專利名稱：一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法。
背景技術(shù)：
合成培養(yǎng)基是一種人工配制的適合動物細(xì)胞營養(yǎng)要求的混合物質(zhì)，一般分為用雞胚、血清消化液等天然成份配制而成的培養(yǎng)基，以及應(yīng)用化學(xué)原料配制而成的合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基。從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)而論，可以分成加入凝固劑的固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、粉末培養(yǎng)基。例中國專利號ZL93112550.2，就公開了一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法。用上述方法制備的培養(yǎng)基存在著需要用兩種以上的制造設(shè)備來制成粉末，例如先使液態(tài)原料溶解、而后再制成粉末或用化學(xué)方法制成鹽類固體后磨成粉末。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種可省去培養(yǎng)基原料通過其它高成本轉(zhuǎn)變(液態(tài)轉(zhuǎn)固態(tài))方法的、而只需將少量的液態(tài)原料加入到固體原料中，以及使多種型號的培養(yǎng)基成分分解成具有相同成份的中間體(分組原料經(jīng)分組球磨、過8目篩后形成的自然物)，即可組合成各種型號的、具有通用性的粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，它依次包括如下步驟a.原料分組稱量；b.干燥；c.分組球磨；d.過篩分組原料；e.將分組原料干燥；f.將分組原料稱量并與氯化鈉和/或酚紅混合球磨；g.過篩成品；h.包裝成品。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還可進(jìn)一步通過如下技術(shù)方案加以解決，原料分租稱量為
第一種A組合計8320.192g1.氯化鈉 4000g 4.磷酸生育酚(液態(tài)) 0.08g2.無水氯化鈣 400g 5.維生素A(液態(tài))0.112g3.葡萄糖 3840g 6.吐溫80(液態(tài)) 80gB組合計4160g1.氯化鈉 1600g 2.葡萄糖 2560gC組合計1982.96g1.氯化鈉 400g 3.硫酸鎂 782.96g2.葡萄糖 800gD組合計2403.664g1.氯化鈉 1400g 10.鹽酸鳥嘌呤 2.4g2.葡萄糖 800g 11.胸腺嘧啶2.4g3.腺嘌呤硫酸鹽 80g 12.次黃嘌呤2.832g4.腺嘌呤三磷酸 8g13.黃嘌呤 2.752g5.尿嘧啶 6.4g 14.還原谷胱甘肽0.4g6.脫氧核糖 4g15.維生素C 0.4g7.核糖 4g16.肌醇0.4g8.腺嘌呤一磷酸 1.6g 17.對氨基苯甲酸0.4g9.膽固醇 1.6g 18.煙酰胺 0.2g19.煙酸0.2g 25.鹽酸吡哆醇 0.2g20.維生素K30.08g 26.D-泛酸鈣0.08g21.核黃素 0.08g 27.葉酸0.08g22.鹽酸硫胺0.08g 28.維生素D20.8g23.d-生物素0.08g 29.氯化膽堿4g24.鹽酸吡哆醛 0.2g 30.酚紅80gE組合計4138g
1.氯化鈉 1850g 4.L-谷按酰胺 800g2.L-鹽酸精氨酸560g 5.DL-色氨酸 160g3.L-鹽酸賴氨酸560g 6.L-鹽酸胱氨酸208gF組 合計2022.6g1.氯化鈉 925g 4.L-羥脯氨酸 80g2.DL-門冬氨酸 480g 5.硝酸鐵 57.6g3.DL-蘇氨酸 480gG組 合計1740.04g1.氯化鈉 925g 3.L-異亮氨酸 320g2.L-脯氨酸320g 4.L-鹽酸組氨酸175.04gH組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 5.L-苯丙氨酸 400g2.乙酸鈉 400g 6.DL-絲氨酸 400g3.DL-丙氨酸 400g 7.DL-纈氨酸 400g4.甘氨酸 400gI組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 3.DL-亮氨酸 960g2.DL-谷氨酸 1200g 4.DL-甲硫氨酸 240gJ組 合計19381.28g1.氯化鈉 14600g3.無水磷酸二氫鈉 11200g2.氯化鉀 3200g 4.L-酪氨酸二鈉鹽 461.28g第二種MEM(L) MEM(A)A組合計3261.5g A組 合計 3261.5g1.氯化鈉 1650g1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸精氨酸 693g 2.L-鹽酸精氨酸 693g3.L-鹽酸組氨酸 231g 3.L-鹽酸組氨酸 231g4.L-鹽酸賴氨酸 401.5g 4.L-鹽酸賴氨酸 401.5g5.L-異亮氨酸 286g 5.L-異亮氨酸 286g
MEM(L) MEM(A)B組 合計2939g B組 合計 2939g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5 2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5g3.L-甲硫氨酸 82.5g 3.L-甲硫氨酸 82.5g4.L-異亮氨酸 286g 4.L-亮氨酸286g5.L-苯丙氨酸 176g 5.L-苯丙氨酸 176g6.L-蘇氨酸 264g 6.L-蘇氨酸264g7.L-色氨酸 55g7.L-色氨酸55g8.L-纈氨酸 253g 8.L-纈氨酸253gMEM(L) MEM(A)C組 合計3256g C組 合計 2912.5g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉1650g2.L-谷氨酰胺 1606g 2.丁二酸550g3.丁二酸鈉 412.5g4.卡那霉素 300gMEM(L) MEM(A)D組 合計3388g D組 合計 3388g1.氯化鈉 2420g 1.氯化鈉 2420g2.無水磷酸二氫鈉 770g 2.無水磷酸二氫鈉 770g3.L-酪氨酸 198g 3.L-酪氨酸 198gMEM(L) MEM(A)E組 合計3299.5gE組 合計 3299.5g1.氯化鈉 549.5g 1.氯化鈉549.5g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖2750gMEM(L) MEM(A)F組 合計6587.2gF組 合計 6587.2g1.氯化鈉 2750g 1.氯化鈉2750g2.無水硫酸鎂 537.2g 2.無水硫酸鎂537.2g3.氯化鈣 1100g 3.無水氯化鈣1100g4.氯化鉀 2200g 4.氯化鉀2200g
MEM(L) MEM(A)G組 合計3294.56g G組合計3301.96g1.氯化鈉 500g 1.氯化鈉 500g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖 2750g3.D-泛酸鈣 5.5g 3.D-泛酸鈣 5.5g4.氯化膽堿 5.5g 4.酒石膽堿 7.75g5.葉酸 5.5g 5.氯化膽堿 5.5g6.煙酰胺 5.5g 6.葉酸 5.5g7.肌醇 11g7.煙酰胺 5.5g8.鹽酸吡哆辛 5.5g 8.鹽酸吡哆辛 5.5g9.核黃素 0.56g 9.肌醇 11g10.鹽酸硫胺 5.5g 10.核黃素 0.55g11.生物素 0.11g12.鹽酸硫胺5.5g干燥為將原料放置在真空干燥箱中干燥，干燥溫度為40℃～100℃，干燥時間為20～28小時，這樣既可以保證原料干燥又不破壞原料的培養(yǎng)性能；分組球磨為2～4小時；過篩分組原料為過8目篩，原分組原料經(jīng)過8目篩后分別成為相應(yīng)分組的固態(tài)粉末中間體，不同配方的培養(yǎng)基的中間體是相同的組分，因此具有通用性，預(yù)先生產(chǎn)相同的、具有通用性的中間體，可降低生產(chǎn)成本；將分組原料干燥為將分組原料放置在真空干燥箱中干燥，干燥溫度為40℃～70℃，干燥時間為20～28小時；將分組原料稱量與氯化鈉和/或酚紅混合球磨為分組原料與氯化鈉和/或酚紅等量均分后混合球磨，氯化鈉為29400g，并經(jīng)真空干燥箱干燥，干燥溫度為80℃～120℃，干燥時間為20～28小時(第一種方法)、氯化鈉為25968g和酚紅50g或氯化鈉為26392g和酚紅50g，并經(jīng)真空干燥箱干燥，干燥溫度為40℃～70℃，干燥時間為20～28小時(第二種方法)，混合球磨時間為2～4小時；過篩成品為過60目篩；包裝成品為無菌包裝。本發(fā)明的所有原料均可在國內(nèi)市場購得，除磷酸生育酚、維生素A、吐溫80為液態(tài)外，其他原料均為固態(tài)。本發(fā)明由于采用上述技術(shù)方案，保障了生物體的安全性，并不需要對現(xiàn)有技術(shù)的培養(yǎng)基配方進(jìn)行改動(例如將液態(tài)的維生素A制成固態(tài)的維生素A醋酸維等)，從而解決了液態(tài)物質(zhì)(原料)進(jìn)入到固態(tài)粉末培養(yǎng)基的問題和提高原料的中間體的一次生產(chǎn)產(chǎn)量，突顯了其通用性，縮短了生產(chǎn)周期、降低了生產(chǎn)成本，節(jié)約了投資資金。
具體實施例方式實施例1a.對各原料進(jìn)行分租稱量，其分租稱量時各原料成份及含量為A組合計8320.192g1.氯化鈉 4000g 4.磷酸生育酚(液態(tài)) 0.08g2.無水氯化鈣 400g 5.維生素A (液態(tài)) 0.112g3.葡萄糖 3840g 6.吐溫80(液態(tài)) 80gB組合計4160g1.氯化鈉 1600g 2.葡萄糖 2560gC組合計1982.96g1.氯化鈉 400g 3.硫酸鎂 782.96g2.葡萄糖 800gD組合計2403.664g1.氯化鈉 1400g 10.鹽酸鳥嘌呤 2.4g2.葡萄糖 800g 11.胸腺嘧啶2.4g3.腺嘌呤硫酸鹽 80g12.次黃嘌呤2.832g4.腺嘌呤三磷酸 8g 13.黃嘌呤 2.752g5.尿嘧啶 6.4g 14.還原谷胱甘肽0.4g6.脫氧核糖 4g 15.維生素C 0.4g7.核糖 4g 16.肌醇0.4g8.腺嘌呤一磷酸 1.6g 17.對氨基苯甲酸0.4g9.膽固醇 1.6g 18.煙酰胺 0.2g19.煙酸0.2g 25.鹽酸吡哆醇 0.2g20.維生素K30.08g 26.D-泛酸鈣0.08g
21.核黃素 0.08g27.葉酸 0.08g22.鹽酸硫胺0.08g28.維生素D20.8g23.d-生物素0.08g29.氯化膽堿 4g24.鹽酸吡哆醛 0.2g 30.酚紅 80gE組 合計4138g1.氯化鈉 1850g 4.L-谷按酰胺 800g2.L-鹽酸精氨酸560g 5.DL-色氨酸 160g3.L-鹽酸賴氨酸560g 6.L-鹽酸胱氨酸208gF組 合計2022.6g1.氯化鈉 925g 4.L-羥脯氨酸 80g2.DL-門冬氨酸 480g 5.硝酸鐵 57.6g3.DL-蘇氨酸 480gG組 合計1740.04g1.氯化鈉 925g 3.L-異亮氨酸 320g2.L-脯氨酸320g 4.L-鹽酸組氨酸175.04gH組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 5.L-苯丙氨酸 400g2.乙酸鈉 400g 6.DL-絲氨酸 400g3.DL-丙氨酸 400g 7.DL-纈氨酸 400g4.甘氨酸 400gI組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 3.DL-亮氨酸 960g2.DL-谷氨酸 1200g 4.DL-甲硫氨酸 240gJ組 合計19381.28g1.氯化鈉 14600g3.無水磷酸二氫鈉 11200g2.氯化鉀 3200g 4.L-酪氨酸二鈉鹽 461.28gb.再將分組稱量后的原料放置在70℃的真空干燥箱中干燥24小時；c.對分組原料球磨3小時；d.對分組原料過8目篩成為固態(tài)粉末狀中間體；e.將分組原料置于55℃的真空干燥箱中干燥24小時；f.將分組原料的固態(tài)粉末狀中間體和氯化鈉29400g(在一缸內(nèi))混合，混合球磨3小時；或分別將分組原料的固態(tài)粉末狀中間體和氯化鈉29400g均勻等量分成若干等份(多缸)，混合球磨3小時。為適應(yīng)市售(SQM16×4)雙頭4缸球磨機(jī)的容積，本實施例可將上述各分組原料的固態(tài)粉末狀中間體和氯化鈉平均地分成8份，分別置于球磨機(jī)的球磨缸內(nèi)再進(jìn)行二次混合球磨，氯化鈉需經(jīng)真空干燥箱干燥，干燥溫度與干燥時間分別對應(yīng)為80℃、20小時；100℃、24小時；120℃，28小時。
實施例2與實施例1相比，本實施例中的步驟b.為再將分組稱量后的原料放置在40℃的真空干燥箱中干燥20小時，c.為對分組原料球磨2小時，e.為將分組原料置于40℃的真空干燥箱中干燥20小時，f.混合球磨2小時，其他步驟不變。
實施例3與實施例1相比，本實施例中的步驟b.為再將分組稱量后的原料放置在70℃的真空干燥箱中干燥28小時，c.為對分組原料球磨4小時，e.為將分組原料置于70℃的真空干燥箱中干燥28小時，f.混合球磨4小時，其他步驟不變。
實施例4a.對各原料進(jìn)行分租稱量，其分租稱量時各原料成份及含量為MEM(L) MEM(A)A組 合計 3261.5gA組合計3261.5g1.氯化鈉1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸精氨酸 693g 2.L-鹽酸精氨酸 693g3.L-鹽酸組氨酸 231g 3.L-鹽酸組氨酸 231g84.L-鹽酸賴氨酸 401.5g 4.L-鹽酸賴氨酸 401.5g5.L-異亮氨酸286g 5.L-異亮氨酸 286g
MEM(L) MEM(A)B組 合計 2939g B組 合計2939g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5g2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5g3.L-甲硫氨酸 82.5g 3.L-甲硫氨酸 82.5g4.L-異亮氨酸 286g 4.L-亮氨酸 286g5.L-苯丙氨酸 176g 5.L-苯丙氨酸 176g6.L-蘇氨酸 264g 6.L-蘇氨酸 264g7.L-色氨酸 55g 7.L-色氨酸 55g8.L-纈氨酸 253g 8.L-纈氨酸 253gMEM(L) MEM(A)C組 合計 3256g C組 合計 2912.5g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-谷氨酰胺 1606g 2.丁二酸 550g3.丁二酸鈉 412.5g4.卡那霉素 300gMEM(L) MEM(A)D組 合計 3388g D組 合計 3388g1.氯化鈉 2420g 1.氯化鈉 2420g2.無水磷酸二氫鈉 770g 2.無水磷酸二氫鈉 770g3.L-酪氨酸 198g 3.L-酪氨酸 198gMEM(L) MEM(A)E組 合計 3299.5g E組 合計 3299.5g1.氯化鈉 549.5g1.氯化鈉 549.5g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖 2750gMEM(L) MEM(A)F組 合計 6587.2g F組 合計 6587.2g1.氯化鈉 2750g 1.氯化鈉 2750g2.無水硫酸鎂 537.2g2.無水硫酸鎂 537.2g3.氯化鈣 1100g 3.無水氯化鈣 1100g94.氯化鉀 2200g 4.氯化鉀 2200g
MEM(L) MEM(A)G組 合計3294.56g G組 合計 3301.96g1.氯化鈉 500g 1.氯化鈉 500g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖 2750g3.D-泛酸鈣 5.5g 3.D-泛酸鈣 5.5g4.氯化膽堿 5.5g 4.酒石膽堿 7.75g5.葉酸 5.5g 5.氯化膽堿 5.5g6.煙酰胺 5.5g 6.葉酸 5.5g7.肌醇 11g 7.煙酰胺 5.5g8.鹽酸吡哆辛 5.5g 8.鹽酸吡哆辛 5.5g9.核黃素 0.56g 9.肌醇 11g10.鹽酸硫胺 5.5g 10.核黃素0.55g11.生物素0.11g12.鹽酸硫胺 5.5g在上述數(shù)值中，MEM(L)為一列、MEM(A)為另一列。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基系列是為了使用者在細(xì)胞培養(yǎng)時使用不同的技術(shù)方法而形成的系列產(chǎn)品，MEM(A)是用高壓濕法高溫滅菌技術(shù)來配制的培養(yǎng)基；MEM(L)是用超濾除菌技術(shù)來配制的培養(yǎng)基?，F(xiàn)以MEM(L)為例b.將MEM(L)列所列的分組稱量后的原料放置在70℃的真空干燥箱中干燥24小時；c.對分組原料球磨3小時；d.對分組原料過8目篩成為固態(tài)粉末狀中間體；e.將分組原料置于55℃的真空干燥箱中干燥24小時；f.將預(yù)先混合、干燥后的氯化鈉25968g和酚紅50g與分組原料的固態(tài)粉末狀中間體進(jìn)行混合，混合球磨3小時；為適應(yīng)市售(SQM16×4)雙頭4缸球磨機(jī)的容積，本實施例可將上述各分組原料的固態(tài)粉末狀中間體和氯化鈉平均地分成8份，分別置于球磨機(jī)的球磨缸內(nèi)再進(jìn)行二(缸)次混合球磨，干燥溫度與干燥時間分別對應(yīng)為80℃、20小時；100℃、24小時；120℃，28小時；g.對成品過60目篩；
h.在無菌室內(nèi)包裝成品。
在本實施例中，酚紅和氯化鈉混合干燥后，其顏色為類白色，有別于實施例1中的外表色澤。這一色澤的變化可以指示出產(chǎn)品的吸濕程度，在吸濕變化上比實施例1更靈敏。
實施例5與實施例4相比，本實施例中的步驟b.為再將分組稱量后的原料放置在40℃的真空干燥箱中干燥20小時，c.為對分組原料球磨2小時，e.為將分組原料置于40℃的真空干燥箱中干燥20小時，f.混合球磨2小時，其他步驟不變。
實施例6與實施例4相比，本實施例中的步驟b.為再將分組稱量后的原料放置在70℃的真空干燥箱中干燥28小時，c.為對分組原料球磨4小時，e.為將分組原料置于70℃的真空干燥箱中干燥28小時，f.混合球磨4小時，其他步驟不變。
至于MEM(A)列，除步驟a，以及在f步驟中，將MEM(A)列中預(yù)先混合的氯化鈉26392g和酚紅50g替換MEM(L)列中的氯化鈉25968g和酚紅50g和將MEM(A)列中的各組原料及數(shù)值替換MEM(L)中的各組原料及數(shù)值外，其余步驟不變，故不另行贅述。
本發(fā)明在生產(chǎn)不同型號的MEM時，可將原料成份相同的組大量生產(chǎn)，而后再與其他原料不同的組進(jìn)行混合球磨，制成不同型號的產(chǎn)品，從而將復(fù)雜的配方成份簡化為幾種成份的配置。
權(quán)利要求
1.一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是它依次包括如下步驟a.原料分組稱量；b.干燥；c.分組球磨；d.過篩分組原料；e.將分組原料干燥；f.將分組原料與氯化鈉和/或酚紅混合球磨；g.過篩成品；h.包裝成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是原料分租稱量為第一種A組合計8320.192g1.氯化鈉 4000g 4.磷酸生育酚(液態(tài)) 0.08g2.無水氯化鈣 400g 5.維生素A(液態(tài))0.112g3.葡萄糖 3840g 6.吐溫80(液態(tài)) 80gB組合計4160g1.氯化鈉 1600g 2.葡萄糖 2560gC組合計1982.96g1.氯化鈉 400g 3.硫酸鎂 782.96g2.葡萄糖 800gD組合計2403.664g1.氯化鈉 1400g 10.鹽酸鳥嘌呤 2.4g2.葡萄糖 800g 11.胸腺嘧啶2.4g3.腺嘌呤硫酸鹽80g 12.次黃嘌呤 2.832g4.腺嘌呤三磷酸8g 13.黃嘌呤 2.752g5.尿嘧啶 6.4g14.還原谷胱甘肽 0.4g6.脫氧核糖4g 15.維生素C 0.4g7.核糖4g 16.肌醇 0.4g8.腺嘌呤一磷酸1.6g17.對氨基苯甲酸 0.4g9.膽固醇 1.6g18.煙酰胺 0.2g19.煙酸 0.2g25.鹽酸吡哆醇 0.2g20.維生素K30.08g 26.D-泛酸鈣 0.08g21.核黃素 0.08g 27.葉酸 0.08g22.鹽酸硫胺 0.08g 28.維生素D2 0.8g23.d-生物素 0.08g 29.氯化膽堿 4g24.鹽酸吡哆醛 0.2g30.酚紅 80gE組 合計4138g1.氯化鈉 1850g 4.L-谷按酰胺800g2.L-鹽酸精氨酸560g5.DL-色氨酸 160g3.L-鹽酸賴氨酸560g6.L-鹽酸胱氨酸 208gF組 合計2022.6g1.氯化鈉 925g4.L-羥脯氨酸80g2.DL-門冬氨酸 480g5.硝酸鐵57.6g3.DL-蘇氨酸 480gG組 合計1740.04g1.氯化鈉 925g3.L-異亮氨酸320g2.L-脯氨酸320g4.L-鹽酸組氨酸 175.04gH組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 5.L-苯丙氨酸400g2.乙酸鈉 400g6.DL-絲氨酸 400g3.DL-丙氨酸 400g 7.DL-纈氨酸400g4.甘氨酸 400gI組 合計4250g1.氯化鈉 1850g 3.DL-亮氨酸960g2.DL-谷氨酸 1200g 4.DL-甲硫氨酸 240gJ組 合計19381.28g1.氯化鈉 14600g 3.無水磷酸二氫鈉 11200g2.氯化鉀 3200g 4.L-酪氨酸二鈉鹽 461.28g第二種MEM(L) MEM(A)A組 合計 3261.5gA組 合計 3261.5g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸精氨酸693g 2.L-鹽酸精氨酸 693g3.L-鹽酸組氨酸231g 3.L-鹽酸組氨酸 231g4.L-鹽酸賴氨酸401.5g 4.L-鹽酸賴氨酸 401.5g5.L-異亮氨酸 286g 5.L-異亮氨酸 286gMEM(L) MEM(A)B組合計 2939g B組 合計 2939g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5g 2.L-鹽酸半胱氨酸 172.5g3.L-甲硫氨酸 82.5g 3.L-甲硫氨酸 82.5g4.L-異亮氨酸 286g 4.L-亮氨酸 286g5.L-苯丙氨酸 176g 5.L-苯丙氨酸 176g6.L-蘇氨酸264g 6.L-蘇氨酸 264g7.L-色氨酸55g7.L-色氨酸 55g8.L-纈氨酸253g 8.L-纈氨酸 253gMEM(L) MEM(A)C組 合計3256g C組 合計 2912.5g1.氯化鈉 1650g 1.氯化鈉 1650g2.L-谷氨酰胺 1606g 2.丁二酸 550g3.丁二酸鈉 412.5g4.卡那霉素 300gMEM(L) MEM(A)D組 合計 3388g D組 合計3388g1.氯化鈉 2420g 1.氯化鈉 2420g2.無水磷酸二氫鈉 770g 2.無水磷酸二氫鈉 770g3.L-酪氨酸198g 3.L-酪氨酸198gMEM(L) MEM(A)E組 合計 3299.5g E組 合計3299.5g1.氯化鈉 549.5g1.氯化鈉 549.5g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖 2750gMEM(L) MEM(A)F組 合計 6587.2g F組 合計6587.2g1.氯化鈉 2750g 1.氯化鈉 2750g2.無水硫酸鎂 537.2g2.無水硫酸鎂 537.2g3.氯化鈣 1100g 3.無水氯化鈣 1100g4.氯化鉀 2200g 4.氯化鉀 2200gMEM(L) MEM(A)G組 合計 3294.56g G組 合計3301.96g1.氯化鈉 500g 1.氯化鈉 500g2.葡萄糖 2750g 2.葡萄糖 2750g3.D-泛酸鈣5.5g 3.D-泛酸鈣5.5g4.氯化膽堿5.5g 4.酒石膽堿7.75g5.葉酸5.5g 5.氯化膽堿5.5g6.煙酰胺 5.5g 6.葉酸5.5g7.肌醇11g 7.煙酰胺 5.5g8.鹽酸吡哆辛 5.5g 8.鹽酸吡哆辛 5.5g9.核黃素 0.56g 9.肌醇11g10.鹽酸硫胺 5.5g 10.核黃素 0.55g11.生物素 0.11g12.鹽酸硫胺 5.5g
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是干燥為將原料放置在真空干燥箱中干燥，干燥溫度為40C°～100C°，干燥時間為20～28小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是分組球磨為2～4小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是過篩分組原料為過8目篩。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是將分組原料干燥為將分組原料放置在真空干燥箱中干燥，干燥溫度為40C°～70C°，干燥時間為20～28小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是將分組原料與氯化鈉和/或酚紅混合球磨為分組原料與氯化鈉和/或酚紅等量均分后混合球磨，氯化鈉為29400g，并經(jīng)真空干燥箱干燥，干燥溫度為80℃～120℃，干燥時間為20～28小時；氯化鈉為25968g和酚紅50g或氯化鈉為26392g和酚紅50g，并經(jīng)真空干燥箱干燥，干燥溫度為40C°～70C°，干燥時間為20～28小時，混合球磨時間為2～4小時。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是過篩成品為過60目篩。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法，其特征是包裝成品為無菌包裝。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種粉末型動物細(xì)胞培養(yǎng)基制備方法。它依次包括如下步驟a.原料分組稱量；b.干燥；c.分組球磨；d.過篩分組原料；e.將分組原料干燥；f.將分組原料稱量并與氯化鈉和/或酚紅混合球磨；g.過篩成品；h.包裝成品。本發(fā)明保障了生物體的安全性，并不需要對現(xiàn)有技術(shù)的培養(yǎng)基配方進(jìn)行改動(例如將液態(tài)的維生素A制成固態(tài)的維生素A醋酸維等)，從而解決了液態(tài)物質(zhì)(原料)進(jìn)入到固態(tài)粉末培養(yǎng)基的問題和提高原料的中間體的一次生產(chǎn)產(chǎn)量，突顯了其通用性，縮短了生產(chǎn)周期、降低了生產(chǎn)成本，節(jié)約了投資資金。
文檔編號C12N5/06GK1699555SQ20041001849
公開日2005年11月23日 申請日期2004年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月20日
發(fā)明者徐俊杰, 徐斌 申請人:上海旭太生物工程有限公司