專利名稱：一株高生物量富鐵酵母及其選育方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物發(fā)酵工業(yè)技術(shù)領(lǐng)域中的一株富鐵酵母及其選育方法與在生產(chǎn)中的應(yīng)用，特別是涉及一株高生物量富鐵酵母及其選育方法與在生產(chǎn)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
鐵是人和動(dòng)物維持生命和發(fā)育所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是體內(nèi)不可缺少的微量元素，參與血液中氧的運(yùn)輸作用。鐵的缺乏會(huì)引起人及動(dòng)物缺鐵性貧血及其它一些臨床癥狀。日常生活中，通常以無(wú)機(jī)鹽方式補(bǔ)充鐵，但這種補(bǔ)鐵方式不利于人及動(dòng)物對(duì)鐵的吸收利用。
酵母細(xì)胞能將無(wú)機(jī)狀態(tài)的鐵轉(zhuǎn)化成有機(jī)狀態(tài)的鐵，可以提高鐵的利用率。利用富鐵酵母將無(wú)機(jī)狀態(tài)的鐵轉(zhuǎn)化成有機(jī)狀態(tài)的鐵是開發(fā)新型鐵源，提高鐵的利用率的有效措施。富鐵酵母在預(yù)防和治療人及動(dòng)物缺鐵性貧血及其它一些缺鐵性疾病方面將發(fā)揮顯著的作用。此外，富鐵酵母細(xì)胞還含有豐富的蛋白質(zhì)、核酸、維生素及機(jī)體必需的十幾種微量元素，是一種豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
近年來(lái)，盡管已有一些稱為“富鐵酵母”的產(chǎn)品，但這些產(chǎn)品存在明顯的缺陷和不足一是沒有對(duì)酵母菌種進(jìn)行篩選和育種，經(jīng)常是用隨機(jī)得到的酵母菌種發(fā)酵生產(chǎn)富鐵酵母產(chǎn)品。但是由于不同酵母菌種對(duì)鐵的抗性差異較大，對(duì)鐵離子的吸收轉(zhuǎn)化能力差異也較大，因此產(chǎn)品缺乏穩(wěn)定性，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。
二是沒有對(duì)富鐵酵母發(fā)酵培養(yǎng)基的鐵離子濃度、培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，雖然培養(yǎng)的酵母稱為“富鐵酵母”，但是其酵母細(xì)胞的含鐵量較低，細(xì)胞生物量也較低。
目前，生產(chǎn)稱為“富鐵酵母”細(xì)胞的方法大體有三種第一種是采用混合處理方法，即將一定量的檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵與市場(chǎng)上的面包酵母或啤酒酵母細(xì)胞混合而成；第二種是采用簡(jiǎn)單的吸附方法，將市場(chǎng)上的面包酵母或啤酒酵母細(xì)胞懸浮于含有一定濃度的檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵的水溶液中處理一定時(shí)間，使鐵離子吸附于酵母細(xì)胞表面；第三種是在含有一定鐵離子的培養(yǎng)基中培養(yǎng)酵母細(xì)胞，但是對(duì)酵母菌種沒有進(jìn)行任何篩選和育種，酵母菌種是隨機(jī)獲得的。
上述方法中，第一種和第二種的主要缺陷在于酵母細(xì)胞未能有效地將無(wú)機(jī)鐵轉(zhuǎn)化為有機(jī)鐵，導(dǎo)致人或動(dòng)物對(duì)其所含鐵的吸收利用率低。第三種方法的主要缺陷在于這種技術(shù)對(duì)培養(yǎng)基的鐵離子濃度、培養(yǎng)條件未進(jìn)行優(yōu)化，因此采用這種技術(shù)培養(yǎng)的酵母中，有機(jī)鐵含量較低(每克干酵母細(xì)胞有機(jī)鐵的含量在10毫克以下)、細(xì)胞生物量也較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一株高生物量的富鐵酵母菌株。
本發(fā)明提供的高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZYGF-15，該菌株已于2003年02月26日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC)，保藏號(hào)為CGMCC № 0895。
高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)的個(gè)體細(xì)胞形為橢圓形，菌落形態(tài)特征是菌落凸起、光滑、乳白色、邊緣整齊。最適生長(zhǎng)溫度30℃。生長(zhǎng)最適pH為5.5。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種高生物量的富鐵酵母菌株的選育方法。
一種高生物量的富鐵酵母菌株的選育方法，包括如下步驟1)根據(jù)不同酵母菌種的生理生化特性，在含有梯度鐵離子濃度的培養(yǎng)基中分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種；2)對(duì)生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種進(jìn)行生孢培養(yǎng)、單倍體分離、誘變，篩選具有不同交配型及不同遺傳標(biāo)記的單倍體突變菌株；3)將分離到的生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌單倍體突變菌株進(jìn)行雜交；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高含鐵量的二倍體雜交優(yōu)良菌株，即高生物量富鐵酵母菌株。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種利用高生物量富鐵酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)生產(chǎn)高生物量的富鐵酵母產(chǎn)品的方法。
一種利用高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)生產(chǎn)富鐵酵母產(chǎn)品的方法，包括斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、至少二級(jí)液體種子培養(yǎng)、發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)、得到產(chǎn)品。
所述液體種子培養(yǎng)為二級(jí)至六級(jí)種子培養(yǎng)。所述發(fā)酵罐培養(yǎng)完成后，收集酵母細(xì)胞并干燥、粉碎得到產(chǎn)品。所述斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、液體種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括8％-20％總糖量的有機(jī)物，200-800微克/毫升的鐵酸鹽，pH為4.0-8.0；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)的接種量為5％-30％。所述鐵酸鹽為檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵。所述有機(jī)物選自麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合。本發(fā)明的優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)條件為接種量5-30％，25-35℃攪拌培養(yǎng)16-30小時(shí)。
本發(fā)明使用的高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)不僅生物量高，而且細(xì)胞的有機(jī)鐵含量較高，每克干細(xì)胞含有機(jī)鐵量高達(dá)25毫克。
本發(fā)明利用高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC№0895)生產(chǎn)高生物量的富鐵酵母產(chǎn)品的方法使用的發(fā)酵底物為普通的麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合，只需調(diào)節(jié)其總糖含量，添加鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)等即可進(jìn)行生產(chǎn)，方法簡(jiǎn)單，成本低廉。本發(fā)明的生產(chǎn)方法實(shí)用性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，對(duì)發(fā)酵設(shè)備及生產(chǎn)條件沒有特殊要求，利用一般發(fā)酵廠的設(shè)備和生產(chǎn)條件即可生產(chǎn)，投資少、見效快、效益高，不但適合于大規(guī)模的生產(chǎn)還適合于小批量的生產(chǎn)，具有廣闊的實(shí)際應(yīng)用前景。


圖1為高生物量富鐵酵母的生產(chǎn)工藝流程示意圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1、高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC№0895)的選育高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)的選育分為以下幾個(gè)步驟1)根據(jù)酵母菌對(duì)硫酸亞鐵的抗性測(cè)定進(jìn)行初篩，測(cè)定了402株不同種屬的酵母菌分別在含有200微克/毫升、400微克/毫升、600微克/毫升、800微克/毫升、1000微克/毫升、1200微克/毫升、1400微克/毫升、1600微克/毫升、1800微克/毫升、2000微克/毫升的梯度鐵離子濃度的YEPD固體培養(yǎng)基(酵母粉1％，蛋白胨1％，葡萄糖4％，1％瓊脂粉)上的生長(zhǎng)情況，從中選出28株在含有1600微克/毫升鐵離子濃度的YEPD固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好的菌株。
2)測(cè)定初篩得到的28株菌株在含有600微克/毫升鐵離子濃度的YEPD液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量。通過篩選，獲得7株細(xì)胞生物量較高的菌株(每升培養(yǎng)液的細(xì)胞干重在17克以上，但每克干細(xì)胞的含鐵量在8毫克以下)和5株細(xì)胞含鐵量較高的菌株(每克干細(xì)胞的含鐵量在16毫克以上，但每升培養(yǎng)液的細(xì)胞干重在10克以下)。
3)通過生孢實(shí)驗(yàn)，從上述菌株中挑選出一株生物量較高、生孢好的二倍體ZY-46(啤酒酵母菌)和一株細(xì)胞含鐵量較高、生孢好的二倍體ZY-173(面包酵母菌)，按常規(guī)方法對(duì)其進(jìn)行生孢培養(yǎng)和單倍體分離。分別測(cè)定單倍體菌株的細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量，從中選出生物量較高的單倍體ZY-46-12(α)和細(xì)胞含鐵量較高的單倍體ZY-173-29(a)。
4)用亞硝基胍和硫酸二乙酯分別對(duì)ZY-46-12(α)和ZY-173-29(a)進(jìn)行誘變，獲得營(yíng)養(yǎng)缺陷突變株，從突變株中選出帶有不同氨基酸缺陷標(biāo)記的突變株ZY-46-12-30(α，leu)和ZY-173-29-5(a，trp)作為雜交親株。
5)用群體雜交法將ZY-46-12-30(α，leu)和ZY-173-29-5(a，trp)的細(xì)胞進(jìn)行雜交，在基本培養(yǎng)基(YNB培養(yǎng)基)上篩選雜交子。
6)測(cè)定獲得的雜交子在含有600微克/毫升鐵離子的YEPD培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量。從中選育出細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量明顯優(yōu)于雜交親株的雜交菌株ZYGF-15。雜交菌株ZYGF-15具有雜交親株的優(yōu)良性狀。雜交菌株ZYGF-15的細(xì)胞生物量和細(xì)胞鐵含量明顯高于親株ZY-46和ZY-173，每升培養(yǎng)液的細(xì)胞干重達(dá)25克以上，每克干細(xì)胞的含鐵量在20毫克以上，結(jié)果表明雜交菌株ZYGF-15是一株優(yōu)良的富鐵酵母，即高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)。
7)高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)的遺傳穩(wěn)定性分析將高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)在YEPD固體培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)30次，取適量細(xì)胞經(jīng)適當(dāng)稀釋后，涂布YEPD平皿，培養(yǎng)后，隨機(jī)分別挑取100個(gè)單菌落于無(wú)菌水中，在室溫條件下饑餓4-6小時(shí)。取饑餓后的菌液分別接種于含有600微克/毫升鐵離子的YEPD培養(yǎng)基、YNB培養(yǎng)基、YNB+LEU培養(yǎng)基和YNB+TRP培養(yǎng)基，培養(yǎng)結(jié)果證明挑取的100個(gè)單菌落在這四種培養(yǎng)基都生長(zhǎng)，沒有出現(xiàn)分離現(xiàn)象。隨機(jī)挑10個(gè)單落在含有600微克/毫升鐵離子的的YEPD培養(yǎng)基中培養(yǎng)培養(yǎng)后測(cè)定細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量，結(jié)果表明細(xì)胞生物量和細(xì)胞含鐵量無(wú)明顯變化。上述結(jié)果證明高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)是一株遺傳穩(wěn)定的、細(xì)胞生物量高、細(xì)胞含鐵量高的優(yōu)良富鐵酵母菌。
實(shí)施例2、高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC№0895)的優(yōu)化培養(yǎng)條件1)采用單因子發(fā)酵實(shí)驗(yàn)和多因子正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行高生物量富鐵酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)的培養(yǎng)條件(包括培養(yǎng)基組分、鐵酸鹽濃度、培養(yǎng)基的pH值、通氣量、接種量及發(fā)酵時(shí)間等)實(shí)驗(yàn)，確定了優(yōu)化培養(yǎng)條件麥芽汁培養(yǎng)基(或糖蜜培養(yǎng)基或淀粉水解糖培養(yǎng)基)，總糖含量為8％-20％，培養(yǎng)基中鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為200微克-800微克/毫升，培養(yǎng)基的pH為4.5-7.0，接種量為5％-30％，25℃-35℃攪拌培養(yǎng)16-30小時(shí)。
2)在優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)條件下發(fā)酵培養(yǎng)高生物量和高含鐵量的富鐵酵母在優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，每升培養(yǎng)液的細(xì)胞干重達(dá)30克以上，每克干細(xì)胞的含鐵量達(dá)25毫克以上。
實(shí)施例3、富鐵酵母的生產(chǎn)高生物量和高鐵含量的富鐵酵母產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝包括斜面菌種→液體菌種→一級(jí)液體種子培養(yǎng)→二級(jí)液體種子培養(yǎng)→三級(jí)液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細(xì)胞及干燥→粉碎→高生物量及高鐵含量的富鐵酵母。下面對(duì)各生產(chǎn)工藝進(jìn)一步說(shuō)明如下(1)斜面菌種將高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)接種于含有總糖含量為8％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為400微克/毫升的麥芽汁固體斜面上，在25-35℃的條件下，培養(yǎng)48小時(shí)后，放入4℃冰箱保存。
(2)液體菌種將保存的高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)活化后，接一環(huán)細(xì)胞于裝有150毫升總糖含量為10％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為400微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，于25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)18小時(shí)，即為液體菌種。
(3)一級(jí)液體種子培養(yǎng)按15％的接種量將液體菌種接入裝有150毫升總糖含量為18％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為600微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的三角瓶中，在25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)16小時(shí)，即為一級(jí)液體種子培養(yǎng)物。
(4)二級(jí)液體種子培養(yǎng)按15％的接種量將一級(jí)種子培養(yǎng)液接入裝有45升總糖含量為20％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為600微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的小卡氏發(fā)酵罐，在25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)16小時(shí)，即為二級(jí)液體種子培養(yǎng)物。
(5)三級(jí)液體種子培養(yǎng)按15％的接種量將二級(jí)種子培養(yǎng)液接入裝有450升總糖含量為20％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為600微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的大卡氏發(fā)酵罐，在25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)16小時(shí)，即為三級(jí)液體種子培養(yǎng)物。
(6)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)按40％的接種量將三級(jí)種子培養(yǎng)液接入裝有2250升總糖含量為20％、鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)濃度為600微克/毫升的麥芽汁培養(yǎng)基的發(fā)酵罐，在25-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)14小時(shí)。
(7)收集酵母細(xì)胞及干燥采用板框壓榨或離心收集富鐵酵母細(xì)胞。在45～85℃條件下風(fēng)干使其含水量小于5％。
(8)粉碎用粉碎機(jī)將風(fēng)干的富鐵酵母細(xì)胞粉碎。
(9)包裝用不透氣的包裝袋包裝，即為高生物量的高富鐵含量的富鐵酵母。
實(shí)施例4、富鐵酵母的生產(chǎn)以淀粉水解糖為培養(yǎng)基，其發(fā)酵培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件是總糖量為8-20％的淀粉水解糖，0.5％的玉米水解液，0.4％硫酸銨，400-600微克/毫升的鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)，培養(yǎng)基的pH為6，接種量為15％，在28-35℃的條件下，攪拌培養(yǎng)20小時(shí)。
本實(shí)施例的生產(chǎn)工藝增加四級(jí)液體種子培養(yǎng)，其條件與三級(jí)液體種子培養(yǎng)大體相同，其他工藝條件與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例5、富鐵酵母的生產(chǎn)以淀粉水解糖和甜菜糖蜜為培養(yǎng)基，其發(fā)酵培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件是總糖量20％的淀粉水解糖和甜菜糖蜜，其重量份數(shù)比為1∶3，0.8％的玉米水解液，0.8％硫酸銨，0.10％磷酸，600微克/毫升的鐵酸鹽(如檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵)，培養(yǎng)基的pH為5，接種量為30％，在25-35℃攪拌培養(yǎng)16小時(shí)。
其生產(chǎn)工藝包括液體菌種→一級(jí)液體種子培養(yǎng)→二級(jí)液體種子培養(yǎng)→三級(jí)液體種子培養(yǎng)→四級(jí)液體種子培養(yǎng)→五級(jí)液體種子培養(yǎng)→發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)→收集酵母細(xì)胞及干燥→粉碎→高生物量高鐵含量的富鐵酵母。
本實(shí)施例的生產(chǎn)工藝增加五級(jí)液體種子培養(yǎng)，其條件與三級(jí)液體種子培養(yǎng)大體相同，其他工藝條件與實(shí)施例4相同。
權(quán)利要求
1.高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC №0895)。
2.一種富鐵酵母的選育方法，包括以下步驟1)在梯度鐵離子濃度的培養(yǎng)基中分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種；2)對(duì)生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種進(jìn)行生孢培養(yǎng)、單倍體分離、誘變，篩選具有不同交配型及不同遺傳標(biāo)記的單倍體突變菌株；3)將生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌單倍體突變菌株進(jìn)行雜交；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高含鐵量的二倍體雜交優(yōu)良菌株，即富鐵酵母菌種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的選育方法，其特征在于所述鐵離子濃度為200μg/ml-2000μg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的選育方法，其特征在于所述選擇培養(yǎng)基所含鐵離子濃度200微克/毫升-2000微克/毫升的YEPD培養(yǎng)基。
5.一種利用高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF-15(CGMCC№0895)生產(chǎn)富鐵酵母產(chǎn)品的方法，包括斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、至少二級(jí)液體種子培養(yǎng)、發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)、得到產(chǎn)品。
6.根據(jù)權(quán)利要求5述的方法，其特征在于所述液體種子培養(yǎng)為三級(jí)-六級(jí)種子培養(yǎng)；所述發(fā)酵罐培養(yǎng)完成后，收集的酵母細(xì)胞進(jìn)行干燥、粉碎后得到產(chǎn)品。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于所述斜面菌種培養(yǎng)、液體菌種培養(yǎng)、液體種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括8％-20％總糖量的有機(jī)物，200-800微克/毫升的鐵酸鹽，pH為4.0-8.0。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于所述發(fā)酵罐培養(yǎng)的接種量為5％-30％。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述鐵酸鹽為檸檬酸鐵、硫酸鐵或硫酸亞鐵。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的生產(chǎn)方法，其特征在于所述有機(jī)物選自麥芽汁、淀粉水解糖、糖蜜或它們的任意組合。
全文摘要
本發(fā)明公開了一株高生物量富鐵酵母菌株及其選育方法與應(yīng)用，本發(fā)明提供的菌株為高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF－15(CGMCC №0895)。其選育方法包括以下步驟1)分別篩選生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種；2)篩選生物量高的酵母菌種和抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌種的單倍體突變菌株；3)生物量高的酵母菌單倍體突變菌株與抗鐵能力強(qiáng)及細(xì)胞含鐵量高的酵母菌單倍體突變菌株進(jìn)行雜交；4)在選擇培養(yǎng)基上篩選高生物量和高含鐵量的二倍體雜交優(yōu)良菌株，即高生物量富鐵酵母菌種。本發(fā)明利用高生物量富鐵酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株ZYGF－15(CGMCC №0895)生產(chǎn)的富鐵酵母產(chǎn)品具有廣闊的市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)C12N15/04GK1530436SQ03119430
公開日2004年9月22日 申請(qǐng)日期2003年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月12日
發(fā)明者張博潤(rùn), 郭雪娜, 傅秀輝, 何秀萍 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所