專利名稱：一種培養(yǎng)基的配制和使用方法
(一)技術(shù)領(lǐng)域發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基的配制和使用方法，更具體地說涉及一種包含有谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉的培養(yǎng)基的配制和使用方法。屬于生物制品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì)，在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要，但是現(xiàn)有技術(shù)中有些培養(yǎng)基的某種組份容易分解，造成保存時(shí)間短等問題，導(dǎo)致培養(yǎng)基的使用成本十分高。其中，在動(dòng)物培養(yǎng)基中，谷氨酰胺是一種必要的組份，但是在常溫下，很短的時(shí)間內(nèi)，約7-10日中培養(yǎng)基中的谷氨酰胺成份就可降解90％以上，這給其商品化帶來(lái)很大的困難。這樣的培養(yǎng)基在現(xiàn)有技術(shù)中很多，都具有上述的缺陷，例如，中國(guó)專利CN1087778C公開了一種雜交瘤細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，其中包含有谷氨酰胺成份，但是這種培養(yǎng)基的保存時(shí)間十分有限，很難達(dá)到商業(yè)使用的目的。

發(fā)明內(nèi)容要解決的問題本發(fā)明的目的是提供一種含有易分解成份的培養(yǎng)基的配制和使用方法，尤其是一種含有谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉的培養(yǎng)基的配制和使用方法。
技術(shù)方案本發(fā)明中培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于將液體培養(yǎng)基中易分解組份單獨(dú)包裝，并將其各自置于合適的存儲(chǔ)條件下，在使用該培養(yǎng)基之前將兩部分混合。
上述培養(yǎng)基中的易分解組份是谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉；上述谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉濃縮液的存儲(chǔ)條件是低于-20攝氏度凍存，優(yōu)選-80攝氏度。
上述與谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉相配合使用的培養(yǎng)基組份的存儲(chǔ)條件是4至8攝氏度，優(yōu)選4攝氏度。
有益效果本發(fā)明方法具有良好的效果，因?yàn)槿菀追纸獾奈镔|(zhì)放置一段時(shí)間后便失去其效果，只能保存很短的時(shí)間，造成產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。用本發(fā)明方法來(lái)配制和使用培養(yǎng)基，能延長(zhǎng)培養(yǎng)基的保存時(shí)間，可以隨時(shí)地根據(jù)需要使用，使用十分方便，產(chǎn)品質(zhì)量更加穩(wěn)定，為液體培養(yǎng)基的商品化帶來(lái)便利。
具體實(shí)施方式
以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明用下面的實(shí)施例作進(jìn)一步的說明，但對(duì)本發(fā)明的范圍不起限制作用。
實(shí)施例1培養(yǎng)基Dulbecco′s Modified Eagle Medium(D-MEM)(低葡萄糖)用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其配比如下
將上述培養(yǎng)基中的谷氨酰胺單獨(dú)包裝，并在零下80攝氏度下保存。其他組份以4攝氏度保存，在使用時(shí)將其混合即可。
實(shí)施例2培養(yǎng)基Dulbecco′s Modified Eagle Medium(D-MEM)(高葡萄糖)，用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其配比如下
將上述培養(yǎng)基中的谷氨酰胺單獨(dú)包裝，并在零下20攝氏度下保存。其他組份以8攝氏度保存，在使用時(shí)將其混合即可。
實(shí)施例3 RPMI Medium 1640，用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其配比如下
將上述培養(yǎng)基中的谷氨酰胺單獨(dú)包裝，并在零下50攝氏度下保存。其他組份以6攝氏度保存，在使用時(shí)將其混合即可。
實(shí)施例4Medium 199，用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，其配比如下
將上述培養(yǎng)基中的谷氨酰胺單獨(dú)包裝，并在零下80攝氏度下保存。其他組份以4攝氏度保存，在使用時(shí)將其混合即可。
本發(fā)明方法及其得到的產(chǎn)品具有良好的效果，用本發(fā)明方法來(lái)配制和使用培養(yǎng)基，能延長(zhǎng)培養(yǎng)基的保存時(shí)間，可以隨時(shí)地根據(jù)需要使用，使用十分方便，降低使用成本，產(chǎn)品質(zhì)量更加穩(wěn)定，為液體培養(yǎng)基的商品化帶來(lái)便利。
權(quán)利要求
1.一種培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于將液體培養(yǎng)基中易分解組份單獨(dú)包裝，并將其各自置于合適的存儲(chǔ)條件下，在使用該培養(yǎng)基之前將兩部分混合。
2.如權(quán)利要求1所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中的培養(yǎng)基中的易分解組份是谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉。
3.如權(quán)利要求2所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中的谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉濃縮液的存儲(chǔ)條件是低于-20攝氏度凍存。
4.如權(quán)利要求2或3所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中的谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉濃縮液的存儲(chǔ)條件是-80攝氏度凍存。
5.如權(quán)利要求2所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中與谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉相配合使用的培養(yǎng)基組份的存儲(chǔ)條件是4至8攝氏度。
6.如權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中培養(yǎng)基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 30L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 84L-Cystine 2HCl(L-2鹽酸胱氨酸酯) 63L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 584L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化組氨酸) 42L-Isoleucine(L-異亮氨酸) 105L-Leucine(L-亮氨酸) 105L-Lysine hydrochloride(L-氯化賴氨酸) 146L-Methionine(L-蛋氨酸) 30L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 66L-Serine(L-絲氨酸) 42L-Threonine(L-蘇氨酸) 95L-Tryptophan(L-色氨酸) 16L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二鈉鹽) 104L-Valine(L-纈氨酸) 94Choline chloride(氯化膽堿) 4D-Calcium pantothenate(D-泛酸鈣) 4Folic Acid(葉酸) 4i-Inositol(i-肌醇) 7.2Niacinamide(煙酰胺) 4Pyridoxine hydrochloride(鹽酸吡哆醇) 4Riboflavin(核黃素) 0.4Thiamine hydrochloride(鹽酸硫胺素) 4Calcium Chloride(CaCl2)(anhyd.)(無(wú)水氯化鈣) 200Ferric Nitrate(Fe(NO3)3″9H2O)(9水硝酸鐵) 0.1Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(無(wú)水硫酸鎂) 97.67Potassium Chloride(KCl)(氯化鉀) 400Sodium Chloride(NaCl)(氯化鈉) 6400Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4-H2O)(一水磷酸二氫鈉) 125D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Phenol Red(酚紅) 15Sodium Pyruvate(丙酮酸鈉) 110。
7.如權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中培養(yǎng)基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 30L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 84L-Cystine 2HCl(L-2鹽酸胱氨酸酯) 63L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 580L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化組氨酸) 42L-Isoleucine(L-異亮氨酸) 105L-Leucine(L-殼氨酸) 105L-Lysine hydrochloride(L-氯化賴氨酸) 146L-Methionine(L-蛋氨酸) 30L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 66L-Serine(L-絲氨酸) 42L-Threonine(L-蘇氨酸) 95L-Tryptophan(L-色氨酸) 16L-Tyrosine(L-酪氨酸) 72L-Valine(L-纈氨酸) 94Choline chloride(氯化膽堿) 4D-Calcium pantothenate(D-泛酸鈣) 4Folic Acid(葉酸) 4i-Inositol(i-肌醇) 7.2Niacinamide(煙酰胺) 4Pyridoxine hydrochloride(鹽酸吡哆醇) 4Riboflavin(核黃素) 0.4Thiamine hydrochloride(鹽酸硫胺素) 4Calcium Chloride(CaCl2-2H2O)(二水氯化鈣) 264Ferric Nitrate(Fe(NO3)3″9H2O)(九水硝酸鐵) 0.1Magnesium Sulfate(MgSO4-7H2O)(七水硫酸鎂) 200Potassium Chloride(KCl)(氯化鉀) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氫鈉) 3700Sodium Chloride(NaCl)(氯化鈉) 6400Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4-2H2O)(二水磷酸二氫鈉) 141D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Phenol Red(酚紅) 15Sodium Pyruvate(丙酮酸鈉) 110。
8.如權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中培養(yǎng)基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 10L-Arginine(L-精氨酸) 200L-Asparagine(L-天門冬醯胺酸) 50L-Aspartic acid(L-天(門)冬氨酸) 20L-Cystine 2HCl(L-2鹽酸胱氨酸酯) 65L-Glutamic Acid(L-谷氨酸) 20L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 300L-Histidine(L-組氨酸) 15L-Hydroxyproline(L-羥(基)脯氨酸) 20L-Isoleucine(L-異亮氨酸) 50L-Leucine(L-亮氨酸) 50L-Lysine hydrochloride(L-氯化賴氨酸) 40L-Methionine(L-蛋氨酸) 15L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 15L-Proline(L-脯氨酸) 20L-Serine(L-絲氨酸) 30L-Threonine(L-蘇氨酸) 20L-Tryptophan(L-色氨酸) 5L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二鈉鹽) 29L-Valine(L-纈氨酸) 20Biotin(維生素H) 0.2Choline chloride(氯化膽堿) 3D-Calcium pantothenate(D-泛酸鈣) 0.25Folic Acid(葉酸) 1i-Inositol(i-肌醇) 35Niacinamide(煙酰胺) 1Para-Aminobenzoic Acid(對(duì)氨基苯(甲)酸) 1Pyridoxine hydrochloride(鹽酸吡哆醇) 1Riboflavin(核黃素) 0.2Thiamine hydrochloride(鹽酸硫胺素) 1Vitamin B12(維生素B12) 0.005Calcium nitrate(Ca(NO3)24H2O)(四水硝酸鈣) 100Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(無(wú)水硫酸鎂) 48.84Potassium Chloride(KCl)(氯化鉀) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氫鈉) 2000Sodium Chloride(NaCl)(氯化鈉) 5300Sodium Phosphate dibasic(Na2HPO4)anhydrous(無(wú)水磷酸二氫鈉) 800D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 2000Glutathione(reduced)(谷胱甘肽) 1HEPES 5958Phenol Red(酚紅) 5。
9.如權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基的配制和使用方法，其特征在于其中培養(yǎng)基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 50L-Alanine(L-丙胺酸) 25L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 70L-Asparticacid(L-天(門)冬氨酸) 30L-Cysteine hydrochloride-H2O(L-一水氯化半胱氨酸) 0.1L-Cystine 2HCl(L-2鹽酸胱氨酸酯) 26L-Glutamic Acid(L-谷氨酸) 75L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 100L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化組氨酸) 21.88L-Hydroxyproline(L-羥(基)脯氨酸) 10L-Isoleucine(L-異亮氨酸) 40L-Leucine(L-)亮氨酸) 60L-Lysine hydrochloride(L-氯化賴氨酸) 70L-Methionine(L-蛋氨酸) 15L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 25L-Proline(L-脯氨酸) 40L-Serine(L-絲氨酸) 25L-Threonine(L-蘇氨酸) 30L-Tryptophan(L-色氨酸) 10L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二鈉鹽) 40L-Valine(L-纈氨酸) 25Alpha-tocopherol Phosphate(α-磷酸維生素E) 0.01Ascorbic Acid(維生素C) 0.05Biotin(生物素) 0.01Choline chloride(氯化膽堿) 0.5D-Calcium pantothenate(D-泛酸鈣) 0.01Folic Acid(維生素B) 0.01i-Inositol(i-肌醇) 0.05Menadione(Vitamin K3)(維生素K3) 0.01Niacinamide(煙酰胺) 0.025Nicotinic acid(Niacin)(煙酸) 0.025Para-Aminobenzoic Acid(對(duì)氨基苯(甲)酸) 0.05Pyridoxal hydrochloride(鹽酸吡哆醛) 0.025Pyridoxine hydrochloride(鹽酸吡哆醇) 0.025Riboflavin(核黃素) 0.01Thiamine hydrochloride(鹽酸硫胺素) 0.01Vitamin A(acetate)(維生素A(醋酸鹽)) 0.1Vitamin D2(Calciferol)(維生素D2(鈣化醇)) 0.1Calcium Chloride(CaCl2)(anhyd.)(無(wú)水氯化鈣) 200Ferric nitrate(Fe(NO3)-9H2O)(九水硝酸鐵) 0.7Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(無(wú)水硫酸鎂) 97.67Potassium Chloride(KCl)(氯化鉀) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氫鈉) 2200Sodium Chloride(NaCl)(氯化鈉) 4750Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4)anhydrous(無(wú)水磷酸二氫鈉) 1402-deoxy-D-ribose(2-脫氧-D-核糖) 0.5Adenine su1fate(硫酸腺嘌呤) 10Adenosine 5′-phosphate(5’-磷酸腺苷) 0.2Adenosine 5′-triphosphate(5’-三磷酸腺苷) 1Cholesterol(膽固醇) 0.2D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Glutathione(reduced)(谷胱甘肽) 0.05Guanine hydrochloride(鹽酸鳥嘌呤) 0.3HEPES 5960Hypoxanthine Na(次黃嘌呤鈉) 0.4Phenol Red(酚紅) 20Ribose(核糖) 0.5Sodium Acetate(乙酸鈉) 50Thymine(胸腺嘧啶) 0.3Tween 8020Uracil(尿嘧啶) 0.3Xanthine-Na(黃嘌呤鈉) 0.34。
10.一種培養(yǎng)基，其特征在于用如權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的方法得到。
全文摘要
發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基的配制和使用方法，更具體地說涉及一種包含有谷氨酰胺和/或碳酸氫鈉的培養(yǎng)基的配制和使用方法。屬于生物制品領(lǐng)域。本發(fā)明培養(yǎng)基的配制和使用方法為將液體培養(yǎng)基中易分解組份單獨(dú)包裝，并將其各自置于合適的存儲(chǔ)條件下，在使用該培養(yǎng)基之前將兩部分混合。本發(fā)明方法具有良好的效果，因?yàn)槿菀追纸獾奈镔|(zhì)放置一段時(shí)間后便失去其效果，只能保存很短的時(shí)間，用本發(fā)明方法來(lái)配制和使用培養(yǎng)基，能延長(zhǎng)培養(yǎng)基的保存時(shí)間，可以隨時(shí)地根據(jù)需要使用，使用十分方便，產(chǎn)品質(zhì)量更加穩(wěn)定，為液體培養(yǎng)基的商品化帶來(lái)便利。
文檔編號(hào)C12N1/00GK1657604SQ20051005321
公開日2005年8月24日 申請(qǐng)日期2005年2月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月7日
發(fā)明者黃宗堂 申請(qǐng)人:黃宗堂