專利名稱：病害肉檢測(cè)方法及病害肉速測(cè)儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品安全檢測(cè)領(lǐng)域，更具體涉及一種病害肉檢測(cè)方法及病害肉速測(cè)儀。
背景技術(shù)：
動(dòng)物性食品營(yíng)養(yǎng)豐富，是人類食品的重要組成部分。我國(guó)是世界上最大的肉類生產(chǎn)國(guó)和消費(fèi)國(guó)，其產(chǎn)量和消費(fèi)量約占全球產(chǎn)量的1/4。隨著人們生活水平的提高，肉類食品在人們?nèi)粘Ｊ称废M(fèi)中的占比例逐漸增加，同時(shí)人們對(duì)其質(zhì)量和衛(wèi)生要求也應(yīng)進(jìn)一步增強(qiáng)。目前我國(guó)肉類衛(wèi)生質(zhì)量狀況不容樂(lè)觀，市場(chǎng)上的各種肉類來(lái)源復(fù)雜，有相當(dāng)一部分的肉類存在著不同程度的質(zhì)量和污染問(wèn)題，而對(duì)有關(guān)病害肉的檢測(cè)和鑒別手段還相當(dāng)欠缺。
現(xiàn)今檢驗(yàn)和制定市場(chǎng)肉類質(zhì)量，特別是對(duì)病害肉的現(xiàn)場(chǎng)判斷，主要靠市場(chǎng)檢疫人員感官檢驗(yàn)和定性檢測(cè)的方法，具有較大的主觀性和經(jīng)驗(yàn)性，缺乏充分的科學(xué)依據(jù)和數(shù)據(jù)?，F(xiàn)對(duì)國(guó)內(nèi)已有的檢測(cè)病害肉的方法及其不足之處做簡(jiǎn)單介紹。
感官檢驗(yàn)主要包括視檢、嗅檢和觸檢(韓宏祥，等，中國(guó)動(dòng)物檢疫，1987，38；陶艷芳，等，云南畜牧獸醫(yī)，2000，333～34；張二懷，等，河南畜牧獸醫(yī)，2001，632；劉廣海，河南畜牧獸醫(yī)，2001，632；張麗花，河北農(nóng)業(yè)科技，1999，334)。視檢一般是指觀察肉樣放血部位的狀態(tài)、放血程度、血液瘀積情況、病理變化等；嗅檢是指用鼻子聞肉的氣味來(lái)判斷肉的新鮮度或是否病害；觸檢主要用手按壓肌肉和脂肪組織，檢查其硬度和彈性。感官檢驗(yàn)雖然方法簡(jiǎn)單，但多憑經(jīng)驗(yàn)判斷且主觀性較強(qiáng)，對(duì)一些隱性感染和無(wú)臨床癥狀的染疫肉品很難檢出，肉品檢出合格率較低，很難保證人民真正吃上“放心肉”。定性檢測(cè)病害肉主要有以下方法，如pH值測(cè)定法、過(guò)氧化物酶法、硫酸銅沉淀法、細(xì)菌毒素氧化呈色法等(王梅霞，等，中國(guó)動(dòng)物檢疫，2003，326～27；孫淑清，肉品衛(wèi)生，2003，1123～25)。pH值測(cè)定法是根據(jù)健康肉與病害肉pH值的不同來(lái)鑒別的。健康豬肉的pH值在5.8～6.4之間，而病死豬肉或變質(zhì)豬肉pH值則在6.5以上。但是屠宰后的豬肉需經(jīng)尸僵、成熟、自溶、腐敗四個(gè)階段(高士昌，等，中國(guó)獸醫(yī)雜志，1994，1150～51)，同時(shí)豬肉的pH也是在不斷變化的，因此pH法檢測(cè)病害肉會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)假性現(xiàn)象。對(duì)于過(guò)氧化物酶法，已有的方法都是以聯(lián)苯胺為顯色劑，采用直接滴肉法、試管法、試紙法等不同形式的方法，故實(shí)質(zhì)上都是聯(lián)苯胺法檢測(cè)過(guò)氧化物酶活性大小。但是使用此法來(lái)鑒別檢測(cè)病害肉并無(wú)說(shuō)服力，因?yàn)椴『θ夂徒】等獾姆磻?yīng)現(xiàn)象有重合之處，主觀判斷易出錯(cuò)，而且此法的重要顯色劑聯(lián)苯胺，是一種較強(qiáng)的致癌物，因此通過(guò)聯(lián)苯胺檢測(cè)過(guò)氧化物酶水平來(lái)鑒別病害肉的方法并不可取。對(duì)于硫酸銅法和細(xì)菌毒素氧化呈色法(張俊峰，等，肉品衛(wèi)生，2003，615～17)，也是定性檢測(cè)病害肉的方法，雖然檢測(cè)效果相對(duì)較好，但是也只是定性檢測(cè)，有較大的主觀性，并且實(shí)驗(yàn)步驟較為復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種病害肉檢測(cè)方法及病害肉速測(cè)儀該方法及速測(cè)儀不僅有助于對(duì)豬肉的健康與否做出準(zhǔn)確科學(xué)的判斷，而且操作簡(jiǎn)便。
本發(fā)明病害肉檢測(cè)方法的特征在于包括以下步驟(1)制肉浸液取些許除去脂肪和結(jié)締組織的肉樣絞碎，稱取部分置于燒杯中，加入一定體積的蒸餾水，用玻璃棒不時(shí)攪拌，浸漬3～5分鐘后抽濾，得濾液即肉浸液，濃度為0.10～0.15g/ml。
(2)反應(yīng)準(zhǔn)備階段取肉浸液2mL，加入16mM 3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)DMF溶液10～50μL，6mM H2O2溶液300～600μL。
(3)記錄反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線上述反應(yīng)體系一經(jīng)混合，馬上搖動(dòng)均勻并立即置于病害肉速測(cè)儀的檢測(cè)裝置中，開(kāi)始記錄反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線。
(4)將測(cè)得的病害肉反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線與健康肉反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線進(jìn)行比較，作出判斷。
上述的檢測(cè)病害肉中過(guò)氧化物酶活性所用的底物為TMB。
本發(fā)明病害肉速測(cè)儀的構(gòu)造特征在于包括電源、發(fā)光二級(jí)管、比色槽、光電池、放大電路和采集電路，發(fā)光二級(jí)管安裝在比色槽的一側(cè)，光電池安裝在比色槽的另一側(cè)，光電池的輸出連接到放大電路的輸入端，放大電路的輸出端連接到采集電路的輸入，采集電路的輸出連接到計(jì)算機(jī)的USB數(shù)據(jù)端。，上述所用的發(fā)光二極管，其發(fā)射波長(zhǎng)為655nm。


圖1為本發(fā)明病害肉速測(cè)儀構(gòu)造示意圖。
圖2為本發(fā)明病害肉速測(cè)儀電路原理圖。
圖3為本發(fā)明的軟件系統(tǒng)操作流程圖。
圖4為健康肉與病害肉的酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合附圖來(lái)敘述本發(fā)明的具體工作原理本發(fā)明所說(shuō)的病害肉速測(cè)儀如圖2所示，包括電源、發(fā)光二級(jí)管、比色槽、光電池、采集卡，其軟件系統(tǒng)包括對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換、數(shù)據(jù)處理及保存。
該裝置具體操作方法如圖3所示。首先是儀器的開(kāi)啟，儀器接入計(jì)算機(jī)USB口，初始化POWER燈亮后，進(jìn)入PM1010光度分析系統(tǒng)，聯(lián)機(jī)后進(jìn)入開(kāi)始采集狀態(tài)。然后進(jìn)行調(diào)零和調(diào)標(biāo)，調(diào)零可采用關(guān)閉LED燈或在比色槽中放入擋光塊，開(kāi)LED燈放入空白溶液即完成調(diào)標(biāo)。最后，待完成反應(yīng)準(zhǔn)備階段且時(shí)間到20s時(shí)，按保存按鈕開(kāi)始記錄反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線(見(jiàn)圖5)，記錄5分鐘后停止并自動(dòng)保存到數(shù)據(jù)庫(kù)。
本發(fā)明的有益結(jié)果是通過(guò)測(cè)得的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線可快速準(zhǔn)確地完成病害肉的鑒別，避免了以前方法的主觀性；儀器裝置不僅操作簡(jiǎn)單且具有小型化、集成化的特點(diǎn)。
本發(fā)明構(gòu)思新穎，檢測(cè)技術(shù)先進(jìn)，該方法的推廣應(yīng)用能有效保證人民真正吃上“放心肉”。
權(quán)利要求
1.一種病害肉檢測(cè)方法，其特征包括以下步驟(1)浸液取些許除去脂肪和結(jié)締組織的肉樣絞碎，稱取部分置于燒杯中，加入一定體積的蒸餾水，用玻璃棒不時(shí)攪拌，浸漬3～5分鐘后抽濾，得濾液即肉浸液，濃度為0.10～0.15g/mL。(2)反應(yīng)準(zhǔn)備階段取肉浸液2mL，加入16mM 3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)二甲亞砜(DMF)溶液10～50μL，6mM過(guò)氧化氫(H2O2)溶液300～600μL。(3)記錄反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線上述反應(yīng)體系一經(jīng)混合，搖動(dòng)均勻并立即置于病害肉速測(cè)儀的檢測(cè)裝置中，等待數(shù)秒，以保證每次測(cè)定從樣品混合到開(kāi)始記錄反應(yīng)曲線時(shí)間均為20秒，記錄反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線。(4)將測(cè)得的病害肉反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線與健康肉反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線進(jìn)行比較，作出判斷。
2.一種病害肉檢測(cè)方法所用的病害肉速測(cè)儀，其特征在于包括電源、發(fā)光二極管、比色槽、光電池、放大電路和采集電路。發(fā)光二級(jí)管安裝在比色槽的一側(cè)，光電池安裝在比色槽的另一側(cè)，光電池的輸出連接到放大電路的輸入端，放大電路的輸出端連接到采集電路的輸入，采集電路的輸出連接到計(jì)算機(jī)的USB數(shù)據(jù)端。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的病害肉速測(cè)儀，其特征是所用的發(fā)光二極管發(fā)射波長(zhǎng)為655nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種病害肉檢測(cè)方法及病害肉速測(cè)儀，該檢測(cè)方法的特征是包括以下步驟(1)配制肉浸液；(2)反應(yīng)準(zhǔn)備階段取肉浸液2mL，加入16mM 3，3’，5，5’－四甲基聯(lián)苯胺(TMB) DMF溶液10～50μL，6mM H
文檔編號(hào)G01N21/00GK1904612SQ20061006975
公開(kāi)日2007年1月31日 申請(qǐng)日期2006年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月28日
發(fā)明者陳曦, 王強(qiáng), 胡浩, 邱彬, 陳海玲 申請(qǐng)人:福州大學(xué)