一種植物源殺菌制劑及在防治蔬菜枯萎病中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種植物源殺菌制劑，它包含如下重量/體積份的組分：兩面針提取物10重量份,有機(jī)溶劑1?2體積份，無菌水20?30體積份。同時公開了該植物源殺菌制劑的制備方法。該植物源殺菌制劑的制備方法是：將兩面針提取物10份,有機(jī)溶劑1?2份，無菌水20?30份攪拌均勻裝瓶包裝即可。所述的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇的一種或兩種的混合物。該植物源殺菌制劑在防治蔬菜枯萎病中的施用方法是：取兩面針提取物的植物源殺菌制劑，加入200?250倍體積的凈水，攪拌均勻灌根即可。
【專利說明】
一種植物源殺菌制劑及在防治蔬菜枯萎病中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以兩面針提取物為有效成分植物源 殺菌制劑，以及該植物源殺菌制劑在防治疏采枯委病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 蔬菜枯萎病，如番茄枯萎病、黃瓜枯萎病、辣椒枯萎病、茄子枯萎病等均是由尖孢 鐮刀菌屬（/^sari? ojfjSjDor?)引起的世界性土傳病害，是蔬菜生產(chǎn)的主要病害之一，在 我國蔬菜產(chǎn)地均有發(fā)生，隨著蔬菜保護(hù)地面積的擴(kuò)大，加之種植模式單一，不合理輪作，連 作障礙加重，致使蔬菜枯萎病的為害呈逐年加重趨勢，一般年份發(fā)病率為20%~40%，嚴(yán) 重年份達(dá)80%以上甚至絕收，蔬菜枯萎病已經(jīng)成為蔬菜生產(chǎn)中的主要病害。由尖孢鐮刀菌 引起的蔬菜枯萎病從出幼苗至蔬菜成熟均可發(fā)生。尖孢鐮刀菌的孢子在土壤中存活10年 以上，離開寄主也能存活5~6年，在長期種植的情況下，病原菌大量累積，致使防治困 難。因此，采取有效的防治方法，減輕其危害，是蔬菜增產(chǎn)、增收的關(guān)鍵。目前在防治蔬菜枯 萎病的手段上，主要還是化學(xué)防治，化學(xué)防治具有見效快、效果好的特點(diǎn)，但化學(xué)防治帶來 眾所周知的農(nóng)藥殘留、污染環(huán)境問題已經(jīng)越來越引起重視。生物農(nóng)藥防治由于其選擇性強(qiáng)、 對生態(tài)環(huán)境影響小的特點(diǎn)，因此開發(fā)研制出高效、環(huán)境友好型植物源生物農(nóng)藥防治蔬菜枯 萎病是目前研究的熱點(diǎn)。通過植物源天然化合物改良后制成的生物農(nóng)藥，一方面對植株的 果、花、葉都無危害，對人畜安全，具有高效無殘留，無藥害，無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)；另一方面在控 制病害的同時可以有效提尚農(nóng)廣品品質(zhì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種以兩面針提取物為有效成分植物 源殺菌制劑，該制劑是一種新型環(huán)境友好制劑。本發(fā)明的另一目的是提供基于兩面針提取 物為有效成分植物源殺菌制劑在防治蔬菜枯萎病中的應(yīng)用。
[0004] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下： 一種植物源殺菌制劑，它包含如下重量/體積份的組分:兩面針提取物10重量份，有機(jī) 溶劑1 -2體積份，無菌水20-30體積份。
[0005] 所述的兩面針提取物的制備方法包括如下步驟： (1) 取兩面針地下部分清洗干凈，瀝干、充分陰干，然后粉碎通過60目篩； (2) 稱取一定重量（1)制備的兩面針粉倒入多功能提取罐中，取兩面針粉重量/體積比 1:4-6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反復(fù)滲漉8-10小時，然后固液分離，重復(fù)2-3次，合 并液體； (3) 將(2)得到的液體減壓回收乙醇，當(dāng)濃縮物比重至1.1-1.2時停止蒸餾，得兩面針浸 膏； (4) 將(3)得到的兩面針浸膏，用浸膏重量體積比3-4倍的水稀釋，再加入浸膏重量體積 比5-6倍的石油醚，在室溫下攪拌萃取2-3小時，靜置后得上層有機(jī)溶液、中層水溶液及下層 沉淀物； (5)取(4)得到的水溶液即為兩面針提取物。
[0006] 本發(fā)明的植物源殺菌制劑的制備方法是:將兩面針提取物10份，有機(jī)溶劑1-2份， 無菌水20-30份攪拌均勻裝瓶包裝即可。
[0007] 所述的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇的一種或兩種的混合物。
[0008] 本發(fā)明的植物源殺菌制劑在防治蔬菜枯萎病中的施用方法是:取上述兩面針提取 物的植物源殺菌制劑，加入200-250倍體積的凈水，攪拌均勻灌根即可。
[0009] 本發(fā)明植物源殺菌制劑對尖孢鐮刀菌的抑菌效果試驗(yàn) 1試驗(yàn)方法 1.1本發(fā)明植物源殺菌制劑與防治蔬菜枯萎病常用藥50%多菌靈可濕性粉劑對尖孢鐮 刀菌的抑菌效果試驗(yàn) 采用實(shí)施例1制備本發(fā)明植物源殺菌制劑稀釋200倍液為處理，以防治蔬菜枯萎病常用 藥50%多菌靈可濕性粉劑600倍液為對照1，以無菌水為對照2。進(jìn)行尖孢鐮刀菌抑菌效果比 較試驗(yàn)。采用菌絲生長速率法測定殺菌制劑與對照農(nóng)藥對病原真菌菌絲生長的抑制方法： 吸取6 mL藥劑于滅菌的三角瓶中，然后加54 mL的PDA培養(yǎng)基混勻，倒入培養(yǎng)皿（90 mm X 20 mm)中，每皿20 mL，在無菌條件下每皿中央放置1塊菌餅(直徑為6 mm)，重復(fù)3次，以無菌 水為對照2。置于26°C恒溫光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，5天后用十字交叉法測量菌落直徑。按下列 公式評判抑菌效果。
[0010] 菌絲生長抑制率/%=(對照2菌落直徑一處理或?qū)φ?菌落直徑)/(對照2菌落直 徑一菌餅直徑）χ 100 1.2本發(fā)明植物源殺菌制劑在田間防治蔬菜枯萎病試驗(yàn) 用本發(fā)明的植物源殺菌制劑200倍液為處理，以50%多菌靈可濕性粉劑600倍液為對照 1，以清水為對照2,以栽培番茄、黃瓜、辣椒和茄子的4個大棚溫室為試驗(yàn)田，每個大棚600 平方米，每個棚分為6個小區(qū)，每個小區(qū)100平方米，重復(fù)三次。苗期用等量的上述藥液或清 水每隔10天灌根一次，灌根2次10天后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析番茄枯萎病、黃瓜枯萎病、辣椒枯萎病、 茄子枯萎病的病情指數(shù)和防治效果。測定方法:病情指數(shù)和防治效果的測定:參照竇瑞木方 法。（竇瑞木.3株植物內(nèi)生細(xì)菌對番茄灰霉病的防治效果.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010,4 :77-79.) 〇
[0011] 2試驗(yàn)結(jié)果 2.1本發(fā)明植物源殺菌制劑與50%多菌靈可濕性粉劑對尖孢鐮刀菌的抑菌效果如表1: 表1本發(fā)明植物源殺菌制劑與50%多菌靈可濕性粉劑對尖孢鐮刀菌的抑菌活性
注:表中數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤。同行數(shù)據(jù)后的小寫字母表示本發(fā)明植物源殺菌制劑 與50%多菌靈可濕性粉劑對不同病原菌的抑菌活性差異顯著性分析(P〈 0.05)。
[0012] 由表1可見，采用菌絲生長速率法測定了本發(fā)明植物源殺菌制劑與50%多菌靈可濕 性粉劑對尖孢鐮刀菌的抑菌活性，結(jié)果表明，本發(fā)明植物源殺菌制劑與50%多菌靈可濕性粉 劑對4種蔬菜尖孢鐮刀菌的生長均有不同的抑制作用。其中，本發(fā)明植物源殺菌制劑對4種 蔬菜枯萎病?；图怄哏牭毒囊志Ч?9%-79%之間，50%多菌靈可濕性粉劑對4種蔬 菜枯萎病專化型尖孢鐮刀菌的抑菌效果在74%-78%之間;說明本發(fā)明的植物源殺菌制劑對4 種蔬菜枯萎病?；图怄哏牭毒囊志Ч町愋暂^大，而多菌靈的抑菌效果較為平均， 但是，就本發(fā)明植物源殺菌制劑與50%多菌靈可濕性粉劑對各種蔬菜枯萎病菌的抑菌效果 差異不顯著(P >0.05)，說明本發(fā)明植物源殺菌制劑的抑菌效果與50%多菌靈可濕性粉劑 相當(dāng)。
[0013] 2.2本發(fā)明植物源殺菌制劑在田間防治蔬菜枯萎病試驗(yàn)結(jié)果見表2: 表2本發(fā)明植物源殺菌制劑在田間防治蔬菜枯萎病試驗(yàn)結(jié)果
注:表中平均防治效果數(shù)據(jù)后的不同小寫字母表示防治效果在P〈 0.05水平差異顯 著。
[0014] 由表2可知，本發(fā)明植物源殺菌制劑在田間防治蔬菜枯萎病效果為61.6%，對照 50%多菌靈可濕性粉劑的防效為63.4%，兩者之間沒有顯著差異(P >0.05)。
[0015] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)勢：（1)本發(fā)明以兩面針提取物為有效成分的 植物源殺菌制劑能夠有效防治茄子、黃瓜、番茄和辣椒4種蔬菜枯萎病，其200倍稀釋液的防 治效果在60%以上，與50%多菌靈可濕性粉劑的防效無顯著差異。（2)本發(fā)明原材料易得，生 產(chǎn)工藝簡單，對環(huán)境沒有污染，生產(chǎn)的蔬菜品質(zhì)好，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益明顯， 具有十分廣闊的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0017] 實(shí)施例！ 制備兩面針提取物，包括如下步驟： (1) 取兩面針地下部分清洗干凈，瀝干、充分陰干，然后粉碎通過60目篩； (2) 稱取一定重量（1)制備的兩面針粉倒入多功能提取罐中，取兩面針粉重量/體積比 1:4倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反復(fù)滲漉8小時，然后固液分離，重復(fù)3次，合并液體； (3) 將(2)得到的液體減壓回收乙醇，當(dāng)濃縮物比重至1.1-1.2時停止蒸餾，得兩面針浸 膏； (4) 將(3)得到的兩面針浸膏，用浸膏重量體積比3倍的水稀釋，再加入浸膏重量體積比 5倍的石油醚，在室溫下攪拌萃取2小時，靜置后得上層有機(jī)溶液、中層水溶液及下層沉淀 物； (5) 取(4)得到的水溶液即為兩面針提取物。
[0018] 實(shí)施例2 制備兩面針提取物，包括如下步驟： (1) 取兩面針地下部分清洗干凈，瀝干、充分陰干，然后粉碎通過60目篩； (2) 稱取一定重量（1)制備的兩面針粉倒入多功能提取罐中，取兩面針粉重量/體積比 1:6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反復(fù)滲漉10小時，然后固液分離，重復(fù)2次，合并液 體； (3) 將(2)得到的液體減壓回收乙醇，當(dāng)濃縮物比重至1.1-1.2時停止蒸餾，得兩面針浸 膏； (4) 將(3)得到的兩面針浸膏，用浸膏重量體積比4倍的水稀釋，再加入浸膏重量體積比 6倍的石油醚，在室溫下攪拌萃取3小時，靜置后得上層有機(jī)溶液、中層水溶液及下層沉淀 物； (5) 取(4)得到的水溶液即為兩面針提取物。
[0019] 實(shí)施例3 制備植物源殺菌制劑的方法是:取實(shí)施例1或2制備的兩面針提取物10重量份與95%乙 醇1體積份和無菌水20體積份攪拌均勻裝瓶包裝即可。
[0020] 采用上述制備的植物源殺菌制劑防治蔬菜枯萎病的施用方法是:取上述兩面針提 取物的植物源殺菌制劑，加入250倍體積的凈水，攪拌均勻灌根即可。
[0021] 實(shí)施例4 制備植物源殺菌制劑的方法是:取實(shí)施例1或2制備的兩面針提取物10重量份、甲醇2體 積份和無菌水30體積份攪拌均勻裝瓶包裝即可。
[0022] 采用上述制備的植物源殺菌制劑防治蔬菜枯萎病的施用方法是:取上述兩面針提 取物的植物源殺菌制劑，加入200倍體積的凈水，攪拌均勻灌根即可。
[0023] 實(shí)施例5 制備植物源殺菌制劑的方法是:取實(shí)施例1或2制備的兩面針提取物10重量份、95%乙醇 1體積份、甲醇1體積份和無菌水25體積份攪拌均勻裝瓶包裝即可。
[0024]采用上述制備的植物源殺菌制劑防治蔬菜枯萎病的施用方法是:取上述兩面針提 取物的植物源殺菌制劑，加入220倍體積的凈水，攪拌均勻灌根即可。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種植物源殺菌制劑，其特征在于，植物源殺菌制劑包含如下重量/體積份的組分： 兩面針提取物10重量份，有機(jī)溶劑1-2體積份，無菌水20-30體積份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物源殺菌制劑，其特征在于，所述的兩面針提取物的制備方 法包括如下步驟： (1) 取兩面針地下部分清洗干凈，瀝干、充分陰干，然后粉碎通過60目篩； (2) 稱取一定重量（1)制備的兩面針粉倒入多功能提取罐中，取兩面針粉重量/體積比 1:4-6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反復(fù)滲漉8-10小時，然后固液分離，重復(fù)2-3次，合 并液體； (3) 將(2)得到的液體減壓回收乙醇，當(dāng)濃縮物比重至1.1-1.2時停止蒸餾，得兩面針浸 膏； (4) 將(3)得到的兩面針浸膏，用浸膏重量體積比3-4倍的水稀釋，再加入浸膏重量體積 比5-6倍的石油醚，在室溫下攪拌萃取2-3小時，靜置后得上層有機(jī)溶液、中層水溶液及下層 沉淀物； (5) 取(4)得到的水溶液即為兩面針提取物。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物源殺菌制劑，其特征在于，所述的植物源殺菌制劑的制備 方法是:將兩面針提取物10重量份，有機(jī)溶劑1-2體積份，無菌水20-30體積份攪拌均勻裝瓶 包裝即可。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物源殺菌制劑，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇 的一種或兩種的混合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物源殺菌制劑，其特征在于，所述的植物源殺菌制劑在防治 蔬菜枯萎病中的施用方法是:取兩面針提取物的植物源殺菌制劑，加入200-250倍體積的凈 水，攪拌均勻灌根即可。
【文檔編號】A01N65/36GK105994421SQ201610376410
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】程作慧, 劉耀華, 李銳, 曹揮, 馬新耀, 李生才
【申請人】山西農(nóng)業(yè)大學(xué)