本發(fā)明屬于植物病理學(xué)領(lǐng)域，具體涉及紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法。

背景技術(shù)：

紅黃兩色植物病害標(biāo)本是植物病害標(biāo)本中的重要組成部分之一。紅黃兩色植物病害標(biāo)本與綠色標(biāo)本在保存上有很多的不同，綠色標(biāo)本是純色，占比例重，研究力度較大，目前技術(shù)比較成熟。紅色黃色病害標(biāo)本基本是果實(shí)型標(biāo)本，完整的一份紅、黃植物病害標(biāo)本，往往是帶有綠色部分的葉片、果柄、果蒂、果枝等的果實(shí)，要做到完整標(biāo)本的原色保存必須做到多種顏色的同時保存。目前專做紅黃兩色植物病害標(biāo)本的保存技術(shù)研究不多，普遍采用一種保存液直接保存，保色效果不佳，標(biāo)本色澤與新鮮標(biāo)本差異過大，容易裂果。有些保色效果稍好的方法，配方里含有甲醛成分，眾所周知，甲醛為有毒有害物質(zhì)，不利于制作使用者的身體健康。

針對目前植物病理學(xué)教學(xué)科研領(lǐng)域植物病害標(biāo)本保存的現(xiàn)實(shí)問題，如何設(shè)計(jì)一種紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，可以保存兩種顏色標(biāo)本，而且簡單易行、安全環(huán)保，具有積極的現(xiàn)實(shí)意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的旨在提供一種紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，保存方法操作簡單、安全環(huán)保、紅黃兩色病害標(biāo)本原形原色保存。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，步驟如下：

1）植物病害標(biāo)本采集整理滅菌：采集7-8成熟具有單一、典型癥狀，帶有葉片、果柄、果蒂、果枝的紅色黃色果實(shí)病害標(biāo)本，修剪整理好后將完整標(biāo)本用清水洗凈，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分鐘，用蒸餾水洗凈3-4遍；

2）顏色固定：把消毒清洗好的標(biāo)本放入固定液中，標(biāo)本占固定液的空間不超過80%，標(biāo)本要完全浸沒在固定液中，5-10天后標(biāo)本綠色部分由綠變黃，逐漸由黃變綠1～2天后，取出用清水漂洗；

3）顏色修復(fù)：漂洗好的標(biāo)本放入70%酒精中浸泡2-3分鐘，取出用蒸餾水洗凈晾干，把標(biāo)本放入復(fù)色液中保存12-15天；

4）原色保存：把標(biāo)本從復(fù)色液中取出，放入滅菌消毒好的標(biāo)本瓶中，標(biāo)本按自然狀態(tài)排放好，對于中空的標(biāo)本在果柄處用解剖剪剪開1-2個小洞，然后往標(biāo)本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm處，保存液浸泡標(biāo)本過程中進(jìn)行排氣，排氣1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm處，1-2天后在空氣濕度為70%以內(nèi)的環(huán)境條件下用封口液進(jìn)行封口，把標(biāo)本放到空氣濕度為70%-80%避光的干凈條件中長期保存。

進(jìn)一步地，所述固定液由以下原料制成：15～25克硫酸銅、40～60ml乙酸、50～80ml丙三醇、15～20ml亞硫酸，制備方法為將15～25克硫酸銅放入800ml蒸餾水中，攪拌至硫酸銅完全溶解，再加入乙酸、丙三醇和亞硫酸，最后加蒸餾水定容至1000ml即得固定液。

進(jìn)一步地，所述復(fù)色液由以下原料制成：13～16ml亞硫酸、80～100ml丙三醇、4～5克硼酸，制備方法為將4～5克硼酸放入150ml蒸餾水中，攪拌至硼酸完全溶解，再加入亞硫酸和丙三醇，最后加蒸餾水定容至1000ml即得復(fù)色液。

進(jìn)一步地，所述復(fù)色液由以下原料制成：13～16ml亞硫酸、80～100ml丙三醇、80～100ml95%酒精，制備方法為將亞硫酸、丙三醇、酒精混合后，最后加蒸餾水定容至1000ml即得復(fù)色液。

進(jìn)一步地，所述保存液由以下原料制成：10～12ml亞硫酸、50～70ml丙三醇ml、4～5克硼酸，制備方法為將4～5克硼酸放入150ml蒸餾水中，攪拌至硼酸完全溶解，再加入亞硫酸和丙三醇，最后加蒸餾水定容至1000ml即得保存液。

進(jìn)一步地，所述保存液由以下原料制成：10～12ml亞硫酸、50～70ml丙三醇、50～80ml95%酒精，制備方法為：將亞硫酸、丙三醇、酒精混合后，最后加蒸餾水定容至1000ml即得保存液。

本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著進(jìn)步是：

本發(fā)明的紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，獨(dú)創(chuàng)顏色固定、顏色修復(fù)、原色保存的三個顏色處理步驟，采用一種方法就可以保存兩種顏色標(biāo)本。原料安全環(huán)保，制作方法簡單易行、省時省力、隨采隨制、可批量制作，用于完整標(biāo)本原形原色保存，保存液清晰透明，在植物病理學(xué)教學(xué)科研領(lǐng)域的應(yīng)用具有積極的現(xiàn)實(shí)意義。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例一：

本發(fā)明紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，用于黃色枇杷炭疽病的保存，具體步驟為：

1）枇杷炭疽病標(biāo)本采集整理滅菌。采集成串7-8成熟具單一、典型癥狀的枇杷炭疽標(biāo)本，除去多余的老葉、其他病果，留下典型癥狀的病果和健康正常的果實(shí)。帶有果枝、果柄、果蒂、病果、健康果實(shí)的完整標(biāo)本。修剪整理好后將完整標(biāo)本用清水清洗干凈，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分鐘，用蒸餾水洗凈3-4遍。

2）顏色固定。把消毒清洗好的枇杷炭疽病標(biāo)本放入固定液中，標(biāo)本占固定液的空間不超過80%，標(biāo)本要完全浸入固定液中。5天后標(biāo)本綠色部分由綠變黃，逐漸由黃變綠2天后，取出用清水漂洗。

固定液的制備：將15克硫酸銅放入800ml蒸餾水中，攪拌至硫酸銅完全溶解，再加入40ml乙酸、50ml丙三醇和15ml亞硫酸，最后加蒸餾水定容至1000ml即得固定液。

3）顏色修復(fù)。漂洗好的標(biāo)本放入70%酒精中浸泡2-3分鐘，用蒸餾水洗凈取出晾干，把標(biāo)本放入復(fù)色液中保存15天。

復(fù)色液的制備：將15ml亞硫酸、100ml丙三醇、95%酒精100ml加入300ml蒸餾水中混合，最后加蒸餾水定容至1000ml攪拌均勻即得復(fù)色液。

4）原色保存。把枇杷炭疽病標(biāo)本從復(fù)色液中取出，放入滅菌消毒好的標(biāo)本瓶中，標(biāo)本按自然狀態(tài)排放好，在果柄附近用解剖剪開1到2個小洞，然后往標(biāo)本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm處，標(biāo)本中不可避免含有氣體，在保存液浸泡標(biāo)本過程中進(jìn)行排氣，排氣1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm處。2天后在空氣濕度為70%以內(nèi)的環(huán)境條件下用封口劑進(jìn)行封口，封口劑的配方為蜂蠟、凡士林各1份。最后，把標(biāo)本放到濕度為70%至80%避光的干凈條件中長期保存。

保存液的制備：將10ml亞硫酸、70ml丙三醇、95%酒精60ml加入300ml蒸餾水中混合，最后加蒸餾水定容至1000ml攪拌均勻即得保存液。

實(shí)施例二：

本發(fā)明紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，用于紅色番茄晚疫病的保存，具體步驟為：

1）番茄晚疫病標(biāo)本采集整理滅菌。采集成串7-8成熟具單一、典型癥狀的番茄晚疫病，除去多余的老葉、其他病果，留下典型癥狀的病果和健康正常的果實(shí)。帶有葉片、果枝、果柄、果蒂、病果、健康果實(shí)的完整標(biāo)本。修剪整理好后將完整標(biāo)本用清水清洗干凈，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分鐘，用蒸餾水洗凈3-4遍。

2）顏色固定。把消毒清洗好的番茄晚疫病標(biāo)本放入固定液中，標(biāo)本占固定液的空間不超過80%，標(biāo)本要完全浸入固定液中。6天后標(biāo)本綠色部分由綠變黃，逐漸由黃變綠2天后，取出用清水漂洗。

固定液的制備：將20克硫酸銅放入800ml蒸餾水中，攪拌至硫酸銅完全溶解，再加入50ml乙酸、65ml丙三醇和15ml亞硫酸，最后加蒸餾水定容至1000ml即得固定液。

3）顏色修復(fù)。漂洗好的標(biāo)本放入70%酒精中浸泡2-3分鐘，用蒸餾水洗凈取出晾干，把標(biāo)本放入復(fù)色液中保存15天。

復(fù)色液的制備：將15ml亞硫酸、100ml丙三醇、95%酒精100ml加入300ml蒸餾水中混合，最后加蒸餾水定容至1000ml攪拌均勻即得復(fù)色液。

4）原色保存。把番茄晚疫病標(biāo)本從復(fù)色液中取出，放入滅菌消毒好的標(biāo)本瓶中，標(biāo)本按自然狀態(tài)排放好，然后往標(biāo)本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm處，標(biāo)本中不可避免含有氣體，在保存液浸泡標(biāo)本過程中進(jìn)行排氣，排氣1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm處。2天后在空氣濕度為70%以內(nèi)的環(huán)境條件下用封口劑進(jìn)行封口，封口劑的配方為蜂蠟、凡士林各1份。最后，把標(biāo)本放到濕度為70%至80%避光的干凈條件中長期保存。

保存液的制備：將10ml亞硫酸、70ml丙三醇、95%酒精60ml加入300ml蒸餾水中混合，最后加蒸餾水定容至1000ml攪拌均勻即得保存液。

實(shí)施例三：

本發(fā)明紅黃兩色植物病害標(biāo)本原色保存方法，用于紅色和黃色甜椒炭疽病的保存，具體步驟為：

1）甜椒炭疽病標(biāo)本采集整理滅菌。分別采集7-8成熟具單一、典型癥狀的紅色和黃色甜椒炭疽病病果，選出典型癥狀的病果和健康正常的果實(shí)，帶有葉片、果柄、果蒂、病果、健康果實(shí)的完整標(biāo)本。修剪整理好后將完整標(biāo)本用清水清洗干凈，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分鐘，用蒸餾水洗凈3-4遍。

2）顏色固定。把消毒清洗好的甜椒炭疽病標(biāo)本放入固定液中，標(biāo)本占固定液的空間不超過80%，標(biāo)本要完全浸入固定液中。5天后標(biāo)本綠色部分由綠變黃，逐漸由黃變綠2天后，取出用清水漂洗。

固定液的制備：將25克硫酸銅放入800ml蒸餾水中，攪拌至硫酸銅完全溶解，再加入60ml乙酸、80ml丙三醇和20ml亞硫酸，最后加蒸餾水定容至1000ml即得固定液。

3）顏色修復(fù)。漂洗好的標(biāo)本放入70%酒精中浸泡2-3分鐘，用蒸餾水洗凈取出晾干，把標(biāo)本放入復(fù)色液中保存15天。

復(fù)色液的制備：將5克硼酸放入150ml蒸餾水中，攪拌至硼酸完全溶解，再加入15ml亞硫酸和100ml丙三醇，最后加蒸餾水定容至1000ml即得復(fù)色液。

4）原色保存。把紅色和黃色甜椒炭疽病標(biāo)本從復(fù)色液中取出，同時放入滅菌消毒好的標(biāo)本瓶中，標(biāo)本按自然狀態(tài)排放好，然后往標(biāo)本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm處，標(biāo)本中不可避免含有氣體，在保存液浸泡標(biāo)本過程中進(jìn)行排氣，排氣1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm處。2天后在空氣濕度為70%以內(nèi)的環(huán)境條件下用封口劑進(jìn)行封口，封口劑的配方為蜂蠟、凡士林各1份。最后，把標(biāo)本放到濕度為70%至80%避光的干凈條件中長期保存。

保存液的制備：將4克硼酸放入150ml蒸餾水中，攪拌至硼酸完全溶解，再加入10ml亞硫酸和70ml丙三醇，最后加蒸餾水定容至1000ml即得保存液。

以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的較佳具體實(shí)施例。應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域的普通技術(shù)無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思做出諸多修改和變化。因此，凡本技術(shù)領(lǐng)域中技術(shù)人員依本發(fā)明的構(gòu)思在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上通過邏輯分析、推理或者有限的實(shí)驗(yàn)可以得到的技術(shù)方案，皆應(yīng)在由權(quán)利要求書所確定的保護(hù)范圍內(nèi)。