一種雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于樹木種植領(lǐng)域，尤其涉及一種雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法各異，但都不是很理想，構(gòu)樹生長慢，長勢不好，高度不利于煉苗等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法，旨在解決現(xiàn)有的雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法，構(gòu)樹生長慢，長勢不好，高度不利于煉苗的問題。
[0004]本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法包括:
[0005]步驟一、雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)外植體的采集，采集帶腋芽的嫩枝；
[0006]步驟二、對(duì)室外采集的外植體進(jìn)行清洗及消毒；
[0007]步驟三、經(jīng)消毒處理后的外植體愈傷組織的誘導(dǎo)；
[0008]步驟四、愈傷組織的再分化及繼代培養(yǎng)；
[0009]步驟五、脫毒苗木生根培養(yǎng)；
[0010]步驟六、煉苗；
[0011]步驟七、大田種植。
[0012]進(jìn)一步，采集的外植體長度在2-4cm之間。
[0013]進(jìn)一步，對(duì)室外采集的外植體進(jìn)行清洗及消毒的具體方法為:
[0014]經(jīng)流水沖洗5分鐘，I%洗滌靈水浸泡5分鐘，消毒劑有70%乙醇，消毒30秒，無菌水沖洗4-5遍;然后放入0.1 %氯化汞溶液，消毒5-8分鐘，無菌水沖洗5-6次，放入超凈臺(tái)，紫外燈照射30分鐘，進(jìn)行外植體和超凈臺(tái)的同時(shí)消毒。
[0015]進(jìn)一步，經(jīng)消毒處理后的外植體愈傷組織的誘導(dǎo)的具體方法為:
[0016]切去在消毒過程中壞死的周邊組織，剩余部分切成0.5-lcm長，帶有一個(gè)腋芽的小徑段，置于滅菌后的誘導(dǎo)愈傷組織形成的第一培養(yǎng)基或第二培養(yǎng)基上培養(yǎng)，暗處理48小時(shí)后，光照時(shí)間為14h/d，光照強(qiáng)度15001x，補(bǔ)光應(yīng)安排于白天進(jìn)行，溫度為25±3°C，培養(yǎng)20-25天。
[0017]進(jìn)一步，愈傷組織的再分化及繼代培養(yǎng)的具體方法為:
[0018]20-25天后，將雜交構(gòu)樹小徑段的腋芽抽生出來的枝條割下，分割成帶有I個(gè)腋芽的小徑段繼續(xù)放到第三培養(yǎng)基上培養(yǎng)，進(jìn)行增值擴(kuò)繁，光照時(shí)間為10_12h/d，光照強(qiáng)度2000 Ix，溫度為25 土 3°C，培養(yǎng)20-25天。再長出3?5片小葉后再次進(jìn)行次繼代培養(yǎng)，一直擴(kuò)繁到所需的量為止，把愈傷組織分化而成的叢生幼苗用剪刀單個(gè)分離開，置于第三培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)。
[0019]進(jìn)一步，脫毒苗木生根培養(yǎng)的具體方法為:
[0020]經(jīng)過大量繼代培養(yǎng)的雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)苗，放于第四培養(yǎng)基或第五培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)2-3個(gè)星期后漸漸長出白色的幼根，培養(yǎng)條件是光照時(shí)間為10-12h/d，溫度為25±3°C，待根生長出4?6條時(shí)可以進(jìn)行煉苗處理。
[0021]進(jìn)一步，煉苗的具體方法為:
[0022]將生根后的雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)苗先連同組培瓶放于陽光下，4-5天后松開瓶蓋，松蓋后3天取掉瓶蓋，使組培瓶苗處于與外界環(huán)境全開放狀態(tài)，2天后進(jìn)行移植工作;將組織培養(yǎng)的構(gòu)樹苗由培養(yǎng)基中取出后洗凈培養(yǎng)基，用稀釋1000倍的多菌靈或百菌清溶液浸泡10-20分鐘，隨后將雜交構(gòu)樹苗木接入已用千分之三甲醛滅菌處理過的混有園土、蛭石及少量珍珠巖的基質(zhì)中培養(yǎng)，蛭石、園土、珍珠巖的比值是6:3:1，煉苗條件是溫度25°C左右，濕度為75%-90%，在植株上層套上塑料薄膜保水，結(jié)合當(dāng)?shù)丨h(huán)境進(jìn)行通風(fēng)換氣，培養(yǎng)10天逐漸取下塑料薄膜，成功渡過煉苗的苗木進(jìn)行大田種植。
[0023]進(jìn)一步，大田種植優(yōu)選的時(shí)間在春季和秋季。
[0024]進(jìn)一步，所述第一培養(yǎng)基的組分為:MS+BA1.20mg\L+IBA0.20mg\L+NAA0.30mg\L；
[0025]第二培養(yǎng)基的組分為:MS+BA1.40mg\L+IBA0.32mg\L+NAA0.43mg\L；
[0026]第三培養(yǎng)基的組分為:MS+BA1.00mg\L+NAA0.50mg\L+GAl.00mg\L；
[0027]第四培養(yǎng)基的組分為:1\2MS(MS)+NAA0.31mg\L+GAl.00mg\L；
[0028]第五培養(yǎng)基的組分為:1\2MS(MS)+NAA0.4mg/l+IAAl.5mg/l。
[0029]本發(fā)明可有效改良雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法，有效縮雜交構(gòu)樹的組培時(shí)間、提高雜交構(gòu)樹組培苗的質(zhì)量，增殖快，組培苗健壯，生根快，生產(chǎn)成本低，污染低，從外植體接種到出苗時(shí)間短。
【附圖說明】
[0030]圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0031]以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述:
[0032]請參閱圖1:
[0033]—種雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)的方法，包括:
[0034]SlOl、雜交構(gòu)樹組織培養(yǎng)外植體的采集，采集帶腋芽的嫩枝；
[0035]S102、對(duì)室外采集的外植體進(jìn)行清洗及消毒；
[0036]S103、經(jīng)消毒處理后的外植體愈傷組織的誘導(dǎo)；
[0037]S104、愈傷組織的再分化及繼代培養(yǎng)；
[0038]S105、脫毒苗木生根培養(yǎng)；
[0039]S106、煉苗；
[0040]S107、大田種植。
[0041 ]進(jìn)一步，采集的外植體長度在2_4cm之間。
[0042]進(jìn)一步，對(duì)室外采集的外植體進(jìn)行清洗及消毒的具體方法為:
[0043]經(jīng)流水沖洗5分鐘，I%洗滌靈水浸泡5分鐘，消毒劑有70 %乙醇，消毒30秒，無菌水沖洗4-5遍;然后放入0.1 %氯化汞溶液，消毒5-8分鐘，無菌水沖洗5-6次，放入超凈臺(tái)，紫外燈照射30分鐘，進(jìn)行外植體和超凈臺(tái)的同時(shí)消毒。
[0044]進(jìn)一步，經(jīng)消毒處理后的外植體愈傷組織的誘導(dǎo)的具體方法為:
[0045]切去在消毒過程中壞死的周邊組織，剩余部分切成0.5-lcm長，帶有一個(gè)腋芽的小徑段，置于滅菌后的誘導(dǎo)愈傷組織形成的第一培養(yǎng)基或第二培養(yǎng)基上培養(yǎng)，暗處理48小時(shí)后，光照時(shí)間為14h/d，光照強(qiáng)度15001x，補(bǔ)光應(yīng)安排于白天進(jìn)行，溫度為25±3°C，培養(yǎng)20-25天。
[0046]進(jìn)一步，愈傷組織的再分化及繼代培養(yǎng)的具體方法為:
[0047]20-25天后，將雜交構(gòu)樹小徑段的腋芽抽生出來的枝條割下，分割成帶有I個(gè)腋芽的小徑段繼續(xù)放到第三培養(yǎng)基上培養(yǎng)，進(jìn)行增值擴(kuò)繁，光照時(shí)間為10_12h/d，光照強(qiáng)度2000 Ix，溫度為25 土 3°C，培養(yǎng)20-25天。再長出3?5片小葉后再次進(jìn)行次繼代培養(yǎng)，一直擴(kuò)繁到所需的量為止，把愈傷組織分化而成的叢生幼苗用剪刀單個(gè)分離開，置于第三培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)。
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