專利名稱:一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法。
背景技術(shù)：
大花蕙蘭(Cymbidium hybridum)，有“蘭花之王”稱譽(yù)，在所有的觀賞洋蘭中，大花蕙蘭的平均市場(chǎng)售價(jià)最高。大花蕙蘭種苗傳統(tǒng)繁殖方式為分株繁殖或用組織培養(yǎng)以芽增方式快繁，繁殖系數(shù)較低，周期較長(zhǎng)，尤其是工廠化生產(chǎn)條件下，優(yōu)良品種的快繁有較高的種苗生產(chǎn)成本，較難在較短時(shí)間內(nèi)形成規(guī)模產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它極大地節(jié)約了生產(chǎn)成本，縮短了繁殖周期，解決了大花蕙蘭優(yōu)良品種在較短時(shí)間內(nèi)難以形成規(guī)模產(chǎn)量的問題。
本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案如下一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖，在無(wú)菌條件下，將莖尖接種于培養(yǎng)基上，建立無(wú)菌體系；步驟二，切取無(wú)菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生；步驟三，對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后，接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán)，在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對(duì)小苗進(jìn)行正常管理，培育至成品花。
在繁殖前需要對(duì)快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。步驟一中所述的對(duì)未展葉新芽進(jìn)行消毒的過程為首先流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無(wú)菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無(wú)菌水沖洗3～5遍后。步驟一中莖尖接種的培養(yǎng)基為大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基。
采用如上技術(shù)方案，本發(fā)明利用細(xì)胞全能性的原理，使大花蕙蘭種苗在規(guī)模生產(chǎn)時(shí)直接以體細(xì)胞胚胎發(fā)生的方式進(jìn)行，較短時(shí)間內(nèi)得到大量單細(xì)胞起源的、同步性好的胚性細(xì)胞和兩極性的胚狀體，進(jìn)而得到大量個(gè)體間遺傳背景一致、無(wú)性系變異小的完整植株，從而解決了在較短時(shí)間內(nèi)形成規(guī)模產(chǎn)量的問題，極大地節(jié)約了生產(chǎn)成本，縮短了繁殖周期。
具體實(shí)施方式本發(fā)明為一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽，首先用流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無(wú)菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無(wú)菌水沖洗3～5遍后，在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖，在無(wú)菌條件下，將莖尖接種于大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基，建立無(wú)菌體系；步驟二，切取無(wú)菌體系幼苗的莖段，在激素組合和適宜的培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生，選取不同發(fā)育階段的體胚細(xì)胞團(tuán)，用鋒利的單面刀片切割成0.2cm×0.2cm×0.2cm的材料塊，材料用FAA(70％)固定，注射器抽氣，正丁醇逐級(jí)脫水，石蠟透入包埋，常規(guī)石蠟切片，切片厚度8-10μm，番紅-固綠對(duì)染，顯微鏡下觀察照相，建立檔案；步驟三，對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后，接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán)，在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對(duì)小苗進(jìn)行正常管理，培育至成品花。
本發(fā)明在繁殖前選擇需要快繁的大花蕙蘭品種，用數(shù)碼相機(jī)拍照，存檔保存親本圖像資料；
權(quán)利要求
1.一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖，在無(wú)菌條件下，將莖尖接種于培養(yǎng)基上，建立無(wú)菌體系；步驟二，切取無(wú)菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生；步驟三，對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后，接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán)，在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對(duì)小苗進(jìn)行正常管理，培育至成品花。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是在繁殖前需要對(duì)快繁的大花蕙蘭品種存檔保存親本圖像資料。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是步驟一中所述的對(duì)未展葉新芽進(jìn)行消毒的過程為首先用流水沖洗10min后，75％酒精表面滅菌5～8s，無(wú)菌水沖凈，然后在3％次氯酸鈉溶液中浸10min，無(wú)菌水沖洗3～5遍后。
4.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，其特征是步驟一中莖尖接種的培養(yǎng)基為大花蕙蘭組培芽增殖培養(yǎng)基。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種通過體胚發(fā)生大量繁殖大花蕙蘭的方法，它采用如下步驟步驟一，采取正在生長(zhǎng)中的未展葉新芽消毒處理后，在顯微鏡下剝?nèi)∏o尖，在無(wú)菌條件下，將莖尖接種于培養(yǎng)基上，建立無(wú)菌體系；步驟二，切取無(wú)菌體系幼苗的莖段，在適宜的激素組合和適宜的培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎的發(fā)生；步驟三，對(duì)體胚進(jìn)行切傷處理后，接種在適宜的培養(yǎng)基上快速大量增殖；步驟四，將得到的足夠數(shù)量的體細(xì)胞胚團(tuán)，在適宜的分化培養(yǎng)基上培育成完整的小植株；步驟五，將得到的足夠數(shù)量的小植株培養(yǎng)至狀苗后出瓶移栽；步驟六，對(duì)小苗進(jìn)行正常管理，培育至成品花。
文檔編號(hào)A01G1/00GK1994069SQ200610161524
公開日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2006年12月27日
發(fā)明者李 杰 申請(qǐng)人:李 杰導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan