10-亞甲基四氫葉酸，其中（61〇-5，10-亞 甲基四氫葉酸含量多89%。
[0012]
【具體實(shí)施方式】
[0013] 通過下述實(shí)施例將有助于理解本發(fā)明，但不限制本發(fā)明的應(yīng)用。
[0014] 實(shí)例 1 : 5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽的制備 在惰性氣體（N2)保護(hù)下，先用硼氫化鈉還原葉酸，整個(gè)過程溫度保持在20°C以下，滴加 HC1調(diào)pH值=3-4，有固體析出，過濾，惰性氛圍（N2)干燥得黃色四氫葉酸固體。
[0015] 四氫葉酸固體溶于100ml無水甲酸和2g三氟乙酸，攪拌，旋蒸，靜止析晶，過濾，惰 性氛圍（N2)干燥得5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體。
[0016] 稱量上述得到的5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體5. 0g,對甲苯磺酸3. 44g，溶 于蒸餾水中，打開真空，抽走瓶中空氣，之后充入惰性氣體（N2 )，體系升溫到45 °C反應(yīng)4h，過 濾，蒸餾水和無水乙醇淋洗，惰性氛圍（N2汗燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽 固體5. 32g，收率80%。
[0017] 將左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽固體5g溶于250ml蒸餾水，打開真空 充入惰性氣體，滴加5ml 2M氫氧化鈉溶液，冰浴下攪拌5h，過濾，蒸餾水和無水乙醇淋洗1 次，惰性氛圍（N2)干燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸，[a ]2°D> -36 °，（c=l，0. 04N NaOH)。
[0018] 實(shí)例2 :稱量5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體5. 0g,對甲苯磺酸4. 30g，溶于蒸 餾水中，打開真空，抽走瓶中空氣，之后惰性氣體（N2 )，體系升溫到50 °C反應(yīng)4h，過濾，用蒸 餾水和無水乙醇淋洗2次，惰性氛圍（N2)干燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽 固體5. 32g，收率80%。
[0019] 將左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽固體5g溶于250ml蒸餾水，打開真空 充入惰性氣體（N2)，滴加5ml 2M氫氧化鈉溶液，冰浴下攪拌5h，過濾，蒸餾水和無水乙醇淋 洗，惰性氛圍（N2)干燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸，[a ]2°D> -36 °，（c=l，0. 04N NaOH)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種左旋5,10-亞甲基四氫葉酸的制備方法，包括以下步驟： 1) 在惰性氣體保護(hù)下，先用硼氫化鈉還原葉酸，整個(gè)過程溫度保持在20°C以下，滴加 HC1調(diào)pH值=3-4,有固體析出，過濾，惰性氣體氛圍干燥得黃色四氫葉酸固體； 2) 四氫葉酸固體溶于含有三氟乙酸的無水甲酸液中，攪拌，旋蒸，靜止析晶，過濾，惰性 氛圍干燥得5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體；其特征在于： 3) 5,10-亞甲基四氫葉酸甲酸鹽固體與對甲苯磺酸，分別溶于蒸餾水中，然后，惰性氣 體保護(hù)，將兩種溶液混合，升溫到45-50°C反應(yīng)4-6h，過濾，惰性氣體氛圍干燥得左旋5， 10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽固體； 4) 左旋5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽固體溶于蒸餾水，惰性氣體保護(hù)，加入 2M氫氧化鈉溶液，冰浴下攪拌5-6h，過濾，惰性氛圍干燥得左旋5,10-亞甲基四氫葉酸， [a]2°D> -36。，（c=l，0· 04NNaOH)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3)的所述的5,10-亞甲基四氫葉酸 甲酸鹽和對甲苯磺酸的摩爾比為1 :2. 0-2. 5。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3)的所述的5,10-亞甲基四氫葉酸 甲酸鹽和對甲苯磺酸的摩爾比為1 :2。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3)的反應(yīng)溫度為50°C。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的惰性氣體為N2。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種制備左旋5，10-亞甲基四氫葉酸的新型方法，對甲苯磺酸作為拆分劑，利用左旋和右旋的5,10-亞甲基四氫葉酸對甲苯磺酸鹽在水中溶解性的差異對其進(jìn)行手性拆分，采用本發(fā)明的方法，可以獲得比旋度為[α]20D≥-36o,(c=1,0.04N？NaOH)的5，10-亞甲基四氫葉酸，其中（6R）-5，10-亞甲基四氫葉酸含量≥89%。
【IPC分類】C07D487/14
【公開號】CN105399747
【申請?zhí)枴緾N201510718571
【發(fā)明人】李果, 張智強(qiáng), 任曉峰, 宋金津, 趙釗, 張寧, 吳海明, 韓瑞婷, 王凱
【申請人】天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司
【公開日】2016年3月16日
【申請日】2015年10月30日