一種鐵皮石斛原球莖直播的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥用植物人工種植技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種藥用植物鐵皮石斛的原球莖直播繁育方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)為蘭科石斛屬多年生草本植物,主要分布于云南、浙江等地,為一種珍稀的中藥材。因其具有滋陰清熱、生津益胃、潤(rùn)肺止咳等功效,位列“中華九大仙草之首”,并被錄入《2015版藥典》。
[0003]鐵皮石斛以其干燥莖入藥,其主要藥用成分為多糖、生物堿、氨基酸、揮發(fā)油及其他微量元素?,F(xiàn)代藥理學(xué)表明,鐵皮石斛具有滋陰養(yǎng)胃、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、降血糖及抗疲勞的作用,鑒于其特殊的藥理藥效作用,使其野生資源受到了掠奪式開(kāi)采,因而其野生資源已瀕臨滅絕。
[0004]鐵皮石斛果莢內(nèi)存有種子1萬(wàn)粒左右,但是其種子沒(méi)有胚乳,自然條件下萌發(fā)率低甚至不萌發(fā),因此,解決鐵皮石斛資源短缺主要還是通過(guò)組織培養(yǎng)的方式。目前,有關(guān)鐵皮石斛的組織培養(yǎng)技術(shù)成熟,均已實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn),但是其要求無(wú)菌、恒溫、恒濕等環(huán)境,造成其培育成本較高。有關(guān)蘭科植物的繁育技術(shù),部分可以通過(guò)有性繁殖的方式在自然條件下直播成功,其大大降低了生產(chǎn)成本,但是從種子到種苗所需生長(zhǎng)周期較長(zhǎng),一般需要10個(gè)月以上的時(shí)間。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有鐵皮石斛種植存在的問(wèn)題,提供一種生產(chǎn)成本低、發(fā)芽率高且能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量鐵皮石斛種苗的方法。
[0006]解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案由下述步驟組成:
[0007]1、鐵皮石斛種子萌發(fā)
[0008]選取成熟的鐵皮石斛果莢,依次用滅菌水、升汞、體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇水溶液消毒,然后剝開(kāi)果莢取出鐵皮石斛種子,將種子均勾播撒在組培瓶?jī)?nèi)的鐵皮石斛培養(yǎng)基上,在溫度為25±2°C、光照強(qiáng)度2000?3000Lx、光照12h/12h的組織培養(yǎng)室培養(yǎng)100?120天,使種子變綠膨大并萌發(fā)成原球莖,再將組培瓶移至溫室苗床上煉苗處理7?10天,將原球莖取出,用水將上面附著的培養(yǎng)基沖洗干凈。
[0009]2、苗床處理
[0010]選擇智能溫室的苗床,苗床高度為1?1.5m,苗床每隔2米用木棍隔檔,將塑料紙平鋪在苗床上,塑料紙的四周固定在苗床邊緣,確保苗床上能保持2cm高的水。
[0011]3、育苗基質(zhì)處理
[0012]將椰糠、發(fā)酵過(guò)的松樹(shù)皮粉、多菌靈按照體積比為150?250:80?150:1混勻,配制成育苗基質(zhì),將配好的育苗基質(zhì)裝入底部有孔的穴盤(pán)中,裝至穴盤(pán)深度的2/3處,壓平壓實(shí),將穴盤(pán)放在苗床上,給育苗基質(zhì)澆水,使育苗基質(zhì)徹底澆透。
[0013]4、原球莖播種
[0014]將步驟1煉苗處理后的原球莖作為種,按照行距3?4cm、株距2?3cm,用鑷子輕輕夾至育苗基質(zhì)表面,播種完后用保鮮膜覆蓋穴盤(pán),控制大棚內(nèi)的溫度為20?25°C、相對(duì)濕度為40%?60%,并保持大棚內(nèi)通風(fēng),播種一周后每隔3?5天由穴盤(pán)與穴盤(pán)之間的空隙澆水一次。
[0015]5、追肥管理
[0016]待鐵皮石斛球莖長(zhǎng)全兩片真葉后,揭去保鮮膜,每隔一周分別噴灑蘭寶營(yíng)養(yǎng)液和磷酸二胺水溶液各1次。
[0017]上述步驟1中,所述的鐵皮石斛培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸餾水定容,然后用0.lmol/L的NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值至5.8?6.0,121°C滅菌20分鐘,配制成鐵皮石斛培養(yǎng)基,其中所述的香蕉汁是將75g香蕉在榨汁機(jī)中加100mL水打勻制得,鐵皮石斛培養(yǎng)基中多效唑的濃度為0.5?1.5mg/L、香蕉濃度為75?120g/L、萘乙酸濃度為0.3?0.8mg/L0
[0018]上述步驟3中,優(yōu)選將椰糠、發(fā)酵過(guò)的松樹(shù)皮粉、多菌靈按照體積比為200:100:1
混勻,配制成育苗基質(zhì)。
[0019]鐵皮石斛組培條件非常成熟,在種子播撒到組培瓶中120天左右,種子可以萌發(fā)成帶新芽的原球莖,本發(fā)明在此階段通過(guò)將原球莖人工馴化后,結(jié)合成熟的溫室直播體系,進(jìn)行原球莖,既提高了發(fā)芽率,而且降低了生產(chǎn)成本,能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的鐵皮石斛種苗,滿(mǎn)足大面積、規(guī)?;绲男枰?,具有生產(chǎn)與經(jīng)濟(jì)上的雙重意義。
【附圖說(shuō)明】
[0020]圖1是實(shí)施例1中鐵皮石斛原球莖直播60天的照片。
[0021 ]圖2是實(shí)施例2中鐵皮石斛原球莖直播60天的照片。
[0022]圖3是實(shí)施例3中鐵皮石斛原球莖直播60天的照片。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明,但本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于這些實(shí)施例。
[0024]實(shí)施例1
[0025]1、鐵皮石斛種子萌發(fā)
[0026]選取成熟的鐵皮石斛果莢,依次用滅菌水、升汞、體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇水溶液消毒,然后剝開(kāi)果莢取出鐵皮石斛種子,將種子均勾播撒在組培瓶?jī)?nèi)的鐵皮石斛培養(yǎng)基上,在溫度為25±2°C、光照強(qiáng)度2500Lx、光照12h/12h的組織培養(yǎng)室培養(yǎng)120天,使種子變綠膨大并萌發(fā)成原球莖,部分原球莖上會(huì)產(chǎn)生根和芽,再將組培瓶移至溫室苗床上煉苗處理10天,輕輕將原球莖取出,用水將上面附著的培養(yǎng)基沖洗干凈。其中鐵皮石斛培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸餾水定容,然后用0.lmol/L的NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值至5.8?6.0,121°C滅菌20分鐘,配制成鐵皮石斛培養(yǎng)基,所述的香蕉汁是將75g香蕉在榨汁機(jī)中加100mL水打勻制得,鐵皮石斛培養(yǎng)基中多效唑的濃度為1.0mg/L、香蕉濃度為100g/L、萘乙酸濃度為0.5mg/L0
[0027]2、苗床處理
[0028]選擇智能溫室的苗床,苗床高度為1.5m,苗床每隔2米用寬度為6cm的方形木棍隔檔,將塑料紙平鋪在苗床上,塑料紙的四周固定在苗床邊緣,確保苗床上能保持2cm高的水。
[0029]3、育苗基質(zhì)處理
[0030]將椰糠、發(fā)酵過(guò)的松樹(shù)皮粉、多菌靈按照體積比為200:100:1混勻,配制成育苗基質(zhì),將配好的育苗基質(zhì)裝入底部有孔的穴盤(pán)中,裝至穴盤(pán)深度的2/3處,壓平壓實(shí),將穴盤(pán)放在苗床上,給育苗基質(zhì)澆水,使育苗基質(zhì)徹底澆透。
[0031]4、原球莖播種
[0032]將步驟1煉苗處理后的原球莖作為種,按照行距3cm、株距2cm,用鑷子輕輕夾至育苗基質(zhì)表面,播種完后用保鮮膜覆蓋穴盤(pán),控制大棚內(nèi)的溫度為20?25°C、相對(duì)濕度為40%?60%,并保持大棚內(nèi)通風(fēng),播種一周后每隔5天由穴盤(pán)與穴盤(pán)之間的空隙澆水一次。
[0033]5、追肥管理
[0034]播種15天后,鐵皮石斛球莖長(zhǎng)全兩片真葉后,出苗率在95%以上,揭去保鮮膜,每隔一周分別噴灑蘭寶營(yíng)養(yǎng)液和磷酸二胺水溶液各1次。播種30天后,鐵皮石斛球莖長(zhǎng)出兩片葉子,由圖1可見(jiàn),播種60天后,鐵皮石斛植株長(zhǎng)出3片葉子,植株長(zhǎng)勢(shì)均勾,植株尚度普遍超過(guò)2cm,且播種180天后,植株高度普遍可以達(dá)到8cm以上。
[0035]實(shí)施例2
[0036]1、鐵皮石斛種子萌發(fā)
[0037]選取成熟的鐵皮石斛果莢,依次用滅菌水、升汞、體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇水溶液消毒,然后剝開(kāi)果莢取出鐵皮石斛種子,將種子均勾播撒在組培瓶?jī)?nèi)的鐵皮石斛培養(yǎng)基上,在溫度為25±2°C、光照強(qiáng)度2000Lx、光照12h/