有機(jī)鐵皮石斛的培育種植方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種有機(jī)鐵皮石斛的培育種植方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鐵皮石斛，是我國蘭科石斛屬植物中最為珍貴的品種之一。因其具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗衰老和有效減輕肝損傷等作用，在2010年版《中華人民共和國藥典》中被單獨(dú)列為一味藥材，由于人為過度采挖和生態(tài)環(huán)境的破壞，加之其自身繁殖率低，野生鐵皮石斛資源日漸枯竭，已被國家列為二級重點(diǎn)保護(hù)的珍稀瀕危植物?，F(xiàn)在，人工栽培種植鐵皮石斛已成為滿足巨大市場需求的主要途徑。鐵皮石斛系蘭科石斛屬植物，種子極小、無胚乳，自然條件下需與某些真菌共生才能萌發(fā)，自然情況下發(fā)芽率僅萬分之一，且栽培品種存在退化現(xiàn)象。
[0003]近年來，我國的一些科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)單位對鐵皮石斛的組培和人工栽培技術(shù)進(jìn)行了大量的探索和試驗，取得了一些成績，也使得近年來人工栽培鐵皮石斛產(chǎn)量有所增加。但是，鐵皮石斛的人工培育仍然存在種苗擴(kuò)繁速度慢、組培苗煉苗及移栽成活率低、人工種植產(chǎn)品有效成分含量低的問題，嚴(yán)重制約了鐵皮石斛的產(chǎn)業(yè)化、規(guī)?；l(fā)展。此外，鐵皮石斛的一般大田種植會伴隨生長雜草，并易受到病蟲害。
[0004]公開號為CN102057867A的專利文獻(xiàn)公開了一種鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法，包括由鐵皮石斛果實(shí)消毒后取得粉末狀種子，粉末狀種子通過種子萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)，萌發(fā)形成原球莖的過程，其特征在于鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)過程中，以LED (半導(dǎo)體發(fā)光二極管)植物生長照明系統(tǒng)作為光源，根據(jù)鐵皮石斛組織培養(yǎng)的不同階段，實(shí)施不同的光照處理。通過采用不同生長階段實(shí)施不同光照處理，使鐵皮石斛種苗能最大限度地利用光能供其光合作用，從而獲得最大生長量。
[0005]公開號為CN102119655A的專利文獻(xiàn)公開了一種鐵皮石斛自然光快繁育苗方法，包括下列步驟完成:(I)將成熟的鐵皮蒴果或儲存的種子經(jīng)過消毒處理程序，播入1/2MS基本培養(yǎng)基+ 土豆汁15% (V/V) +瓊脂5g/L的培養(yǎng)基里，進(jìn)行種子萌發(fā)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度22?25V。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在800?15001x，每日光照10?12小時，約15?20天種胚膨大、萌發(fā)形成綠色的原球莖；(2)將原球莖轉(zhuǎn)入MS基本培養(yǎng)基+BA (6-芐基腺嘌呤)0.01 ?0.5mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.01 ?0.5mg/L+土豆汁 20% (V/V) +瓊脂 5g/L的培養(yǎng)基里進(jìn)行原球莖增殖、分化培養(yǎng)。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在1500?25001x，每日光照10?12小時，約I?1.5月可觀察到瓶內(nèi)原球莖重疊堆積在培養(yǎng)基中，并有葉原莖和小苗出現(xiàn)，小苗高度I?2cm。將小苗轉(zhuǎn)入同樣的培養(yǎng)基和同樣的光照條件，繼續(xù)培養(yǎng)1.5月，將小苗培養(yǎng)成中苗，苗高3?4cm左右；(3)將中苗轉(zhuǎn)入MS基本培養(yǎng)基+NAA(a-萘乙酸)0.01 ?0.5mg/L+香蕉汁 15% (V/V) +土豆汁 10% (V/V) + 瓊脂 6g/L 的壯苗培養(yǎng)基。通過雙層遮陽控制系統(tǒng)，光照度控制在2000?40001x，每日光照10?12小時，約1.5個月可培養(yǎng)出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶煉苗、移栽。
[0006]但是，現(xiàn)有技術(shù)在規(guī)?；a(chǎn)中，從種子到生根成品苗的鐵皮石斛種苗的培育時間為150天時，合格苗僅占總苗量的50%左右；到180天時，合格苗占總苗量的80%左右；并且需要較長的煉苗時間才能有90%以上的移栽成活率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種有機(jī)鐵皮石斛的培育種植方法，組培種苗擴(kuò)繁速度快、合格率高，組培苗煉苗及移栽成活率高，并能避免病蟲害發(fā)生，使鐵皮石斛的生長環(huán)境更接近自然環(huán)境，從而保證鐵皮石斛的品質(zhì)，并且營養(yǎng)成份接近野生鐵皮石斛，藥用價值高。
[0008]為了達(dá)到上述的目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
[0009]一種有機(jī)鐵皮石斛的培育種植方法，包括下述步驟:
[0010]I)選擇品種特性純正、生長健壯的植株留種，留種地方圓I千米內(nèi)無其它種類石斛；在6月份盛花期，進(jìn)行授粉，母本在授粉后立即摘除唇瓣，及時掛牌標(biāo)志；授粉當(dāng)年10月份以后，蒴果開始轉(zhuǎn)黃時，選擇飽滿的果實(shí)連莖一起采收；
[0011]2)采收的蒴果經(jīng)后熟，采用酒精+次氯酸鈉消毒后進(jìn)行無菌播種；選用組培瓶進(jìn)行接種，培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基+ 土豆汁15% +瓊脂5g/L ;將接種后的組培瓶放入LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)，LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)溫度控制在23°C，每天分為光照12小時和黑暗12小時，光質(zhì)為紅藍(lán)混合光，紅光:藍(lán)光為1:1，光照強(qiáng)度控制在1500-25001ux ；18天后，98%以上的種胚膨大萌發(fā)形成綠色的原球莖；
[0012]3)將原球莖轉(zhuǎn)接至MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.01?0.5mg/L+ α -萘乙酸0.01?0.5mg/L+ 土豆汁20% +瓊脂5g/L的培養(yǎng)基里進(jìn)行原球莖增殖、分化培養(yǎng)；轉(zhuǎn)接后的組培瓶放入LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)，LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)溫度控制在23°C，以光照12小時和黑暗6小時為一個周期，三天四個周期，光質(zhì)為紅藍(lán)混合光，紅光:藍(lán)光為4:3，光照強(qiáng)度控制在2000-25001ux ；33天后，98%以上的原球莖有葉原莖和小苗出現(xiàn)，小苗高度I?2cm ;
[0013]4)將小苗轉(zhuǎn)接至MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.01?0.5mg/L+a-萘乙酸0.01?0.5mg/L+ 土豆汁20% +瓊脂5g/L的培養(yǎng)基里繼續(xù)培養(yǎng)，360ml的組培瓶中每瓶放入150株，轉(zhuǎn)接后的組培瓶放入LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)，LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)溫度控制在23°C，以光照8小時和黑暗4小時為一個周期，每天兩個周期，光質(zhì)為紅藍(lán)混合光，紅光:藍(lán)光為7:1，光照強(qiáng)度控制在2200-30001ux ；50天后，98%以上的小苗生長為植株健壯、葉片平展、葉色綠色或深綠的中苗，中苗高度3?4cm ；
[0014]5)將中苗轉(zhuǎn)接至MS基本培養(yǎng)基+a-萘乙酸0.01?0.5mg/L+香蕉汁15 % +土豆汁10% +瓊脂6g/L的壯苗培養(yǎng)基，360ml的組培瓶中每瓶放入30株，轉(zhuǎn)接后的組培瓶放入LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)，LED燈光培養(yǎng)箱內(nèi)溫度控制在23 °C，以光照6小時和黑暗6小時為一個周期，每天兩個周期，光質(zhì)為紅藍(lán)混合光，紅光:藍(lán)光為9:1，光照強(qiáng)度控制在2500-35001ux ;60天后，97%以上的中苗生長為優(yōu)質(zhì)大苗，該優(yōu)質(zhì)大苗:有3條以上根系，根系長度3cm以上，葉片4片以上、正常展開、葉色綠色或深綠，高度5cm以上；
[0015]6)將上述優(yōu)質(zhì)大苗的密閉組培瓶放在有自然光的培苗室，自然光光照強(qiáng)度控制在1500-40001UX，溫度為15?25°C，放置一周后，打開組培瓶的瓶蓋煉苗5?8天；
[0016]7)在進(jìn)行移植前，需要對組培瓶內(nèi)的組培苗進(jìn)行充分的清洗:用鑷子將3至5株苗逐步從瓶中拉出，動作輕緩防止傷苗；取3至5株苗在清水中漂洗掉瓊脂，用手指輕輕揉洗根部，確保無瓊脂殘留；逐瓶清洗，防止過多苗長時間浸泡水中，每清洗30瓶后更換清水；漂洗掉瓊脂的苗過二次清水后豎直放置在筐中待移栽，表面覆蓋潮濕的無紡布保濕；
[0017]8)將清洗后的組培苗移栽至大棚種植:大棚選址在海拔300?600米的山頂凹陷通風(fēng)處，大棚配有遮陽網(wǎng)和噴灌設(shè)備，大棚內(nèi)搭建多個寬約1.2?1.5米、高80cm的竹制或鋼架的苗床，苗床間配有40?50cm寬的通道，苗床底層鋪一層10?12cm厚的栽培基質(zhì)，栽培基質(zhì)為發(fā)酵處理過的松樹皮和松木肩，栽培基質(zhì)內(nèi)混合羊糞；選擇無病、健壯、大小均勻的組培苗進(jìn)行定植，按每叢3?5株，株距10cm、行距13cm的規(guī)格種植于栽培基質(zhì)上，定植時以栽培基質(zhì)完全覆蓋根部為宜；移栽7天內(nèi)，大棚內(nèi):光照強(qiáng)度控制在1000?lOOOOLux，溫度控制在15?25°C，空氣相對濕度控制80%?90%，采用葉片噴霧和地面灑水來補(bǔ)充水分，水的PH值在5?6 ;移栽7天后的生長期，大棚內(nèi):光照強(qiáng)度控制在10000?15000Lux，白天溫度控制在16?21°C，夜間溫度控制在10?15°C，空氣相對濕度控制70%?80%，采用葉片噴霧和地面灑水來補(bǔ)充水分，水的PH值在5?6。
[0018]作為優(yōu)選，所述步驟8)中，栽培基質(zhì)的發(fā)酵處理過程為:在夏季高溫季節(jié)，在大棚中把基質(zhì)堆成1.2m高、2.5m寬的基質(zhì)堆，將基質(zhì)噴濕，使基質(zhì)含水量超過80 %，然后用塑料薄膜覆蓋基質(zhì)堆，密閉于大棚內(nèi)，每隔10天揭開薄膜翻堆一次，翻堆5-6次，待基質(zhì)變?yōu)楹稚?，將基質(zhì)攤開冷卻后裝袋備用；栽培基質(zhì)使