本發(fā)明涉及生物檢測領域，具體涉及一種獨活種子生活力的測定方法。
背景技術：
獨活為傘形科植物重齒毛當歸的干燥根，是我國常用中藥材，人工種植已有300多年歷史；主產(chǎn)于湖北、甘肅等省，種植面積達10萬畝以上，已成為當?shù)剞r(nóng)村的支柱產(chǎn)業(yè)。市場上流通的獨活種子多為農(nóng)戶分散生產(chǎn)，質(zhì)量層次不齊，為此我們曾使用發(fā)芽率、千粒重、凈度、含水量四個指標，制定了獨活種子的質(zhì)量分級標準，目前還沒有獨活種子生活力的測定技術，只有獨活種子萌發(fā)率的測定方法。但獨活種子萌發(fā)試驗需要1個月時間，周期較長，同時獨活種子不耐貯藏，種子質(zhì)量隨儲藏時間的變長而降低。
技術實現(xiàn)要素：
為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種獨活種子生活力的測定方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術方案為：
一種獨活種子生活力的測定方法，包括如下步驟：
s1、染色前處理：將獨活種子浸泡在清水中8-12小時，濾出備用；
s2、染色：沿種子背部中線進行縱切，將胚和胚乳均分成兩部分，選取其中一部分，放入由磷酸緩沖液配置的，濃度為0.6％-1％的ttc溶液中，于25攝氏度-45攝氏度恒溫條件下染色，染色時間為50分鐘；
s3、染色結(jié)束后，用自來水沖洗種子2或3次，立即觀察種胚著色情況，判斷種子有無生活力，判斷標準為：
胚發(fā)育良好、完整、整個胚染成鮮紅色；子葉有小部分壞死，其部位不是胚中軸和子葉連接處；胚雖有小部分壞死，但其他部位完好的，為有生活力種子；其他均為無活力或死種子。
本發(fā)明具有以下有益效果：
為獨活種子質(zhì)量檢測提供了一個快速簡便的方法，便于獨活種子流通中與生產(chǎn)中的種子質(zhì)量快速鑒定。
具體實施方式
為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
以下實施例中，根據(jù)獨活種子生活力推測獨活種子的萌發(fā)率公式為：萌發(fā)率＝((有生活力的種子百分比*0.73-0.0016)±0.04)*100％。
實施例1
2017年2月5日21點，取來自巴東水布埡鎮(zhèn)楊家埡村的獨活種子4g，放入盛有100毫升自來水的燒杯中浸泡。
2017年2月6日8點，將浸泡的獨活種子濾出，放在吸水紙上，隨機選取獨活種子150粒，分為3組，每組50粒；用解剖刀將獨活種子沿種子背部中線進行縱切，將胚和胚乳均分成兩半，選取其中一半，丟棄另一半；切好后分組放入由磷酸緩沖液配置的，濃度為0.6％、溫度為35攝氏度的ttc溶液中，于35攝氏度恒溫條件下染色。
50分鐘后，濾出獨活種子，用自來水沖洗種子3次，立即觀察種胚著色情況，判斷種子有無生活力。
三組有生活力的種子數(shù)量分別為24顆、26顆、30顆，平均生活力為53.3％。
生活力測定結(jié)束后，將剩余的種子在75％酒精中消毒2.5分鐘，后進自來水沖洗3次，再隨機選取150顆，至于三個放有3層濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿50粒；將培養(yǎng)皿置于25攝氏度恒溫光照培養(yǎng)箱中，每日光照8小時，光照強度2500lux；每天檢查培養(yǎng)皿，保持濾紙濕潤，并統(tǒng)計種子萌發(fā)數(shù)量。
2017年3月7日，萌發(fā)試驗結(jié)束，三個培養(yǎng)皿的獨活種子萌發(fā)率分別為32％、38％、36％，平均萌發(fā)率為35.3％。
這批獨活種子的生活力為53.3％，推測萌發(fā)率為：((53.3％*0.73-0.0016)±0.04)*100％＝38.75％±4％；實測萌發(fā)率為35.3％。
實施例2
2017年2月9日22點，取來自甘肅華亭縣馬峽鎮(zhèn)蔣莊新村的獨活種子4g，放入盛有80毫升自來水的燒杯中浸泡。
2017年2月10日8點，將浸泡的獨活種子濾出，放在吸水紙上，隨機選取獨活種子150粒，分為3組，每組50粒；用解剖刀將獨活種子沿種子背部中線進行縱切，將胚和胚乳均分成兩半，選取其中一半，丟棄另一半；切好后分組放入由磷酸緩沖液配置的，濃度為0.8％、溫度為45攝氏度的ttc溶液中，于45攝氏度恒溫條件下染色。
50分鐘后，濾出獨活種子，用自來水沖洗種子3次，立即觀察種胚著色情況，判斷種子有無生活力。
三組有生活力的種子數(shù)量分別為20顆、22顆、19顆，平均生活力為40.7％。
生活力測定結(jié)束后，將剩余的種子在75％酒精中消毒2.5分鐘，后進自來水沖洗4次，再隨機選取150顆，至于三個放有3層濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿50粒；將培養(yǎng)皿置于25攝氏度恒溫光照培養(yǎng)箱中，每日光照8小時，光照強度2500lux；每天檢查培養(yǎng)皿，保持濾紙濕潤，并統(tǒng)計種子萌發(fā)數(shù)量。
2017年4月6日，萌發(fā)試驗結(jié)束，三個培養(yǎng)皿的獨活種子萌發(fā)率分別為26％、30％、30％，平均萌發(fā)率為28.7％。
這批獨活種子的生活力為40.7％，推測萌發(fā)率為：((40.7％*0.73-0.0016)±0.04)*100％＝29.6％±4％；實測萌發(fā)率為28.7％。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。