專(zhuān)利名稱(chēng)：復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種有多種功效的復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法。
背景技術(shù)：
目前，發(fā)達(dá)國(guó)家在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用微生物技術(shù)十分廣泛，其科技含量很高。如日本的酵素菌、EM、萬(wàn)田發(fā)酵三大品牌。這些微生物菌群的特點(diǎn)是多菌種、多功能，可廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)有機(jī)肥、微生物農(nóng)藥、飼料、保健品，或用污水處理。而我國(guó)用于微生物肥生產(chǎn)的菌種，種類(lèi)少、功能少、用量少，效果不明顯。如各種品牌的固氮菌、微生物鉀、微生物磷，包括最大品牌的阿姆斯，菌種數(shù)量都比較少。研究開(kāi)發(fā)培殖多菌種、多功能的優(yōu)良微生物菌群，是我國(guó)科技界面臨的重大課題。
農(nóng)業(yè)微生物在農(nóng)作物種植業(yè)、畜禽飼養(yǎng)業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、農(nóng)產(chǎn)品加工、農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)等領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。目前發(fā)達(dá)國(guó)家在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用微生物技術(shù)十分廣泛，從過(guò)去單一菌種的應(yīng)用發(fā)展到復(fù)合菌群，廣泛用于生產(chǎn)生物有機(jī)肥、生物農(nóng)藥和生物飼料，可用于農(nóng)產(chǎn)品保鮮或用于環(huán)境保護(hù)(污水垃圾處理)。我國(guó)目前農(nóng)業(yè)微生物庫(kù)保藏菌種3000多株，而用于生物肥料中的有益微生物2003年統(tǒng)計(jì)才80多種，尤其是用于肥料生產(chǎn)的菌種類(lèi)少，菌量少。我國(guó)利用微生物生產(chǎn)生物有機(jī)肥料才開(kāi)始起步，還很落后，隨著科技的發(fā)展和生產(chǎn)中的實(shí)際需要，截止到2003年末已有300家生物有機(jī)肥產(chǎn)品在農(nóng)業(yè)部登記、生產(chǎn)，還有許多正在申報(bào)登記，總產(chǎn)量超過(guò)350萬(wàn)噸，是1995年的8倍。從以上看出農(nóng)業(yè)微生物在有機(jī)肥料上的應(yīng)用發(fā)展勢(shì)頭喜人，形勢(shì)也逼人，大有發(fā)展前途。但是，由于種種原因，我國(guó)目前有益微生物的繁殖量小，不能滿(mǎn)足生產(chǎn)中的實(shí)際需要，因此，有益微生物的培養(yǎng)繁殖是正在努力解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上這情況，本發(fā)明之目的就是提供一種復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法，以解決生產(chǎn)中對(duì)有益菌類(lèi)的需要問(wèn)題，其解決的技術(shù)方案是，將細(xì)菌、酵母菌、放線(xiàn)菌分別按配比摻入培殖器內(nèi)的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基是由水、牛肉膏、蛋白質(zhì)、食鹽、瓊脂組成的固體培養(yǎng)基，在適宜的溫度和PH值下培養(yǎng)一定時(shí)間，再置入三個(gè)種子罐內(nèi)，在一定溫度下進(jìn)行厭氧發(fā)酵，發(fā)酵后將三種菌體進(jìn)行混合在一起，按比例加入麥麩或米糠進(jìn)行擴(kuò)繁，擴(kuò)繁后進(jìn)行二次發(fā)酵成菌種粉，干燥后，稱(chēng)重包裝入庫(kù)，本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，培殖效果好，其酶菌用途廣，價(jià)值大，有廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景及巨大的經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合具體情況對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作詳細(xì)說(shuō)明。
由前述給出，本發(fā)明是首先按重量比，細(xì)菌∶放線(xiàn)菌∶酵母菌＝1∶1∶1，分別放置在試管菌種搖瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基中，每1000g培養(yǎng)基是由牛肉膏3g、蛋白質(zhì)10g，食鹽5g和瓊脂18-20g與余量為水組成，每一菌種加入量為1000g培養(yǎng)基中加入5g，培養(yǎng)基加入菌種后，在溫度20-30℃、PH7.2-7.4培殖72-96小時(shí)(3-4天)，然后再把培養(yǎng)后的三個(gè)菌種分別置入三個(gè)種子罐內(nèi)，在10-40℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵148-240小時(shí)(即7-10天)，之后，將發(fā)酵過(guò)的三種菌群按1∶1∶1的比例放入混合罐混勻，再按混合的復(fù)合菌種與麥麩(或米糠)為1∶100的重量比加入麥麩或米糠，在18-25℃下進(jìn)行固體擴(kuò)繁，時(shí)間240-360小時(shí)(即10-15天)擴(kuò)繁后再在罐內(nèi)二次發(fā)酵148-240小時(shí)(即7-10天)，成菌種粉，干燥后稱(chēng)重包裝入庫(kù)，干燥后含水量≤3％。
實(shí)施例1按1∶1∶1選取細(xì)菌10g、酵母菌10g和放線(xiàn)菌10g，分別放入三個(gè)菌種搖瓶培養(yǎng)基中，每個(gè)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基由牛肉膏6g、蛋白質(zhì)20g、食鹽10g、瓊脂36g加水至2000g制成，在25℃、PH7.3下培養(yǎng)72小時(shí)，再分別放入三個(gè)種子罐內(nèi)，在25℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵192小時(shí)(8天)，發(fā)酵后裝入混合罐進(jìn)行混合，再在每1g的混合菌體中加入麥麩100g，進(jìn)行固體擴(kuò)繁，20℃下，時(shí)間為248小時(shí)(12天)，擴(kuò)繁后再在種子罐內(nèi)進(jìn)行二次發(fā)酵，溫度25℃，時(shí)間192小時(shí)，過(guò)濾干燥后，含水2％，稱(chēng)重包裝入庫(kù)。
實(shí)施例2按1∶1∶1比例，選取細(xì)菌15g、酵母菌15g、放線(xiàn)菌15g，分別放入三個(gè)搖瓶培養(yǎng)基中(最好每種菌均分裝在3個(gè)搖瓶中)，培養(yǎng)基是由牛肉膏9g、蛋白質(zhì)30g、食鹽15g和瓊脂60g加水至3000g組成，在28℃、PH7.4下培養(yǎng)72小時(shí)，培養(yǎng)后三種菌體分別放入種子罐內(nèi)，在30℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵204小時(shí)(8.5天)，發(fā)酵后再將三種菌體在混合罐內(nèi)進(jìn)行混合，并在每1g的混合菌體內(nèi)加入100g米糠進(jìn)行擴(kuò)繁，擴(kuò)繁后再用發(fā)酵罐進(jìn)行二次發(fā)酵204小時(shí)成菌種粉，脫水干燥后(含水率＜3％)稱(chēng)重包裝入庫(kù)。
上述所說(shuō)的有益細(xì)菌、酵母菌和放線(xiàn)菌市場(chǎng)上均有售，一般可由試管菌種研究所提供。本發(fā)明的巨大意義在于一、本發(fā)明培殖的復(fù)合酶菌用于生產(chǎn)有機(jī)肥不僅含有氮、磷、鉀、微量元素，而且還含有多種維生素、氨基酸、糖類(lèi)化合物。脂類(lèi)化合物、纖維素、核酸及SOD等多種酶，可有效疏松土壤，培肥地力，保水保肥，提高土壤CEC值，降低EC值，提高地溫1-3度，根系發(fā)達(dá)，生長(zhǎng)茁壯，座果率提高10-20％，提前成熟7-10天；保持土壤適當(dāng)?shù)腜H值，有改良鹽堿地的作用；減少病蟲(chóng)害發(fā)生，減少化學(xué)農(nóng)藥用量和次數(shù)；提高作物品質(zhì)，大大降低農(nóng)產(chǎn)品硝酸鹽含量，糖度提高1-3度，耐儲(chǔ)藏；農(nóng)作物提高產(chǎn)量20％以上，降低成本，投入產(chǎn)出比高；技術(shù)容易掌握。
二、本發(fā)明復(fù)合酶菌用于發(fā)酵中藥，制作農(nóng)用殺菌劑、殺蟲(chóng)劑用本發(fā)明復(fù)合酶菌發(fā)酵中藥制作殺菌劑、殺病毒劑已取得明顯效果。微生物發(fā)酵中藥劑，靠代謝產(chǎn)生的有機(jī)酸、醇和酶等物質(zhì)，溶解中藥中的礦元素，分解、轉(zhuǎn)化中藥中的植物堿、黃酮類(lèi)、萜稀類(lèi)等殺菌成份，提高藥效30倍以上，加上代謝產(chǎn)生的幾十種搞菌素，能大大提高防治病蟲(chóng)害的效果。
中藥殺菌劑、殺蟲(chóng)劑，還可以配合化學(xué)農(nóng)藥使用，不僅可以減少一半農(nóng)藥用量，還可以增加藥效，而且噴施后5-7天可以降解農(nóng)藥，大大減少農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留量。
三、用復(fù)合酶菌制作飼料添加劑增進(jìn)畜禽食欲，幫助消化。經(jīng)過(guò)發(fā)酵的飼料，有良好的甜味和酒香味，可增進(jìn)食欲。發(fā)酵分解的酶和有機(jī)酸，能促進(jìn)各種營(yíng)養(yǎng)的消化吸收。如蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率極高。
促進(jìn)生產(chǎn)，改善肉質(zhì)。在本發(fā)明復(fù)合酶的次級(jí)代謝中，能產(chǎn)生多種刺激動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的因子，既可促進(jìn)脂肪的代謝，又可防止由于脂肪過(guò)多而發(fā)生肉質(zhì)下降的現(xiàn)象，提高度肉率。養(yǎng)豬的料肉比為3∶1或4∶1左右，豬體重日增0.6kg以上。
養(yǎng)雞可延長(zhǎng)產(chǎn)蛋期，提高產(chǎn)蛋率10％左右，雞蛋破損率降到0.5％，軟蛋減少到2％。奶牛可提高產(chǎn)奶率10％，平均日增產(chǎn)鮮奶1-3.5kg。
提高畜禽的抗病性，不再使用西方國(guó)家禁用抗生素和激素，節(jié)省藥費(fèi)，減少投資30-50％，只進(jìn)行必要的防疫工作即可。
減少糞便惡臭，改善養(yǎng)殖環(huán)境；畜禽糞便質(zhì)量好，用于種植是優(yōu)良的有機(jī)肥；飼料成本降低10-20％；技術(shù)好學(xué)，容易掌握。
四、環(huán)境保護(hù)本發(fā)明復(fù)合酶菌有效用于污水除臭，把生活垃圾做成有機(jī)肥，制作家庭清潔劑。
五、本發(fā)明復(fù)合酶菌還可用于人體保健、作飲料，健身及治病，發(fā)酵轉(zhuǎn)化的中藥成份及產(chǎn)生的抗氧化物，如維生素、抗生素、氨基酸、礦元素、多種酶和核酸，以及去氫表雄酮、染料木素等抗癌物質(zhì)，讓腸胃中的有益菌群占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，消除體內(nèi)有害菌和氧自由基的危害，除去疾病和衰老的根源，從而恢復(fù)增強(qiáng)免疫功能，使人體各種疾病好轉(zhuǎn)或康復(fù)。
六、復(fù)合酶菌不僅科技含量高，而且價(jià)格低復(fù)合酶菌每克含有益菌大于或等于9億個(gè)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)日本酵素菌每克含蓖6億個(gè)。功能多，如固氮能力高于日本酵素菌，比日本多了植物表型基因誘導(dǎo)調(diào)控表達(dá)技術(shù)，可大大提高農(nóng)作物的抗寒能力。用日本酵素菌發(fā)酵1噸肥料需要菌種20公斤，每公斤投資8元；用本發(fā)明復(fù)合酶菌發(fā)酵1噸肥料，只需要5-10公斤，每公斤僅6元。進(jìn)口1噸日本酵素菌需要25萬(wàn)元人民幣，而本發(fā)明復(fù)合酶菌1噸原菌種的價(jià)格僅10萬(wàn)元人民幣。
總之，本發(fā)明的研制成功，開(kāi)拓了微生物菌類(lèi)應(yīng)用的新前景，其推廣應(yīng)用，將造益于社會(huì)與人類(lèi)。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法，其特征在于，按重量比，細(xì)菌∶放線(xiàn)菌∶酵母菌＝1∶1∶1，分別放置在試管菌種搖瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基中，每1000g培養(yǎng)基是由牛肉膏3g、蛋白質(zhì)10g，食鹽5g和瓊脂18-20g與余量為水組成，每一菌種加入量為1000g培養(yǎng)基中加入5g，培養(yǎng)基加入菌種后，在溫度20-30℃、PH7.2-7.4培殖72-96小時(shí)，然后再把培養(yǎng)后的三個(gè)菌種分別置入三個(gè)種子罐內(nèi)，在10-40℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵148-240小時(shí)，之后，將發(fā)酵過(guò)的三種菌群按1∶1∶1的比例放入混合罐混勻，再按混合的復(fù)合菌種與麥麩為1∶100的重量比加入麥麩或米糠，在18-25℃下進(jìn)行固體擴(kuò)繁，時(shí)間240-360小時(shí)擴(kuò)繁后再在罐內(nèi)二次發(fā)酵148-240小時(shí)，成菌種粉，干燥后含水量≤3％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法，其特征在于，所說(shuō)的按1∶1∶1選取細(xì)菌10g、酵母菌10g和放線(xiàn)菌10g，分別放入三個(gè)菌種搖瓶培養(yǎng)基中，每個(gè)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基由牛肉膏6g、蛋白質(zhì)20g、食鹽10g、瓊脂36g加水至2000g制成，在25℃、PH7.3下培養(yǎng)72小時(shí)，再分別放入三個(gè)種子罐內(nèi)，在25℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵192小時(shí)，發(fā)酵后裝入混合罐進(jìn)行混合，再在每1g的混合菌體中加入麥麩100g，進(jìn)行固體擴(kuò)繁，20℃下，時(shí)間為248小時(shí)，擴(kuò)繁后再在種子罐內(nèi)進(jìn)行二次發(fā)酵，溫度25℃，時(shí)間192小時(shí)，過(guò)濾干燥后，含水2％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法，其特征在于，所說(shuō)的按1∶1∶1比例，選取細(xì)菌15g、酵母菌15g、放線(xiàn)菌15g，分別放入三個(gè)搖瓶培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基是由牛肉膏9g、蛋白質(zhì)30g、食鹽15g和瓊脂60g加水至3000g組成，在28℃、PH7.4下培養(yǎng)72小時(shí)，培養(yǎng)后三種菌體分別放入種子罐內(nèi)，在30℃下進(jìn)行厭氧發(fā)酵204小時(shí)，發(fā)酵后再將三種菌體在混合罐內(nèi)進(jìn)行混合，并在每1g的混合菌體內(nèi)加入100g米糠進(jìn)行擴(kuò)繁，擴(kuò)繁后再用發(fā)酵罐進(jìn)行二次發(fā)酵204小時(shí)成菌種粉，脫水干燥。
全文摘要
本發(fā)明是一種復(fù)合酶菌的培養(yǎng)制備方法，以解決生產(chǎn)中對(duì)有益菌類(lèi)的需要問(wèn)題，其解決的技術(shù)方案是，將細(xì)菌、酵母菌、放線(xiàn)菌分別按配比摻入培殖器內(nèi)的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基是由水、牛肉膏、蛋白質(zhì)、食鹽、瓊脂組成的固體培養(yǎng)基，在適宜的溫度和pH值下培養(yǎng)一定時(shí)間，再置入三個(gè)種子罐內(nèi)，在一定溫度下進(jìn)行厭氧發(fā)酵，發(fā)酵后將三種菌體進(jìn)行混合在一起，按比例加入麥麩或米糠進(jìn)行擴(kuò)繁，擴(kuò)繁后進(jìn)行二次發(fā)酵成菌種粉，干燥后，稱(chēng)重包裝入庫(kù)，本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，培殖效果好，其酶菌用途廣，價(jià)值大，有廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景及巨大的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C12N1/16GK1800360SQ200510107280
公開(kāi)日2006年7月12日 申請(qǐng)日期2005年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月16日
發(fā)明者曹明軍, 郭志學(xué) 申請(qǐng)人:曹明軍